清洁级实验动物设施环境指标的跟踪监测与分析

目的　观察运行中清洁级实验动物设施的环境指标 ,指导科学实验和设施管理。方法　在不同季节、不同动物饲养量和不同管理情况下 ,按国家标准GB T 14 92 5 94测试相关环境指标。结果　全年温度 2 4～ 2 5℃ ,相对湿度 4 0 %～ 70 % ,换气次数 14 .5～ 17.0次 h ,空气洁净度 60 0 0～ 2 0 0 0 0级 ,梯度压差 2 2～ 2 8Pa ,噪声 3 9～ 4 8dB ,落菌数 1.4～ 4 .9个 皿 ,氨浓度 0 .4～ 3 .8mg m3,各项环境指标稳定 ,但个别指标未达到国家标准。结论　不同季节大气尘浓度的变化对清洁级实验动物设施的环境指标无影响 ,严格管理可保持动态动物实验室的洁净度     

湖北省实验动物设施环境控制中存在的问题

目的分析总结湖北省2012年度实验动物许可单位年检中环境设施的检测结果,找出问题,提出促进湖北省实验动物环境设施可靠运行的建议。方法各实验动物环境设施采用30%区域抽检方式,依据GB14925-2010《实验动物环境及设施》,进行环境指标检测。结果除气流速度、沉降菌最大平均浓度外,其他技术指标均存在不符合国家标准的情况。结论应针对实验动物设施管理加强培训,提高实验动物设施管理人员的管理水平,从而保证实验动物设施的正常运行。     

SO2对蚕豆根尖细胞微核的诱导作用

应用蚕豆根尖微核试验,对SO2的遗传毒性效应进行了研究。结果表明：一定浓度范围内（0.108-14.00mg/m^3）,蚕豆根尖微核细胞数与SO2浓度间呈正相关,太原市大气污染严重的冬季采暖期根尖细胞微核率明显高于非采暖期;SO2浓度0.604mg/m^3处理24h和48h或2.80-28.00mg/m^3熏气处理4h可使蚕豆根尖中具有微核的细胞数明显增加,结果表明,低浓度SO2较长时间接触或高浓度短期接触均可引起蚕豆根尖细胞遗传物质的损伤,应用蚕豆根尖细胞微核实验可对大气SO2污染进行生物监测。SO2（2.80-28.00mg/m^3）熏气实验中,接触时间延长能导致根尖细胞微核率下降,2.80mg/m^3熏气组下降较快,14.00mg/m^3熏气组下降较慢,研究结果提示,在运用蚕豆根尖微核实验监测环境SO2污染时要考虑蚕豆的染毒方式,避免假阴性结果的出现。     

动物室氨浓度两种检测方法的对比

目的寻找方便、快捷、准确的实验动物环境中氨浓度检测方法。方法通过对《实验动物环境及设施》（GB14925-2001）中规定的纳氏试剂比色法和近年国内引进的Ammonia meter法两种检测室内的氨气浓度的方法比较研究。结果纳氏试剂比色法和Ammonia meter法检测结果存在差异显著性。结论在现阶段Ammonia meter法代替传统的纳氏试剂比色法的条件尚不成熟。同时,对实验采用方法进行说明。建议现行标准的吸收液浓度由0.5 mol/L修改为0.05 mol/L,吸收波长由500 nm修改为420 nm。     

关于实验动物设施安全检查、研发实验动物行业通用安全检查表的讨论

实验动物设施的安全运行和环境条件标准化控制是实验动物繁育生产质量和进行动物实验的条件保证。本人运用安全系统工程、安全科学管理理论,结合我国实验动物安全工作发展,就实验动物环境设施的安全运行管理、检查、发现、分析和消除实验动物环境设施运行中潜在的危险和危害因素,做一阐述。总结性地提出了实验动物环境设施安全检查的程序、内容、实施步骤的闭环式安全检查模型。利用安全检查表,科学有效地开展实验动物环境设施安全检查工作,把事故消灭在萌芽状态。     

氯丙嗪在斑马鱼胚胎和早期幼鱼发育过程中的神经毒性作用

目的 采用模式动物斑马鱼作为研究对象,观察氯丙嗪（chlorpromazine,CPZ）暴露对胚胎和幼鱼早期神经发育的影响.方法 在一般毒性评价的基础上,通过整体胚胎细胞凋亡检测和脑组织病理学检查,了解CPZ对神经发育的器质性改变;采用神经行为学方法,包括幼鱼触动逃避反应、自发运动以及惊恐逃避反射等,研究氯丙嗪暴露所致的神经发育功能性障碍.结果斑马鱼胚胎受精后6 h（6 hpf）～72 hpf暴露于CPZ（≥5 mg/L）可引起胚胎和幼鱼死亡、致畸和幼鱼孵化延迟,并呈浓度和时间依赖性;采用吖啶橙染色检测36 hpf整体胚胎凋亡细胞,发现凋亡细胞主要集中在胚胎中脑、后脑、丘脑以及中后脑连接区、脊索和尾部等处;脑组织病理学检测发现,7dpf幼鱼颅腔增大、脑体积减小、脑细胞缩小且细胞间隙增宽.6～72 hpf CPZ（≥0.0625 mg/L）暴露后,幼鱼神经行为学研究发现,CPZ（≥0.125 mg/L）可引起3dpf幼鱼触觉运动能力下降;CPZ（≥0 5 mg/L）可浓度依赖性地抑制幼鱼自发运动,并出现僵直不动、震颤或快速刻板式转圈运动等行为改变;光惊恐实验中,暗环境下各暴露组幼鱼对突发强光刺激均表现为惊跳逃避,并且暗-光交替期运动加速度变化与对照组无显著差异;在撤除光源后,1mg/L和2 mg/L暴露组幼鱼暗适应时程缩短,而0.125 mg/L和0.25 mg/L暴露组暗适应时程延长,提示CPZ对外界刺激引发的幼鱼活跃游动有抑制和促进双重毒性作用.结论 CPZ暴露对斑马鱼胚胎和幼鱼具有明显的神经发育毒性作用.模式动物斑马鱼作为一种高通量筛选模型在外源性化合物神经发育毒性评价中具有较好的应用前景.     

黄芪多糖对暴露于苯、甲醛环境中小鼠脾脏的保护作用

目的探讨黄芪多糖对暴露于苯、甲醛环境中小鼠脾脏的保护作用。方法将40只雄性小鼠随机分成4组,即对照组、苯甲醛染毒组（苯：5 g/m^3,甲醛：50 mg/m^3）、苯甲醛染毒黄芪多糖低剂量保护组[黄芪多糖：10 mg/（kg.d）,苯：5 g/m^3,甲醛：50 mg/m^3]、苯甲醛染毒黄芪多糖高剂量保护组[黄芪多糖：20 mg/（kg.d）,苯：5 g/m^3,甲醛：50 mg/m^3]。采用静式吸入染毒,每天2 h,连续30 d,并同时采用饮水的方式给予黄芪多糖保护。末次染毒24 h内,处死小鼠,对小鼠脾中谷胱甘肽（GSH）含量及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性进行测定和分析。结果苯、甲醛染毒黄芪多糖保护各组脾组织中GSH含量和GSH-PX活性均高于苯、甲醛染毒组,均有统计学意义（P〈0.01）而与对照组的差异无统计学意义（P〉0.05）,苯、甲醛染毒黄芪多糖保护组高剂量组脾组织中GSH-PX活性高于低剂量组,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论黄芪多糖对暴露于苯、甲醛环境中小鼠脾脏具有保护作用,且对脾中GSH含量的作用有随剂量增加而增大的趋势,对脾中GSH-PX活性的作用随剂量增加而增大。     

新型氟喹诺酮衍生物对水产致病菌及其生物被膜的抑制作用研究北大核心

【目的】细菌的耐药性给动物抗感染和疾病治疗带来了极大的困难和挑战,生物被膜是导致细菌耐药性的主要原因之一,本研究检测分析了氯丙酰基克林沙星对7株菌株的抗菌活性及其生物被膜形成能力,以期发现氯丙酰基克林沙星是否具有抗菌活性。【方法】本研究通过打孔法和微量肉汤二倍稀释法进行常规药敏试验以测定最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC),通过结晶紫染色法检测这7株受试菌在药物亚抑菌浓度下的生物被膜形成能力以及生长速率来测定氯丙酰基克林沙星的抑菌能力。【结果】实验结果显示,氟喹诺酮类衍生物氯丙酰基克林沙星药物对4株受试革兰氏阴性菌的MIC≤10 mg/L、MBC≤48 mg/L,对3株受试革兰氏阳性菌也呈现敏感状态(MIC≤10 mg/L,MBC≤10 mg/L)。结晶紫染色法检测发现,这7株受试菌在药物亚抑菌浓度下的生物被膜形成能力以及生长速率显著下降,说明氯丙酰基克林沙星在亚抑菌浓度即具有良好的抑菌活性。【结论】本研究证明氯丙酰基克林沙星可用作抗菌剂,并为新型生物被膜抗菌剂或细菌感染治疗药物的开发提供了新的依据。     

重组干酪乳杆菌在模拟消化环境中生存性能的研究

目的 探讨重组干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393在模拟胃肠道环境中的存活能力.方法 人工模拟胃肠道环境,即人工胃液（pH=1.5～4.5）、人工肠液、胆汁（质量浓度0.3～3.0 g/L）和高盐（质量浓度40～90g/L）.结果 重组干酪乳杆菌在pH为2.5～4.5的人工胃液中具有较强的生存能力,3 h活菌数仍达108/ml;在人工肠液中经过不同时间的作用后,重组干酪乳杆菌显出生长趋势;在0.3%的胆汁环境作用8 h仍有存活,且能耐受7%NaCl浓度的高渗环境.结论 实验为干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393能否作为益生菌制剂在胃肠道中发挥作用提供了理论基础.     

脱氧胆酸钠对人脐静脉内皮细胞凋亡的影响

目的:探讨脱氧胆酸钠(SD)对体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的影响。方法:(1)以不同终浓度(0、0.015mg/mL、0.05 mg/mL、0.15 mg/mL、0.5 mg/mL、1.0 mg/mL)的脱氧胆酸钠分别作用于人脐静脉血管内皮细胞,使用CCK-8检测细胞活力、TUNEL荧光染色检测细胞凋亡;(2)以终浓度为0.15 mg/mL的SD作用于HUVEC4、8、12 h后用Western blot检测Caspase-3、7、9蛋白及PARP活化情况;(3)观察Caspase-3抑制剂Z-DEVD-FMK对0.15 mg/mL脱氧胆酸钠组的影响。结果:CCK8结果显示随SD浓度(0~1.0 mg/mL)及作用时间(0~12 h)增加,HUVEC活力降低,0.15 mg/mL时活力为80%,1.0 mg/mL时细胞活力仅不到10%;Tunel检测示随着SD浓度的增加HUVEC凋亡明显增多;Western Blot结果示SD作用于HUVEC后Caspase-3、7、9蛋白及PARP活化明显增加;Z-DEVD-FMK明显抑制了0.15 mg/mLSD引起的PARP活化。结论:脱氧胆酸钠(SD)通过启动Caspase级联反应介导了人脐静脉内皮细胞的凋亡。     

四氧嘧啶诱发糖尿病模型效果的性别差异

目的了解性别因素对四氧嘧啶诱发糖尿病动物模型的影响,为提高动物模型的复制效率提供实验依据。方法分别给雌、雄比格犬和昆明小鼠注射不同剂量的四氧嘧啶,药后3、7、14、21 d测定血糖值,同时统计实验期间动物的死亡情况。结果给予同等剂量的四氧嘧啶,雌性比雄性动物的血糖升高更快,浓度更高。雌性犬四氧嘧啶的最适造模剂量为40 mg/kg,而雄性犬在此剂量下的模型成功率只有40%,二者差异极显著（70%VS40%,P〈0.01）;雄性犬的最适使用剂量为50 mg/kg,但在此剂量下有高达30%的雌性犬因高血糖而死亡。四氧嘧啶对小鼠的影响与犬基本一致,雌雄鼠的最佳剂量分别为200 mg/kg和250 mg/kg。结论雌性动物对四氧嘧啶的敏感性较雄性动物高,雄性动物在使用四氧嘧啶复制糖尿病模型时,其剂量通常需要较雌性动物高20%左右。     

一种家兔持续静脉麻醉方法

目的为进行某些特殊项目的实验研究,建立一种持续麻醉实验动物模型。方法戊巴比妥钠粉剂加生理盐水溶解,配成1%水剂,按3 mL/kg（30 mg/kg）耳缘静脉注射。诱导成功后约2 h经留置针使用恒速微量泵1 mL/h.kg给药,维持4 h后调节至2 mL/h.kg给药,并长期维持。每日上午、下午各停止静脉给药1 h,为动物饲食水。结果经实验证明家兔可耐受120 h连续麻醉。实验动物耐受情况好,家兔麻醉前呼吸48～68次/min,心跳140～200次/min,体温为39.4℃±1.0℃。以3～6 mg/s速度,成年兔的正常耳缘静脉注射后,平均3＋2.8 s实验动物呈三度麻醉状态,无自主运动,未见兴奋躁动过程,呼吸24±6.6次/min。死亡率12.5%。持续麻醉期间动物二便正常。结论长期持续麻醉的效果要求是以避免动物挣扎的镇静为主,戊巴比妥适合于建立长期麻醉实验动物模型。该方法在爆炸伤和创面愈合等实验实际应用中效果理想。     

不同剂量炔雌醚对小鼠器官鲜重、繁殖生理和肝肠CYP3A4酶含量的影响

为探究不同剂量炔雌醚对小鼠器官、激素和肝肠药解酶的影响,分别以0.008 mg/kg、0.04 mg/kg、0.2 mg/kg、1.0 mg/kg和5.0 mg/kg的炔雌醚油溶液连续3d灌胃小鼠,首次给药7d后解剖取材,检测其器官鲜重、雄鼠精子数量、血清中激素浓度、小肠和肝脏中CYP3 A4酶含量的变化.结果 发现:...     

转bar基因小麦和非转基因小麦抗除草剂鉴定方法比较

方便、快捷、准确地对转基因小麦中的bar基因进行检测,对于筛选纯合稳定转基因植株、获得无筛选标记转基因植株、鉴定常规小麦品种和商品小麦中的bar基因成分等具有一定价值。本试验对叶片涂抹、植株喷洒、培养基添加除草剂3种方法鉴定转bar基因小麦植株的效果进行了比较,表明3种方法都能很好鉴定转基因小麦中的bar基因,叶片涂抹200mg/LLiberty鉴别的准确性高于PCR检测,植株喷洒Basta的适宜浓度为100mg/L,喷洒Liberty的适宜浓度为150mg/L,培养基添加Bialaphos的适宜浓度为5～8mg/L。叶片涂抹和植株喷洒除草剂方法受环境条件影响较大,区别转基因植株和非转基因植株的标准不够明确。相比之下,成熟胚离体培养除草剂筛选不受外界环境条件的影响,具有鉴定效果直观明了、操作简单、试验周期短等优点,在检测小麦转入或飘入的bar基因方面具有潜在应用前景。     

稀土元素( RENO3)对马哈利樱桃组培苗生长的影响

以马哈利樱桃茎段为实验材料,研究不同浓度硝酸稀土( RENO3)对其组培苗生长发育及生理作用的影响,结果表明:在马哈利樱桃茎段培养的分化培养基上添加不同浓度的RENO3(5 mg/L～20 mg/L),有利于芽分化和组培苗的生长,提高叶片中超氧化物歧化酶(SOD),过氧化物酶(POD)活性及叶绿素含量;其中RENO3浓...     

解放军疾控所SPF动物房的工艺设计

解放军疾病预防控制所,为履行职能和任务,在业务办公大楼12层建设了SPF动物实验设施,面积约240 m^2。文章介绍了作者的设计思路和建设方案。同时还介绍了SPF动物房的建设经验。     

水产用聚维酮碘对异育银鲫养殖的安全性评价

评价水产用聚维酮碘对异育银鲫(Carassius auratus gibelio)养殖的安全性,为其在异育银鲫养殖中的安全应用提供了重要的科学依据,本研究参照国家标准及相关法规,在观察了聚维酮碘对小球藻(Chlorella sp.)生长抑制作用、对水产益生菌抑菌效果以及对大型蚤(Daphnia magna straus)、斑马鱼(Brachydanio rerio)和异育银鲫的急性毒性的基础上,分析其对异育银鲫及其养殖水体主要有害理化因子的影响.实验结果表明,聚维酮碘在终浓度为6.00 ～ 14.00 mg/L时对小球藻生长具有促进作用,对小球藻的半数抑制浓度大于14.00 mg/L,对水产益生菌的最小抑菌浓度为128～512 mg/L,对大型蚤、斑马鱼的半数致死浓度分别为13.44 mg/L、17.63 mg/L.此外,聚维酮碘对异育银鲫的半数致死浓度为74.77 mg/L,而且在养殖水体中加入聚维酮碘至终浓度为0.20 ～ 1.40 mg/L后14 d内,随着聚维酮碘浓度的增加,各浓度组异育银鲫养殖水体的氨氮含量、亚硝酸盐含量均缓慢下降.本研究证实聚维酮碘低毒,但考虑到其可能对异育银鲫养殖水体中大型蚤等浮游动物存在潜在影响,建议其在异育银鲫养殖中的安全应用浓度应不高于1.34 mg/L,在该安全应用浓度内不会引起养殖水中氨氮、亚硝酸盐等有害因子含量的增加.     

双酚A和壬基酚对隆线溞和微型裸腹溞的毒性

我们以隆线溞和微型裸腹溞为实验动物,进行了两种酚类内分泌干扰物双酚A（BPA）和壬基酚(NP)的毒性效应研究。急性实验测定出双酚A对隆线溞的24h和48h半数致死浓度（LC50）为：12.02mg/L和11.64mg/L,对微型裸腹溞24h和48h半数致死浓度LC50为：13.70mg/L和9.63mg/L。而壬基酚对隆线溞的24h和48h半数致死浓度（LC50）分别为：0.221mg/L和0.159mg/L,对微型裸腹溞的24h和48h半数致死浓度（LC50）分别为：0.334mg/L和0.126mg/L。实验表明微型裸腹溞对双酚A和壬基酚的敏感度高于隆线溞,能够很好的指示水环境的污染。慢性毒性实验发现双酚A对微型裸腹溞后代的雌雄比例有明显的影响,影响类似于hormesis现象。而壬基酚对隆线溞的慢性毒性研究发现,隆线溞的生活史、后代成活率均受到暴露的壬基酚浓度升高的不利影响。这些研究表明低浓度双酚A长期暴露的潜在毒性与高浓度壬基酚的急性毒性在这两种内分泌干扰物污染环境的研究中有重要意义。     

长江口北支大型底栖动物群落周年变化特征

分析了长江口北支滩涂大型底栖动物的群落结构和多样性变化特征。共采集大型底栖动物78种,包括环节动物7种、软体动物23种、节肢动物28种、脊索动物18种、其它两种,全年优势种有8种。密度为0.08 ind/m^2（1月）-1.24 ind/m^2（7月）,生物量为0.006 g/m^2（2月）-0.58 g/m^2（5月）,Margalef丰富度指数（D）为0.82（1月）-3.88（7月）,Pielou均匀度指数（J）为0.60（9月）-0.86（1月）,Shannon-Wiener多样性指数（H＇）为1.59（2月）-2.76（10月）。底栖动物密度与环境因子进行相关性分析显示,北支潮间带的大型底栖动物群落按照盐度、沉积特征等不同可分为3组,盐度和温度是影响底栖动物群落分布的主导因子。     

浮游细菌在黄海冷水团中的分布

采用荧光显微镜直接计数和分级培养的方法对黄海冷水团水域的浮游细菌分布及其摄食压力来源进行了研究,结果表明：在所研究水域聚球（Synechococcus spp.）蓝细菌生物量的变化是0.78～33.49 mg C/m^3（平均为6.26 mg C/m^3,n=197）,最高值是最低值的40多倍;异养细菌生物量的变化是1.58～21.25 mg C/m^3（平均为5.79 mg C/m^3,n=197）,最高值是最低值的13倍.在垂直方向上聚球蓝细菌生物量表现为中层》表层》底层,异样细菌生物量表现为表层》中层》底层.聚球蓝细菌对浮游植物总生物量的贡献（CB/PB）为2%～99%（平均为42.5%）,而异养细菌生物量与浮游植物生物量的比值为 0.05～6.37（平均为0.85）.在浮游细菌的昼夜变化中,聚球蓝细菌的最高值是最低值的8.8倍,异养细菌最高值是最低值的2.8倍,但二者的昼夜变化规律不明显.浮游细菌的分布与水温和盐度变化基本一致,且浮游细菌生物量最低值出现在冷水团水域.另外在冷水团区域聚球蓝细菌的主要摄食者是小型浮游动物（Microzooplankton,20～200 μm）,摄食率约为0.20～0.42/d.