大鼠肾移植慢性排斥反应模型的建立

目的建立一种稳定的大鼠原位肾移植慢性排斥反应模型。方法供体为近交系F344大鼠,受体为Lewis大鼠,供肾采用左肾,在体修整,原位灌注。肾静脉用硬膜外导管做为临时内支架管端-端、六针法吻合,腹主动脉端-侧连续缝合,输尿管带膀胱瓣与膀胱吻合。受体术前3 d开始环孢素A灌胃至术后30 d（5 mg/kg·d）,以预防急性排斥反应。结果手术时间120～180 min;手术成功率90.9%（40P44）;受体均存活60 d。并发症有吻合口出血、静脉血栓形成、急性排斥反应等。结论供肾原位灌注,在体修整是简单可靠的方法。静脉內支架管端端吻合,腹主动脉端侧吻合能够达到稳定的成功率,值得推广。熟练的外科操作技能和血管吻合技术是手术成功的关键。     

食蟹猴肾移植模型的建立

目的建立食蟹猴的肾移植模型。方法通过显微外科手术对食蟹猴进行同种异体移植,将供体肾动脉、肾静脉分别端侧吻合到受体腹主动脉、下腔静脉,供体输尿管端端吻合到受体输尿管。结果154例肾移植食蟹猴无一只在手术过程中因意外死亡;无一只因手术感染死亡;无一只因手术并发症死亡;肾热缺血时间（30±4.5）min。结论应用食蟹猴建立肾移植模型,技术成熟,方法可靠。应用此模型评价新型免疫抑制药物,进行免疫耐受、异种移植研究可为临床试验提供更为准确可靠的依据。     

大鼠腹腔内工作型心脏移植模型的改进

目的构建大鼠腹腔内工作型心脏移植模型,总结影响模型成功率的因素。方法 Brown Norway到Lewis大鼠心脏移植90例,其中预实验50例,正式实验40例。采用肺动脉和左房吻合、主动脉和受体腹主动脉吻合的方法建立工作型心脏移植,统计手术存活率和死亡原因,分析确保成功率的关键因素。结果术者通过练习,手术成功率稳定77.5%,供心冷缺血时间为(34±5)min,整个手术时间为(71±11)min。HE染色显示移植后发生了免疫反应,移植模型可靠。结论决定手术成功率的影响因素众多,其中主要因素有:合格的实验动物、供体心脏的保护、快速有效的血管缝合和术后动物护理。     

大鼠异位工作型心脏移植模型的建立

目的 建立大鼠腹腔异位工作型心脏移植动物模型.方法 Wistar大鼠30只,将供心主肺动脉与左房吻合,再将供心移植到受体腹部,将升主动脉与供心腹主动脉端侧吻合,使得左心房获得前负荷,成为工作型心脏.结果 成功建立大鼠腹腔异位工作型心脏移植模型,15例成功11例,手术成功率为73%.手术平均时间为(38.8±5.7)min.移植心脏获得长期存活,在28 d后通过超声观察可见供体心脏工作正常.结论 手术的关键是提高供心的摘取技术及受体的血管吻合技术,同时术后给与供心适当的按摩辅助也非常必要.此模型可以更好的用于移植免疫学的研究.     

大鼠肾移植慢性排斥反应模型的建立

目的建立稳定而可靠的大鼠肾移植慢性排斥反应模型。方法选用30只Wistar大鼠为供体,30只SD大鼠为受体。取供体左肾,采用HC-A离体肾保存液原位灌注,将供肾动、静脉分别与受体腹主动脉、下腔静脉行端侧吻合,以输尿管膀胱植入法行尿路重建,建立大鼠同种异体肾移植模型。分别于术后3、6、9周取移植肾观察大体和组织形态学变化,观察术后并发症及排斥反应情况。结果移植肾脏大体和组织形态学呈渐进性变化,至术后9周可出现明显的慢性排斥反应病理改变。移植肾脏可顺利存活,部分出现肾积水并发症,但不影响排斥反应病理变化。结论本方法可建立稳定、可靠的肾移植慢性排斥反应模型,是研究慢性排斥反应的理想模型。     

单人直视下改良建立大鼠原位肝移植模型的体会

目的:建立稳定大鼠原位肝移植模型,缩短术中无肝期时间,提高手术成功率及受体存活率。方法:在Kamada"二袖套法"的基础上改进,单人直视下建立大鼠原位肝移植模型,行60例SD大鼠原位肝移植手术。本研究简化供受体麻醉方式,供肝采用经门静脉(必要时配合腹主动脉补救方式)进行冷灌注,缩短修肝时间,提前预置牵引线,固定进针位置,改进植入肝脏肝上下腔静脉吻合、肝下下腔静脉及门静脉套管。观察并记录各组大鼠供体手术、修肝套管、无肝期、受体手术及肝移植手术总时间。术后检测1,7,30天受体大鼠肝功能(血清丙氨酸转氨酶(ALT),天冬氨酸转氨酶(AST)及总胆红素(TB))并分析生存情况。结果:无肝期结束后,供体肝脏灌注良好,受体麻醉移除后较快苏醒。供体手术、修肝套管、无肝期、受体手术及肝移植手术总时间分别为(32.5±1.58)、(7.3±1.43)、(15.6±2.62)、(53.2±3.74)、(108.5±2.34)min。大鼠术后24 h(手术成功率)为95%,1周生存率分别为90%,1月生存率分别为86.7%。大鼠术后短时间内肝功能水平增高,24 h时ALT(228.5±54.5 IU/L),AST(439.3±86.3 IU/L),TB(6.2±0.7μM),1周后逐渐恢复正常。结论:改良后的方法可以简易麻醉流程,缩短无肝期,提高手术成功率及受体的生存率。     

小鼠异位肢体复合组织移植模型的建立

目的建立稳定的小鼠异位肢体复合组织移植模型。方法选用25对C57BL/6小鼠行同品系异位肢体复合组织移植手术。取供体小鼠后肢,于腹股沟韧带下缘起沿股动脉、股静脉向上游离,电凝切断除股静脉、股动脉外所有分枝血管至髂外动脉、髂外静脉,断髂外动脉、髂外静脉后,横断股骨、股部肌肉。将供体髂外动脉、髂外静脉分别与受体小鼠右侧颈总动脉、颈外静脉行端侧吻合。连续缝合供体皮缘于受体皮肤切缘固定肢体。于供肢胫骨远端关节处切断,结扎残端。结果手术成功率76%,总手术时间(87.1±10.1)min,供体获取时间(23.8±4.9)min,血管吻合时间(55.3±9.6)min。结论小鼠异位肢体复合组织移植成功率较高,稳定可靠,是一种新的研究移植免疫的理想的动物模型。     

改良导管固定法在硬膜外阻滞大鼠模型构建中的应用

目的探讨改良硬膜外导管固定法应用于构建硬膜外阻滞动物模型的可行性及效果。方法采用随机数字法将24只雄性Wistar大鼠分为实验组和对照组,每组12只,用于构建硬膜外阻滞大鼠模型。实验组在切开置管后导管固定使用创新性关卡,采用不透气无菌医用胶带封闭导管;对照组则采用单纯缝线环绕法固定,并保留导管接头固定于后颈部。术后每天硬膜外腔注射0.1%罗哌卡因30 uL,共28 d。对比观察两组术后发生感染率,硬膜外阻滞模型有效时间及硬膜外导管深度变化等情况。结果术后感染发生率：两组间差异无统计学意义（P〉0.05）;模型有效时间：实验组长于对照组（26.2±1.7d＆18.5±3.0d,P〈0.05）;硬膜外腔内导管深度：实验组与对照组比,其均值和离散程度的差异均具有显著性（1.81±0.07＆1.44±0.55,P〈0.05）。结论应用改良导管固定法构建大鼠硬膜外阻滞模型,有助于提高其稳定性和成功率。     

大鼠腹腔异位心脏移植模型建立及改进

目的:建立一种快速有效的大鼠腹腔异位心脏移植模型。方法:采用SD大鼠作为受体,Wistar大鼠作为供体,行同种异位腹腔心脏移植,术后给以CsA5 mg/kg/d灌服,心脏移植手术方法采用改良的Ono术式,观察改良的腹腔异位心脏移植各步骤所需时间、术后成功率及主要并发症发生率。结果:共建立40只大鼠异位心脏移植模型,手术成功率92.5%。动脉吻合时间12.5±2.3min,静脉吻合时间12.3±1.5 min,供心缺血时间37±3.5 min,受体血管阻断时间34.2±2.6 min,总手术时间90.2±4.8 min,出现的主要并发症为出血和供心复跳失败(各占5%、2.5%)。结论:改进的大鼠腹部异位心脏移植技术是一种简便、快速、有效、成功率高的模型制作方法。     

κ-阿片受体激动通过激活KATP通道对大鼠腹主动脉产生舒张作用

为观察U50,488H（选择性κ－阿片受体激动剂）对大鼠腹主动态的佶张作用,并探讨其机制,实验采用离体血管灌流实验,测定血管张力的改变。结果显示：（1）U50,488H对大鼠腹主动脉具有明显的舒张作用;（2）U50,488H对大鼠腹主动脉的舒张效应部分依赖于内皮细胞的存在;（3）优降糖和格列甲嗪可明显抑制U50,488H对大鼠腹主动脉的佶张作用;（4）U50,488H的舒张血管效应与M受体、β受体、前列腺素及NO无关。结果表明,U50,488H是一种有效的扩血管物质,其舒张血管的效应具有内皮依赖性,且与KATP通道有密切关系。     

Surgical technique in the rat model of kidney transplantation

Today successful kidney transplantation procedures, techniques and immunosuppression protocols are a consequence of extensive research on animal models. During every transplantation surgery there are two crucial points for the success of the entire procedure: vascular (arterial end venous) and ureteral or ureterovesical anastomosis. Renal artery and vein of the donor kidney can be anastomosed end-to-side to the abdominal aorta and vena cava of the recipient (heterotopic transplantation), or end-to-end to the remains of renal artery and vain of the recipient (orthotopic transplantation) after nephrectomy. The ureter can be anastomosed also end-to-end or we can connect it directly to the urinary bladder (ureterocystoneostomy). The aim of this study was to elucidate which technique has better results according to: animal survival, reperfusion and perfusion of the transplanted kidney, elimination of the urine from the transplanted kidney and procedure costs. The study included 240 (120 donors and 120 recipients) male Wistar rats (3 months old; weight 250-300 g Our results are clearly showing that the end-to-end vascular anastomosis, and Paquins ureterovesical anastomosis have better results in transplanted rat kidneys survival and urine drainage compared to end-to-side vascular anastomosis and end-to-end ureteral anastomosis. Based on our experience we can conclude that described methods of end-to-end vascular anastomosis and Paquins ureterovesical anastomosis are less technically demanding and have a shorter learning curve. Therefore, we can recommend the use of described methods in kidney transplantation related researches.     

大鼠颈总动脉端-侧吻合模型的建立

目的建立大鼠颈总动脉端-侧吻合模型,以期对欲进行显微血管吻合训练或相关实验的同道提供帮助。方法成年SD大鼠10只,将左侧颈总动脉远端穿过颈前肌肉群和气管之间的隧道,与右侧颈总动脉行端-侧吻合。结果成功建立大鼠颈总动脉端-侧血管吻合动物模型,手术成功率约为100%,平均吻合所需8针,平均血管吻合所需时间(35±5)min。吻合3个月后观察通畅率100%,HE染色示吻合口愈合良好。结论吻合成功的关键是提高显微操作技术水平,同时注意保护术野中小的血管和神经。此模型可以较好的应用于显微血管缝合训练。     

雄性大鼠膀胱出口梗阻两种模型制作方法的比较研究

目的 通过采用耻骨后膀胱颈和会阴途径球部尿道部分结扎两种方法,建立雄性大鼠膀胱出口部分梗阻（paritial bladder outlet obstraction,pBOO）模型,并对所建模型进行鉴定和比较,为pBOO后膀胱重构（bladder reconstruction）的深入研究提供一种成活率高,复制性和稳定性较好的动物模型.方法 80只健康雄性Wistar大鼠随机分为三组：I组为假手术组（对照组）,20只;II组为耻骨后途径膀胱颈部分结扎组,30只;III组为会阴途径球部尿道部分结扎组,30只.依据梗阻时间分别将I组、II组、III组大鼠随机分为2周组和4周组,于术后2周和4周对大鼠行尿动力学检测后,完整切除膀胱测其重量,将精囊腺组织和部分膀胱用4%甲醛固定,HE染色观察组织学变化.结果 II组和III组成活率分别为73.3%和80.0%,二者无统计学意义;I组、II组、III组建模手术时间分别为（9.75±2.29）、（17.33±3.54）、（10.77±2.44）min,II组与I组和III组比较差异均有统计学意义;I组、II组、III组的2周组和4周组逼尿肌漏尿点压（detrusor leak point pressure,DLPP）分别为（26.31±2.32）、（27.34±3.93）、（24.68±2.39）mmHg和（26..42±2.41）、（34.23±3.01）、（32.63±3.20）mmHg,I组与II组和III组的4周组比较差异有统计学意义,II组和III组的2周组和4周组比较差异均有统计学意义.结论 耻骨后途经膀胱颈部分结扎和会阴途径球部尿道部分结扎两种方法都能成功建立雄性大鼠pBOO模型,与耻骨后途径相比,会阴途径成活率高,手术操作时间短,复制性和稳定性好.     

硝普钠灌注对移植小肠粘膜细胞凋亡的影响

目的：探讨外源性一氧化氮（nitricoxide,NO）供体硝普钠（sodiumnitroprusside,SNP）对移植小肠粘膜细胞凋亡的影响。方法：64只220-300g雄性SD大鼠随机分成3组：A1组（n=8）,仅行剖腹关腹手术;A2组（n=12）：12对大鼠随机作为供受体行同种异体节段小肠移植,无SNP干预;A3组（n=16）：16对大鼠随机作为供受体行同种异体节段小肠移植,SNP加入灌注液进行供肠灌注。采用前述3。组动物模型再灌注5小时肠造口标本,TUNEL法检测小肠蜡块标本的细胞凋亡情况。结果：与A1组（3．86±4．74％）相比,A2（22．44±10．94％）、A3组（17．12±8．44％）小肠粘膜的细胞凋亡指数均有显著增高（P〈0．05）,A3组较A2组细胞凋亡指数显著降低（P〈0．05）。结论：小肠移植导致小肠粘膜细胞凋亡增加,外源性NO供体SNP灌注能够显著降低植入小肠的细胞凋亡,从而可能减弱粘膜屏障的损伤。     

大鼠原位肝移植急性排斥反应模型的建立

目的建立大鼠原位肝移植急性排斥反应模型。方法采用改进的Limmer和Kamada的二袖套法建立大鼠肝移植模型。将大鼠分为2组：①实验组：急性排斥反应组（Wistar→SD）;②对照组：免疫耐受组（SD→SD）。结果免疫排斥组肝存活时间（7.4±1.7）d低于对照组（18.9±7.6）d,差异有统计学意义0.05（P〈0.05）。结论Wistar→SD大鼠之间的原位肝移植模型可产生中、重度的免疫排斥反应,是一种较理想的可作为研究急性排斥反应的动物模型。     

Time course of onset and decay of humoral natriuretic activity in the rat.

The natriuretic mechanism.tic activity shown in earlier cross-circulation experiments to develop in the blood of rats undergoing sustained vascular expansion has been further characterized. Following whole blood infusion and urine reinfusion of the donor rat, a cross-circulated isovolaemic partner exhibits a natriuresis of gradual onset, requiring 60-80 min to reach a peak (0.04-3.24 muequiv./min per gram kidney weight). The gradual feature of recipient natriuresis was unchanged by infusing the donor rat 1 h prior to cross-circulation. Once developed, the recipient natriuresis was sustained when fluid depletion by the renal response was prevented, but was reversible with a half-life of about 30 min on interruption of the cross-circulation; reconnection of cross-circulation promptly restored recipient natriuresis. No significant natriuresis (0.04-0.16 muequiv/min per gram kidney weight) occurred in the recipients if the donors in comparable cross-circulations were not infused. These findings confirm that a natriuretic activity develops in the blood as a consequence of vascular expansion, and reveal that the activity has a slowly developing and reversible action on the renal natriure     

大鼠肝移植急性排斥反应模型的建立与评价

目的：建立大鼠肝脏移植急性排斥反应模型,并对所建模型进行评价。方法：采用改良Kamada“二袖套”法,以近交系大鼠Dark Agouti（DA）为供体、Lewis（LEW）为受体（A组）建立大鼠原位肝移植急性排斥反应模型,通过观察手术情况、生存情况及肝功能和病理学检查对此模型进行评价,同时以LEW→LEW作为对照组（B组）。结果：手术成功率为91.3%;手术时间为（90.70±5.68）min;无肝期时间（9.96±1.19）min;平均存活时间A组为（12.44±3.43）d,B组超过100d;A组血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶及血清总胆红素术后不断升高,在第10～14d最为明显,血清白蛋白在术后第3d开始逐渐降低,在相同时相点,与B组相比差异显著;A组移植肝脏病理检查有明显的排斥反应,而B组没有。结论：DA→LEW为稳定、强烈的大鼠肝移植急排模型,是研究肝移植排斥及免疫耐受的理想动物模型。     

骨髓间质干细胞移植对大鼠脑缺血再灌注凋亡蛋白Caspase-3的影响

目的研究静脉移植骨髓间充质干细胞（MSCs）对脑缺血再灌注模型大鼠神经功能及凋亡相关蛋白caspase-3的影响。方法体外培养及扩增MSCs后,用绿色荧光染料羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（CFSE）标记,通过静脉途径移植给大脑中动脉缺血2 h再灌注的SD大鼠,按不同时间点取材,荧光显微镜观察BMSCs在脑内的分布,免疫组织化学染色及RT-PCR检测大鼠脑内caspase-3蛋白表达情况。结果移植组在移植后第6天神经功能明显好于对照组（P〈0.05）。移植组移植后3、12、24、48、72 h caspase 3免疫组化阳性目标面密度分别为（1.34±0.31）%、（3.98±0.67）%、（5.58±0.92）%、（4.65±0.69）%、（3.51±0.63）%,对照组分别为（2.09±0.19）%、（5.23±0.30）%、（6.89±0.57）%、（5.93±0.56）%、（4.39±0.57）%,移植组和对照组比较均（P〈0.05）。6h及7 d移植组caspase 3阳性目标面密度分别为（2.81±0.35）%、（1.64±0.29）%,与对照组（3.92±0.44）%,（2.29±0.21）%比较差异显著（P〈0.01）。移植组相应时间点caspase-3的表达明显低于对照组（P〈0.05,P〈0.01）;移植组大鼠缺血侧皮层的caspase-3 mRNA相对量明显低于对照组（P〈0.01）。结论经静脉注射骨髓间充质干细胞可明显改善神经功能。其可能通过下调caspase-3表达方式对脑缺血再灌注损伤起保护作用。