铜绿假单胞菌的分布特点耐药性分析

目的分析3年来我院患者铜绿假单胞菌的耐药特点,为临床合理用药提供依据,并有助于医院感染预防与控制。方法对2010年至2012年我院各类感染患者标本中分离获得的铜绿假单胞菌,采用纸片扩散法（K-B法）检测抗菌药物的敏感性,并用WHONET5．3软件对药敏结果进行统计分析。结果3年分离的铜绿假单胞菌共计369株,其对多黏菌素B无耐药,对亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮／舒巴坦、哌拉西彬他唑巴坦和阿米卡星的耐药率较低（6．81％～22．73％）,对其他抗菌药物的耐药率较高（32．47％～73．38％）。结论铜绿假单胞菌对多种抗菌药物均具有较高的耐药性,临床上治疗该菌感染时应根据药敏检测结果选择抗菌药物。     

Transient exposure to a physiologically-relevant concentration of calcium confers tobramycin resistance upon sessile cells of Pseudomonas aeruginosa

Sessile populations of a mucoid Pseudomonas aeruginosa isolate generated in M-56 medium of 'low' (0.02 mM) or 'high' (2.5 mM) Ca2+ were treated with tobramycin (250 micrograms.ml-1), as were biofilms exposed transiently to 'high' Ca2+ medium. Viability decreased by over 99.9% within 8 h in the 'low' and 'high' samples, while transient Ca2+ exposure was protective. Dispersed sessile bacteria were as tobramycin sensitive as planktonic bacteria.     

301株铜绿假单胞菌的分布及耐药性分析

目的 通过对临床中分离的铜绿假单胞菌的分布及对临床常用13种抗生素的耐药性进行分析指导临床合理用药.方法 收集大连医科大学附属第二医院2010年1月至12月临床送检的标本,采用全自动细菌和药敏分析仪分离铜绿假单胞菌同时进行药敏试验.结果 铜绿假单胞菌在痰液标本中分离率高达79.06％;对头孢噻肟、头孢西丁、头孢唑啉3种药物的耐药率均大于50％;对头孢他啶,哌拉西林/他唑巴坦耐药率低于20％.结论 铜绿假单胞菌易产生多源耐药,加强耐药性监测,控制医院内感染,对临床医生选用有效的抗生素具有十分重要的意义.     

新生儿病房铜绿假单胞菌感染状况及耐药性的5年监测

目的监测2005年至2009年间铜绿假单胞菌在新生儿病房的分离情况及其耐药趋势,为临床感染的预防和治疗提供实验室依据。方法回顾分析2005年至2009年间新生儿病房所有标本中铜绿假单胞菌的分离率,菌株在标本中的分布以及对常见的13种抗菌药物的耐药性。结果铜绿假单胞菌的分离率有逐年升高的趋势,从2005年的1.19%增至2009年的5.16%;其在呼吸道标本中的分离率最高(86.3%),在其他标本中的检出率都相对较低。铜绿假单胞菌的耐药株也有逐年增多的趋势,特别是对复方新诺明的耐药性已发展成为全部耐药。结论铜绿假单胞菌在新生儿病房的分离率在不断地增加,其对多种抗菌药物有较高的耐药性,加之新生儿免疫系统发育不完善,应引起临床医师的高度重视。     

铜绿假单胞菌多重耐药基因的筛选及鉴定

[目的]研究铜绿假单胞菌中与耐药性相关的基因.[方法]筛选转座突变体文库中对多种抗菌药物敏感的突变体,通过随机PCR、核苷酸测序及序列比对确定突变体中转座子的插入位点及其破坏的基因.[结果]筛选得到2株对多种抗菌药物敏感的突变体,其中被破坏的基因分别为功能未知的新基因PA2580和PA2800.[结论]PA2580和PA2800可能分别通过参与细胞氧化还原作用和细胞壁合成进而与铜绿假单胞菌耐药性相关.     

铜绿假单胞菌体外抑菌活性研究

目的 观察铜绿假单胞菌抗菌物质对鲍曼不动杆菌等细菌的体外抑菌效果.方法 用交叉条带实验方法检测了铜绿假单胞菌对鲍曼不动杆菌、耐甲氧西林表皮葡萄球菌和粪肠球菌的体外抑制活性.结果 铜绿假单胞菌对鲍曼不动杆菌、耐甲氧西林表皮葡萄球菌和粪肠球菌体外抑菌活性良好,10株铜绿假单胞菌中,有8株对鲍曼不动杆菌的抑制率均达到了100％.另外有8株对耐甲氧西林表皮葡萄球菌的抑菌率均为100％;有6株对粪肠球菌的抑菌率为100％.结论 铜绿假单胞菌对上述3种致病菌具有较强的抗菌活性,具有开发前景.     

126株铜绿假单胞菌的临床分布及耐药性分析

目的调查分析象山县中医医院铜绿假单胞菌的临床分布及药敏情况,为临床合理选用抗生素提供可靠的依据。方法采集疑似患者的标本,进行分离、培养与鉴定。采用自动微生物鉴定／药敏分析仪进行鉴定及药敏试验,对2012年7月至2013年10月分离出的126株铜绿假单胞菌（包括21株黏液型铜绿假单胞菌）的分布及耐药性进行回顾性分析。结果126株铜绿假单胞菌临床主要分布情况：痰占80．2％,尿液占11．1％,脓液占7．1％,以呼吸道感染为主。对铜绿假单胞菌保持活性较强同时耐药率〈20％的抗生素有阿米卡星、妥布霉素、亚胺培南、哌拉西林／他唑巴坦,其中碳青霉烯类耐药率升至5％,原来被认为抗铜绿假单胞菌较为有效的喹诺酮类抗生素的耐药率也有了很大提升,左氧氟沙星耐药率升至33％。黏液型铜绿假单胞菌的体外抗菌药物敏感试验耐药性较弱,且明显弱于非黏液型铜绿假单胞菌的耐药性。结论铜绿假单胞菌为医院呼吸道感染的常见致病菌,对多种抗菌药物呈不同程度耐药。加强动态监测,合理使用抗菌药物,对铜绿假单胞菌感染的预防和药物治疗具有重要指导意义。     

ICU患者铜绿假单胞菌获得性肺炎耐药研究

目的监测重症监护病房（ICU）铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa,PA）的感染状况及耐药变迁,指导临床合理使用抗菌药物。方法对2003年至2007年间,我院ICU收治的患者下呼吸道分泌物进行培养及体外耐药试验。结果铜绿假单胞菌是ICU下呼吸道感染的主导致病菌且感染率呈逐年上升的趋势（46．3％-81．0％）,细菌对三代头孢、亚胺培南及氨基糖苷类药物的耐药性也呈逐年上升的趋势,并呈现多重耐药的特性。结论铜绿假单胞菌是ICU院内下呼吸道感染的常见病原菌,其多重耐药性及应引起高度重视。     

铜绿假单胞菌医院感染调查及耐药分析

目的探讨铜绿假单胞菌(PA)医院感染的临床分布及耐药性,为临床合理使用抗菌药物及控制医院感染提供依据。方法 PA的培养与鉴定严格按照《全国临床检验操作规程》进行。药敏试验采用纸片扩散法(K-B法)。结果收集的359株PA中,分离率居前3位的临床科室依次为ICU、呼吸内科和神经内科,分别占38.1%、17.5%和13.9%;临床标本中以呼吸道标本分离率最高,占62.7%;PA对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率最低(9.7%),其次为阿米卡星(13.1%)和头孢他啶(17.8%),另12种抗菌药物的耐药率均较高。结论 PA耐药性已十分严重,临床应根据药敏结果合理使用抗菌药物并加强对细菌耐药性的全面监测。     

哈尔滨市112株绿脓杆菌的血清学分型和耐药性测定

对从临床分离的112株绿脓杆菌进行系统鉴定后,血清学分型表明:6、2和3型分别占32.14％、15.18％、15.18％,为主要流行型,共占总分离株的62.50％。耐药性测定结果为:对10种抗生素5耐以上者占69.6％。其中对多粘菌素、妥布霉素、丁胺卡那霉素三种抗生素最为敏感,敏感率分别为100％、70.6％、86.5％。     

不同标本来源铜绿假单胞菌体外耐药性对比研究

目的比较不同部位培养出的铜绿假单胞菌耐药性,为临床控制和治疗铜绿假单胞菌感染提供依据。方法收集住院患者不同标本中分离的铜绿假单胞菌进行鉴定和药敏试验。结果分离率以痰标本中最高,占57.67%;伤口分泌物次之占30.69%。科室分布以ICU（38.1%）、神经外科（15.34%）和烧伤科（14.81%）最多见。同一种抗菌药物对不同标本分离的铜绿假单胞菌显示出不同敏感性,痰标本中铜绿假单胞菌对常用抗菌药物耐药率较伤口分泌物标本中高,除头孢哌酮/舒巴坦、氨苄西林/舒巴坦和复方新诺明外,对其他常用的12种抗菌药物耐药率比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论不同标本分离的铜绿假单胞菌对抗菌药物耐药性存在差异,临床经验用药时应区别对待不同部位铜绿假单胞菌的感染。     

某院铜绿假单胞菌获得性肺炎病原菌分析及院感防控

目的 了解我院铜绿假单胞菌获得性肺炎患者病原菌的分布及耐药情况。方法 选取2016年7月至2017年12月我院送检的获得性肺炎患者痰液培养标本,采用VITEK2-COMPACT全自动微生物分析仪进行菌株鉴定和药敏分析。结果 总共检出358株铜绿假单胞菌,主要分布于呼吸内科和ICU。患者主要基础疾病为慢性阻塞性肺疾病、慢性支气管炎、脑梗死、脑出血等。检出的铜绿假单胞菌对复方新诺明耐药率最高,对阿米卡星耐药率最低。铜绿假单胞菌耐药率由低到高依次为妥布霉素、哌拉西林/他唑巴坦、庆大霉素、头孢他啶、头孢哌酮/舒巴坦、头孢唑肟钠、头孢曲松钠、亚胺培南和左氧氟沙星。结论 我院需要加强对碳青霉烯类和含β-内酰胺酶抑制剂药物的管控,减少这些药物的使用强度,各临床科室尤其是呼吸内科和ICU需及时监控铜绿假单胞菌的耐药情况,合理使用抗生素,从而逐步降低病原菌耐药状况。     

病原菌耐药性与血清PCT水平关系的分析

目的 了解病原菌不同的耐药性对患者血清降钙素原（PCT）水平的影响。方法 运用酶联免疫荧光法检测30例普通耐药铜绿假单胞菌感染患者,30例泛耐药铜绿假单胞菌感染患者,30例普通耐药金黄色葡萄球菌感染患者,30例泛耐药金黄色葡萄球菌感染患者,以及40例健康体检者（对照组）血清中PCT的水平。结果 铜绿假单胞菌感染组患者PCT水平明显高于金黄色葡萄球菌感染组（P<0.01）,且两组均明显高于对照组（P均<0.05）,普通耐药菌组患者PCT水平明显低于泛耐药菌组（P均<0.01）,且两组均明显高于对照组（P均<0.05）。结论 革兰阴性菌感染时,PCT水平显著高于革兰阳性菌感染,且病原菌耐药性越高,PCT水平升高越显著。     

Role of dose concentration in biocide efficacy against Pseudomonas aeruginosa biofilms

Pseudomonas aeruginosa entrapped in alginate gel beads to form artificial biofilms resisted killing by chlorine, glutaraldehyde, 2,2-dibromo-3-nitrilopropionamide (DBNPA), and an alkyl dimethyl benzyl ammonium compound (ADBAC). The degree of resistance was quantified by a resistance factor that compared killing times for biofilm and planktonic cells in response to the same concentration of antimicrobial agent. Resistance factors averaged 120 for chlorine, 34 for glutaraldehyde, 29 for DBNPA, and 1900 for ADBAC. In every case, resistance factors decreased with increasing concentration of the antimicrobial agent. An independent analysis of the concentration dependence of the apparent rates of killing of planktonic and biofilm bacteria showed that elevating the treatment concentration increased bacterial killing more in the biofilm than it did in a suspension culture. Calculation of a transport modulus comparing the rates of biocide reaction and diffusion suggested that at least part of the biofilm resistance to chlorine, glutaraldehdye, and DBNPA could be attributed to incomplete or slow penetration of these agents into the biofilm. Time-kill curves were nonlinear for biofilm bacteria in some cases. The shapes of these curves implicated retarded antimicrobial penetration for chlorine and glutaraldehyde and the presence of a tolerant subpopulation for DBNPA and ADBAC. The results indicate that treating biofilms with a concentrated dose of biocide is more effective than using prolonged doses of a lower concentration. Journal of Industrial Microbiology & Biotechnology (2002) 29, 10–15 doi:10.1038/sj.jim.7000256 Received 29 October 2001/ Accepted in revised form 18 March 2002     

Regulation of virulence and antibiotic resistance by two-component regulatory systems in Pseudomonas aeruginosa

The Gram-negative opportunistic pathogen Pseudomonas aeruginosa ubiquitously inhabits soil and water habitats and also causes serious, often antibiotic resistant, infections in immunocompromised patients (e.g. cystic fibrosis). This versatility is mediated in part by a large repertoire of two-component regulatory systems that appear instrumental in the regulation of both virulence processes and resistance to antimicrobials. Major two-component regulatory system proteins demonstrated to regulate these diverse processes include PhoP–PhoQ, GacA–GacS, RetS, LadS, and AlgR, among others. Here, we summarize the current body of knowledge of these and other two-component systems that provides insight into the complex regulation of virulence and resistance in P. aeruginosa .     

铜绿假单胞菌ESBLs和AmpC酶的检测及耐药性分析

目的了解铜绿假单胞菌临床分离株ESBLs和AmpC酶的产生及对常用抗菌药物敏感性,指导临床合理选用抗生素。方法常规培养分离细菌,采用VITEK-60型全自动细菌鉴定仪鉴定细菌;按NCCLS推荐的双纸片确证法和K-B纸片扩散法检测ESBLs和药敏试验;采用头孢西丁纸片扩散法筛选疑产AmpC酶阳性菌株,确诊采用三维试验。结果铜绿假单胞菌产ESBLs和AmpC酶总检出率分别为40.8%和38.2%,其中,单产AmpC酶、单产ESBLs和同产AmpC酶+ESBLs检出率分别为19.7%、26.3%和14.5%。药敏试验显示:产酶株的耐药性明显高于非产酶株,耐药现象在同产AmpC酶和ESBLs菌株中更为严重。结论台州地区临床分离的铜绿假单胞菌产ESBLs和AmpC酶菌株检出率较高。产AmpC酶和ESBLs的菌株呈高度耐药,临床上对产酶菌株引起感染的治疗应根据细菌药敏试验结果,合理选择有效的抗菌药物联合治疗,减少产酶菌株的产生和流行。     

Analysis of antibiotic resistance gene expression in Pseudomonas aeruginosa by quantitative real-time-PCR

In Pseudomonas aeruginosa many of the clinically relevant resistance mechanisms result from changes in gene expression as exemplified by the Mex drug efflux pumps, the AmpC beta-lactamase and the carbapenem-specific porin OprD. We used quantitative real-time-PCR to analyze the expression of these genes in susceptible and antibiotic-resistant laboratory and clinical strains. In nalB mutants, which overexpress OprM, we observed a four- to eightfold increase in the expression of mexA, mexB, and oprM genes. MexX and mexY genes were induced eight to 12 times in the presence of 2 mg L(-1) tetracycline. The mexC/oprJ and mexE/oprN gene expression levels were increased 30- to 250-fold and 100- to 760-fold in nfxB and nfxC mutants, respectively. We further found that in defined laboratory strains expression levels of ampC and oprD genes paralleled beta-lactamase activity and OprD protein levels, respectively. Our data support the use of quantitative real-time-PCR chain reaction for the analysis of the antimicrobial resistance gene expression in P. aeruginosa.