共查询到20条相似文献,搜索用时 15 毫秒
1.
用人重组肿瘤坏死因子-α(Tumornecrosisfactor-α,TNF-α)和人天然α干扰素(Interferon-α-,IFN-α)在人胚胎肺纤维母细胞(HEF)和Hep-2细胞系上对常见呼吸道病毒所致细胞病变抑制进行比较观察。病毒包括不同型别的腺病毒5株,单疱病毒Ⅰ型(HSV-I)1株,鼻病毒1株,仙台病毒1株,VSV1株。结果提示TNF-α和IFN-α均具有广谱抗病毒活性。TNF-α的抑毒作用能被TNF-α申抗和IFN-β单抗完全去除,被IFN-α单抗部分去除TNF-α的抗病毒效应。TNF--α中和试验的结果提示:TNF抗病毒活性仍为IFN-β诱生所介导。 相似文献
2.
利用脑炎心肌炎病毒的内核糖体进入位点连接人TNF-αcDNA和选择基因NeoR基因,使TNF-α及NeoR基因均受控于病毒LTR启动子,将两基因同时转录至同一mRNA,从而构建成人TNF-α双顺反子逆转录病毒载体pGCEN/TNF-α.在LipofectAMINE介导下将其导入包装细胞PA317,G418筛选得单克隆,病毒滴度为106CFU/ml重组病毒分泌的细胞株.经PCR证明外源基因已整合至细胞基因组,Northern印迹显示出单一LRT转录本.持续G418筛选能明显促进目的基因TNF-α的表达.用重组病毒上清感染小鼠成纤维细胞NIH3T3,G418筛选获得的混合抗性克隆持续高表达TNF-α,40Gyγ线照射后能维持高效表达至7d.实验结果表明,含IRES的双顺反子逆转录病毒载体将是一个很好的基因转移载体. 相似文献
3.
利用脑炎心肌炎病毒和脊髓灰质灰病毒的内核糖体进行位点,连接人TNF-α及IL-2cDNA和选择基因新霉素磷酸转移酶基因(NeoR),使TNF-α、IL-2及NeoR基因均受控于病毒毒LTR启动子,将这3个基因转录至用一mRNA,从而构建成含人TNF-α、IL-2及NeoR基因多顺反子逆转录病毒载体pGCEN/TRI。在LipofectAMINE介导下将其导入包装细胞PA317,G418筛选得单克隆 相似文献
4.
本文利用小鼠大脑机械损伤模型及体外培养的胶质细胞,采用同位素渗入法观察了细胞介素及其抗体对胶质细胞增生的影响。结果表明:体外培养时TNF-α在浓度为10~200u/ml培养液时均能促进胶质细胞增生(P<0.05),IL1-β在浓度为5~200u/ml培养液时能促进胶质细胞增生,TNF-α+IL1-β其促进胶质细胞增生作用更强烈,TNF-α抗体能完全阻断TNF-α的促增生作用,部分阻断TNF-α+IL1-β的促增生作用。在体实验时,IL1-β及TNF-α的作用与离体时相似,IL1-β及TNF-α亦能促进胶质细胞增生,二者共同作用时促细胞增生作用更强。以上结果提示,外源性TNF-α及IL1-β能促进中枢神经损伤后胶质细胞增生且具有协同作用。 相似文献
5.
TNF┐α作用的两面性细胞凋亡是否存在保护机制?最近Science上发表了三篇文章从不同的角度证明,TNF-α在诱导细胞凋亡的同时,可通过核因子κB(NF-κB)诱导某些蛋白以保护靶细胞免于死亡。因而,靶细胞的命运就取决于细胞内这两种机制的平衡。Ba... 相似文献
6.
含人TNF-α、IL-2及NeoR基因多顺反子逆转录病毒载体的构建及表达 总被引:1,自引:0,他引:1
利用脑炎心肌炎病毒和脊髓灰质炎病毒的内核糖体进入位点,连接人TNF-α及IL-2cDNA和选择基因新霉素磷酸转移酶基因(NeoR),使TNF-α、IL-2及NeoR基因均受控于病毒LTR启动子,将这3个基因转录至同一mRNA,从而构建成含人TNF-α、IL-2及NeoR基因多顺反子逆转录病毒载体pGCEN/TRI。在LipofectAMINE介导下将其导入包装细胞PA317,G418筛选得单克隆,病毒滴度为5×105CFU/ml重组病毒分泌的细胞株,经PCR证明外源基因已整合至基因组,Northern印迹显示出单一转录本。用重组病毒上清感染不同的细胞,G418筛选所获得的抗性克隆能不同程度地表达TNF-α及IL-2。实验结果表明,含IRES的多顺反子逆转录病毒载体能很好地在同一靶细胞中表达多个外源基因。 相似文献
7.
8.
用转入TNF-α基因并稳定有达了4年多的丝状体蓝藻-鱼腥藻7120(Anabaena sp.PCC7120),研究比较了在培养液中氨源(NaNO3)和碳源(NaAc)对转基因灌生长和TNF-α基因的不同影响,氨源能稳定外源蛋白的表达,而碳源则影响细胞壁的合成。通过比较不同的破碎细胞的方法,发现超声破碎得到的可溶性总蛋白含量和TNF-α含量均要比冻融法高出1倍左右,经过细胸破碎、硫酸铵分级沉淀、常压离子交换液相色析后,除去杂蛋白及大量容易堵柱的糖类等物质,最后通过亲和柱层析,分离出了纯的目标蛋白-重组肿瘤坏死因子(TNF-α)。经凝胶电泳鉴定为单一的谱带,分子量为17kD。 相似文献
9.
单核/巨噬细胞分泌TNF—α的调控及在老年时的改变 总被引:3,自引:0,他引:3
肿瘤坏死因子-α(TNF-α)是一种主要由单核/巨噬细胞分泌的细胞因子。它不仅有杀伤肿瘤细胞的特性,还在炎症、休克和自身免疫等病理过程中起重要作用。刺激巨噬细胞分泌TNF-α的主要物质有内毒素、病毒、某些细胞因子和有丝分裂原以及神经肽等。而前列腺素E(PGE)、cAMP类似物和肾上腺素类等可抑制其分泌。很多文献报道TNF-α在老年时单核/巨噬细胞的分泌有改变。 相似文献
10.
p38 MAPK参与LPS诱导RAW细胞TNF—α基因表达的调控 总被引:3,自引:0,他引:3
构建TNF-α启动子驱动的荧光酶报告基因系统,研究p38MAPK信号转导系统对TNF-α基因表达的影响,RAW264.7细胞共转染实验发现,LPS对p38的激活作用与其诱导TNF-α转录活性的作用显著相关,虽然单纯转染p38未见明显诱导TNF-α报告基因系统的转录活性。 相似文献
11.
人PSP94全长cDNA的获得及PSP94-TNF~Δ融合蛋白的构建 总被引:2,自引:0,他引:2
利用RT-PCR从人肥大前列腺组织钓取94个氨基酸的人前列腺分泌蛋白(PSP94)全长cDNA,序列分析结果与文献报道的完全一致.将PSP94成熟肽与人TNFα衍生物(TNFΔ)通过Linker-SAPGTP在基因水平上融合成5′PSP94-TNFΔ,融合基因DNA序列分析结果与设计的相符合.5′PSP94-TNFΔ在大肠杆菌中表达产物分子量约为31kD,表达量约占菌体总蛋白量的35%.以L929细胞和人前列腺癌细胞株PC-3为靶细胞进行细胞毒分析结果表明,5′PSP94-TNFΔ融合蛋白既具有TNF的细胞毒活性,又具有对前列腺癌细胞PC-3的杀伤作用 相似文献
12.
青春双歧杆菌DM8504菌株对小鼠体内HCa—F25/16A3—F肿瘤细胞 … 总被引:2,自引:2,他引:0
本实验应用加热处死的青春双歧杆菌DM8504菌株皮下注射荷瘤HCa-F25/16A3-F肿瘤的BALB/c小鼠,酶联法测定小鼠体内TNF-α、IL-6的含量,TUNEL法及电镜观察肿瘤组织中是否有凋亡细胞的存在。实验结果指出:双歧杆菌能提高荷瘤小鼠体内TNF-2的含量,较对照组明显升高,但IL-6的含量处理组与对照组之间无显著性差异。TUNEL法除观察到不同程度的坏死组织外,未见到散在凋亡的肿瘤细 相似文献
13.
目的:探讨针对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的小干扰RNA(siRNA)对口腔鳞癌细胞(OSCC)化疗敏感性的影响。方法:用Western印迹检测OSCC和针对HIF-1α基因的siRNA导入OSCC后的HIF-1α蛋白表达水平;用MTT法检测细胞对化疗敏感性的影响;用流式细胞术检测化疗诱导细胞凋亡的凋亡率。结果:HIF-1α在OSCC中高表达,HIF-1α-siRNA转染后HIF-1α表达水平明显下降,细胞对化疗敏感性明显提高,化疗诱导肿瘤细胞凋亡率明显增加。结论:针对HIF-1α基因的siRNA能明显降低HIF-1α的表达,增强化疗对OSCC的凋亡诱导作用,有效提高OSCC对化疗的敏感性。 相似文献
14.
bcl—2和IL—1和TNFα表达的调节作用初探 总被引:1,自引:0,他引:1
通过将反义bcl-2基因转梁于U937细胞,建立了Bcl-2蛋白表达受抑的U937细胞模型,证实了模型细胞的增殖和存活表型授课和线菌素D-结晶紫试验和ELISA检测表明模型细胞上清中TNFα的活性和含量无明显变化,小鼠胸腺细胞增殖试验表明模型细胞上清中IL-1活性升高,提示bcl-2的表达对TNFα的表达无明显影响,但可能在一定程度上抑制了IL-1的表达或活性。 相似文献
15.
人α-肿瘤坏死因子基因的高效表达 总被引:2,自引:0,他引:2
用人工合成的α-肿瘤坏死因子(TNF-α)基因构建了五个不同的表达质粒,它们不同之处是SD序列与起始密码子ATG间距离(D)各异。计算机模拟计算出翻译起始区域(TIR)中二级结构的最小生成自由能,以(D)为6个核苷酸时最小(绝对值)。它的表达效率也最高,产物TNF-α可达菌体总蛋白的60%。密码子的选用对表达效率有很大的影响,故人工合成TNF-α基因(选用大肠杆菌偏爱的密码子)的表达效率高于sc- 相似文献
16.
Fas与FasL的分子及细胞生物学研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
卫立辛 《国外医学:分子生物学分册》1996,18(3):97-99
Fas是I型膜蛋白,属TNF受体家庭成员,许多细胞表达Fas。而Fas配体(FasL)只在激活T淋巴细胞表达,是Ⅱ型膜蛋白,属TNF家庭成员,当FasL与Fas结合时,Fas可向细胞传递“死亡信号”,细胞在数小时内凋亡,Fas-FasL介导的细胞凋亡在免疫调失及免疫病理中,可能有重要作用。 相似文献
17.
青春双歧杆菌DM8504菌株对小鼠体内HCa-F_(25)/16A_3-F肿瘤细胞抑制作用的初步研究 总被引:3,自引:0,他引:3
本实验应用加热处死的青春双歧杆菌DM8504菌株皮下注射荷瘤HCa-F25/16A3-F肿瘤的BALB/c小鼠,酶联法测定小鼠体内TNF-α、IL-6的含量,TUNEL法及电镜观察肿瘤组织中是否有凋亡细胞的存在。实验结果指出:双歧杆菌能提高荷瘤小鼠体内TNF-2的含量,较对照组明显升高,但IL-6的含量处理组与对照组之间无显著性差异。TUNEL法除观察到不同程度的坏死组织外,未见到散在的凋亡的肿瘤细胞,电镜观察与TUNEL结果相一致,肿瘤细胞呈现坏死细胞的超微结构,未见凋亡细胞所具有的典型的形态特征。结果提示:双歧杆菌通过调节机体的免疫系统发挥抗肿瘤的作用,其对HCa-F25/16A3-F肿瘤细胞的杀伤是通过坏死的方式实现的。 相似文献
18.
为了检测双歧杆菌是否能增强巨噬细胞免疫因子的产生,用RAW264.7细胞作为巨噬细胞模型,将8种不同的经热处理杀死的双歧杆菌分别与培养的RAW264.7细胞温育。所有的双歧杆菌均能诱导TNF-α及IL-6的产生,且产生TNF-α及IL-6的量与双歧杆菌的剂量及诱导时间有关,在24h之内,与对照组相比,8种双歧杆菌均能增强TNF-α和IL-6的产生,但是如果双歧杆菌与RAW264.7细胞温育时间短(只有14h),低剂量的双歧杆菌(10μg/mL和50μg/mL)就不能诱导TNF-α和IL-6的产生。双歧杆菌 相似文献
19.
给BALB/c小鼠腹腔注射产肠毒素B金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌或葡萄球菌肠毒素,均可引起小鼠腺萎缩,呈现胞腺重量减轻、胸腺细胞数减少、胸腺细胞存活率降低。进一步研究表明,小鼠胸腺细胞凋亡的机制可能与这些细菌或毒素诱导缩生产生TNF-α、IFNr和IL-6等细胞因子有关。 相似文献
20.
针对肿瘤坏死因子(TNF)在肿瘤治疗剂量下产生的严重毒副作用及一些肿瘤细胞上白细胞介素-6(IL-6)受体明显增高的事实,根据TNF结构与功能研究的最新信息,利用PCR技术,对人TNFα基因进行了改造,并将其与人IL-6成熟肽编码区cDNA通过人工接头进行融合。融合蛋白在大肠杆菌中表达后,Westernblot分析表明,分子量约为37kD;活性检测结果证实,该融合蛋白兼具有TNF抗肿瘤活性和结合IL-6受体的能力,在高表达IL-6受体的人骨髓瘤细胞上测得的细胞毒活性较同样位点突变的TNF高约3倍。 相似文献