肥胖引起胰岛素耐受的分子机理

肥胖引起胰岛素耐受的分子机理胰岛素经血液循环到达靶细胞后,与细胞膜上胰岛素受体（ＩＲ）结合,引起ＩＲβ亚单位上的酪氨酸残基自身磷酸化（ＩＲ本身具有酪氨酸激酶活性）,随即引发胰岛素受体底物１（ｉｎｓｕｌｉｎｒｅｃｅｐｔｏｒｓｕｂｓｔｒａｔｅｌ,ＩＲＳ－...     

胰岛素受体底物1的PH结构域与PKC的结合

从大鼠的肝脏克隆胰岛素受体底物１（ＩＲＳ－１）的ＰＨ结构域基因并进行谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧＳＴ）融合表达,研究该结构域与蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）的结合情况,并为进一步寻找其新配基打下基础,研究采用一步法从大鼠新鲜肝组织中提取总ＲＮＡ,以ＲＴ－ＰＣＲ的方法扩增目的基因片段,测序证明序列正确,再将正确的目的基因片段定向克隆到表达载体ｐＧＥＸ－４Ｔ－１中,以ＩＰＴＧ在２６℃下诱导,获得与ＧＳＴ的融合表达,表     

胰岛素样生长因子1受体激活机制及信号转导特异性

胰岛素样生长因子１受体（ＩＧＦ１Ｒ）与胰岛素受体（ＩＲ）结构同源,它们信号转导的细胞内底物相似,但二者介导的生物学效应却存在的一定的差异,本文集中介绍了两种受体的激活机制及信号转导特异性方面的研究进展。     

TGF—β家族信号的细胞内传导蛋白：MAD蛋白家族

ＳＭＡＤｓ是新近发现的参与ＴＧＦ－β超家族的信号在细胞内声望地的一族蛋白,包括８个成员,分别称ＳＭＡＤ１－８。ＳＭＡＤ１、２、３、５和８属于一类,它们被ＴＧＦ－β的受体或ＢＭＰ的受体激活而磷酸化,称为受体调节ＳＭＡＤ,传导下ＴＧＦ－β或ＢＭＰ的信号。ＳＭＡＤ６和７属于另一类,它们抑制制受体调节ＳＭＡＤ的信号传导。ＳＭＡＤ４是第三类,它是受体调节ＳＭＡＤ传导信号的伴侣。受体调节ＳＭＡＤ传导信号必须先     

白血病抑制因子受体与细胞内信号分子

白血病抑制因子（ＬＩＦ）与细胞膜上的ＬＩＦ受体β亚基结合并使之与ｇｐ１３０形成异源性二聚化后,ＬＩＦ受体β亚基细胞内区的３个Ｔｙｒ和ｇｐ１３０的４个Ｔｙｒ（均呈（ＹＸＸＱ结构）分别激活ＪＡＫ酶,ＭＡＰＫ,Ｆｅｓ,Ｂｔｋ,Ｔｅｃ激酶,ＰＴＰ１Ｄ和ＳＴＡＴＳ等,Ｃ－ｍｙｃ,Ｃ－ｍｙｂ的转录活性下降,以及ＪｕｎＢ,ＩＲＦ１和Ｓｔａｔ３的转录活性上升促进细胞分化,抑制细胞增殖,从而维持垂体功能,促进神经肌     

衣霉素对胰岛素受体结合胰岛素及内吞作用的影响

本文研究了人肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１的胰岛素受体与＾１２５Ｉ－胰岛素结合的条件,并比较了衣霉素处理和对照细胞的结合动力学和内吞作用。结果表明：４℃和ＰＨ８是研究胰岛素受体与配体结合的较佳条件,当０．１ｕｇ／ｍｌ衣霉素处理１８小时,Ｓｃａｔｓｈａｒｄ作图分析指出,胰岛素受体的结合容量降低,每个细胞上的受体位点数减少。Ｈｉｌｌ作图分析说明,胰岛素和受体的亲和力（胰岛素半饱和浓度和表观解离常数）及结合     

水稻条纹病毒两个分离物RNA4基因间隔区的序列比较

通过ＲＴ－ＰＣＲ扩增了我国水稻秫纹病毒（ＲＳＶ）山东济宁（ＪＮ）、云南宜良（ＹＬ）两个分离物ＲＮＡ４基因间隔区（ｉｎｔｅｒｇｅｎｉｃ ｒｅｇｉｏｎ,ＩＲ）序列,并克隆于ｐＧＥＭ－Ｔ ｅａｓｙ载体上。序列分析结果表明：ＪＮ、ＹＬ两分离物ＲＮＡ４ ＩＲ均由６５４个核苷酸组成,两者之间的同源率为９２％。ＪＮ、ＹＬ两个分离物ＲＮＡ４ ＩＲ在ＡＵ碱基富集处可形成上明显的结构,其中一个序列比较保守,形成的发夹     

小肠平滑肌胰岛素受体的特征及其蛋白激酶活性

 本实验对狗小肠平滑肌中胰岛素受体的结构和特征进行了分析研究。通过麦胚凝集素琼脂糖和两次Sepharose-CL-6B凝胶层析从平滑肌中纯化胰岛素受体,达到电泳纯。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳证明胰岛素受体是由两个亚基组成的,分子量分别为135kD和90kD。磷酸化实验证明平滑肌胰岛素受体具有胰岛素依赖性蛋白激酶活性,能催化自身的β亚基磷酸化和底物的磷酸化。Scatchard分析表明胰岛素和受体的结合呈(?)协同效应,最大结合率为13μg胰岛素/mg蛋白质。     

胰岛素受体底物家族与Ⅱ型糖尿病关系性的研究进展

胰岛素受体底物分子(IRS)是调节胰岛素信号通路的关键物质,在维持细胞生长,分裂和代谢中起着重要作用。目前已发现的家族成员有四个(IRS-1、IRS-2、IRS-3、IRS-4)。目前研究表明,糖尿病的发生与之密切相关:胰岛素信号通路与其他信号通路发生交叉发生干扰,从而导致胰岛素抵抗,引发Ⅱ型糖尿病;IRS蛋白的结构、表达水平异常导致胰岛素信号的中断或减弱,并表现为胰岛素抵抗;四种IRS分子表达的不平衡,致使胰岛素分泌调节的稳态被破坏也可能是糖尿病发病的原因之一。Fox蛋白家族是动物细胞内的一类转录因子,与细胞代谢密切相关。Fox蛋白靶点有可能作为研究治疗糖尿病方法的一种新思路。     

Smads蛋白结构与功能的研究进展

TGF－β家族成员与细胞膜上受体结合后,通过Smads蛋白,调节细胞核内特异的基因表达。从结构和功能上看,Smads蛋白可分为3类。受体调节－Smads(R-Smads)作为具有Ser/Thr激酶活性的TGF-β受体－I的底物,激活后通过MH2结构域,与共同介导的Smads(Co-Smads）相互作用形成异聚体,直接结合在目的基因启动子上,影响基因转录。而转录抑制Smads(I-Smads)能够拮抗R－Smads的生物活性。在细胞内,Smads蛋白通过与不同的转录蛋白或转录共调节因子相互作用,在不同类型的细胞内介导特异的基因表达。改变Smads蛋白的正常结构和功能上起人体发生各种病变。     

胰岛素受体胞外区三维结构的模建及结构功能关系

利用计算机辅助分子设计技术模建了人胰岛素受体α亚基N端三个结构域的空间结构。实验研究证明胰岛素受体结合胰岛素的主要决定要素在这三个结构域,在模建的结构中,三个结构域围成了一个很大的开放的空洞,这个空洞的体积大小足以容纳一个胰岛素分子,这个空洞可能就是胰岛素受体与底物的作用的部位,另外,突变实验研究表明在胰岛素受体中有一个结合底物的“footprint”,由4个在一级结构上不连续的片段组成,从三维结构角度看,这4个片段中,有3个出现在邻近的平行折叠股,在我们的模型中,胰岛素受体分子中有一个两性表面,这个表面位于L1结构域,并且面向三个结构域围成的空洞,这个表面可能就是受体识别胰岛素和与底物发生初始作用的部位。“foot-print”和两性表面的大部分残基是相同的。     

c—Fms的分子结构与细胞内信号传导

ｃ－Ｆｍｓ是原癌基因ｆｍｓ的产物,是酪氨酸激酶受体家族成员之一,与单细胞／巨噬细胞的增殖,分化及其活性相关。ｃ－Ｆｍｓ胞外区含有５个Ｉｇ样结构域,胞内区具有酪氨酸激酶活性,是具有单一高亲和力受体分子。Ｍ－ＣＳＦ与ｃ－Ｆｍｇ Ｉｇ样结构域的Ｄ１,Ｄ２和Ｄ３结合,引起Ｄ４构象变化,受体二聚化而导致胞内区酪氨酸激酶的变化。     

黄病毒非结构蛋白NS3的蛋白酶特性研究进展

黄病毒科成员多,且其基因组结构同源性高,弄清其结构与功能的关系可大大缩短疫苗研制和使用的进程。黄病毒ＮＳ３蛋白为分子量仅次于ＮＳ５的非结构蛋白,且具高度保守性。实验表明,ＮＳ３蛋白具蛋白酶活性。本文就ＮＳ３蛋白的酶活性中心、辅酸成分、底物结合部位及酶特异作用序列等加以阐明。     

［B1－Ala，B2－Ala］－胰岛素：受体结合特性及生物活力研究

本文报道了［Ｂ１～Ａｌａ,Ｂ２－Ａｌａ］－胰岛素与人胎盘细胞膜胰岛素受体结合的特性和体外生物活力,并与胰岛素进行比较。在３７℃和杆菌肽存在下,１２５Ｉ－［Ｂ１－Ａｌａ,Ｂ２－Ａｌａ］－胰岛素和１２５Ｉ－胰岛素与人胎盘细胞膜作用依赖于反应时间,反应６分钟到达平衡,此时,［Ｂ１－Ａｌａ,Ｂ２－Ａｌａ］－胰岛素和胰岛素与胰岛素受体的最大结合分别为每毫克膜蛋白结合６．４４ｆｍｏｌ和３．４７ｆｍｏｌ：达到平衡一半所需时间（Ｔ１／２）分别为１９秒和２５秒。用１２５Ｉ－［Ｂ１－Ａｌａ,Ｂ２－Ａｌａ］－胰岛素作为放射配体进行竞争性结合研究,从ＩＣ（５０）得［Ｂ１－Ａｌａ,Ｂ２－Ａｌａ］胰岛素的受体结合活力为胰岛素的１３９．６％。Ｓｃａｔｏｈａｒｄ分析求得;［Ｂ１－Ａｌａ,Ｂ２－Ａｌａ］－胰岛素与高亲和和低亲和结合位点的结合常数在４℃时分别为５．８８×１０８Ｌ／ｍｏｌ和７．６３×１０５Ｌ／ｍｏｌ,而胰岛素分别为４．８３×１０８Ｌ／ｍｏｌ和３．３９×１０５Ｌ／ｍｏｌ。促脂肪细胞生成脂的实验表明：［Ｂ１－Ａｌａ,Ｂ２－Ａｌａ］－胰岛素的活力为胰岛素的１３０％。     

碱提水溶小皮伞多糖B3的研究

用ＧＣ,ＩＲ,ＮＭＲ,ＧＣ－ＭＳ及高碘酸氧化,Ｓｍｉｔｈ降解,甲基化分析,部分酸水解等方法确定了一个新的碱提水溶小皮伞多糖的一级结构,分子主链α－Ｄ－（１→４）。α－（ａ→６）Ｇｌｅ,且均连在主链的０－６上。     

用酵母双杂交系统研究Smad3和Smad4的相互作用

Ｓｍ ａｄ３ 和 Ｓｍ ａｄ４ 是将 Ｔ Ｇ Ｆ β的信号从细胞外传递到细胞核内的重要的信号传导蛋白． Ｔ Ｇ Ｆ β与其受体结合后,激活受体的磷酸激酶,使 Ｓｍ ａｄ３ 发生磷酸化,活化的 Ｓｍ ａｄ３ 与 Ｓｍ ａｄ４ 结合,形成异源复合物,进入到核中．然后 Ｓｍ ａｄ４ 以 Ｄ Ｎ Ａ 结合蛋白的形式与特定的 Ｄ Ｎ Ａ 结合,将 Ｔ Ｇ Ｆ β的信号传到核内．激活转录,诱导背中胚层的形成,抑制细胞的分化等．经研究利用酵母双杂交试验,鉴定了 Ｓｍ ａｄ３ 和 Ｓｍ ａｄ４ 相互作用的功能区域．构建 Ｓｍ ａｄ３ 和 Ｓｍ ａｄ４ 的 Ｃ 端、 Ｎ 端和中间连接区的突变体,将这些突变体克隆到 ｐ Ｇ Ａ Ｄ４２４ 和 ｐ Ｇ Ｂ Ｔ９ 载体中,并转化到 Ｈ Ｆ７ Ｃ 酵母中．通过 Ｌｅｕ－ ／ Ｔｒｐ－ ／ Ｈｉｓ－ Ｓ Ｄ 平板上菌落的形成,和 Ｘ－ ｇａｌ显色反应鉴定转化到酵母中的两个克隆质粒的相互作用．结果显示 Ｓｍ ａｄ４ 与 Ｓｍ ａｄ３ 异源相五作用时,主要是通过 Ｓｍ ａｄ４ 的中间连接区．在同源作用时, Ｓｍ ａｄ３ 是通过 Ｃ 端,而 Ｓｍ ａｄ４ 是通过中间连接区进行的．     

Smads分子及其介导的TGF—β超家族信号转导

ＴＧＦ－β超家族成员的重要生物学功能正日益引起人们的重视,该家族受体也在不断被克隆鉴定。配体通过受体的胞内信号转导研究近年有较大进展,特别是Ｍａｄ及相关蛋白Ｓｍａｄｓ的发现,为阐明ＴＧＦ－β超家族作用机理提供了一条重要线索：Ｓｍａｄｓ蛋白位于细胞浆,被受体激酶直接磷酸化后形成异源聚合体,转移至核内,激活靶基因转录。     

CCR5的结构和功能：近两年的研究进展

ＣＣＲ５是趋化蛋白ＭＩＰ－１α,ＭＩＰ－１β、ＲＡＮＴＥＳ的特异性受体,主要表达于单核／巨细胞及Ｔ细胞膜上,具有Ｇ蛋白受体所特有的７个胯膜区。ＣＣＲ５与白细胞的趋经性,炎症反应,嗜Ｍφ型ＨＩＶ－１株对ＣＤ４细胞的感染密度相关。ＣＣＲ５的缺陷与个体对ＨＩＶ－１的抗性有关。本文就近两年在ＣＣＲ５结构特点,转录调控,信号传递,生物学功能等方面的研究进展作一综述。     

血浆激肽释放酶新底物PK—120的研究

血浆激肽释放酶新底物ＰＫ┐１２０的研究蒲小平（军事医学科学院基础医学研究所,北京１００８５０）关键词血浆激肽释放酶底物１．发现补体系统由２０余种血浆蛋白组成,在机体防御和炎症应答反应中起重要作用。１９８９年Ｈａｍｍｅｒ等在用Ｃ４ｂ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ...     

番荔枝化学成分研究(7)

从番荔枝（Ａｎｎｏｎａ ｓｑｕａｍｏｓａ Ｌ．）种子中得到化合物１、２和４,化合物２和４分别为已知化合物ｍｏｔｒｉｌｉｎ（莫垂林,２）和ｂｕｌｌａｔａｎｏｃｉｎ（布拉他诺辛,４）。化合物１的化学结构经ＩＲ、ＭＳ、＾１Ｈ ＮＭＲ及＾１３Ｃ ＮＭＲ谱分析及其乙酰化物（１ａ）的ＭＳ、＾１Ｈ ＮＭＲ谱分析推定如（１）式并命名为２２－表－莫维查灵（２２－ｅｐｉ－ｍｏｌｖｉｚａｒｉｎ）。