载脂蛋白C3研究新进展

载脂蛋白C3(apolipoprotein C3,APOC3)是一种水溶性低分子蛋白质,主要分布在血浆高密度脂蛋白、极低密度脂蛋白、乳糜微粒和低密度脂蛋白中。新近研究表明,APOC3是一个多功能蛋白质,是脂质代谢的重要调控因子,与高甘油三酯血症和心血管疾病发病相关,是心血管疾病进展的重要预测因子。APOC3在动脉粥样硬化和糖尿病发展进程中起到重要的作用。因此,调控APOC3水平可能是控制患者脂质代谢异常和治疗心血管疾病的重要策略。     

HDL蛋白质组分临床研究新进展

高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平与冠心病风险呈负相关,低HDL-C水平增加心血管疾病风险,是心血管疾病的独立危险因素.然而升高HDL-C水平的药物治疗并没有明显的临床获益,没有起到降低心血管疾病风险的预期效果,因此高密度脂蛋白(HDL)功能比HDL-C水平更好地预测心血管事件的发生.HDL是蛋白质含量最高的脂蛋白,由于蛋白质组学技术的进步,越来越多的HDL蛋白质成分被发现,除了传统的载脂蛋白、酶类,还包括脂质转移蛋白、急性期反应蛋白、补体成分、蛋白酶抑制剂,HDL的功能也从脂质转运扩展到感染免疫、急性期反应、补体激活、离子结合等,不仅参与动脉粥样硬化的发生发展,在终末期肾病、糖尿病等高心血管风险疾病中也发挥重要作用.本文就HDL蛋白质成分、功能及在冠心病和高心血管风险疾病中的作用做一综述.     

载脂蛋白AI结构与功能研究进展

载脂蛋白AI（apoAI)是高密度脂蛋白（HDL）中主要的蛋白质,它是细胞胆固醇逆向转运（RCT）的特殊重要因素,ApoAI能与磷脂,多种血浆因子及细胞膜受体结合,可以激活卵磷脂胆固醇酰基转移酶（LCAT）,起着促进细胞内胆固醇的移出,酯化,转移,以及调节HDL代谢的作用。ApoAI在各种HDL亚类中其空间结构有较大差异。这与HDL成熟过程及运载胆固醇等生理功能密切相关。     

利用大肠杆菌高效表达人载脂蛋白AI及其性质分析

载脂蛋白AI(apolipoproteinAI,apoAI)是高密度脂蛋白HDL的主要组成成分 ,流行病学研究表明apoAI的含量决定血浆中HDL的高低 ,而HDL具有胆固醇逆向转运的功能 ,起到降低冠心病发生概率的作用。通过大肠杆菌表达系统来生产apoAI的蛋白原proapoAI,蛋白的表达形式为包涵体 ,通过疏水柱进行柱上复性。同时在proapoAI和apoAI之间设计一个酸水解位点 ,通过将蛋白原proapoAI进行酸水解来得到成熟蛋白apoAI。最终得到的成熟蛋白apoAI在结构分析和脂结合特性上都与天然的apoAI相似 ,从而为该蛋白的工业生产上提供了一个良好的基础。     

北京鸭血清HDL主要载脂蛋白的高效液相层析分离及其理化性质

用高效液相层析(HPLC)对北京鸭血清高密度脂蛋白(HDL)的所有载脂蛋白(apo)分离纯化,得五个主要apo峰,经SDS-PAGE鉴定,均为单一带;并做了IEF、糖基含量分析;对其中含量高的四个apo峰样进行了氨基酸组成测定和N-端部分氨基酸序列分析;从所做理化性质的研究,发现北京鸭血清HDL中的主要apo为:A-Ⅰ、C-Ⅲ_o、apoC-Ⅲ_s(s=1,2)、apoC's及可能的A-Ⅲ,几乎不含E和A-Ⅱ_o北京鸭HDL中apo的上述组成特点明显不同于易患动脉粥样硬化(As)的人及兔等动物,在一定程度上决定了北京鸭HDL的形成与代谢具有其特点,该特点与北京鸭不易形成As密切相关。     

重组人载脂蛋白AI米兰变体在大肠杆菌中的高效表达

通过大肠杆菌表达系统来生产重组人载脂蛋白AIM(proapolipoprote in AIM,proapoAIM)。整个proapo AIM基因被分成两个片断,通过RT-PCR的方法合成。在对该基因的上游部分进行改造后,插入到表达载体pBV220中进行表达。蛋白的表达量达到45%左右,蛋白的表达形式为包涵体。包涵体通过疏水柱进行柱上复性,复性后的蛋白具有良好的生物活性。     

重组人载脂蛋白AI米兰突变体在大肠杆菌中的可溶性表达

载脂蛋白AI米兰突变体(apoliproteinA-I-Milano ,AIM)是载脂蛋白AI的天然突变体,具有比载脂蛋白AI更强的抗动脉粥样硬化症的作用。将AIM基因N_末端的氨基酸密码子优化后,克隆至表达载体pET2 2b ,重组质粒转化BL2 1(DE3)宿主菌,用IPTG诱导表达。AIM以可溶形式表达,约占菌体总蛋白的38%。表达产物经ButylSepharose 4F .F疏水层析和QSepharoseH .P .阴离子交换层析后,再用Vivaspin2 0 (30 0 0 0MW)进行超滤,AIM单体的纯度达95 %以上。AIM单体与脂结合活性表明,AIM单体结合脂的速度比apoA_I慢,但结合脂的量比apoA_I高。这项研究为AIM的结构和功能,特别是临床应用研究奠定了基础。     

重组人载脂蛋白AI米兰突变体在大肠杆菌中的高表达

用RT-PCR法从人肝总RNA库中克隆出人载脂蛋白Al的cDNA序列,再通过重叠PCR将载脂蛋白AI的第179位精氨酸密码子突变成半胱氨酸密码子,即载胎蛋白AI米兰突变体基因。将此目的基因克隆至表达载体pQE30,重组质粒转化JMl09宿主菌,经表达试验筛选出高表达克隆;工程菌经诱导后表达出含6个氨基酸前肽的载脂蛋白AI米兰突变体。表达产物主要以可溶形式存在,但也有部分为包涵体。     

60例活动性肝硬变患者血清载脂蛋白AI与B的临床研究

目的：为了探讨活动性肝硬变患者的血清载脂蛋白AI（APOAI）、载脂蛋白B（APOB）与肝细胞损害的严重程度及其预后的关系。方法：采和速度比浊法检测60例活动性肝硬变患者的血清APOAI、APOB水平,并与其他肝脏生化试验进行比较。结果：活动肝硬变代偿性与失代偿性两组APOAI,APOB均有着显著性差异（P＜0．01,P＜0．05）。活动性肝硬变患者的APOAI与总胆红素（TB）、凝血酶原时间（PT）呈负相关性（P＜0．01,P＜0．01,与白蛋白（ALB）,胆碱酯酶（CHE）、纤维蛋白原（FIB）呈显著正相关性（P＜0．01,P＜0．01,P＜0．05）。APOX仅与FIB呈显著相关性（P＜0．05）,好转组与死亡组两组APOAI有显著性差异（P＜0．05）,APOB无显著性差异,结论：检测活动性肝硬变患者血清APOAI,APOB水平有助于判断肝硬变的严重程度,且APOAI比APOB更敏感、可靠。     

地塞米松对HepG2细胞分泌载脂蛋白的影响

以培养的人肝癌细胞系HepG2为研究对象,采用“冻干浓缩培养液载脂蛋白测定法”,考察了地塞米松对HepG2细胞载脂蛋白(apolipoprotein,apo)AⅠ、AⅡ、CⅢ、B100及E分泌的影响.结果表明：地塞米松对HepG2细胞apoAⅠ和apoE的分泌有促进作用,对apoAⅡ、apoB100和apoCⅢ的分泌有抑制作用,且这种作用随地塞米松浓度的增加而增强.当培养液中地塞米松的浓度为5.5×10^－5mol/L时,apoAⅠ和apoE的分泌分别增加36.6%和49.4%（P＜0.01）,apoAⅡ、apoB100和apoCⅢ的分泌分别减少38.9%、31.9%和29.8%（P＜0.01）.     

综述: HDL蛋白质组分临床研究新进展

高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平与冠心病风险呈负相关,低HDL-C水平增加心血管疾病风险,是心血管疾病的独立危险因素．然而升高HDL-C水平的药物治疗并没有明显的临床获益,没有起到降低心血管疾病风险的预期效果,因此高密度脂蛋白(HDL)功能比HDL-C水平更好地预测心血管事件的发生．HDL是蛋白质含量最高的脂蛋白,由于蛋白质组学技术的进步,越来越多的HDL蛋白质成分被发现,除了传统的载脂蛋白、酶类,还包括脂质转移蛋白、急性期反应蛋白、补体成分、蛋白酶抑制剂,HDL的功能也从脂质转运扩展到感染免疫、急性期反应、补体激活、离子结合等,不仅参与动脉粥样硬化的发生发展,在终末期肾病、糖尿病等高心血管风险疾病中也发挥重要作用．本文就HDL蛋白质成分、功能及在冠心病和高心血管风险疾病中的作用做一综述．     

人血浆HDL对动脉粥样硬化家兔肝细胞膜 LDL受体活性影响的研究

高胆固醇饲料喂养造成的动脉粥样硬化（Ａｓ） 模型家兔通过静脉注射人血浆ＨＤＬ 制剂, 观察ＨＤＬ 对Ａｓ家兔肝细胞膜ＬＤＬ受体活性的影响． 结果发现, 摄取高胆固醇饲料的Ａｓ 家兔, 其肝细胞膜ＬＤＬ 受体 Ｋｄ 值虽无明显变化但Ｂｍａｘ 值显著减小（ Ｐ＜ ０－０１ , 与正常对照组比较） ; 注射ＨＤＬ 制剂后, Ａｓ 家兔肝细胞膜ＬＤＬ受体Ｋｄ 值仍无明显改变, 但Ｂｍａｘ 值却显著回升（ Ｐ＜ ０－０１ , 与高脂组比较） ． 表明人血浆ＨＤＬ 具有增加Ａｓ 家兔肝细胞膜ＬＤＬ 受体活性的作用．     

人血浆HDL对动脉粥样硬化家兔肝细胞膜LDL受体活性影响的研究

高胆固醇饲料喂养造成的动脉粥样硬化(As)模型家兔通过静脉注射人血浆HDL制剂,观察HDL对As家兔肝细胞膜LDL受体活性的影响.结果发现,摄取高胆固醇饲料的As家兔,其肝细胞膜LDL受体K_d值虽无明显变化但B_max值显著减小（P＜0.01,与正常对照组比较);注射HDL制剂后,As家兔肝细胞膜LDL受体K_d值仍无明显改变,但B_max值却显著回升（P＜0.01,与高脂组比较).表明人血浆HDL具有增加As家兔肝细胞膜LDL受体活性的作用.     

高密度脂蛋白对部分微生物感染影响的研究新进展

高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)是主要的血脂成分之一,具有抗动脉粥样硬化、抗炎症反应等多种功能。近年来,HDL对微生物感染的影响得到广泛关注和研究。研究发现,微生物感染能够导致炎症反应,引起甘油三脂、极低密度脂蛋白、低密度脂蛋白升高,高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)降低。细菌感染时,HDL与HDL相关脂蛋白结合并中和革兰氏阴性菌的脂多糖和革兰氏阳性菌的磷壁酸,抑制炎症反应发生。寄生虫感染过程中,apo L-1通过溶酶体溶胀作用杀死寄生虫。本文主要综述HDL对微生物感染的影响,以期为抑制微生物感染引起的炎症反应提供新思路,为治疗败血症、微生物感染引起的疾病提供新方法。