一种紫菜多糖的制备及对淋巴细胞生长的影响

用DEAE－纤维素和SephadexG-200柱层析法分离纯化条斑紫菜的热水提取物,从中得到多糖PY2,并测出其分子量为2．0％10^4。用紫外和红外光谱对PY2的性质进行了鉴定。进一步测定了PY2对体外培养的小鼠骨髓细胞及淋巴细胞生长的影响。结果表明,PY2是一种少见的紫菜多糖,它不含有大多数紫菜侈糖具有的3,6－内醚－兰乳糖和硫酸基,它对小鼠脾脏淋巴细胞、胸腺淋巴细胞以及混合淋巴细胞的增殖有一定的抑制作用,而对骨髓细胞的增殖没有明显的影响。     

环境因子及藻体密度对条斑紫菜生长与氮磷去除效率的影响

以条斑紫菜为材料,系统探究实验室条件下光照强度、温度、光周期、盐度和干出等生态因子和藻体密度对条斑紫菜生长和氮磷去除的影响,为今后条斑紫菜大规模栽培的生态修复潜力研究及海洋富营养化治理奠定理论基础。实验室条件下不同藻体密度、光照强度、光周期、温度、盐度和干出时间对条斑紫菜生长及氮磷去除效率的影响。结果表明:条斑紫菜在藻体密度0.1 g/L、光照强度为120μmol m-2s-1时特定生长率最大,为38.1%。随着藻体密度增加,光照强度减小,其特定生长率逐渐减小,当藻体密度为1.6 g/L、光照强度为30μmol m-2s-1时,特定生长率最小为12.6%;藻体密度0.1—0.8 g/L时随着藻体密度的增加条斑紫菜对NO-3-N和PO3-4-P的去除效率显著增加,藻体密度为0.8—1.6 g/L时藻体对NO-3-N和PO3-4-P去除效率差异不大,其中藻体密度1.6 g/L、光照强度90μmol m-2s-1时条斑紫菜对NO-3-N和PO3-4-P去除效率均达到93%以上。为进一步探究其他环境因子的影响,因此在温度和光周期实验中选择氮磷去除率适中的藻体密度0.4 g/L和最适光照强度90μmol m-2s-1。温度为15℃、光周期为16L∶8D条件下条斑紫菜特定生长率最大,为36.9%,且氮和磷去除效率也最大,分别为91.9%和81.6%。条斑紫菜生长适宜盐度为10—35,最佳盐度为25,干出时间越长生长越慢,氮磷去效率也越低,且有较大交互作用,但干出后的紫菜光合作用更强。以上研究将为应用大型海藻条斑紫菜大规模栽培进行生态修复奠定基础。     

条斑紫菜多糖PY-D2对4种人肿瘤细胞株生长的影响

目的:研究条斑紫菜多糖体外抗肿瘤的生物学活性。方法:应用生化技术分离和纯化条斑紫菜多糖,获得条斑紫菜多糖的2个组分,分别为PY-D1和PY-D2;在体外培养条件下分别用不同浓度的条斑紫菜多糖PY-D2处理4种人肿瘤细胞,通过MTT法观察条斑紫菜多糖PY-D2对4种人肿瘤细胞生长的影响;采用流式细胞仪检测肿瘤细胞的细胞周期变化。结果:条斑紫菜多糖PY-D2诱导HO-8910、MCF-7、K562和7721肿瘤细胞72h后,对其生长有明显的抑制作用,呈剂量依赖效应,500mg/LPY-D2的抑制率分别为21.2%、23.6%、19.8%和21%(P<0.001)。流式细胞仪检测表明PY-D2可以阻滞肿瘤细胞的细胞周期于G0/G1期或G2/M期。结论:条斑紫菜多糖PY-D2具有抑制肿瘤细胞HO-8910、MCF-7、K562和7721生长的作用,其有关的分子生物学作用机理值得进一步研究。     

条斑紫菜抗高温和快速生长细胞株系HB的建立及栽培

本文主要应用单细胞培养技术培育紫菜新品系,以建立紫菜细胞工程快速育苗系统。通过酶解技术分离出紫菜叶状体细胞,并进行多克隆,从中获得4个细胞纯系植株(HA,HB,HC,HD)。对该4个细胞株系进行了纯系培养,并对其细胞苗和丝状体的生长速度和抗高温(19℃,21℃,23℃,25℃)性进行了测定。结果显示,HB株系具有较高的抗高温性和最快生长速度。在1998年到2000年间,在江苏省启东县海丰海区对HB株系进行了海上栽培实验,结果显示,实验组的产量高于当地对照组产量,证明了条斑紫菜HB株系不仅具有较高的抗高温性,而且也有较快生长速度。本实验说明应用细胞工程进行条斑紫菜育种是一条很好的快速育种途径。     

某些外界因子对真姬菇菌丝体生长的影响

本文报道了不周培养基、温度、pH值和碳,氮源对真姬菇菌丝体生长影响的研究。结果表明:真姬菇能在多种培养基上生长,其中在麦芽膏蛋白胨培养基上生长最好,在PDA综合培养基上生长较差:菌丝体生长最适温度为20—25℃,10℃或30℃生长缓慢,35℃不生长;pH5—8均能生长,其中pH6.5—7.0最适宜;对不同碳、氮源的同化吸收各异,其中碳源以麦芽糖、氮源以蛋白胨最佳。     

NaCl溶液对贵阳腐霉菌丝生长、孢子囊产生及灭蚊能力的影响

研究不同浓度NaCl溶液对贵阳腐霉菌丝生长、产孢能力及灭蚊能力的影响,探讨贵阳腐霉对NaCl溶液的耐受性,为其在含盐水体中控制蚊虫种群的应用提供理论依据。结果表明：低浓度NaCl溶液可以促进贵阳腐霉菌丝生长及孢子囊形成,高浓度NaCl溶液则抑制菌丝生长及孢子囊形成。于0.01%浓度NaCl溶液中培养24h菌丝生长速度最快,产孢子囊数量最多,与对照相比差异显著。随着NaCl浓度升高,菌丝及孢子囊形成均受影响。菌丝生长速度降低,孢子囊形成数量减少。在0.75% NaCl溶液中贵阳腐霉的菌丝生长严重受抑制,且产孢子囊能力为零。灭蚊实验表明,0.01% NaCl溶液中贵阳腐霉的灭蚊能力在72–96h时均比蒸馏水对照组强,但二者未有显著差异,120h蒸馏水对照组灭蚊能力均明显高于各浓度NaCl溶液处理组;蚊虫总感染率蒸馏水对照组均显著高于NaCl溶液处理组。     

条斑紫菜粗多糖对淋巴细胞和支持细胞的增殖作用

目的:探讨条斑紫菜粗多糖的一些生物学功能,包括促进淋巴细胞增殖以及促进支持细胞生长的功能。方法:将原代培养的大鼠和小鼠脾淋巴细胞以及大鼠睾丸支持细胞分别接种于96孔板中,将不同浓度的条斑紫菜粗多糖(0.05、0.5、5、10mg/mL)加入培养,每种浓度设6个复孔,并设对照组孔。采用四氮甲唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖率。结果:条斑紫菜粗多糖能够显著地促进大鼠、小鼠脾淋巴细胞和大鼠睾丸支持细胞的增殖,增殖率随多糖浓度的提高而升高;当多糖浓度为10mg/mL时,增殖率分别为137.3%、149%和454.5%。结论:条斑紫菜粗多糖具有提高免疫力及促进生殖功能的作用,其对睾丸支持细胞的增殖作用目前还未见报道。     

外界支持物直径对苦瓜生长和觅食行为的影响

采用实验生态学的方法研究了外界支持直径变化对苦瓜植株生长和觅食行为的影响。结果表明,支持物直径变化对主茎节间、叶片、叶柄和卷须的发育进程无明显影响。苦瓜植株的攀援生长显著受到支持物直径大小的影响,当支持物直径小于8mm时,植株能较好地自主攀援生长。生长于直径支持物上的植株比生长于小直径支持物上的植株表现出较高的分枝率、较短的主茎、较长的分枝、较大的比茎长和比叶柄长。相关分析表明,节间长度和叶柄长度同植株自主攀援程度成显著正相关关系,而单叶面积、分枝数量和比叶柄长同植株自主攀援程度成显著负相关关系。作为攀援植物的一种重要资源,外界支持物的特征和存在状况将对植物的生长和行为产生重要影响。     

不同温度与CO2浓度对坛紫菜生长和光合作用温度反应特性的影响

论文研究了不同CO₂浓度(390 μL/L和700 μL/L)和温度(15℃和25℃)对坛紫菜(Porphyra haitanensis)生长与光合作用-温度反应特性的影响。结果表明,相对于25℃生长的海藻,15℃生长的海藻具较高的相对生长速率和色素含量(叶绿素和类胡萝卜素),并且在高CO₂下增加趋势更显著。在两种CO₂浓度下,15℃生长的坛紫菜可溶性蛋白质和可溶性碳水化合物含量高于25℃生长的坛紫菜。低温10℃胁迫下,15℃生长的坛紫菜最大光量子产量(Fv/Fm)、光能利用效率(α)及非光化学淬灭(NPQ)相对于25℃生长的坛紫菜更稳定;高温35℃使得坛紫菜rETRmax、Fv/Fm、α值均下降,这种下降的程度在15℃生长藻中比25℃生长的藻更大;此外,15℃生长条件下,高CO₂生长的坛紫菜受35℃高温胁迫时的Fv/Fm和α下降程度小于正常空气生长下的坛紫菜。高温40℃使坛紫菜 rETRmax、Fv/Fm、α、NPQ及qP均急剧下降。结果表明高CO₂使得坛紫菜耐高温性能提高。     

不同温度下CO2浓度增高对坛紫菜生长和叶绿素荧光特性的影响

大气CO2浓度升高对海藻的影响已有许多的研究报道,但鲜见有关温度与CO2相互作用的研究.在4种条件下对坛紫菜进行连续通气培养:(1)15℃+ 390tmol/mol CO2,(2) 15℃+700 μmol/mol CO2,(3) 25℃+390 μmol/mol CO2,(4) 25℃+ 700 μmol/mol CO2.从而探讨这种南方海域重要栽培海藻种类的生长和叶绿素荧光特性对温度和CO2相互作用的响应.结果表明:CO2对坛紫菜的生长的影响具有温度依赖性,在低温生长条件下提高CO2浓度更有利于坛紫菜的生长.CO2对坛紫菜叶绿素a(Chlorophyll a,Chl a)和类胡萝卜素(Carotenoid,Car)的促进作用远大于温度对其产生的影响.相对于25℃的生长温度而言,15℃生长温度下的坛紫菜表现出较高的最大相对电子传递速率(rETRmax),表明坛紫菜在低温环境下有较高的光合潜力;而CO2对坛紫菜的rETRmax没有明显影响.对于在不同测定温度下的光合荧光特性而言,在10-30℃测定温度范围内,在各生长条件下的海藻的rETRmax、光能利用效率(α)和最大光化学量子产量(Fv/Fm)随温度的升高变化不明显;但在较高测定温度下(≥30℃),上述荧光参数显著下降,说明高温易引发海藻光能利用效率和光合能力的下降,这可能与光系统(PS)Ⅱ反应中心活性下调有关.同时,当测定温度大于30℃时,15℃生长条件下的坛紫菜的rETRmax、α和F/Fm值下降趋势远大于25℃生长条件下的坛紫菜的值,表明在低温生长条件下的坛紫菜对短期高温胁迫的适应能力较弱;而在高CO2浓度生长条件下的坛紫菜的rETRmax总是低于正常CO2浓度生长下的值,说明CO2浓度升高会抑制坛紫菜在短期高温条件下的光合电子传递能力.     

Effect of DMSO on PCR of Porphyra yezoensis (Rhodophyta) gene

In order to improve the predictability ofresults of PCR with Porphyra yezoensisUeda genes, a study was made of possiblemodifications to the basic PCR protocol. DMSO used as an adjuvant considerablyincreased amplification efficiency andspecificity of PCR, the optimalconcentration being 5%. This protocolallowed for DNA templates with a high GCcontent to be amplified by PCR withoutproblem.     

条斑紫菜R-藻红蛋白提纯工艺研究

对条斑紫菜叶状体R-藻红蛋白提纯方法进行了研究和分析。首先分别采用冻融法、化学试剂法、溶胀法等单一及组合细胞破碎方法对条斑紫菜细胞进行破碎,结果表明溶胀 组织捣碎法效果最佳。其次用25%～60%饱和度范围内的硫酸铵沉淀法粗提藻红蛋白,发现25%～45%硫酸铵分步沉淀法效果最好,再经结晶法盐析纯度(D565nm/D280nm)达到2.088。盐析液用SephadexG-25层析柱脱盐,再经羟基磷灰石(HA)柱层析,纯度可达到4.98。R-藻红蛋白的最大吸收峰在565nm,其室温荧光发射峰为578nm。SDS-PAGE结果显示,R-藻红蛋白可分为α、β两个亚基,Mr分别为17.0×103和19.0×103。     

条斑紫菜多糖抗疲劳生物活性研究

主要应用活体动物实验技术,研究了纯化产物紫菜多糖的抗疲劳作用及量效关系。通过紫菜多糖PY-G1不同剂量对小鼠游泳时间、乳酸脱氢酶活性、肌糖原和肝糖原含量等指标的检测,分析了紫菜多糖提高小鼠抗疲劳生物活性功能及其量效关系。实验结果表明,紫菜多糖可显著延长小鼠游泳时间,最高可以提高37%;并且可以使小鼠在游泳前后乳酸脱氢酶含量分别增加35%和37.5%(P<0.05);增加小鼠肌糖原储备量和肝糖原储备量,其肌糖原储备量和肝糖原储备量最高可以分别增加85.6%和86%。实验结果表明,条斑紫菜多糖具有明显提高小鼠抗疲劳生物学活性。     

Analysis of expressed sequence tags of Porphyra yezoensis

Single direct partial sequencing of anonymous cDNA clones was performed to obtain genetic information on red algae Porphyra yezoensis of which genetic information is not available. This expressed sequence tags (EST) analysis revealed 81 clones (42%) had significant homologies to known genes in GenBank. Of these clones, eight are related to known algal genes, whereas above 90% of the EST clones were newly identified in algae. Putative functional categories of these clones showed that the most abundant genes were involved in stress and defense mechanisms and that the next abundant genes were associated with protein synthetic pathways.     

条斑紫菜(Porphyra yezoensis)游离氨基酸组成分析

采用邻苯二甲醛/9-氯甲酸芴甲酯(OPA/FMOC)柱前衍生反相高效液相色谱法(RP-HPLC),对江苏南通海区栽培的12个条斑紫菜(Porphyra yezoensis)样品游离氨基酸组成进行分析.结果显示:供试样品游离氨基酸总量在19.82～38.91 mg·g-1之间,共检出16种游离氨基酸,其中Ala、Arg、...     

Isolation and Characterization of Photosystem Ⅱ of Porphyra yezoensis Ueda

The thylakoid membranes were isolated and purified from gametophyte of Porphyra yezoensis Ueda (P. yezoensis) by sucrose density gradient ultracentrifugation. After P. yezoensis gametophyte thylakoid membranes were solubilized with SDS, the photosystem Ⅱ (PSⅡ) particles were isolated and purified. The activity of PSⅡ