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dsRNA介导的RNA干扰 总被引:5,自引:0,他引:5
在多种生物中 ,外源或内源性的双链RNA(double strandedRNA ,dsRNA)导入细胞中 ,与dsRNA同源的mRNA则受到降解 ,因而其相应的基因受到抑制。这种转录后基因沉默 (post transcriptionalgenesilencing ,PTGS)机制首先在线虫 (C .elegans)中得以证实。由于这是一种在RNA水平的基因表达抑制 ,故也称为RNA干扰 (RNAinterfer ence) ,简称RNAi[1] 。随后发现 ,在各种生物 ,如果蝇[2 ] 、拟南芥菜[3 ] 、及小鼠[4] 等均存在dsRNA介导… 相似文献
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SAR与植物转基因沉默的消除 总被引:12,自引:0,他引:12
随着转基因技术在各上应用领域的深入和发展,转基因沉默现象已引起越来越多的关注。转基因沉默主要发生在转录或转录后水平,涉及核酸的三种相互作用,即:DNA-DNA、DNA-RNA、RNA-RNA。这是植物基因表达调控的具体表现之一,也是外源基因插入后生物体的一种自我保护。SAR协同转基因进行转化,可以消弱宿主DNA对外源基因的不利影响。实验证明,在稳定整合的转基因植物中,SAR提高了整体表达水平,并降 相似文献
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DNA模板序列的转录调控是基因表达多级调节过程的关键 ,细胞周期中基因转录水平的改变应激细胞发育、分化及正常生理功能的多种信号转导。疾病或其它因素也应激转录水平变化 ,从而改变各种mRNAs的稳定性。因此基因的mR NA水平分析 ,在基因调控研究领域是必不可少的。mRNA的常规分析方法是Northernblots、RNAdot/slotblot、核酸酶保护法(nucleaseprotection)和原位杂交 (insituhybridization)。而PCR技术的应用开创了mRNA分析新方法[1 -3] :RN… 相似文献
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植物转基因沉默研究进展、对策及应用 总被引:2,自引:0,他引:2
转基因沉默 (transgenesilencing)是导入并整合进受体基因组中的外源基因在当代转化体或其后代中表达受到抑制的现象。自Peerbolte在 1986年首次报道发现转基因沉默现象以来 ,相关报道不断发表。如今 ,转基因沉默现象已成为遗传转化技术实用化 ,商品化过程中的巨大障碍。从九十年代开始 ,人们就致力于转基因沉默方面的研究。随着研究的不断深入 ,转基因沉默的各种机理不断被揭示 ,并研究出相应的对策。1.植物转基因沉默研究进展转基因沉默的各种机理都涉及到各种核酸之间的相互作用 ,包括转录水平的基因沉默 (t… 相似文献
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随着转基因技术在各个应用领域的深入和发展,转基因沉默现象已引起越来越多的人关注。转基因沉默主要发生在转录或转录后水平,涉及核酸的三种相互作用,即:DNA-DNA、DNA-RNA、RNA-RNA。这是植物基因表达调控的具体表现之一,也是外源基因插入后生物体的一种自我保护。SAR协同转基因进行转化,可以消弱宿主DNA对外源基因的不利影响。实验证明,在稳定整合的转基因植物中,SAR提高了整体表达水平,并降低了不同转化体之间的差异。这是消除植物转基因沉默的一条有效途径。 相似文献
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登革病毒感染性转录体技术 总被引:2,自引:0,他引:2
登革病毒 (Denguevirus)属黄病毒科黄病毒属 ,基因组结构为单股正链RNA ,全长约 1 0~ 1 1kb。登革病毒在复制过程中不形成DNA中间体 ,因此要在基因水平研究其特征存在一定困难 ,因为突变、重组、克隆等分子生物学技术都是在DNA水平上的操作。体外转录制备感染性RNA(感染性转录体 )技术提供了解决这一难题的新途径[1]。该技术是把病毒RNA逆转录成cDNA ,并置于RNA聚合酶启动子的下游 ,在RNA聚合酶的作用下体外转录出全长正链RNA ,经转染易感细胞后复制出子代病毒颗粒。由于这种子代病毒来自cDN… 相似文献
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在mRNA的剪接 (splicing)过程中 ,前体RNA分子的内含子被切除 ,继以外显子相连成具有翻译功能的mRNA。剪接反应系由剪接体 (spliceosome)完成 ,它是一个含有 5种细胞核内小分子RNA(snRNA)与逾 50种蛋白质的大复合物。最近Nilsen报道 ,有新的实验证据表明 ,前体RNA的剪接由剪接体的一种RNA组分所催化 ,该组分可同一关键性金属离子结合。及后 ,Yean等也指出 ,剪接体含有的U6snRNA能特异地同二价金属离子结合 ,参与剪接第一步的催化 ,提示剪接体属于金属依赖性酶类。剪接包括两个… 相似文献
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人们长期认为核糖核酸 (RNA)在细胞中只传递信息和氨基酸 ,但最近因它的多功能而令人瞩目。自 1995年表明小分子RNA能够关闭一种线虫中的基因 ,与植物中已知的“基因沉默”(genesilence)相似 ,分子生物学家即认识到基因功能研究将因“RNA干扰”(RNAinterference ,RNAi)而得益 ,对RNA的兴趣飙升。 2 0 0 1年他们发现RNAi也能在鼠和人的细胞中阻遏基因的活性。小分子RNA起着重要的生物作用 ,从DNA序列分析已知线虫和果蝇中有几十个 ,大肠杆菌有数百个 ,鼠脑组织更多。在线虫和果蝇中 ,这… 相似文献