C57BL/6小鼠听皮层脑片的长时程增强特性

采用脑片细胞外记录群体细胞兴奋性突触后电位方法,在成年C57BL／6小鼠听皮层上,研究长时程增强(10ng-termpotentiation,LTP)特征。用100Hz高频电脉冲刺激听皮层白质,可在听皮层灰质Ⅱ/Ⅲ层记录到明显的LTP。根据条件刺激后LTP的变化特征,将其分为缓慢上升(A类)和短暂快速上升(B类)两种类型。使用模拟的θ节律刺激参数,可更有效地诱导听皮层LTP,其群体细胞兴奋性突触后电位斜率增加更为明显(P＜0．01),诱导成功率也更高。     

C57BL/6小鼠脑脊液抽取——毛细玻璃虹吸管真空吸引技术

本研究旨在建立一种适合C57BL/6小鼠脑脊液(cerebrospinal fluid, CSF)抽取的方法。用膜片钳电极拉取仪拉制毛细玻璃虹吸管,用脑立体定位仪将小鼠头部固定,使之与身体之间角度为135°。在立体显微镜下分离小鼠颅脑背部皮肤和肌肉组织,暴露出小脑延髓池处硬脑膜,用毛细玻璃虹吸管(与硬脑膜平面之间角度为20°～30°)在Y形脊椎背侧动脉内侧1 mm处穿刺,进行CSF采样。第一次抽取后将毛细玻璃虹吸管与1 mL无菌注射器相连,构成负压装置,进行第二次抽取。结果显示,CSF抽取成功率为83.33%(30/36),CSF平均抽取量为(7.16±0.43)μL/只。另外,经鼻给予C57BL/6小鼠枸橼酸铁胺(ferric ammonium citrate, FAC)建立脑内高铁模型,采用本研究建立的CSF抽取技术进行采样。结果显示,生理盐水对照组CSF铁含量没有检出,FAC处理组CSF铁含量为(76.24±38.53)μmol/L,组间差异具有显著性。以上结果提示,本研究建立的小鼠CSF毛细玻璃虹吸管负压吸引技术具有简单易行、成功率高、抽取量多、出血率低的优点,适合在C57BL...     

寒冷对雌性C57BL/6小鼠动情周期的影响*

目的:研究寒冷对雌性C57BL/6小鼠动情周期的影响。方法:12只雌性小鼠随机分为对照组、低温组,每组6只;低温组每天4℃暴露4 h,每天阴道涂片法观察小鼠动情状况,对照组饲养于常温动物房;每2 d称量体重,2周后心脏取血、子宫和卵巢,检测小鼠血清E2、FSH、LH、Prl、P水平,进行子宫、卵巢的组织病理学检查。结果:与对照组比较,低温组小鼠体重无显著性差异(P＞0.05),小鼠子宫脏器系数明显较低、动情间期明显延长(P＜0.01),血清FSH显著升高、Prl显著降低(P＜0.01),小鼠子宫腺管扩张,卵巢卵泡数量明显减少。结论:寒冷可使雌性C57BL/6小鼠动情周期延长,进而可能影响生殖功能。     

MTHF对C57BL/6鼠Lewis肺癌细胞生长的影响

通过观察MTHF纯体对C57BL/6鼠移植瘤细胞生长的影响,初步探讨MTHF抗肿瘤作用的机理。将42只接种Lewis肺癌LL2细胞的C57BL/6鼠随机分成对照组、MTHF组和顺铂组。分别处理后观察各组肿瘤生长情况,于接种22 d后处死荷瘤鼠,收集肿瘤标本后测量瘤体质量,并进行电镜以及组织学分析,通过免疫组化检测肿瘤组织PCNA、Bcl-2及Bax的表达。结果表明MTHF组、顺铂组抑瘤率分别为46.2%、54.5%。电镜显示MTHF组出现细胞凋亡。MTHF处理Lewis肺癌细胞后,PCNA和Bcl-2基因下调,Bax基因上调。MTHF可显著抑制C57BL/6鼠移植瘤肺癌细胞的生长,其机制可能与诱导Lewis肺癌细胞凋亡并抑制其增殖有关,是一种有前景的抗肿瘤药物。     

FMR1基因敲除对C57BL/6小鼠部分生物学特性的影响

为探讨脆性X智力障碍1(FMR1)基因敲除对C57BL/6小鼠(Mus musculus domesticus)部分生物学特性的影响,使用全自动动物血细胞分析仪和全自动生化仪分别检测8~10周龄的FMR1基因敲除小鼠(C57BL/6 FMR1 KO)及同源背景C57BL/6小鼠的血液生理生化指标、电解质等,并进行统计学分析。C57BL/6 FMR1 KO小鼠与野生型C57BL/6小鼠比较,血液生理指标中雌性及雄性组间的中性粒细胞计数(MEUT#)、中性粒细胞百分比(MEUT)和淋巴细胞百分比(LY)存在显著性差异(P0.05);雄性组间的红细胞总数(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)和平均血红蛋白浓度(MCHC)存在显著性差异(P0.05);雌性组间的白细胞(WBC)、淋巴细胞计数(LY#)存在显著性差异(P0.05);而非性别因素影响两类小鼠组间的红细胞总数(RBC)、红细胞压积(HCT)、中性粒细胞计数(MEUT#)、中性粒细胞百分比(MEUT)和淋巴细胞百分比(LY)存在显著性差异(P0.05);血清生化指标中雄性组间的谷草转氨酶/谷丙转氨酶(AS/AL)存在显著性差异(P0.05);雌性组间的肌酐CR、肌酸磷酸激酶CK和钙离子浓度Ca2+存在显著性差异(P0.05);而非性别因素影响两类小鼠组间的谷草转氨酶/谷丙转氨酶(AS/AL)、肌酐CR和肌酸磷酸激酶CK存在显著性差异(P0.05);其他各项指标差异不显著(P0.05)。研究表明,FMR1基因敲除可影响小鼠的部分生理生化指标水平,这为今后研究和应用C57BL/6 FMR1 KO小鼠模型提供了实验依据。     

C57BL/6小鼠性别差异对髓鞘少突胶质糖蛋白诱导的实验性自身脑脊髓炎疾病的影响

多发性硬化是人类常见的中枢神经系统自身免疫性炎症致脱髓鞘疾病．流行病学研究发现,女性患者多于男性,其平均发病时间早于男性．实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)与多发性硬化症有相似的临床症状和病理特征,是被广泛应用于人类疾病研究的动物模型．本实验利用髓鞘少突胶质糖蛋白MOG_33-35免疫C57BL/6小鼠建立EAE模型,观察29天．通过疾病评分发现雌雄小鼠在发病率、起病时间上均无明显差别,但雄鼠的发病症状明显比雌鼠严重．在其病理切片HE染色中观察到雄性小鼠中枢浸润的炎性细胞多于雌性小鼠,并且在LFB染色中同样观察到雄鼠脱髓鞘区域明显增大．对其发病高峰期中枢浸润细胞的染色分析时,可以发现雄性小鼠中浸润的CD4 T细胞及其亚群T_H-1和T_H-17细胞均有明显增加．这些都表明MOG_33-35免疫C57BL/6小鼠建立的EAE模型存在着性别差异的影响,这一发现为今后建立多发性硬化症的动物模型中动物性别的选择提供了一定的参考依据．     

CVB3诱导的急性心肌炎C57BL/6小鼠模型转录组分析

研究柯萨奇病毒B3(CVB3)感染小鼠所引起的心肌组织转录组变化规律.C57BL/6小鼠腹腔接种浓度为104TCID50的CVB3,建立C57BL/6急性病毒性心肌炎小鼠模型,逐日测量休重.接种第3、6、9、11和14d分别取心脏,计算心脏指数,并取部分心肌组织进行HE染色分析病理学改变;病毒接种后的第3、第6和第9d,取部分组织匀浆进行转录组测序,分析三个时间点的共同差异表达基因,对其进行GO和KEGG信号通路的富集,并对其中12个基因进行了 qRT-PCR的验证.在CVB3感染后,小鼠体重下降至对照组的80％,心脏指数在第3d明显升高,随后逐渐下降.通过转录组分析找到100个共同差异基因,从中选出的12个基因,经qRT-PCR验证与转录组表达趋势一致.GO和KEGG信号通路富集发现,CVB3感染后,小鼠心肌组织出现病毒性心肌炎、NK细胞通路,T、B细胞激活及先天性免疫反应通路的改变.差异基因的蛋白与蛋白互作网络分析显示,先天性免疫中MHC-Ⅰ型分子蛋白基因H2-Q7、H2-Kl、H2-D1等,NK细胞毒作用通路中的Gzmb、Gzma,以及蛋白酶体信号通路基因Psmb8、 Psmb9﹑Psmb10和lfit3位于相互作用中心.CVB3感染C57BL/6小鼠心肌组织的转录组变化涉及病毒性心肌炎、NK细胞和T、B细胞激活及先天性免疫反应等通路.CVB3感染引起的急性病毒性心肌炎是多通路和多基因综合作用的结果.     

H5N1禽流感病毒对C57BL／6小鼠的致病性研究

本试验利用虎源H5N1禽流感病毒对6～8周龄雌性C57BL/6小鼠进行滴鼻感染,观测小鼠临床症状和组织病理变化,于感染后第3d和第5d每组分别处死3只小鼠,测定肺、脑、脾、肾、肝组织中的病毒含量;并测定该病毒对C57BL/6小鼠的MLD50。结果表明感染小鼠出现精神不振、体重下降、支气管炎和间质性肺炎为主的临床症状和病理变化;测得感染后小鼠肺脏中病毒拷贝数和病毒滴度最高,其次是脑、肾、脾、肝等组织;该病毒对C57BL/6小鼠的MLD50为10-6.5/0.05mL。此研究成功进行了H5N1禽流感病毒对C57BL/6小鼠的感染,可以作为感染模型进行H5N1禽流感病毒的发病机制、疫苗评价、药物筛选等研究。     

三硝基苯磺酸诱导的C57/BL6小鼠结肠炎模型的建立方法

2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的小鼠结肠炎模型是研究人类炎性肠病(inflammatorybowl disease,IBD)的主要手段之一,但在实际应用中,常用的C57/BL品系小鼠却对TNBS有较高耐受性,不易建模.本文主要介绍一种可以有效诱导C57BL6小鼠TNBS结肠炎的方法,并对疾病评价指标进行了具体...     

C57BL／6J小鼠ES细胞系的建立及其特性分析

本文报道从C57BL/6J个鼠的囊胚中,建立了三个ES细胞系MESPU17,MESPU18,MESPU19。这些细胞的细胞学特征和强AKP反应,表明这三个细胞系具有干细胞的特征。这三个细胞系均为XY型,正常二倍体核型分别占70％、88％和59％。体外分化可形成简单类胚,体内分化可形成瘤块。与国际上通用的CCE和来自129/ter的ES细胞MESPU13相比,这三个细胞系的ES细胞较大;在体外培养时,生长较慢;细胞也较粘,进行显微注射时,很容易粘在注射针壁上。MESPU17,MESPU18进行了嵌合体制作,以BALB/c和昆明鼠的囊胚为受体,采用囊胚注射法未获嵌合体,但使用昆阴鼠的8细胞胚注射法和共培养法得到嵌合体。     

Utility of a C57BL/6 ES line versus 129 ES lines for Targeted Mutations in Mice

Inbred ES lines, though useful for generating targeted mutations in mice, are used infrequently. To appreciate the relative efficiency of inbred ES lines, a C57BL/6 ES line was compared with 129 strain ES lines for effectiveness in chimera formation leading to the establishment of targeted mutations in mice. Data from a transgenic facility spanning 7 years were collected. C57BL/6 ES cells injected into Balb/c embryos results in lower coat color chimerism than do 129 ES cells injected into C57BL/6 embryos. Combined data indicate that five independent targeted C57BL/6 clones should be injected as compared to three independent 129 clones to generate enough chimeras to effectively test for germ-line transmission. Thus, although less efficient than 129 ES lines, the C57BL/6 ES line is a relatively competent line and useful for the routine generation of targeted mutations in mice on a defined genetic background.     

小鼠动物实验方法系列专题(三) 三硝基苯磺酸诱导的C57/BL6小鼠结肠炎模型的建立方法

2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的小鼠结肠炎模型是研究人类炎性肠病(inflammatory bowl disease,IBD)的主要手段之一,但在实际应用中,常用的C57/BL品系小鼠却对TNBS有较高耐受性,不易建模。本文主要介绍一种可以有效诱导C57/BL6小鼠TNBS结肠炎的方法,并对疾病评价指标进行了具体的描述。对基因工程小鼠IBD模型的研究具有重要意义。     

链脲佐菌素诱导C57BL/6J小鼠2型糖尿病模型研究

目的建立与2型糖尿病(非胰岛素依赖型糠尿病、NIDDM)病人临床特征和发病过程相似的NIDDM动物模型.方法用高脂肪饲料喂养C57BL/6J雄性断乳小鼠3周,腹腔注射链脲佐菌素(STZ),继续喂养4周,测定给药前和给药后1、3、4周非空腹血糖、实验结束时非空腹胰岛素水平,观察胰腺形态学变化.结果喂养3周后(给药前)高脂饲料-STZ组及高脂饲料-柠檬酸组血糖浓度(7.0±0.39)mmol/L、( 6.8±0.45)mmol/L高于普通饲料-STZ组及普通饲料-柠檬酸组(5.3±0.40)mmol/L、(5. 4±0.39)mmol/L,P＜0.05;实验结束时,高脂饲料-STZ组血糖浓度(13 .1±2.01)mmo/L高于高脂饲料-柠檬酸(6.9±0.46)mmol/L、普通饲料-柠檬酸组(6.0± 0.46)mmol/L和普通饲料-STZ组(7.1±0.62)mmol/L(P＜0.05),各组间血浆胰岛素浓度、体重及饮水量差异无显著性,P＞0.05;实验过程中高脂饲料STZ组和柠檬酸组小鼠每天进食热量(64.49±9.2)kJ/只,(70.7±9.6)kJ/只, 显著高于普通饲料STZ组和柠檬酸组(52.7±7.9)kJ/只,(57.3±11.7)kJ/只;各组小鼠胰腺和胰岛细胞形态正常.结论高脂肪饲料和STZ是用C57BL/6J断乳幼鼠建立NIDDM模型所必须的,100mg/kg体重STZ对普通饲料小鼠血糖无影响;用高脂饲料和STZ 处理的小鼠血糖升高、胰岛素浓度正常,与NIDM病人临床特征和发病过程相似;C57BL/6J小鼠易得,建模方法简便,费用低,是在NIDDM实验研究中能广泛使用的较理想的非遗传性NID DM动物模型.     

The influences of age on T lymphocyte subsets in C57BL/6 mice

The aim of this study is to evaluate the age related changes of T lymphocyte subsets in C57BL/6 mice and immune function. Multi-color immunofluorescence techniques that were used to analyse relative numbers of T lymphocyte subsets include CD4⁺, CD8⁺, naive and memory CD4⁺ and CD8⁺, CD8⁺CD28⁺ T cells in peripheral blood of C57BL/6 mice from different age groups (Group I: 2 months old; Group II: 7 months old; Group III: 21 months old); Splenocytes isolated from different group mice were stimulated with Con A to evaluate the proliferative ability. Compared with group I, group II had a significant reduction in the percentage of CD4⁺, naive CD4⁺ and CD8⁺ T cells and an increase in the percentage of CD8⁺ T cells, while group III had a significant reduction in the percentage of CD4⁺, naive CD4⁺ and CD8⁺ T cells and increase in the percentage of CD8⁺, memory CD4⁺ and CD8⁺ T cells in peripheral blood. Compared with group II, group III had a significant reduction in the percentage of naive CD8⁺ T cells and increase in the percentage of memory CD4⁺ and CD8⁺, CD8⁺CD28⁺ T cells in peripheral blood. The T lymphocyte proliferation in vitro showed that groups II and III had a lower proliferative capacity than group I, between groups II and III, there was not a significant difference. We provide relative values for the T lymphocyte subsets in the different age groups of C57BL/6 mice. The immune system began aging at 7 months old in C57BL/6 mice under a specific pathogen free environment.     

A comparative phenotypic and genomic analysis of C57BL/6J and C57BL/6N mouse strains

Background

The mouse inbred line C57BL/6J is widely used in mouse genetics and its genome has been incorporated into many genetic reference populations. More recently large initiatives such as the International Knockout Mouse Consortium (IKMC) are using the C57BL/6N mouse strain to generate null alleles for all mouse genes. Hence both strains are now widely used in mouse genetics studies. Here we perform a comprehensive genomic and phenotypic analysis of the two strains to identify differences that may influence their underlying genetic mechanisms.

Results

We undertake genome sequence comparisons of C57BL/6J and C57BL/6N to identify SNPs, indels and structural variants, with a focus on identifying all coding variants. We annotate 34 SNPs and 2 indels that distinguish C57BL/6J and C57BL/6N coding sequences, as well as 15 structural variants that overlap a gene. In parallel we assess the comparative phenotypes of the two inbred lines utilizing the EMPReSSslim phenotyping pipeline, a broad based assessment encompassing diverse biological systems. We perform additional secondary phenotyping assessments to explore other phenotype domains and to elaborate phenotype differences identified in the primary assessment. We uncover significant phenotypic differences between the two lines, replicated across multiple centers, in a number of physiological, biochemical and behavioral systems.

Conclusions

Comparison of C57BL/6J and C57BL/6N demonstrates a range of phenotypic differences that have the potential to impact upon penetrance and expressivity of mutational effects in these strains. Moreover, the sequence variants we identify provide a set of candidate genes for the phenotypic differences observed between the two strains.