双酚A的内分泌干扰效应研究进展

双酚A(Bisphenol A, BPA)是一种危害生物体内分泌干扰效应的环境激素。近年来, 随着工农业的不断发展, 造纸行业、电子产品、食品包装等行业大量使用BPA, 国内外主要河流、湖泊都不同程度受到了BPA的污染。BPA通过富集会影响人类激素的合成、释放、转运, 进而影响人的生殖和发育。BPA的毒性效应主要包括内分泌干扰物、神经毒素、免疫毒素等方面, 这些致毒效应甚至会增加细胞癌变、畸变的可能性。此外BPA毒性替代物、BPA与其他物质结合的产物都增加了BPA毒性的多样性, 逐渐成为了危害人类生命安全的又一大隐患。通过研究BPA毒性效应以及近年来BPA的替代品, 了解双酚A的致毒机理, 为研究预防控制BPA污染对人类健康的影响提供参考依据。     

双酚A暴露对东亚三角涡虫急性毒性及神经酶的影响

旨在探讨双酚A (BPA)对东亚三角涡虫的急性毒性及神经系统相关酶活性的影响。采用不同浓度的BPA处理涡虫24 h、48 h、72 h,求出半致死浓度,以此为基础,采用不同浓度的BPA处理涡虫24 h、72 h、144 h,测定AchE、ChAT及Na+~K+^-ATP酶活性。BPA对三角涡虫的24 h、48 h、72 h,LC50分别为12.18 mg/L、8.49 mg/L、6.43 mg/L。ChE、ChAT、Na+~K+^-ATP酶活性对BPA反应敏感,具有较好的规律性。24 h处理组,AChE酶活力随BPA浓度的升高而升高,72 h和144 h处理组则呈现先上升后下降的趋势,除0.643 mgBPA/L以外,其它处理组均表现出了时间-效应关系;在BPA胁迫下,ChAT酶活力均呈现降低趋势,在BPA浓度为0.643 mg/L、1.286 mg/L时,表现出了时间-效应关系;24 h、72 h处理组Na+~K+^-ATP酶活力随BPA浓度升高呈现先上升后下降的趋势,144 h处理组则呈现下降趋势,Na+~K+^-ATP酶活力随BPA胁迫时间的延长呈现先升高后下降的趋势。BPA对涡虫具有较强的生态毒性,AchE、ChAT、Na+~K+^-ATP酶活性可与其他敏感指标一起作为水体BPA污染的早期监测指标。     

历史生物地理学中的BPA分析法Ⅱ :二级BPA

BPA(broks parsimony analysis)是历史生物地理学研究的重要分析方法之一,包括初级BPA和二级BPA。前者主要用于寻找共同格局,后者是对网状进化格局的解释。本文详细介绍了二级BPA的分析方法,并就BPA与其它历史生物地理学／支序学派的研究方法进行了区别。     

双酚A暴露对哺乳动物精子蛋白酪氨酸磷酸化的影响

双酚A(BPA)是一种人工合成的雌激素性化合物,广泛存在于环境中,对哺乳动物内分泌有干扰作用,影响雄性生殖系统功能。本研究以新鲜猪精子、17 ℃保存猪精子以及小鼠精子为对象,采用体外培养方法,利用蛋白免疫印迹(WB)和免疫荧光技术,分析不同浓度BPA(0、0.1、1、10、100 μmol·L^-1)暴露对哺乳动物精子蛋白酪氨酸磷酸化的影响及分子机制。结果表明: 低中浓度(0.1、1 μmol·L^-1)BPA暴露对新鲜猪获能精子蛋白酪氨酸磷酸化具有显著促进作用,但在高浓度(10、100 μmol·L^-1)BPA暴露下,猪获能精子蛋白酪氨酸磷酸化呈现降低趋势。BPA暴露下,小鼠获能精子蛋白酪氨酸磷酸化随BPA浓度的增加而增强,并且BPA影响猪和小鼠精子获能相关酪氨酸磷酸化修饰的蛋白种类不同。表明BPA暴露对哺乳动物精子的影响具有物种特异性。免疫荧光结果显示BPA对精子蛋白酪氨酸磷酸化的影响主要发生在鞭毛的中段和主段。     

妊娠期和哺乳期双酚A暴露对幼年子代小鼠焦虑和抑郁行为的影响

双酚A(bisphenol-A,BPA)对脑和行为发育的低剂量效应已引起广泛关注。本研究分别于妊娠最后2周和分娩后前2周母鼠灌胃BPA(0.4和4 mg/kg.d),然后以旷场、高架十字迷宫、明暗箱、镜子迷宫、强迫游泳和被动回避箱等模型,分别测试幼年期(生后21～28 d)子代小鼠的行为,探讨围生期不同阶段的BPA暴露对幼年仔鼠自发活动、探究、焦虑、抑郁和被动回避记忆等行为的影响。结果表明,围生期不同阶段的BPA暴露对这些行为的影响不同,主要表现为:妊娠期BPA暴露促进幼年仔鼠的活动性,减弱其焦虑状态,提高雄性仔鼠的探究能力,促进雌性仔鼠的被动回避记忆;哺乳期BPA暴露减少幼年仔鼠的活动性,但对其焦虑行为的影响相对较弱,不影响仔鼠的探究能力和被动回避记忆;而妊娠期和哺乳期BPA暴露均加剧幼年仔鼠的抑郁行为。以上结果提示,妊娠期和哺乳期BPA暴露均可影响幼年仔鼠的焦虑、抑郁、被动回避记忆等多种行为,而妊娠期可能是BPA影响的更敏感时期。     

围产期母鼠染毒双酚A对雄性子代脑内谷氨酸N-甲基-D-天冬氨酸受体发育的影响

为了探讨围生期双酚A (bisphenol A,BPA) 暴露对雄性子代大鼠海马和前皮层谷氨酸N- 甲基-D- 天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate Receptor, NMDAR) 表达的影响,作者通过对妊娠第7 天至仔鼠出生后21 天的母鼠灌胃染毒BPA (200, 50, 5, 0.5 mg/(kg·d)),用Western-blot法分别检测出生后4、7、14、21、56 天的雄性仔鼠海马和前皮层NMDA 受体NR1、NR2A、2B 亚基的表达。结果显示,在海马区,较低剂量(0.5～50 mg/(kg·d))BPA 剂量依赖性地下调NMDA 受体各亚基表达,而高剂量(200 mg/(kg·d)) BPA 最显著下调NR1 表达,却对
NR2A、2B的影响最小;但所有BPA剂量组的NMDA受体亚基表达均显著低于对照组。在前皮层,NMDAR 亚基表达对BPA 的敏感性相对较低,只有较高剂量(50～200 mg/(kg·d)) BPA 可明显下调NR2A、2B 亚基表达。此外,BPA 明显改变NMDAR 的亚基组成,NR2A/NR1 和NR2B/NR1 比值在海马区被200 mg/(kg·d) BPA 上调,在前皮层却被0.5 mg/(kg·d) BPA 上调;其它剂量BPA 均下调两脑区的该比值。以上结果提示,母体围生期双酚A 暴露下调NMDA 受体表达和亚基组成,这可能是BPA 影响雄性子代脑发育的机制之一。     

历史生物地理学中的BPA分析法Ⅰ:初级BPA

BPA(brooks parsimony analysis)是历史生物地理学研究的重要分析方法之一 ,在过去的 2 0年内得以发展和完善。除了用于生物地理分布格局的支序分析并解释其形成原因外 ,BPA也可用于寄生物与宿主、物种与区系以及协同进化等方面的研究。本文详细介绍了BPA的原理以及初级BPA的分析方法。     

基于氧化应激与细胞凋亡探究双酚A慢性暴露致小鼠肾毒性作用机制

双酚A (bisphenol A, BPA)被广泛应用于生产环氧树脂和聚碳酸酯塑料等制品,在强酸、强碱或高温条件下,BPA被释放出来,然后渗入环境中。在大多数生物液体中都检测到了不同浓度的BPA,BPA的存在已被证明与许多慢性疾病密切相关,包括慢性肾病(chronic kidney disease,CKD)。然而,关于BPA的有害作用及其对CKD的不良影响知之甚少。为了探讨BPA对动物肾毒性的作用机制,本研究通过向饮水中加入0.01、0.1和1 mg/L的BPA,暴露于雌性小鼠4周后,交配和怀孕的雌性小鼠持续接触BPA,直到断奶;F1代3周龄雄性仔鼠继续口服相同剂量的BPA,持续10周。结果表明,0.1mg/L和1mg/LBPA处理组小鼠的肾脏损伤严重,血清中肾脏功能指标尿素氮(urea nitrogen,UN)、肌酐(creatinine,CR)和尿酸(uric acid,UA)的含量均发生显著升高(P<0.05);肾脏组织形态结构被损害;肾脏抗氧化相关基因在mRNA和蛋白水平上的表达显著降低(P<0.05),包括谷胱甘肽硫转移酶(glutathione-S-transf...     

夹竹桃麻素对双酚a诱导的成年雄性小鼠精子损伤作用的实验研究

目的:研究NADPH氧化酶抑制剂夹竹桃麻素(Apocynin)对双酚a(Bisphenol a,BPA)诱导的成年雄性小鼠精子损伤过程中的作用。方法:成年雄性小鼠给以BPA刺激,给以Apocynin(1 mg/kg/day和10 mg/kg/day,分别处理7 day)进行治疗,观察其对BPA诱导的成年雄性小鼠精子损伤的作用。结果:BPA处理组小鼠附睾精子数目和活力明显降低,血清中睾酮和黄体生成素水平明显减少;Apocynin治疗明显增加BPA处理组小鼠附睾中精子数目和活力,但是对血清中睾酮和黄体生成素水平没有明显影响。另外,BPA处理组小鼠睾丸中丙二醛(Malonaldehyde,MDA)水平明显增加;Apocynin治疗明显抑制了BPA处理组小鼠睾丸中MDA水平。结论:NADPH氧化酶抑制剂Apocynin减轻BPA诱导的成年雄性小鼠精子损伤。     

双酚A对萼花臂尾轮虫毒性及生活史的影响

应用生态毒理学研究方法,研究了双酚A(BPA)对萼花臂尾轮虫毒性及生活史影响。结果表明:BPA对萼花臂尾轮虫24 h急性毒性LC₅₀为13.76 mg/L,95%置信限为10.97-17.10 mg/L。生活史研究显示:与对照组相比,0.25-4.0 mg/L的BPA对轮虫胚胎发育历时影响不显著;2.0-4.0 mg/L的BPA显著延迟了轮虫幼体发育时间;当BPA为0.5 mg/L时,轮虫净生殖率(R₀)显著上升,但BPA浓度为2.0和4.0 mg/L时R₀显著降低;4.0 mg/L的BPA显著缩短世代时间(T);BPA浓度为2.0、4.0 mg/L时,轮虫生命期望值(e₀)显著下降;BPA浓度为1.0、2.0、4.0 mg/L时,轮虫内禀增长率(r_m)显著下降;BPA浓度为0.5、1.0 mg/L时轮虫所产后代混交率(MR)显著增长。研究结果表明BPA对轮虫的生殖具有干扰作用,其中R₀和MR受BPA影响最为显著。     

哺乳期接触双酚A对子代雄鼠睾丸结构及雌激素受体β表达的影响

目的研究哺乳期接触双酚A(BPA)对雄性小鼠睾丸结构及雌激素受体β(ERβ)表达的影响。方法 20只妊娠母鼠,待分娩后随机分为高、中、低剂量组,BPA染毒剂量为100、50、5 mg/(kg.d)和对照组,母鼠分娩后第2天开始每天灌服BPA,仔鼠通过乳汁暴露于BPA,一直持续到第22天断奶,研究其成年后睾丸组织形态学改变,并用免疫组织化学、RT-PCR和Western blot方法研究BPA对其成年后睾丸内ERβ表达的影响。结果睾丸形态学分析表明BPA处理组睾丸发育受到严重影响,生精细胞排列紊乱,支持细胞和各级生精细胞生长受到不同程度的抑制;免疫组化、RT-PCR及Western blot均显示,高、中、低剂量组雄鼠成年后睾丸组织中ERβ的表达均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论哺乳期接触BPA影响雄鼠睾丸发育,改变其成年后睾丸形态,提高睾丸组织内ERβ表达,提示BPA可能通过改变雌激素受体表达从而影响睾丸发育。     

中国大鲵肌肉蛋白肽对BPA诱导小鼠精子发生障碍的治疗作用及其机制研究

摘要 目的：研究中国大鲵肌肉蛋白肽（The protein and peptide extracts from muscles of Chinese giant salamanders,SP）对双酚A（bisphenol A,BPA）诱导的小鼠生精障碍的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法：40只C57BL/6 雄性小鼠分为四组,分别为Control组、BPA组、BPA+CS（Compound Substance）组、BPA+SP组。BPA组使用50 mg/kg/d的BPA腹腔注射,BPA溶解于玉米油;Control组只腹腔注射玉米油。BPA+CS组灌胃其他有利于生精壮阳的复合物用作对照,复合物溶解于生理盐水中;BPA+SP组灌胃上述复合物联合大鲵肌肉蛋白肽,以上灌胃剂量均4 g/kg/d。连续造模28天,期间每周测定小鼠体重,造模结束后测定睾丸体积、睾体比,取附睾精子使用CASA计算机辅助分析系统测定精子数目、精子活力,ELISA法测定血清睾酮含量,HE染色、TUNEL染色分析睾丸组织病理学,最后采用免疫荧光染色及Western blotting分析转移相关基因2（MTA2）的表达情况、油红O染色观察支持细胞体内、体外吞噬作用。结果：与对照组比较,BPA组睾丸体积（P<0.05）、睾丸重量（P<0.05）、睾体比（P<0.05）、精子数目（P<0.05）、精子活力（P<0.05）、睾酮含量（P<0.01）均显著降低,睾丸组织形态受损（P<0.05）、生精细胞凋亡增多（P<0.01）、MTA2表达量降低（P<0.01）、支持细胞吞噬功能减弱（P<0.01）;BPA+CS组较BPA组无明显变化,BPA+SP组以上变化显著改善（P<0.05）。结论：大鲵肌肉蛋白肽对BPA诱导的小鼠生精功能障碍有明显的保护作用,作用机制可能与干预MTA2表达进而增强支持细胞的吞噬作用相关。     

历史生物地理学中的BPA分析法I：初级BPA

BPA(brooks parsimony analysis)是历史生物地理学研究的重要分析方法之一,在过去的20年内得以发展和完善。除了用于生物地理分布格局的支序分析并解释其形成原因外,BPA也可用于寄生物与宿主、物种与区系以及协同进化等方面的研究。本文详细介绍了BPA的原理以及初级BPA的分析方法。     

围产期母体染毒双酚A对雄性子代脑内雌激素β受体和芳香酶表达的影响

为了探讨环境雌激素双酚A (bisphenol-A,BPA)对子代发育期脑内雌激素受体(estrogen receptor,ER）和芳香化酶P450arom表达的影响,对妊娠第7天至哺乳期(仔鼠出生后21天)的母鼠灌胃染毒BPA(200、50、5、0.5mg·kg-1/d),用Western-blot法分别检测出生后4、7、14、21、56天雄性仔鼠的海马及前皮层ERβ和P450arom蛋白表达。结果显示,BPA剂量依赖性地上调前皮层和海马P450arom表达,抑制ERβ蛋白表达。在皮层,出生后4~56天各时间点的P450arom和ERβ表达对BPA都很敏感,其中200、50 或5mg·kg原1/d BPA组与对照组相比有显著差异(P＜0.05,P＜0.01 或P＜0.001);在海马内,BPA对生后发育早期P450arom和ERβ表达的影响更为明显,出生后2周内,200 和50mg·kg-1/d BPA组与对照组相比有显著差异(P＜0.05,P＜0.01或P＜0.001)。以上结果提示,母体围产期BPA暴露可通过上调P450arom而促进雄性子鼠皮层和海马的雌激素合成,并由此抑制ERβ表达。这可能是BPA影响雄性子代脑发育的机制之一。     

双酚A(BPA)与黑腹果蝇雌激素相关受体(dERR)的结合模式及对其基因表达的影响

【目的】雌激素相关受体(estrogen-related receptors, ERRs)属于核受体(nuclear receptor, NR)超家族,在昆虫新陈代谢和能量转换调节中发挥重要作用。双酚A(bisphenol A, BPA)与昆虫生殖和神经系统疾病有关。本研究旨在探究BPA影响黑腹果蝇Drosophila melanogaster ERR(dERR)的作用机理。【方法】通过AutoDock Vina模拟小分子BPA与Modeller 9.25构建的dERR蛋白的分子对接,使用Gromacs 5.1.9进行分子动力学模拟,并结合自由能的计算探究BPA与dERR的结合模式。利用qRT-PCR方法检测3种浓度(0.1, 1和10 μg/L) BPA处理6, 12和24 h对黑腹果蝇成虫和2龄幼虫中dERR基因转录水平的影响。【结果】通过分子对接和极性溶剂化能发现,Phe370及Leu334等侧链氨基酸是BPA与dERR结合的关键氨基酸。qRT-PCR分析显示,不同浓度的BPA处理6和12 h时黑腹果蝇成虫和2龄幼虫中dERR基因转录水平均发生显著变化,而0.1 μg/L BPA处理24 h时的几乎接近对照。【结论】BPA能够影响黑腹果蝇体内dERR的表达,作用机理可能跟BPA与dERR的潜在特异性结合有关。     

低剂量双酚A灌胃对去卵巢小鼠子宫的增生作用

目的观察小鼠经消化道途径给予低剂量环境内分泌干扰物双酚A对子宫的作用及机制。方法雌性ICR小鼠切除双侧卵巢,恢复性饲养1周,剔除异常个体后,50只动物随机分成5组,每组10只动物,依次皮下注射(sc)10.0μg/(kg·d)17β-雌二醇,灌胃(ig)0、20.0、60.0和180.0μg/(kg·d)BPA,连续7d。动物每3d称量体重一次,于最后一次给药24h后,阴道涂片检测角化上皮细胞,颈椎脱臼处死动物,取子宫,称其干湿重,计算子宫脏器指数,组织切片,HE染色后利用图像分析系统测量子宫上皮高度和宫腔面积。免疫组化法分析子宫雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)表达。结果①与对照组相比,雌二醇和BPA低剂量组动物体重增加,BPA中高剂量组动物体重无明显差异。②阴道涂片结果显示,处于动情期动物数分别为:对照组0/10,雌二醇组10/10,BPA低剂量组2/10,BPA中剂量组1/10,BPA高剂量组0/10;③BPA低剂量组动物子宫湿重和含水量较对照组增加,脏器系数增大,BPA中高剂量组子宫湿重和脏器系数较对照组降低明显(P0.05);④病理组织学及显微图像分析结果显示,BPA低剂量组动物子宫腔面积较对照组增大,中高剂量组子宫腔面积明显减小(P0.01);低剂量组动物子宫上皮高度较对照组增高(P0.01),中高剂量组子宫上皮高度降低明显(P0.01)。⑤免疫组化结果显示,低剂量BPA能增强小鼠子宫ER和PR表达,但随剂量增加,ER表达下降。结论BPA经消化道途径给予ICR小鼠,人环境暴露剂量下具有雌激素活性,但雌激素活性随BPA剂量增大呈现下降趋势。     

双酚A对中国林蛙生精细胞凋亡和Bax、Bcl-2表达的影响

为探讨双酚A(BPA)对两栖动物生精细胞凋亡及相关蛋白Bax和Bcl-2表达的影响.将雄性中国林蛙(Rana chensinensis)分别暴露于10-7、10-6、10-5 mol/L BPA水体中持续3 d、5 d、7 d,取其精巢组织.用原位末端转移酶法(TUNEL)和甲基绿-派诺宁法(Methyl Green-Pyronine)检测生精细胞凋亡,用免疫组织化学方法检测生精细胞的Bax和Bcl-2表达.结果显示,各BPA处理组中国林蛙生精细胞凋亡指数(Apoptotic index,AI)均显著高于对照组,10-6 mol/L与10-7 mol/L BPA处理组生精细胞的AI差异不显著,10-5 mol/L BPA处理组生精细胞的AI与前两组相比显著增高;在同一BPA浓度处理组,生精细胞AI随处理时间的延长而增高.与对照组相比,各BPA处理组Bax表达上调,Bcl-2表达下调,差异均显著;生精细胞AI与Bax/Bcl-2表达呈正相关.这些结果提示,BPA可导致中国林蛙的生精细胞凋亡,而生精细胞凋亡的发生与Bax/Bcl-2表达比值的变化密切相关.     

双酚A对三角涡虫DjSOD,DjCAT,DjGPx基因及相关酶活性的影响

本试验旨在探讨环境内分泌干扰物双酚A(BPA)对涡虫抗氧化酶(SOD,CAT,GPx)的活性及相关基因表达的影响。采用不同浓度的BPA处理涡虫48 h,然后测定抗氧化酶活性,并应用半定量RT-PCR技术探讨相关基因的变化。在BPA胁迫下,SOD活性呈现上升趋势、CAT活性表现出了先上升后下降的趋势,GPx活性总体上变化不大。随BPA浓度的增加,Dj SOD m RNA表达量上升,并呈现剂量-反应关系,Dj CAT及Dj GPx m RNA表达量也呈现出明显的上调现象,但变化趋势并不同于酶活性。BPA诱导涡虫的氧化应激反应,改变抗氧化酶SOD、CAT基因的转录水平。     

双酚A与镉对植物光合作用的复合微生态效应

近年来,国内外学者研究了双酚A (BPA)及重金属镉(Cd)单一因子对植物光合作用的影响.但在自然背景下,污染多呈复合型,因此研究BPA和Cd对二者叠加的空间内植物光合作用的复合影响意义重大.本文综述了BPA对植物光合作用的影响及机制,及Cd对植物光合作用的影响及其机制,其中单一BPA和Cd对植物光合作用的影响均表现为:低浓度促进光合作用,高浓度反之.根据相关研究推测了植物在受到复合胁迫时的生态响应,相应的生理生化反应,及光合过程的响应机制.最后提出了BPA与Cd对植物复合胁迫可能开展的相关研究方向.     

胚胎期接触双酚A对雄鼠睾丸内PCNA和p53表达的影响

目的研究胚胎期接触双酚A(Bisphenol A,BPA)对雄性胎鼠睾丸发育的影响及睾丸内增殖细胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen,PCNA)和p53表达的影响。方法母鼠怀孕后第2天对其灌服双酚A(剂量5,50,100 mg/ml/day),一直持续分娩,F1代雄性小鼠饲养至75日龄,观察BPA对仔鼠成年后睾丸结构和PCNA和p53表达的影响。结果发现BPA处理组睾丸发育受到抑制,曲细精管直径和管腔直径变小(P0.05),管腔内出现大量胞质残余体,部分管腔出现潴留管腔液,支持细胞生长受到抑制,生精细胞排列紊乱,细胞质出现空泡化。免疫组织化学结果显示在BPA处理组,PCNA除了在精原细胞大量表达外,在初级精母细胞中表达量明显升高(P0.05,P0.01),免疫荧光结果显示胚胎期接触BPA导致成年后睾丸内p53蛋白表达量显著升高(P0.05,P0.01)。结论胚胎期接触BPA对雄鼠睾丸发育有着长期的不良影响,可能源于BPA引起细胞的异常增殖和凋亡。