嗜水气单胞菌生物被膜对其耐药性的影响

建立了嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila, Ah)的生物被膜(Bacterial biofilm, BF) 体外形成模型, 并对11种抗菌药物对BF细菌和浮游（Freecell, FC）细菌的清除作用进行了研究。将Ah J1株在放有硅胶膜的TSB中培养7d,用银染法鉴定,发现可形成良好的BF。FC细菌对青霉素具有耐药性, 最低杀菌浓度(MBC)为256μg/mL;对蒽诺沙星和氟哌酸最敏感,MBC分别为003μg/mL和0.25μg/mL。氟苯尼考对BF细菌的清除能力最强,作用于BF细菌和FC细菌的MBC之比为2∶1;卡那霉素、青霉素、新霉素的MBC比值在32∶1以上。扫描电镜观察蒽诺沙星作用于FC及BF细菌前后的形态变化,并测定其杀菌曲线。发现4×MBC时可完全清除FC细菌,但不能完全清除BF细菌;在32×MBC时,4h内可完全清除FC细菌,而24h内完全清除BF细菌。结果表明形成BF的Ah对抗菌药物可形成强耐受性,其潜在影响应引起足够重视。     

嗜水气单胞菌感染现状及耐药分析

目的调查湖州市中心医院嗜水气单胞菌感染现状和耐药情况。方法采用常规方法分离,用VITEK-32全自动微生物分析仪进行菌种鉴定为嗜水气单胞菌或豚鼠气单胞菌,依据葡萄糖产气反应鉴定为嗜水气单胞菌。并根据配套药敏卡进行药敏试验。结果共分离到34株嗜水气单胞菌,主要来自痰液、胆汁、腹腔引流液或腹水。嗜水气单胞菌对哌拉西林、替卡西林、阿莫西彬克拉维酸、妥布霉素、头孢呋辛、头孢噻肟、头孢他啶、环丙沙星、复方新诺明耐药率为52．9％～73．5％。结论目前嗜水气单胞菌也呈现多重耐药现象,临床上应予以重视。     

水产品中嗜水气单胞菌耐药性研究进展

嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila具有广泛的致病性,是水生动物最常见的致病菌之一。由于抗生素不合理使用、质粒以及耐药基因的水平转移等因素,来自零售市场、超市和餐厅的即食海鲜产品中,均可分离出大量的嗜水气单胞菌耐药菌株及其耐药基因。因此,探明关键控制点、寻求有效缓解抗生素耐药性的防控策略至关重要。文中介绍了我国嗜水气单胞菌的耐药现状,嗜水气单胞菌的主要侵染及耐药机制,以及目前削减和防控耐药性的主要手段和策略,并对水产品耐药性研究方向和重点作出展望。     

嗜水气单胞菌致病性研究进展

嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,AH)是我国养殖鱼类的重要病原,对其侵袭机制和毒力因子的研究有重要的意义。本文对嗜水气单胞菌的生物学特性、致病机制、毒力因子及其防治措施进行了综述。     

我国鱼类病原——嗜水气单胞的耐药性研究

采用琼脂扩散法和稀释法研究26株嗜水气单胞菌对21种菌药物的敏感性,分析了其耐药状况。结果表明：从不同地区分离收集到的26株嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）对青霉素类和头孢菌素类药物全部具耐药性,对万古霉素多数不敏感。21种药物中最敏感的是氟哌酸、氯霉素、呋喃呋酮,总体耐药率分别为7.7％、7.7％和11.5％。氨基糖甙类药物和四环素类药物的耐药频率介于其间,对磺胺药的耐药菌比例也很高,高达73.1％的A.hydrophila对磺胺及复方磺胺其有耐药性,但耐磺胺比耐复方磺胺的现象更为普遍,对3种常用药物具有耐药性的菌株比例最高。同时对鱼类病原菌耐药性的判定标准以及两种方法在鱼类病原菌耐药性研究中的适用性问题进行了讨论。     

嗜水气单胞菌毒力基因的研究进展

嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)隶属于气单胞菌科(Aermonadaceae)气单胞菌属(Aeromonas),为人、畜及水生动物共患的条件致病菌。该菌广泛存在于水环境中,是多种水产动物的主要致病菌。国内外学者对其进行了许多研究,现普遍认为嗜水气单胞菌的致病性与其产生的毒素密切相关。随着分子生物技术的发展,已有许多学者从分子水平上对嗜水气单胞菌进行了研究,为阐明嗜水气单胞菌的致病机理提供了一些理论依据,并建立起针对几种主要毒力因子的检测手段。本文将嗜水气单胞菌目前的研究策略、部分主要毒力因子及其检测手段作一综述,以期为嗜水气单胞菌致病机理的研究及嗜水气单胞菌病的防治提供参考和借鉴。       

我国鱼类病原——嗜水气单胞的耐药性研究*

采用琼脂扩散法和稀释法研究 2 6株嗜水气单胞菌对 2 1种抗菌药物的敏感性 ,分析了其耐药状况。结果表明 :从不同地区分离收集到的 2 6株嗜水气单胞菌 (Aeromonashydrophila)对青霉素类和头孢菌素类药物全部具耐药性 ,对万古霉素多数不敏感。 2 1种药物中最敏感的是氟哌酸、氯霉素、呋喃唑酮 ,总体耐药率分别为 7.7%、7.7%和 11.5%。氨基糖甙类药物和四环素类药物的耐药频率介于其间。对磺胺药的耐药菌比例也很高 ,高达 73.1%的A.hydrophila<     

谷氨酰胺对嗜水气单胞菌致病中华鳖的保护作用

为探讨谷氨酰胺(Gln)对嗜水气单胞菌致病中华鳖的保护作用,本试验选取健康中华鳖270只,随机分为5组(A~E组),每组3个重复,每个重复18只。A~D组腹腔注射嗜水气单胞菌(1.3×109cfu/mL,0.5 mL),E组注射等量生理盐水。6 d后,A、E组注射生理盐水,B、C、D组分别注射100 mg/kg·BW、200 mg/kg·BW、400 mg/kg·BW Gln注射液,隔天注射,共注射3次。观测各组中华鳖的存活率,血浆总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)、溶菌酶(LZM),脾脏、肝脏和肠道的组织学以及肠道菌群变化。结果表明,A组血浆LZM极显著低于C、D、E组(P0.01),C、D组LZM含量极显著高于A组(P0.01);A组T-AOC极显著低于E组(P0.01),D组T-AOC极显著高于A、B、C组(P0.01);A组GSH-PX极显著低于其余各组(P0.01);A组MDA极显著高于E组(P0.01),B、C、D组MDA显著低于A组(P0.05);A组中华鳖脾脏的红髓脾窦淤血扩张,红髓和白髓的淋巴细胞和血细胞坏死。肝脏充血严重,大量肝细胞破裂,肝细胞间有大量红细胞浸润。中肠黏膜萎缩,较多皱襞断裂。随着Gln注射剂量的增加,B、C、D组脾脏红细胞充斥逐渐减少,红白髓的分界逐渐明显。肝脏出血点减少,肝细胞的大小与排布也渐趋正常。中肠皱襞破损脱落程度逐渐减轻;A组肠道嗜水气单胞菌和大肠杆菌明显高于E组(P0.05),而乳酸杆菌和芽孢杆菌明显低于E组(P0.05);D组嗜水气单胞菌和大肠杆菌明显低于A组(P0.05),而乳酸杆菌和芽孢杆菌明显高于A组(P0.05)。注射Gln可缓解嗜水气单胞菌对中华鳖的致病作用,有效恢复机体抗氧化及非特异免疫力,降低死亡率。     

嗜水气单胞菌耐四环素的蛋白质组学初步研究

采用四环素次抑菌浓度对嗜水气单胞菌进行选择,筛选得到耐四环素的嗜水气单胞菌菌株,其MIC（最低抑菌浓度）为出发菌株的8倍。通过比较对照菌与耐药菌总蛋白质的双向电泳图谱,获得3个差异显著的蛋白点。对这3个差异蛋白质进行肽质量指纹及其生物信息分析,分别鉴定为核糖体小亚基蛋白、药物排出系统蛋白和乙酸乙酰辅酶A转移酶亚基。文中对嗜水气单胞菌耐四环素的机理进行了初步探讨。     

嗜水气单胞菌佐剂灭活苗免疫中华鳖抵抗嗜水气单胞菌的致死性感染

通过建立中华鳖浸泡感染模型评价中华鳖嗜水气单胞菌油乳剂灭活疫苗对中华鳖的免疫保护效力。在主动免疫保护试验中,疫苗免疫组中华鳖能产生较高的抗体水平,在使用10×LD50的嗜水气单胞菌T3株进行浸泡攻毒后,保护率为100%(10/10),生理盐水对照组中华鳖的存活率仅为30%(3/10)。在被动免疫保护试验中,疫苗腹腔免疫异育银鲫抗血清能80%(8/10)保护中华鳖抵抗10×LD50的T3株的腹腔接种的攻击,生理盐水对照组中华鳖的存活率为20%(2/10)。研究结果表明嗜水气单胞菌佐剂油乳剂灭活苗具有良好的免疫学原性,可有效预防由嗜水气单胞菌引起的中华鳖红底板和肠道败血症等疾病。     

嗜水气单胞菌毒素的提纯及其特性分析

从患发性传染病的家养鲫鱼分离到嗜水气单胞菌,其培养物经硫酸铵沉淀,DEAE-纤维素层析及Sephadex G100凝胶过滤纯化,获碍一种单一多肽的外毒素,分子量为52.5kd。该毒素对热敏感,对胰酶有抗性,最适pH5—8,具有溶血性、肠毒性和细胞毒性,腹腔注射致死小白鼠和鲫鱼．其生物学活性可被同源抗毒素中和。鉴于该毒素的独转性质,建议命名为hec毒素。     

白藜芦醇抑制嗜水气单胞菌毒力作用研究

为探索白藜芦醇(Resveratrol, Res)在水产动物细菌病防控中的应用价值, 实验以淡水养殖中重要的细菌病原嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)为研究对象, 通过设置药物浓度梯度, 检测其对嗜水气单胞菌生长、生物膜形成和溶血活性的抑制作用, 和对毒力及群感调控系统相关基因表达的影响; 同时通过人工感染异育银鲫(Carassius auratus gibelio)试验检测其对鱼体保护作用和对鱼体炎症相关因子基因表达的影响。结果显示: 白藜芦醇对嗜水气单胞菌的最小抑菌浓度(MIC)>1024 μg/mL; 浓度低于64 μg/mL时, 对菌株生长影响不显著; 浓度≥32 μg/mL时, 对病原菌株生物膜形成和溶血活性具有显著抑制作用(P<0.05), 且随剂量增加而增强。荧光定量RT-PCR结果分析发现白藜芦醇能引起嗜水气单胞菌群感调控系统中luxR和luxS基因分别显著上调和下调表达; 外膜蛋白基因omp表达显著下降。人工感染试验发现攻毒前两小时腹腔注射25、50和100 mg/kg白藜芦醇处理组的异育银鲫死亡率显著下降, 鱼体炎症相关的肿瘤坏死因子(TNF-α)和Ⅱ型干扰素(IFN-γ)的mRNA表达量也显著下降。研究表明药用植物大黄、虎杖等所含白藜芦醇成分能有效抑制嗜水气单胞菌毒力, 降低鱼体炎症反应的功效; 腹腔注射25—100 mg/kg白藜芦醇对感染病原菌的异育银鲫有一定保护作用。     

嗜水气单胞菌致双下肢大面积溃烂1例报告

20 0 1年 3月我科在治疗 1例非何杰金氏病患儿的化疗期间受嗜水气单胞菌感染导致双下肢大面积溃烂 ,现将治疗情况报告如下。1　临床资料　　患者 ,女 ,1 3岁。因淋巴结肿大经病理检查确诊为非何杰金氏病 8月余 ,确诊后已 4次在我科住院化疗 ,骨髓完全缓解。2 0 0 1年 3月 1日第 5次入院进行强化治疗 ,予以 IODL加三联鞘膜内注射进行化疗 ,化疗后第 1 4天 ,患儿发烧 ,体温在 3 8.5℃～ 40℃波动 ,舌尖及口腔粘膜出现大小不等的溃疡 ,3月 2 1日四肢开始出现疼痛、肿胀、红斑、水泡 ,双下肢尤为严重 ,第 2天水泡溃破 ,有暗红色血水渗出 ,右大…     

宽体金线蛭嗜水气单胞菌感染的病原检验

对河北某宽体金线蛭（Whitmania pigra Whitman）养殖场所养殖的宽体会线蛭发生的病害,进行了发病情况、临床表现、病理变化等方面的枪验。同时,择代表菌株进行了16S rRNA基因的分子鉴定,测定了16S rRNA基因序列、分析了相关细菌相应序列的同源性、构建了系统发生树。结果表明所检病例为由嗜水气单胞菌（Aeronmnas hydrophila）所引起的感染。分离后做纯培养的10株嗜水气申胞菌均为同种血清型菌株;代表菌株对健康宽体金线蛭的人工感染试验表明了相应的原发病原学意义;药敏试验结果显示,对供试37种抗菌药物中的头孢噻肟等高度敏感、对链霉素等敏感、对苯唑青霉素等耐药。     

单克隆抗体亲和层析提纯嗜水气单胞菌HEC毒素

单克隆抗体亲和层析提纯嗜水气单胞菌ＨＥＣ毒素陈琼,陈怀青,陆承平（南京农业大学动物医学院,２１００９５）关键词嗜水气单胞菌,ＨＥＣ毒素,单克隆抗体,亲和层析ＰＵＲＩＦＩＣＡＴＩＯＮＯＦＡＥＲＯＭＩＮＡＳＨＹＤＲＯＰＨＩＬＡＨＥＣＴＯＸＩＮＷＩＴＨＭＯ...     

嗜水气单胞菌脂酶同工酶提取方法的研究

采用了5种提取方法对嗜水气单胞菌酯酶同工酶进行酶样品提取，并对提取温度以及提取时冻存时间等条件进行了摸索。结果表明：以TBE冷没法，-20℃冻存18～24h的提取条件最适用于嗜水气单胞菌酯酶同工酶的提取，且方法简便，值得推广。