葡萄球菌肠毒素抗肿瘤作用研究进展

葡萄球菌肠毒素（ＳＥ）是一种外源性超抗原,能够高效地刺激Ｔ细胞增殖并且促使其释放多种大量的细胞因子。体外细胞水平和动物体内水平的研究结果表明,ＳＥ能够产生强大的杀伤肿瘤细胞效应,它是一种很有潜能的新型肿瘤免疫治疗剂,展示了良好的应用前景。ＳＥ抗肿瘤是目前肿瘤治疗基础研究的一个热点,但是尚未见临床应用ＳＥ治疗人体肿瘤的报道。本文综述了ＳＥ抗肿瘤作用的实验研究进展,探讨了其抗肿瘤作用的机制,分析了存在的问题和对策。     

金黄色葡萄球菌肠毒素

金黄色葡萄球菌是一种重要的病原体,它产生多种类型的毒素,从而引起各种类型的疾病。金黄色葡萄球菌肠毒素(Staphylococcal enterotoxins,SEs),是一组血清学上互不相同的热稳定肠毒素,有10个血清型。由于食入了被SEs污染的食品而主要引起肠胃炎,此外,SEs还是一种强的超抗原,它可以刺激非特异性T细胞增殖。SEs各型之间有着相似的结构和功能。     

金黄色葡萄球菌肠毒素研究进展

金黄色葡萄球菌肠毒素是由金黄色葡萄球菌分泌的一类胞外毒素,其中传统型为SEA-SEE,具有催吐活性。目前也发现了一些催吐活性未知的新类型肠毒素,命名为SEls。所有肠毒素的分子量都在22-28KDa之间,由单一肽链组成,其稳定性好,可耐大多数蛋白水解酶。金黄色葡萄球菌肠毒素具有较强的超抗原特性,可促使T淋巴细胞大量增殖,同时表现出对组织相容性复合物Ⅱ类分子(MHCⅡ)等位基因的不同偏爱性。超抗原的产生和调控依赖agr系统,同时也受其它因素的调控,如一些氨基酸。因此在免疫治疗中具有着重要作用。本文从性质、组成、结构、功能、检测方法等方面对金黄色葡萄球菌肠毒素进行简要介绍,为肠毒素的研究提供依据。     

快速检测食品中葡萄球菌肠毒素的方法及其评价

<正> 在美国和加拿大,葡萄球菌仍然是引起食物中毒的主要病原(1)。用常规方法检测食品中的葡萄球菌是非常局限的,因为葡萄球菌肠毒素比菌体耐热,没能检查出菌体,不等于没有毒素存在。只有直接分析肠毒素,才能找到真正的病原。在过去由于可应用技术的复杂性,或方法灵敏度达不到要求而难以实现。目前现代化仪器设备的大幅度改进和提高,和分析技术的飞速发展,使得直接检查食品中肠毒素的方法成为可能。     

层析等电聚焦法提纯葡萄球菌肠毒素D

 我们成功地建立了层析等电聚焦的三步程序,分离提纯葡萄球菌D型肠毒素。首先用CG-50树脂吸附由细菌培养液中获得粗毒素,然后在PBE94柱上进行层析等电聚焦,最后经过Sephacryls-200过滤。纯化的SED纯度约98%,回收率89%,分子量为28500,pI 7.6。Western blot,免疫双向琼脂扩散的鉴定试验表明,纯化SED与其相应抗血清是特异性反应。     

金黄色葡萄球菌肠毒素中毒的免疫治疗策略

金黄色葡萄球菌肠毒素（staphylococcal enterotoxins,SEs）是由金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）分泌的一类具有呕吐活性的细菌外毒素，可引起严重的炎症反应和食物中毒。SEs具有超抗原活性，可与T细胞受体的可变区和MHC II类分子形成三元复合物（TCR-SEs-MHC II），直接刺激T淋巴细胞大量产生肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor α,TNF-α)、白介素（interleukin,IL）-2、IL-6和γ干扰素（interferon γ,IFN-γ）等细胞因子，从而导致中毒性休克综合征（toxicshocksyndrome, TSS）。在临床常见的SEs中，肠毒素A (staphylococcalenterotoxin A, SEA)和肠毒素B(staphylococcal enterotoxin B,SEB)是出现频率最高、毒性最大、危害最严重的两种。目前尚没有针对SEs中毒治疗策略的综述性研究。本文首先概述了SEs的分类、结构及毒性作用，重点围绕SEA和SEB，分析了TCR-SEs-MHC II类...     

金黄色葡萄球菌肠毒素B的主要检测研究方法

金黄色葡萄球菌是自然界中一种普遍存在的菌株,其分泌产生的肠毒素是一组结构相关,毒力相近的单肽链毒性蛋白质,主要包括A、B、Cs、D、E等血清型,广泛存在于蛋白含量较高的物质中。本文着重总结了当前对于金黄色葡萄球菌肠毒素的主要检测方法的研究进展,并对几种技术进行比较。     

用于检测葡萄球菌肠毒素的免疫芯片技术

免疫芯片是指包被在固相载体上的高密度抗原或抗体微点阵 ,是继基因芯片之后提出的一种新型的生物芯片。在检测大分子物质葡萄球菌肠毒素 (SE)时采用双抗体夹心法。检测时将SEA、SEB、SEC加入反应池中 ,反应后清洗掉未结合的SE ,再加入相应的标记抗体 ,形成固定抗体 待测物 标记抗体的夹心式结构。对影响免疫芯片检测效果的条件进行了优化 ,按优化后的条件进行SEA、SEB、SEC的检测 ,结果表明荧光信号强度随待测物浓度的增加而增加 ,当浓度高于一定值时 ,荧光信号强度趋于一定值 ,本法最低可检测 0.0 1 μg ml的SEA和SEB及 0.1 μg ml的SEC。将此项技术应用于环境和食品中污染物检测领域 ,将会使卫生监督工作水平得到明显的提高。     

金黄色葡萄球菌肠毒素检测的研究进展

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是一种重要的人畜共患致病菌,广泛存在于自然界中,其产生的肠毒素(staphylococcal enterotoxins,SE)可通过污染食物而导致食物中毒。目前,随着人们对食品安全重视度的加深,国际上已将肠毒素的检测列入食品检验法规,因此建立灵敏、快速的肠毒素检测方法,是食品安全检测的一项重要研究内容。     

金黄色葡萄球菌与肠毒素联合对白细胞水平恢复的研究

目的：探讨化疗后快速升高白细胞的水平。方法：取昆明种系小鼠40只,每只用0．3mg环磷酰胺腹腔注射制成小鼠骨髓抑制的动物模型,并随机分4组,给药后的3、5、7、14d分别腹腔注射肠毒素(I);菌体蛋白(Ⅱ);肠毒素加菌体蛋白(Ⅲ);盐水(Ⅳ),另取10只小鼠为空白对照(Ⅴ)。分别在每次给药前于眼脸采血,显微镜下查出每只小鼠的白细胞总数和分类计数,并计算出中性粒细胞和淋巴细胞绝对值相比较。结果：I、Ⅱ、Ⅲ组白细胞总数均在3d内开始升高,5或7d达高峰,实验组是对照组的8～10倍,以第Ⅲ组升高最为明显．各组白细胞水平在7d开始逐渐下降,到21d恢复到正常水平。虽然各实验组用药后白细胞水平明显升高,但中性粒细胞的分类数和绝对值升高的比例各不相同,其中第I组以淋巴细胞升高为主,第Ⅱ组以中性粒细胞升高为主,第Ⅲ组则以中性粒细胞和淋巴细胞平行升高。结论：以金黄色葡萄球菌菌体蛋白与肠毒素联合应用具有较好地升高化疗后血中中性粒细胞和淋巴细胞的作用。     

快速检测金黄色葡萄球菌肠毒素A基因方法的建立与应用

目的建立一种快速准确定量检测金黄色葡萄球菌肠毒素A的方法。方法以femB、SEA基因分别作为金黄色葡萄球菌菌株、肠毒素A的靶序列,设计合成引物和TaqM an探针;收集腹泻患者大便标本分离的金黄色葡萄球菌68株,并定量检测其肠毒素A。结果TaqM an探针荧光聚合酶链反应检测金黄色葡萄球和肠毒素A的灵敏度均为1.0×102拷贝。68株金黄色葡萄球菌中检出产肠毒素A菌株11例(16.2%,11/68),CT值为13.5~20.6。结论TaqM an探针荧光聚合酶链反应能够准确快速检测金黄色葡萄球菌肠毒素A。     

食品中金黄色葡萄球菌肠毒素的快速检测方法

采用反向被动乳胶凝集法 (RPLA)和mini VIDAS (ELFA)两种方法对 42份金黄色葡萄球菌阳性样品进行了肠毒素检测。结果RPLA法的金葡菌肠毒素检出率为 61.9% (P<0.05 )要高于ELFA法的检出率 50.0% (P <0.05 ) ,但检测时间长 ( 20h)。在实验中我们还发现 ,血浆凝固酶阴性的葡萄球菌也可产生肠毒素 ,其原因有待进一步的研究。     

葡萄球菌A型肠毒素的高效表达和分离纯化

根据已知葡萄球菌A型肠毒素 (SEA)的基因序列 ,用PCR从产毒标准株S .aureusFRI 10 0中扩增得到约70 0的SEA基因片段 ,并将该片段克隆至表达载体 pBV2 2 0中 ,实现了高效表达。表达产物以可溶性形式存在 ,表达的毒素用CM SephroseFF离子交换层析进行纯化 ,获得了高纯度的重组SEA ,SDS PAGE显示单一条带。ELISA试验证明所获重组SEA具有与天然SEA相似的免疫学性质。     

葡萄球菌肠毒素A全长基因的克隆和序列测定

分析和克隆超抗原（SAg）葡萄球菌肠毒素A（SEA）全长基因,为进行SAg基因应用于肿瘤导向治疗和基因治疗的研究奠定基础。设计并合成一对针对SEA全长基因的特异性引物,用PCR反应从产SEA的标准葡萄球菌菌株的基因组中扩增出SEA全长基因。PCR产物与克隆载体pGEM-T连接后进行基因序列测定。成功地从标准葡萄球菌菌株的基因组中扩增出一条约770bp的条带。基因序列测定表明,与巳发表的SEA全长基国序列完全一致。     

AlphaLISA检测金黄色葡萄球菌肠毒素E方法的建立

目的:利用AlphaLISA技术,建立新型均相检测方法,对金黄色葡萄球菌肠毒素E(SEE)进行检测。方法:采用2种SEE抗体建立AlphaLISA检测方法,羊抗肠毒多克隆抗体同受体微球偶联,SEE小鼠单克隆抗体标记生物素,并同偶联了亲和素的供体微球连接,3种组分与待测抗原形成双抗体夹心结构,680nm的光激发供体微球产生能量,将周围反应体系中的氧分子转变为激发态,并将能量传递给受体微球,产生520~620nm的荧光,荧光信号与抗原浓度正相关。对该方法的反应体系进行优化,验证其重复性、敏感性和特异性,并采用该方法检测菌液上清和食品模拟样本。结果:所建立的AlphaLISA检测方法重复性较好,批间变异系数和批内变异系数皆小于10%;检测SEE的灵敏度可以达到100pg/mL,并与其他几种毒素均无交叉反应,具有较好的特异性。该方法也能够准确地对金黄色葡萄球菌菌液上清中的SEE进行检测,对食品模拟样本的检测也有较好的灵敏度。结论:建立了检测SEE的AlphaLISA方法。该方法均相免洗,操作便捷,用时短,灵敏度更高,可对菌液上清和不同食品模拟样本中的SEE进行检测。     

PCR扩增葡萄球菌肠毒素A全长基因方法的建立及意义

为了分析和克隆葡萄球菌肠毒素（ＳＥ）Ａ全长基因,设计了一对针对ＳＥＡ全长基因的特异性引物,成功地用ＰＣＲ反应从标准产ＳＥＡ的葡萄球菌基因组中扩增出了一条约７７０ｂｐ的条带,为进一步用ＰＣＲ法克隆ＳＥＡ基因,并把它用于抗肿瘤研究奠定了实验基础     

金黄色葡萄球菌肠毒素B研究进展

金黄色葡萄球菌肠毒素B型(SEB)是一种典型的T细胞性超抗原,可引起T细胞多克隆活化。本文综述了金黄色葡萄球菌SEB的结构功能,生物学效应,诊断及治疗方面的研究进展,并重点介绍了金黄色葡萄球菌SEB的临床应用。