贵州省安龙县狂犬病的流行病学研究

为了探讨局部地区暴发流行的因素,对2004年与2005年间在贵州省安龙县及其周边发生的人间狂犬病进行个案调查,用直接免疫荧光法检测犬脑组织中的狂犬病毒抗原,用RT-PCR法扩增G基因片段,测定核苷酸序列并构建系统发生树进行遗传特征分析。自1994-2003年安龙县报告无人间狂犬病疫情,但于2004与2005年分别报告44例与27例人狂犬病。71例狂犬病患者中68人被犬所伤,3人被猫所伤。在有完整记录的69例患者中,潜伏期平均为47.5d(10～282),13例狂犬病患者的潜伏期≤15d(18.84%);32例的潜伏期≤30d(46.38%),尤其是在2004年的患者中,潜伏期≤20d的病例有13例,占30%。2005年在疫点周围采集的85只犬脑组织中,5只犬脑组织狂犬病毒抗原阳性,阳性率为5.88%。A13株与A48株病毒之间的G基因核苷酸序列同源性为86.5%,与已报道病毒株比较发现,A13株与广西分离株有最高的同源性,而A48株却与印度尼西亚分离株SN01-23的同源性最高。比较分析两株病毒G基因编码的氨基酸序列,发现包括GⅠ、GⅡ,以及GⅢ抗原位点内的区间,A13与A48分别有19和28个氨基酸位点发生了氨基酸的替代。用全G基因核苷酸序列进行系统分析发现,两株毒株全为Ⅰ型狂犬病毒。结果表明引起安龙县的狂犬病流行的病毒不是新型狂犬病毒,犬饲养量大与病毒携带率高是狂犬病发病暴发流行的直接原因。     

贵州省25株狂犬病病毒核蛋白基因序列分析

分析贵州省25株狂犬病病毒的核蛋白基因(N基因)序列,探讨贵州省狂犬病流行特征与狂犬病病毒变异情况。以RT-nested PCR检测来自贵州省2005年至2010年不同地区的病人脑组织、病人唾液以及犬脑组织标本狂犬病病毒RNA,经测序与拼接后得到25条N基因全长序列,采用生物信息学软件对N基因序列进行分析。25株狂犬病病毒核蛋白在核苷酸及氨基酸水平上彼此的同源性分别为89.3%～100%和98.%～100%;与国内其他省已发表基因1型狂犬病病毒核苷酸和氨基酸序列同源性分别为88%～99.1%和88%～99.7%,与已知的基因1型狂犬病病毒比较,25株病毒核蛋白氨基酸序列发生了若干位点的取代。进化树分析显示,同一地区内与相邻地区,以及同一时间段与相邻时间段内狂犬病病毒N基因进化亲缘关系相近。25株贵州省狂犬病病毒流行毒株均属基因1型,其核蛋白在基因的核苷酸及推导的氨基酸水平上均有变异,且这些变异具有地域和时间分布特性。     

我国狂犬病流行现状及检测预防

狂犬病是动物源性传染病,可引起人类感染。一旦发病,死亡率近乎100%,目前尚无有效治疗方法。介绍了狂犬病病毒的生物学性状,阐述了狂犬病在我国的流行现状及新近发展的诊断技术及预防措施,有利于狂犬病在中国的控制和消除。     

伪狂犬病病毒基因缺失疫苗制苗用毒种特性研究

本试验通过对PRV基因缺失株SA215(gE-/gI-/TK- )细胞培养特性、理化特性及形态发生过程进行研究,来确定gE、gI和TK 基因缺失对病毒特性的影响。结果表明,基因缺失对该毒株在培养细胞的吸附和穿入过程没有影响,但与亲本株相比,表现为生长掩蔽期延长,增殖速度减缓,但能达到相似的增殖滴度,并且基因缺失对病毒的理化特性影响很小。形态发生过程观察结果表明,PRV SA215 株在细胞培养上形态发生正常,能形成感染性病毒粒子,但在由核膜出芽和囊膜形成上受到一定程度的阻碍。本研究为疫苗研制和生产提供指导和依据。     

伪狂犬病病毒基因缺失疫苗制苗用毒种特性研究

本试验通过对PRV基因缺失株SA215(gE -/gI -/TK -)细胞培养特性、理化特性及形态发生过程进行研究,来确定gE、gI和TK基因缺失对病毒特性的影响.结果表明,基因缺失对该毒株在培养细胞的吸附和穿入过程没有影响,但与亲本株相比,表现为生长掩蔽期延长,增殖速度减缓,但能达到相似的增殖滴度,并且基因缺失对病毒的理化特性影响很小.形态发生过程观察结果表明,PRV SA215株在细胞培养上形态发生正常,能形成感染性病毒粒子,但在由核膜出芽和囊膜形成上受到一定程度的阻碍.本研究为疫苗研制和生产提供指导和依据.     

韶关市2008—2011年手足口病流行病学特征分析

目的了解韶关市2008—2011年手足口病流行特征,为降低该病的发病率提供决策依据。方法依据卫生部2008年版下发的手足口病诊断标准、防控指南,进行诊断、流行病学调查、标本采集。用描述流行病学方法对手足口病病例进行分析,并对人份标本进行逆转录酶反应(RT-PCR)核酸测定。结果韶关市4年共报告手足口病例14 076例,手足口病发病有明显的季节性,4～6月为发病高峰期,占全年报告总数的63.34%。发病人群以男性(男∶女=1.89∶1)5岁以下散居儿童为主,占总发病数的93.11%。4年的手足口病主要由EV71和其他肠道病毒混合感染引起,死亡病例主要由EV71感染引起。聚集性病例主要发生在个体托幼机构,占77.46%。散居或家庭聚集性病例占22.54%。结论当前手足口病是严重危害韶关市低年龄组儿童身体健康和生命安全的重要公共卫生问题,要不断加强环境及个人卫生条件的改善,普及健康教育。     

伪狂犬病病毒鄂A株包膜糖蛋白gD基因的克隆与表达

克隆了伪狂犬病病毒鄂A株编码包膜糖蛋白gD的基因并进行了序列测定 ,与国外报道的Rice株相比 ,其核苷酸序列具有 98%的同源性 ,推导氨基酸序列同源性为 97%。将此基因克隆于具有全期启动子盒的杆状病毒转移载体pSX35A中 ,构建成重组转移质粒pSX35A gD ,与致死缺失型线性化苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒 (AcMNPV OCC- )基因组DNA一起共转染粉纹夜蛾Hi5细胞 ,经同源重组 ,获得含gD基因的重组病毒AcMNPV OCC+ gD。重组病毒经空斑纯化后感染Hi5细胞进行表达分析 ,细胞裂解物的SDS PAGE及Western Blot ting均显示分子量约 47kD的gD蛋白得到了特异性表达 ,其表达量占细胞总蛋白的 6 2 % ,表达的gD蛋白具有免疫原性。     

狂犬病免疫学的研究动向

本文着重从细胞培养疫苗,免疫机制和免疫诊断检测三方面简要评述了狂犬免疫学的最新研究进展,对狂犬病防治研究及临床实践有指导作用。     

广西容县84例狂犬病流行病学分析及预防对策

目的 通过对容县2000～2007年84例狂犬病流行病学特点进行分析,探讨流行回升的因素,分析目前防治过程中存在的问题,提出狂犬病的预防对策和措施.方法 收集2000～2007年容县狂犬病疫情报告资料及对狂犬病病例的个案调查资料进行分析.结果 近年来,容县狂犬病疫情明显上升,成为有史以来流行高峰,最高年发病率3.04/10万.发病以农民,学生为主,男性多于女性,全年均有病例发生,无明显季节性,狂犬病暴露动物以犬伤为主,暴露部位以头颈部为最危险,潜伏期最短.结论 为有效预防狂犬病流行,应进一步建立完善犬类的管理的法律、法规,使预防狂犬病进入法制轨道,以有效控制狂犬病流行.伤后未能及时正确处理,暴露后免疫率低,是狂犬病发生的重要原因.加强宣传,提高狂犬病的防控知识,政府部门齐抓共管,采取综合性防控措施,才能有效控制狂犬病的流行.     

伪狂犬病基因缺失疫苗的研究进展

伪狂犬病是由疱疹病毒科伪狂犬病病毒引起的多种畜、禽及野生动物的一种急性传染病.动物感染后表现为从隐性临床症状到严重的呼吸道和神经症状综合症.该病给世界养猪业造成巨大的损失,目前预防该病主要是以疫苗接种为主.综述了当今广泛应用的伪狂犬病基因缺失疫苗的研究现状和进展.     

采用数据挖掘技术对湖北省人类狂犬病开展生物信息学研究

狂犬病作为一种急性人畜共患疾病,其致死率接近100％.而湖北省作为我国中部狂犬病高发地之一,开展该省狂犬病的流行病学调查不仅有助于了解我国当前面临的狂犬病疫情风险,还能为当地及全国狂犬病防控工作提供有效的参考意见.首先运用描述性分析发现湖北省狂犬病发病人数随时间呈下降趋势,而狂犬病暴露人数则呈上升趋势,且近年来中西部地...     

Molecular characterization of viral G gene in emerging and Re-emerging areas of rabies in China, 2007 to 2011

In recent years (2007 to 2011),although the overall number of rabies cases in China has decreased,there is evidence of emerging or re-emerging cases in regions without previous rabies cases or with low...     

广西12株狂犬病野毒株的g基因序列测定与分析

对广西12株狂犬病病毒株g基因全序列进行测序分析,结果显示:广西毒株属于I型,可分为3个群,即Ⅰ群、Ⅱ群和Ⅲ群。GX01、GX08、GX09、GX014、GX091、GX195、GX260、GXLA8株为Ⅰ群,GX219、GX074、GXBM3株为Ⅱ群,GXN119株为Ⅲ群。Ⅰ群的广西毒株g基因核苷酸的同源性为97.6%～99.9%,氨基酸同源性在97.7%～100%之间;Ⅱ群的核苷酸的同源性为98.2%～99.0%,氨基酸的同源性在98.5%～99.2%之间。糖蛋白在主要的抗原位点GI、GⅡ区以及与中和抗原有关的36、263、367位氨基酸没有变异,GⅢ区上只有Ⅱ群在332位缬氨酸变异为异亮氨酸,G蛋白上的氨基酸主要在-2、-5、-13、-14、-15、-16、90、96、132、140、156、168、170、204、241、249、253、264、289、332、382、427、436、445、463、474位共26个氨基酸发生了变异,这些氨基酸的变异具有群的特异性。     

狂犬病毒蚀斑方法在病毒研究和疫苗研制中的应用

本文采用狂犬病毒CTN-1和4aC株,经Vero细胞传代适应后,以Vero细胞为培养基质,建立了狂犬病毒蚀斑试验和蚀斑减少试验的方法。目前已将此方法应用于病毒鉴定、病毒克隆、病毒滴定以及抗狂犬血清的检测,并取得了较好的结果。     

双表达狂犬病毒基因的非复制型痘苗病毒改建及免疫效果

为减少重组病毒非必需外源基因,进一步提高非复制重组痘苗病毒狂犬病疫苗的安全性,本研究改建不含报道基因LacZ的双表达狂犬病毒aG株G、N的非复制重组痘苗病毒VTKRGΔCKRN。采用G418-neo富集、蓝白斑及免疫蚀斑筛选等方法,以表达狂犬病毒糖蛋白(RG)基因的非复制重组痘苗病毒VTKRG△CKlacZ作为亲本株,利用同源重组原理,删除C与K片断间lacZ,并将狂犬病毒核蛋白(RN)基因插入C-K片段间。经核酸及蛋白水平检测表明VTKRGΔCKRN能同时稳定有效地表达狂犬病毒G和N,并具有非复制病毒生长特性。重组病毒裸鼠毒力实验表明VTKRG△CKRN较复制型重组痘苗病毒VTKRG病毒毒力显著减弱。VTKRGΔCKRN免疫小鼠可诱生较高有效中和抗体,并能保护小鼠免于致死剂量狂犬病毒攻击。以1.6×106PFU较低免疫剂量、仅一次免疫狗可保护狗经致死量中国狂犬病毒街毒株SBD株攻击后存活,诱生具有保护性中和抗体。非复制狂犬-痘苗重组病毒VTKRGΔCKRN免疫效果好、更具安全性。     

贵州省赤水县桫椤调查初报

国家一级重点保护植物桫椤,目前世界上少数国家尚存,国内除华南、西南地区及台湾等少数省份外亦不多见。其中贵州省赤水县桫椤不仅面积广,且数量多,生长旺。据不完全统计,全县35个乡中,有20个乡有分布,面积     

双表达狂犬病毒基因的非复制型痘苗病毒改建及免疫效果

为减少重组病毒非必需外源基因,进一步提高非复制重组痘苗病毒狂犬病疫苗的安全性,本研究改建不含报道基因LacZ的双表达狂犬病毒Ag株G、N的非复制重组痘苗病毒VTKRG△CKRN.采用G418-neo富集、蓝白斑及免疫蚀斑筛选等方法,以表达狂犬病毒糖蛋白(RG)基因的非复制重组痘苗病毒VTKRG△CKlacZ作为亲本株,利用同源重组原理,删除C与K片断间lacZ,并将狂犬病毒核蛋白(RN)基因插入C-K片段间.经核酸及蛋白水平检测表明VTKRG△CKRN能同时稳定有效地表达狂犬病毒G和N,并具有非复制病毒生长特性.重组病毒裸鼠毒力实验表明VTKRG△CKRN较复制型重组痘苗病毒VTKRG病毒毒力显著减弱.VTKRG△CKRN免疫小鼠可诱生较高有效中和抗体,并能保护小鼠免于致死剂量狂犬病毒攻击.以1.6×106PFU较低免疫剂量、仅一次免疫狗可保护狗经致死量中国狂犬病毒街毒株SBD株攻击后存活,诱生具有保护性中和抗体.非复制狂犬-痘苗重组病毒VTKRG△CKRN免疫效果好、更具安全性.     

Gene frequency of five genetic characteristics in six nationalities in Southern Guizhou Province, China

Five characteristics (hair forms, nasal profile, nostril forms, mongoloid fold and upper eyelid fold) were respectively investigated in six nationalities, including the Buyi, Miao, Shui, Maonan, Dong, and Han nationalities in Southern Guizhou, China. The gene frequencies of five characteristics in the six nationalities were estimated and compared. The results indicated that: (1) for hair forms and nasal profile, the frequency of the dominant gene was lower than that of their recessive gene, but the opposite was true for nostril forms. (2) Among different nationalities, the difference of gene frequency of the mongoloid fold, nasal profile, hair forms and upper eyelid fold was quite significant, which was followed by that of nostril forms. __________ Translated from Hereditas, 2006, 28(4): 399–402 [译自: 遗传]     

狂犬病毒核蛋白（NP）的纯化及其免疫原性的研究

对重组痘苗毒和重杆状病毒表达的狂犬病毒NP及原代地鼠肾细胞培养的狂犬病毒核衣壳蛋白（RNP）、先经Sepharose CL 4B分子筛柱初步提纯,再经抗狂犬病毒NP McAB 2C12-S-epharose 4B亲和层析柱纯化分离,经ELISA、SDS－PAGE电泳和Western-Blot分析证实,获得了高纯度和免疫反应性的NP和RNP。以相同剂量的纯化蛋白免疫小鼠,RNP和两种重组NP均可诱生特异的抗NP抗体,三种蛋白间无明显差异;狂犬病毒CVS株攻击保护实验结果显示,三种蛋白免疫的小鼠存活率约为50％;两种重组NP的免疫反应性和免疫原性与天然狂犬病毒RNP相似。