用聚乙二醇诱导选定的成对原生质体间的融合

用微吸管选取单对原生质体,在含聚乙二醇（ＰＥＧ）的微滴中诱导融合。此法克服了常规的ＰＥＧ群体融合方法中的盲目性,能排除一方亲本原生质体自相融合和多个原生质体的融合,以及未融合的原生质体的混杂,保证融合产物来自选定的成对原生质体,从而使ＰＥＧ融合技术精确化。此法在植物细胞工程和细胞生物学研究中有广泛的应用前景     

酿酒酵母原生质体的融合

原生质体融合技术开始于动植物细胞,特别是Willin等报道了PEG有助于高等植物细胞原生质体融合以后,这一技术广泛地应用于植物、微生物原生质体的融合和动物细胞的融合。原生质体的制备、培养、融合和发育为研究细胞分化、膜结构与功能、定向育种等生物学     

栽培稻与4种野生稻的原生质体融合

野生稻具有许多优良性状,是水稻遗传改良的重要物质基础。为了探讨应用原生质体融合技术转移野生稻有利基因的途径,进行了栽培用与4种野生稻融合试验。总计6·28×107个野生稻原生质体与栽培稻原生质体进行了电激融合。获得了4364块愈伤组织,再生了490个植株。试验了Y射线处理野生稻原生质体的有效剂量和碘代乙酰胺抑制栽培稻原生质体生长的浓度。探讨了原生质体来源对融合效果的影响,讨论了融合亲和性问题。     

凤尾菇和盖囊侧耳原生质体非对称融合的研究

盖囊侧耳的双核体原生质体经过灭活处理作为供体与带有营养缺陷型标记的凤尾菇单核体原生质体受体融合,得到大量生长速度和菌落形态差异较大的融合子,这些融合子主要显示了供体菌株的特性,数次转接和进行原生质体再分离后,有的融合子再生菌株恢复了供体亲本的遗传特性,同时获得了一些新的生理特证。结果表明原生质体非对称融合可以作为食用菌原生质体融合育种的一种有效方式。     

凤尾菇和盖囊侧耳原生质体非对称融合的研究

盖囊侧耳的双核本原生质体经过灭活处理作为供体与带有营养缺陷型标记的凤尾菇单核体原生质体受体融合,得以大量生长速度和菌落形态差交大的融合子,这些融合子主要显示了供体菌株的特性,数次转接和进行原生质体再分离后,有的融合子再生菌株恢复了供体亲本的遗传特性,同时获得了一些新的生理特证。结果表明原生质体非对称融合可以作为食用菌原生质体融合育种的一种有效方式。     

林青链霉菌双亲灭活原生质体融合的研究

分别以紫外线、热灭活性林肯链霉菌947和9502原生质体,然后进行灭活双亲的原生质体融合,从16株融合子筛选到林青霉素高产株。用双亲的互补营养缺陷型对林肯链霉菌原生质体的制备、融合、再生的部分条件进行了研究。发现含0．4％Gly和34％蔗糖的SM培养基最适于实验菌株原生质体的制备、再生。聚乙二醇（PEG）分子量对原生质体融合影响不大,其在P缓冲液中的浓度却很重要。含50％PEG的P缓冲液最有利于原生质体融合。     

林肯链霉菌双亲灭活原生质体融合的研究

分别以紫外线、热灭活林肯链霉菌 94 7和 95 0 2原生质体 ,然后进行灭活双亲的原生质体融合 ,从 1 6株融合子筛选到林肯霉素高产株。用双亲的互补营养缺陷型对林肯链霉菌原生质体的制备、融合、再生的部分条件进行了研究。发现含 0 .4 %Gly和 34 %蔗糖的SM培养基最适于实验菌株原生质体的制备、再生。聚乙二醇 (PEG)分子量对原生质体融合影响不大 ,其在P缓冲液中的浓度却很重要。含 5 0 %PEG的P缓冲液最有利于原生质体融合     

原生质体融合技术在香菇育种中的应用

对香菇原生质体融合技术以及其融合育种研究作了简要介绍,并初步阐明原生质体融合育种的理论与实际意义。     

真菌原生质体融合技术的新进展

原生质体融合具有许多常规杂交方法所无法比拟韵独到之处,生物学研咒手段的不断创新,使原生质体融合技术正在逐步完善。近几年来,在原生质体融合的基础研究及应用研究领域中,都有相当大的进展。     

念珠菌属原生质体形成与融合的基础研究

一本文对主要条件致病性念珠菌属进行了原生质体形成.再生及种间:属间融合的基础研究。对融合产物进行了生物特性的观察。结果表明:念珠菌属可形成原生质体,其原生质体在一定条件下可互栩融合,其融合产物的生物特性可与亲株不同。白色念珠菌与其它种间,酵母菌属间的融合产物,对小白鼠无致病性。细胞融合是近年来发展起来的一项微生物育种新技术,它是通过两亲株原生质体融合而达到杂交目的的(王俊英,1982)。在细胞工程中,原生质体分离、培养、融合和发育技术是十分重要的。为将这一技术应用于防病治病,我们试对主要条件致病性念珠菌属进行了原生质体的分离.再生及融合的基础研究。     

棒状杆菌灭活原生质体种间融合

原生质体融合技术越来越广泛地应用于遗传学基础理论和工业育种研究,且融合的方法不断改进。近来报道用灭活的亲株原生质体融合也能达到遗传重组:用链霉素灭活枯草芽孢杆菌原生质体、热灭活巨大芽孢杆菌原生     

利用米曲霉自身溶壁酶制备原生质体的研究

真菌原生质体融合作为生物工程的一种新技术,日益受到了人们广泛的重视,而制备原生质体则是原生质体融合的前提。各种真菌细胞壁的结构与化学组成不尽相同,因此制备不同种真菌的原生质体所要求的溶壁酶也有差异。曲霉制备原生质体一般可采用蜗牛酶,但米曲霉     

微生物原生质体融合育种技术及其应用

工业微生物菌种选育在发酵工业中占有重要地位。微生物原生质体融合(microbial protoplast fusion)技术具有重组频率高、受结合型或致育型限制小以及遗传物质传递完整等优点,是微生物育种最常用的方法之一。结合相关研究进展,分析了原生质体融合技术的组成,包括制备、再生、融合的影响因素以及融合子的筛选方法,重点评述了原生质体融合技术应用在微生物育种中的最新进展,以及微生物原生质体融合技术的发展前景。     

不同离子对原生质体表面电荷和融合的影响

原生质体融合的一个先决条件是不同亲本的原生质体首先发生粘连。有些工作证明原生质体的表面带有负电荷,其电位从负十几毫伏到负五十几毫伏不等。这一特性无疑地会影响原生质体的粘连和融合。此外也有一些结果表明,CaCl_2、NaNO_3、多聚氨基酸、某些蛋白质或磷酯可以降低原生质体的表面负电位;甚至还能将负电荷转变为正电荷。如果这些物质对原生质体的正常功能没有损害,则将有助于提高原生质体的融合率。     

大型真菌原生质体融合技术研究进展

原生质体融合技术是近些年来迅速发展起来的细胞工程育种新技术,它具有许多常规杂交方法所无法比拟的独到之处。随着生物学研究手段的不断创新,使得原生质体融合技术正在逐步完善。本文综述了原生质体融合技术在大型真菌遗传方面的研究进展。     

烟草花粉原生质体与叶肉原生质体的融合及培养早期变化

用ＰＥＧ—高Ｃａ高ＰＨ法诱导抗卡那霉素的烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍ）品系Ｎ３６４＋Ｋｍ＋花粉原生质体和黄花烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｒｕｓｔｉｃａ）叶肉原生质体融合。幼嫩花粉原生质体和叶肉原生质体之间的融合体培养启动胚胎发生分裂,经卡那霉素筛选后,少数多细胞团存活并形成小愈伤组织。成熟花粉原生质体与叶肉原生质体之间的融合体则仅产生管状结构。这一结果表明,作为融合一方的花粉原生质体的发育时期对融合产物的发育途径有重要影响。     

原生质体灭活供体在食用菌融合中的应用初探

原生质体融合是进行遗传育种研究的重要手段,可是亲本菌株遗传标记的诱变筛选既费时费力,又会带来一些不良突变;远缘融合中细胞核的不亲和性,以及融合率普遍较低等问题阻碍了原生质体融合发展。国内外已有关于利用灭活原生质体作为供体与带有遗传标记的受体进行融合的...     

普通番茄叶肉原生质体和多毛番茄茎尖原生质体的电融合

普通番茄叶肉原生质体和多毛番茄茎尖原生质体在一交变电场中(正弦波;1mHz,200v/cm)可发生双向电泳而随机排列成串。再附加单个直流方波脉冲,可诱导相邻原生质体的融合,适宜的融合脉宽为40μs,电压幅度为3000v/cm。最高融合率可达57%。培养经电融合处理的原生质体,观察到了少数原生质体的第1次分裂。     

微生物原生质体技术

从影响原生质体制备、再生的因素、原生质体融合、原生质体诱为、原生质体再生育种、原生质体转化和原生质体固定化等几个方面,较为全面地介绍了目前原生质体技术的发展现状,对相关机制和技术环节作了简要概述。     

螯合剂对原生质体融合的影响

螯合剂对原生质体融合的影响王建华（中国农业科学院饲料研究所北京１０００８１）赵学慧（华中农业大学食品微生物学研究室武汉４３００７０）自从Ｋａｏ［１］发现聚乙二醇（ＰＥＧ）能高效介导植物原生质体融合以来,至今它仍不失其作为植物、微生物原生质体促融合剂的...