对斐林试剂和双缩脲试剂应用的探究

人教社新版高中《生物》第1册教材中有“实验-生物组织中可溶性还原糖、蛋白质、脂肪的鉴定”的实验。可溶性还原糖用斐林试剂鉴定,蛋白质用双缩脲试剂鉴定。斐林试剂与双缩脲试剂都是由甲液（NaOH）和乙液（CuSO4）组成,参加鉴定反应时,却是以不同的反应物身分出现。但是,它们是否可以互换？在使用时是否可以颠倒加入的顺序等？为此笔者做了实验探究．现简述如下供大家探讨。     

再谈斐林试剂和双缩脲试剂的应用

在中学生物学教学中斐林试剂用于生物组织中还原糖的鉴定,在加热的条件下会产生砖红色的Cu2O沉淀：双缩脲试剂用于生物组织中蛋白质的鉴定,结果产生紫色络合物,有紫色现象生成。但两者的化学成分都是CuSO4和NaOH,笔者通过实验探究发现,在实验中只要注意用量,试剂加入的顺序和互用都不影响实验结果。     

斐林试剂与双缩脲试剂的比较

斐林（Fehling）试剂与双缩脲试剂都主要由NaOH和CuSO42种成分配制而成,常用于某些物质的定性或定量鉴定。然而当它们用于鉴定物质时有如下不同之处。     

用徒手切片法鉴定生物组织中的有机物

1　可溶性还原糖的鉴定切下一片极薄的梨肉薄片 ,放在载玻片上 ,加 2滴刚配制的斐林试剂 ,把载玻片在酒精灯上加热片刻 (注意受热均匀 ) ,盖上盖玻片 ,在显微镜下可看到多边形梨肉细胞内分散着许多砖红色的小颗粒。2　淀粉的鉴定取一小块马铃薯 ,用刀片刮些马铃薯泥放在载玻片上 ,滴上 2滴碘液 ,盖上盖玻片 ,在低倍显微镜下 ,可找到清晰的淀粉颗粒 ,转到高倍镜 ,可看到马铃薯细胞内 ,含有大量圆形或椭圆形的蓝紫色的颗粒。3　蛋白质的鉴定取新鲜的大豆种子 (去种皮 ) ,用刀片切下极薄的一片放在载玻片上 ,先滴 2滴质量浓度为 0 .1g/ m L的…     

生物素一亲和素系统试剂及其应用的研究I．试剂的制备和鉴定

本文报道生物索－亲和素系统(Bas)成套试剂的制备及其鉴定结果。活化生物素BNHs由生物素与羟基丁二酰亚胺脱水缩台而成。亲和素用cMc柱二次梯度层桁法从鸡蛋清中提取。生物素化羊抗兔(b—Sarg)和生物索化过氧化物酶(b-HRP)分别由Sarg和HRP与BNHs反应获得。经鉴定,上述四种试剂均符合要求。通过Abc ELIsA法检测兔抗人Ig表明,用全套自制的Bas试剂所得结果与进口产品一致,其灵敏度可达1：256000以上,超过常规ELIsA水平。现正进行Bas免疫酶法与其它免疫酶测定法的对比试验,并用Bas检测其它免疫反应体系,同时将研制成套Bas试剂盒。     

国产生化试剂福司可林研制成功

福司可林(forskolin)是医学和生物化学中研究环核苷酸系统的良好试剂,用途广泛。目前从sigma公司进口此生化试剂,价格昂贵,且不易买到。中国科学院动物研究所立足于国内资源,已研究开发出了这种生化试剂。经研究单位实验证明,此试剂与sigma     

CELL-DYN1700血液分析仪试剂的研制与应用

目的　为了降低实验成本而研制一种稳定性、准确性良好的配套试剂。　方法　研制试剂采用Na Cl、 Na HPO4、 KH2 PO4、 EDTA- Na2 为稀释液 ,稀释中加入适量酶、表面活性剂为清洗液 ,CH3( CH2 ) 11N+ ( CH3) 3Br-为溶血剂。测定两种试剂的理化指标、Hb吸收光谱、溶血速度 ,以及清洁度的比较 ;并在 CELL- DYN170 0血液分析仪上进行两种试剂的对比试验。　结果　与进口试剂比较 ,重复性、准确性、稳定性 ,两者无显著性差异 ( P >0 .0 5,平均 r=0 .96 831) ,研制试剂通过测定 CELL- DYN系列专用质控品试验 ,结果与靶值很接近 ,准确性良好 ,试剂存放半年 ,检测本底几乎为零。　结论　研制试剂可替代进口试剂用于临床 ,成本约为进口试剂的 2 0 % ,临床应用效果满意     

糖的有色试剂标记微量测定法

本文报告用有色试剂4-N,N-二甲氨基-4′-氨基偶氮苯标记还原糖。标记产物可在聚酰胺薄膜上经双向层析分离鉴定。用盐酸熏后,标记产物由黄绿色转为蓝紫色。灵敏度达10~(-9)～10~(-10)克分子糖。本法可鉴定寡糖的组成成分和聚合度;结合酶解可鉴定寡糖的还原末端。     

糖的有色试剂标记微量测定法

本文报告用有色试剂4-N,N-二甲氨基-4'-氨基偶氮苯标记还原糖。标记产物可在聚酰胺薄膜上经双向层析分离鉴定。用盐酸熏后,标记产物由黄绿色转为蓝紫色。灵敏度达10~(-9)～10~(-10)克分子糖。本法可鉴定寡糖的组成成分和聚合度;结合酶解可鉴定寡糖的还原末端。     

几点小建议

全日制普通高中教科书（试验本）中新增加生物组织中可溶性糖、脂肪、蛋白质的鉴定。其中,实验原理中某些试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。如可溶性糖中的还原糖,除与斐林试剂发生作用外还可用银氨溶液等。即在１支洁净的试管里加入２％硝酸银溶液２ｍｌ,同时逐滴加入２％稀氨水,直到析出氧化银恰好溶解为止,所得澄清溶液就是银氨溶液试剂。在盛着银氨溶液的试管里加入可溶性还原糖。把试管放在水浴里加热３～５ｍｉｎ,即出现银镜,这就是有名的银镜反应。还有,在试管里加入１０％氢氧化钠溶液２ｍｌ,滴加…     

鲎试剂在抗淋巴细胞免疫球蛋白热原检测中的应用

报道了鲎试剂在抗淋巴细胞免疫球蛋白内毒素检查中的应用。在用鲎试剂检测细菌内毒素时 ,按中国药典的要求对鲎试剂灵敏度进行标定 ,并作干扰实验 (增强或抑制实验 ) ,然后用鲎试法与家兔法同时测定 15批抗淋巴细胞免疫球蛋白。结果发现三批鲎试剂的灵敏度标示值均正确 ,五批抗淋巴细胞免疫球蛋白半成品在最大有效稀释度 (MVD)时对试验无干扰 ,这两种方法测定结果的符合率达到 91.7%。从而表明鲎试法很有可能代替家兔法     

开放试剂在罗氏生化分析仪使用评价

目的评价开放试剂在罗氏全自动生化分析仪(cobas8000-c702)上使用情况方法使用开放性试剂[三酞甘油(TG),丙氨酸氨基转移酶(ALT),碱性磷酸酶(ALP),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),总胆固醇(TC),γ-谷氨酞基转移酶(GGT)]由利徳曼厂家提供,以上开放试剂的分析类型,方法原理,试剂组分以及试剂的组成均使用效果合理,且使用开放试剂混合的血清来作为量值传递的载体,用其开放性试剂校准后在对cafs校准品进行赋值,并且对cafs校准品及开放性试剂组成测定的系统进行赋值。结果开放性试剂在检测高值还是低值的血清结果是,批内以及批间的变异系数(CV)均小于5%,这样就开放试剂同时在检测60份临床样本时,所测的结果基本就保持一致(P0.05),相关系数(r)均0.968。开放试剂之间的自比对实验结果,在医学上决定水平处的偏倚都是低于允许误差的范围。试剂的抗干扰能力就没有明显的差异,r值均大于0.968(P0.05)[1]。结论开放试剂在罗氏全自动生化分析上相关性较好、精密度高、偏差小,抗干扰能力强等优点;其检验的结果也具有一定溯源性以及可比性。     

国产放射免疫试剂与Abbott放射免疫试剂检测乙型肝炎病毒感染指征的比较

本文报告了国产乙型肝炎病毒(HBV)RIA和Abbott RIA诊断试剂盒检测质量的比较研究。表明两试剂滴定HBsAg、抗-HBs、抗-HBc阳性血清的敏感性相似,抗-HBs mIU/ml定量检测结果相符。证明国产RIA试剂质量是可靠的。但是,国产试剂S/N值曲线的陡度和标本的阳性检出率较Abbott试剂为高,可能与试剂出厂后周转期短有关。适当提高国产试剂阳性判定标准后,与Abbott试剂的检测符合率可达90％以上。     

酚顿试剂对竹林土壤中酚类化合物的降解作用

酚类化合物是农业和生态系统中主要的化感物质之一,大量积累在土壤中,抑制作物和林下植物生长,导致农作物减产、连作障碍和自然生态环境破坏。用过氧化氢(H2O2)与硫酸亚铁(Fe2 )所组成的酚顿试剂研究了化学氧化法对化感物质(对香豆酸、对羟基苯甲酸和胡桃醌)、竹林土壤提取物及竹林土壤中对香豆酸的降解作用。过氧化氢与硫酸亚铁的摩尔比为15:1的酚顿试剂,过氧化氢与酚类物质浓度比为8:1时,对酚类物质的降解效率最高。以8×10-3mol/L(0.028%)的H2O2,5.4×10-4mol/L(0.075%)的FeSO4和10-3mol/L的酚类物质组成的反应体系中,反应10min和30min后,对香豆酸的降解率分别为55%和74%;对羟基苯甲酸的降解率在10min时达90%以上;而胡桃醌在10min时已经完全被降解。酚顿试剂处理土壤酚类提取物时,可使其中主要的化感物质对香豆酸降解75%。用含0.1%和1%H2O2的酚顿试剂处理竹(Bambusa chungii)林土壤,土壤对香豆酸的降解率分别为32%和37%。竹林土壤中存在过氧化氢酶和过氧化物酶活性,但没有检测到超氧化物歧化酶活性。土壤中的过氧化氢酶和过氧化物酶可能迅速分解外加的过氧化氢,一方面缩短过氧化氢处理的作用时间和降低降解效率,另一方面可分解过剩的过氧化氢。这说明酚顿试剂是降解土壤和培养液中有害化感物质的有效化学氧化剂。     

血型检测用反向定型试剂的研制

将正常的红细胞在特定条件下用甲醛处理,使红细胞膜固定但不影响膜表面糖蛋白血型抗原的活性。采用与正向定型相同的平板凝集试验方法,４０６０份血样正向和反向定型结果完全一致。经稳定性观察９０天,处理后的红细胞与相应抗体的凝集性能未见明显改变。实验结果表明本文介绍的红细胞试剂可用于ＡＢＯ血型鉴定的反向定型试验。     

新型冠状病毒抗体检测试剂的临床性能评估方案

新型冠状病毒肺炎(COVID-19)已在全球形成大流行,目前其确诊主要依靠病毒核酸检测,但核酸检测存在漏诊及对检测条件要求较高等不足。与核酸检测相比,抗体检测通常具有普及面广、样品采集便捷、容易实现高通量、成本低等优点,与核酸检测联合应用可有效弥补核酸检测的缺陷。本研究设计了评价新型冠状病毒(SARS-CoV-2)抗体检测试剂盒的详细方案,包括对研究对象、样本量评估、纳入及排除标准、盲法设计、实验标本、伦理、研究管理及质量控制、数据管理与统计分析、结果报告的具体内容和考量,旨在帮助使用者在大规模应用抗体检测试剂前系统地评估抗体检测试剂的灵敏度、特异度等关键临床性能,以根据各自的检测目的在不同抗体检测试剂中做出合理的选择提供参考。     

如何验证种子里含有蛋白质

在清水中揉洗面团,最后剩下的胶状物就是蛋白质。在此基础上如果再用实验加以验证则更有说服力。验证方法是:在载玻片上滴2滴米伦试剂,取上述胶状物一小块压扁放上,并在其上再滴2滴米伦试剂。隔石棉网用酒精灯     

酶联免疫破伤风抗体定量试剂的研制及应用

制备一种精确的破伤风抗体定量试剂,用于人源破伤风抗体的定量及人群破伤风抗体水平的测定。以人源破伤风免疫球蛋白国家标准品建立定量反应曲线,经系统优化后建立双抗原夹心法定量检测系统。定量反应曲线显示,抗体浓度在10~120m IU/m l之间,相关系数r=0.9993。精密度(CV)≤7%。实际应用验证,未经(TTC)免疫的献血员中,具有保护性抗体水平(0.01 IU/m l)的比例只占12.2%。经3针(TTC)免疫后,抗体水平均大于0.01 IU/m l,经动物体内中和试验法(NT)定量的3批破伤风免疫球蛋白,用制备的酶联免疫破伤风抗体定量试剂测定,其回收率分别为109%、98%和93%。结论,该试剂可用于破伤风抗体的精确定量。     

四种丙型肝炎病毒抗体试剂检测方法的性能评估

对血液筛查的四种丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)抗体试剂检测方法的性能进行评估。方法采用协作标定方式,应用四种检测方法(间接ELISA法、双抗原夹心ELISA法、间接CLIA法、双抗原夹心CLIA法)16种HCV抗体试剂,对经确证筛选出的70份(HCV抗体阳性35份、阴性35份)血浆样本进行检测,通过分析阳性、阴性符合率,评估四种方法 HCV抗体试剂的性能。结果间接ELISA法试剂检测阳性符合率为88.6%(31/35)~94.3%(33/35),双抗原夹心ELISA法、间接CLIA法、双抗原夹心CLIA法试剂检测阳性符合率为91.4%(32/35)~94.3%(33/35),四种检测方法 HCV抗体试剂阳性符合率之间的差异无统计学意义(P0.05);间接ELISA法和间接CLIA法试剂弱阳性样本检出率为11.4%(4/35)~31.4%(11/35),双抗原夹心ELISA法和双抗原夹心CLIA法试剂弱阳性样本检出率为5.7%(2/35)~11.4%(4/35),四种检测方法 HCV抗体试剂对弱阳性样本的检出率之间的差异有统计学意义(P0.05);间接ELISA法试剂检测阴性符合率分别为94.3%(33/35)~100%(35/35),间接CLIA法试剂阴性符合率分别为94.3%(33/35)~97.1%(34/35),双抗原夹心ELISA法和双抗原夹心CLIA法试剂阴性符合率均为97.1%(34/35),四种检测方法 HCV抗体试剂阴性符合率之间的差异无统计学意义(P0.05)。结论四种检测方法 HCV抗体试剂的性能基本一致,不同方法各有优缺点,建议应用多种检测方法对弱阳性样本进行确认检测。     

纯化人干扰素β的一种试剂

<正> Celltech 有限公司研制出了一种新的纯化用试剂β-Sepharose,这使得它在干扰素的鉴定和纯化试剂的供应方面的领导地位得到加强。根据 Cellech 的报告,β-Sepharose 是世界上第一个基于单克隆抗体原理的用于干扰素β纯化的商品化试剂。这种试剂提供了只要一步色谱过程就能够去除所有杂质而保留下高产率