四个与小鼠摄食、摄水量及蛋白质代谢相关基因的功能研究

目的　通过对小鼠摄食、摄水量及蛋白质代谢相关基因的功能研究 ,为今后的营养学和营养疾病学的分子生物学水平研究提供一定的依据。方法　利用反义核酸技术与动物行为学实验方法相结合 ,从动物整体水平上研究与动物膳食和营养代谢相关的基因功能。从课题组以往研究得到的摄食量与对照组有显著差异的基因中选出 4个 ,用BALB c小鼠进行实验。结果　实验结果表明 :D1、Pe和Tr实验组小鼠的摄食量、摄水量与对照组有明显的差异 ,D1和Tr实验组的蛋白质代谢与对照组有明显的差异。D1实验组小鼠的摄食量和摄水量明显高于对照组并呈下降趋势 ,但其表观消化率小于对照组 ,说明其蛋白质代谢功能有所下降 ;Tr实验组小鼠的摄食量和摄水量也明显高于对照组但呈上升趋势 ,其表观消化率大于对照组 ,说明其蛋白质代谢功能有所上升。结论　预测D1基因可能与促进营养代谢功能有关 ,Tr基因可能与抑制营养代谢功能有关。D1、Pe和Tr与移动、痛觉、记忆等其他行为学有相关性 ,P3与其他行为学无相关性。     

肝螺杆菌感染对BALB/c小鼠免疫应答干扰的初步研究

目的探讨肝螺杆菌(Helicobacter hepaticus,H.hepaticus)感染对小鼠骨髓源树突状细胞(DC)表面分子形态和机体免疫应答的干扰。方法以H.hepaticus(ATCC 51450)灌饲SPF级BALB/c雄性小鼠,于末次接种后5个月体外分离培养骨髓DC,经粒细胞-单核细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-4(IL-4),刺激DC增殖、分化,流式细胞仪分析DC细胞表面分子CD11c、CD40、CD80、MHCII的表达率。此基础上,用新城疫病毒(NDV)ZJ1株人工接种实验组和对照组小鼠,每周测定NDV血清抗体效价,比较抗体产生的差异。结果实验组MHC II和CD40分子的表达率高于对照组。NDV抗体水平第1周实验组略低于对照组;第2~5周内实验组小鼠的抗体水平均高于对照组,差异有显著性;第6周两组小鼠血清抗体均呈下降趋势,差异无显著性。结论 H.hepaticus感染对小鼠骨髓DC成熟有促进作用,能提高MHC II和CD40表达水平,可促进BALB/c小鼠产生抗NDV的抗体水平。     

C57BL/6J小鼠在构建2型糖尿病模型中体重和非空腹血糖浓度的异常变化

由北京市一实验动物生产单位购入近交系C57BL/6J(B6)和封闭群ICR(3周龄)小鼠,分别以高脂饲料、高脂饲料-3%果糖饮水(实验组)和常规饲料(对照组)喂养6周,实验组腹腔注射链脲佐菌素(STZ,100mg/kg体重),然后以相应饲料继续喂养4周。每周测定小鼠体重,于注射STZ前和注射后每周测定非空腹血糖浓度。研究显示,无论是否补充果糖饮水,B6对照组体重显著高于实验组,而相应周龄的ICR小鼠,实验组体重显著高于对照组。两品系小鼠实验组间体重无差异。注射STZ后,B6实验组血糖浓度均没有达到糖尿病小鼠非空腹血糖浓度的成模标准(11mmol/L),而ICR实验组血糖浓度均达到并超过糖尿病小鼠非空腹血糖浓度的成模标准。研究表明,无论补充果糖与否,ICR小鼠均能成功建模,而B6小鼠建模均失败。因此,ICR小鼠仍是目前应用高脂饲料-STZ联合诱导2型糖尿病模型中经济、有效的候选动物,而B6小鼠在体重和血糖浓度上的异常表现很可能是其遗传背景变化的结果,这尚需进一步研究证实。     

过量人参皂苷对小鼠脑组织谷氨酸代谢的影响

目的:探讨过量人参皂苷对小鼠脑组织中谷氨酸代谢的影响。方法:常规饲养昆明小鼠,按照最终浓度低(8 mg/kg)、中(40mg/kg)、高(200 mg/kg)剂量连续灌胃人参皂苷24天,记录小鼠体重变化。第25天颈脱臼处死小鼠,取出全脑匀浆后测定谷氨酸水平,谷氨酰胺酶活力。结果:各实验组与对照组相比,体重明显下降;低、中、高实验组谷氨酸水平分别高与对照组13.66%、21.67%、39.83%,其中中剂量组和高剂量组显著高于空白组(P0.05);谷氨酰胺酶活力较对照组分别增高2.06%、2.91%、10.11%,高剂量与空白组差异显著,有统计学意义(P0.05)。结论:高剂量人参皂苷能使神经系统兴奋,可能与增高谷氨酰胺酶活力、从而提高脑组织中谷氨酸含量有关。     

萌动激活赤灵芝孢子粉对小鼠脾细胞IL-2的分泌和脾淋巴细胞转化增殖的影响

目的 :探讨萌动激活赤灵芝孢子粉对小鼠脾细胞IL 2分泌和脾淋巴细胞转化增殖的影响。方法 :实验小鼠随机分成实验组 (低剂量组 4 g/kg/d :高剂量组 :8g/kg/d)和对照组 (与实验组用同体积的生理盐水 ) ,连续用药 1 0天。用3H—TdR掺入法进行检测。结果 :与对照组相比萌动激活赤灵芝孢子粉对小鼠脾细胞IL 2分泌有明显促进作用并能明显提高小鼠脾淋巴细胞转化增殖 ,并有一定的量效关系。结论 :萌动激活赤灵芝孢子粉对小鼠免疫功能有明显的促进作用 ,这可能与其促进细胞因子的分泌和淋巴细胞转化增殖有关。     

磁处理党参药液对小肠平滑肌收缩活动影响的研究

目的 :探讨磁处理党参药液对离体兔小肠平滑肌收缩活动的影响。方法 :通过正常台氏液对照组与磁处理党参药液实验组 ,以及磁处理党参药液组与非磁处理党参药液组进行比较 ,观察对离体兔小肠平滑肌的作用 ,同时观察药液对氯化钡引起离体兔小肠平滑肌收缩活动的影响。结果 :低浓度 ( 5 %、1 0 %、2 0 % )磁处理党参药液对离体兔小肠有轻度抑制作用 ;浓度加大 ( 4 0 %、60 % ) ,有明显促进作用 (P <0 .0 1 ) ;当浓度为 1 0 0 % ,药液有强烈的抑制作用 ,波形几乎呈直线。磁处理药液能解除Bacl2 引起的痉挛性收缩。磁处理与非磁处理党参药液组比较 ,只有浓度 5 %的波幅明显下降 (P <0 .0 1 ) ,其余浓度均无差异显著 (P>0 .0 5 ) ;结论 :磁处理党参药液对小肠平滑肌的收缩活动有明显影响     

苦瓜皂甙对衰老动物内分泌功能的影响

目的 :探讨苦瓜皂甙对衰老动物内分泌功能的调节作用。方法 :15月龄雌性老年昆明小鼠 ,随机分为老年对照组、实验 1组和实验 2组三组 ,同时准备 4月龄雌性昆明小鼠作青年对照组 ,其中两对照组饮水为普通水 ,两个实验组饮水分别含有 10 0mg/L及 2 0 0mg/L苦瓜皂甙 ,饲养 5周后取血清标本待测。同时 ,取 12月龄大鼠胸腺细胞培养 ,检测不同浓度苦瓜皂甙对雌激素受体蛋白表达的影响。结果 :与青年对照组相比 ,衰老小鼠血清ACTH、雌二醇水平显著降低。与老年对照组相比 ,两实验组血清雌二醇水平均明显升高 ,ACTH水平有升高趋势 ,但只有高剂量组有显著性 ;两组之间所有指标均没有显著性差异。体外实验发现 ,苦瓜皂甙明显促进雌激素受体蛋白的表达 ,却不影响其mRNA水平。结论 :苦瓜皂甙可通过调节ACTH分泌及雌激素受体表达来改善衰老机体内分泌功能     

磁处理白术药液对消化功能影响的药效研究

目的 :研究磁处理白术药液对消化功能影响的药效作用。方法 :用碳末法比较生理盐水、磁处理白术药液与非磁处理白术药液对小鼠肠推进运动的影响 ;用对比法 ,比较磁处理白术药液与正常台氏液及与非磁处理白术药液对离体兔小肠平滑肌收缩运动的影响。结果 :小鼠肠碳末推进率 :与生理盐水组比较 ,磁处理白术药液有促进作用 (p <0 .0 1 ) ,磁处理白术药液与非磁处理白术药液相比差异不显著 ;离体兔小肠平滑肌收缩运动 :与正常台氏液相比 ,磁处理白术药液有促进作用 (p <0 .0 1 ) ,磁处理白术药液与非磁处理白术药液相比 ,有抑制作用。结论 :磁处理白术药液对小鼠肠推进运动功能及对离体兔小肠平滑肌收缩运动有明显作用。     

复方薏苡仁方对小鼠肠道菌群及 微环境的调节作用研究

目的观察复方薏苡仁方调节小鼠肠道菌群功能及胃肠运动的效果,并考察复方薏苡仁方对小鼠盲肠内容物pH及肠黏膜结构等肠道内环境的影响。方法参照《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)的规定进行调节肠道菌群实验和小肠墨汁推进试验,检测小鼠盲肠内容物pH,并对肠道黏膜结构进行病理形态学观察。结果 (1)与给样前相比,复方薏苡仁方中、高剂量组肠杆菌数和低、高剂量组肠球菌数均明显减少(P0.05),中、高剂量组乳杆菌数和双歧杆菌数均明显或显著增加(P0.05或P0.01),且高剂量组乳杆菌数和中、高剂量组双歧杆菌数明显高于阳性对照组(P0.05);(2)复方薏苡仁方各剂量组小鼠盲肠内容物pH值均显著降低(P0.01),且均低于阳性对照组,其中低、高剂量组差异有统计学意义(P0.05或P0.01);(3)与正常对照组相比,复方薏苡仁方低、中、高剂量组小鼠十二指肠、空肠、回肠绒毛长度/隐窝深度比值(A/V)均明显或显著增加(P0.05或P0.01),且中、高剂量组十二指肠、空肠及回肠A/V比值明显或显著高于阳性对照组(P0.05或P0.01);(4)与模型对照组相比,复方薏苡仁方各剂量组小鼠小肠推进率均显著增加(P0.01),且均高于阳性对照组(P0.01)。结论复方薏苡仁方对调节肠道菌群及改善肠道微环境具有一定的促进作用。     

不同浓度卵蛋白变应原对小鼠哮喘模型建立的影响

目的研究不同浓度卵蛋白(ovalbumin,OVA)变应原对小鼠的哮喘造模影响。方法 96只6～8周龄SPF级雌性BALB/c小鼠随机分为8组,分别为PBS组(对照组)、10μg组(A组)、20μg组(B组)、50μg组(C组)、100μg组(D组)、200μg组(E组)、500μg组(F组)、1000μg组(G组)。A～G组分别用含1%明矾的PBS配制相应浓度的OVA于第0、7和第14天对小鼠进行腹腔注射。于第21～27天连续7 d用含1%的OVA的PBS溶液雾化吸入激发各组小鼠。正常对照组使用PBS溶液致敏和激发。最后一次雾化吸入激发后24 h内,计数各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BLAF)中嗜酸性粒细胞的含量,ELISA法检测IL-4、IL-5的分泌量及其血清IgG2a、IgE抗体的水平;肺组织病理切片观察各组小鼠哮喘模型的效果,评价最优哮喘造模的OVA浓度。结果 A～G组小鼠肺泡灌洗液中IL-4、IL-5含量均高于正常对照组(P<0.01),细胞因子水平随着OVA浓度的增高而逐渐下降;A～G组小鼠肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞数均高于正常对照组(P<0.01),从低浓度组至高浓度组嗜酸性粒细胞数从高向低变化;A～G组小鼠血清中总抗体IgE的水平均显著高于正常对照组(P<0.01),且随着OVA浓度的增高IgE水平逐渐下降。血清中IgG2a的水平则随OVA给药浓度的增高而逐渐增高;低浓度OVA致敏组小鼠肺组织标本可观察到明显的炎症浸润性病理表现,而高浓度组肺部组织病理变化不明显。结论低浓度的OVA连续致敏小鼠造成过敏性哮喘病理改变较为明显,随着OVA浓度的增高,造模效果逐渐降低,而高浓度的OVA则会导致模型小鼠发生免疫耐受。     

绿茶摄入量对小鼠肠道微生物及酶活性的影响

目的从肠道微生态角度研究绿茶摄入量对小鼠肠道微生物和酶活性的影响,探析饮茶(绿茶)有益健康的机制,为饮茶做出科学指导。方法将SPF级实验小鼠随机分为正常对照组、低浓度绿茶摄入组、中浓度绿茶摄入组和高浓度绿茶摄入组。低、中、高浓度绿茶摄入组分别给予10%、20%和30%(g/g)的茶水溶液,连续灌胃1个月后采集空肠至回肠段内容物进行微生物和酶活性分析,同时观察实验动物体质量变化情况。结果各实验组小鼠体质量增长与对照组相比无明显差异;与对照组相比,低浓度绿茶摄入组小鼠肠道乳酸菌数降低而细菌数升高,中浓度摄入组乳酸菌数、细菌以及双歧杆菌数显著降低,高浓度摄入组细菌数、双歧杆菌数升高而乳酸菌数显降低著,且中浓度摄入组乳酸菌数和细菌数均极显著地低于低浓度摄入组;由酶活性分析可看出,与对照组小鼠相比,各实验组小鼠肠道淀粉酶和蛋白酶活性均升高而木聚糖酶活性显著降低。结论摄入一定量的绿茶对肠道微生物有一定的调节作用,可提高淀粉酶和蛋白酶活性而益于机体健康。     

激光联合环磷酰胺对荷瘤鼠脾重和外周免疫细胞数量影响的试验研究

目的:试验以小鼠S180腹水瘤为动物实验模型,对He-Ne激光照射与化疗药物联合应用对S180荷瘤鼠脾脏重量和免疫细胞数量影响作了系统性研究。方法:应用11.00J/cm2,14.67J/cm2和22.00J/cm2三种剂量He-Ne激光照射荷瘤鼠内眼角,同时联合应用化疗药物环磷酰胺,以观察其对荷瘤鼠脾脏重量和免疫细胞数量的影响。结果:健康小鼠脾脏随日龄增加呈持续上升趋势,肿瘤对照组及CYT对照组在第4d.显著升高。此后便持续下降,尤其是CYT对照组,第8d.荷瘤鼠脾脏萎缩极为严重。而CYT/He-Ne激光联合应用组小鼠脾脏在第4d.轻微下降后,便呈持续上升趋势;CYT对外周血白细胞总数、淋巴细胞数和中性幼稚细胞数有着显著的抑制作用(P<0.01,P<0.05)。CYT/He-Ne激光联合应用组白细胞总数和中性幼稚细胞数的变化较单纯CYT应用组为轻微。结论:He-Ne激光对CYT及肿瘤本身所致免疫抑制具有明显的改善效应。     

犬卵透明带3DNA疫苗在小鼠模型中的避孕效果评价

为了评价犬卵透明带3(CZP3)DNA疫苗的避孕效果,采用6只雌性小鼠Mus musculus肌肉注射50μg pcDNA3-CZP3质粒后30 V电压刺激6次的方法建立实验组,以6只同等注射pcDNA3质粒的雌性小鼠为阴性对照组;初免后每周采血并用ELISA方法检测小鼠的CZP3抗体水平及第6周抗体滴度;第6周与雄鼠合笼,计算产仔数;第24周收集卵巢制成HE染色切片进行观察;最后用小鼠血清进行小鼠及犬卵透明带的间接免疫荧光实验。结果显示,1)实验组小鼠从初免第2周就产生了抗CZP3的抗体,并且与阴性对照组之间的差异有统计学意义(P0.05);第24周实验组的抗体水平与阴性对照组之间的差异有高度统计学意义(P0.01)。2)第6周血清中的抗体1∶4 000倍稀释时,实验组与阴性对照组之间的差异有高度统计学意义(P0.01)。3)小鼠生育率由阴性对照组的100%降低至实验组的50%,平均产仔数由阴性对照组的(6.667±0.422)只降至实验组的(2.500±1.455)只,且实验组的抗体水平与产仔数呈高度负相关。4)卵巢HE染色切片结果显示,CZP3 DNA疫苗避孕的免疫未对小鼠卵巢发育产生影响。5)间接免疫荧光实验显示,实验组小鼠产生的血清可以与小鼠及犬卵子的卵透明带基质结合。综上所述,CZP3 DNA疫苗在小鼠模型中能够显著降低小鼠的生育率及产仔数,但不影响小鼠的卵巢发育。     

柑橘橘络提取物通便作用的实验研究

目的：研究富含柑橘多糖和黄酮的橘络提取物的润肠通便作用。方法：依据《保健食品检验与评价技术规范》（2003版）“通便作用检验方法”,将小鼠随机分为模型对照组、阴性对照组和三剂量实验组（低、中、高剂量组）,经口给予柑橘橘络提取物1w后,通过测定小肠墨汁推进率、首粒便排出时间和6h内排便粒数及重量,判断柑橘橘络提取物对小鼠肠道蠕动和排便功能的影响。结果：与模型对照组相比,低剂量和中剂量组提高小肠墨汁推进率分别为65.29%和62.90%;3个剂量组的小鼠排首粒便时间显著低于模型对照组,6h内排便数及重量明显增多。结论：柑橘橘络提取物具有良好的促进肠道蠕动功能和排便的作用,其中中剂量组效果较好。     

轮状病毒致BALB/c小鼠肠道外感染后淋巴细胞亚群变化的研究

目的建立小鼠肠道外感染轮状病毒(Rotavirus,RV)动物模型,观察该模型动物发病时的细胞免疫功能状态。方法通过腹腔注射RV,建立小鼠肠道外感染RV的模型。分别在病毒接种后第3天及第7天通过摘除眼球取血,流式细胞仪检测T细胞亚群。同时处死动物,无菌取出肺脏、肝脏和脾脏进行组织病理学检查。设立正常对照组。结果小鼠肠道外感染RV成功(可见到肺脏、肝脏和脾脏非特异性病毒感染性炎性病变)。淋巴细胞亚群测定:实验组CD3、CD4及CD4/CD8比值均较对照组明显降低(P0.01)。结论RV引起小鼠肠道外脏器肺脏、肝脏和脾脏组织病变的同时,机体免疫功能亦明显降低。     

青春双歧杆菌对1型糖尿病小鼠胰岛β细胞的保护作用

目的 探讨青春双歧杆菌对1型糖尿病小鼠胰岛β细胞的保护作用.方法 给予1型糖尿病小鼠口服青春双歧杆菌,观察实验组和对照组体重的变化及糖尿病发病率.ELISA法测定血清、脾细胞上清IL-4和IFN-γ浓度,电镜观察胰岛超微结构变化.结果 15周龄时实验组体重(23.41±1.64)g, 而对照组为(22.31±1.32)g(P<0.05);实验组发病率低于对照组(P＜0.05);实验组血清、脾细胞上清IL-4浓度明显高于对照组,而IFN-γ低于对照组(P<0.05);对照组残存胰岛的β细胞数目稀少,有核膜和内浆网扩张、核糖体脱颗粒和分泌颗粒空泡样变等超微结构异常,而实验组胰岛β细胞数显著多于对照组(P<0.05),且无上述超微异常.结论 青春双歧杆菌通过上调IL-4水平,降低IFN-γ水平,促使免疫平衡向Th2方向偏移,且有保护胰岛β细胞超微结构的作用,在一定程度上可预防和延缓NOD鼠糖尿病的发生.     

富氢水对高氧环境小鼠肠道屏障和菌群的影响

目的 探讨富氢水(hydrogen-rich water)对高氧环境下小鼠肠道屏障和菌群的影响。方法 选取SPF级C57BL/6雄性小鼠24只,随机分为4组(n=6):对照组(C组)、对照+富氢水组(CH组)、高氧组(H组)和高氧+富氢水组(HH组)。C组、CH组小鼠饲养于常氧环境,H组、HH组小鼠饲养于85%高氧环境。CH组和HH组小鼠每天给予富氢水0.1 mL/10 g灌胃2次,持续7 d; C组和H组小鼠给予等体积生理盐水。第7天采集小鼠粪便,心脏采血,处死动物并切取末端回肠组织5 cm。HE染色观察肠组织病理学变化,行肠黏膜损伤评分;透射电镜观察肠上皮细胞超微结构;测定肠组织丙二醛(MDA)水平,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力,肠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)水平;测定血清二胺氧化酶(DAO)水平;提取粪便DNA行肠道菌群检测和分类。结果 与C组、CH组小鼠相比,H组肠黏膜损伤评分升高,肠道SOD、CAT活力下降,sIgA、MDA水平升高,血清DAO水平升高(均P<0.05);与H组小鼠相比,HH组肠黏膜损伤评分下降,MDA水平下降,肠道SOD、CAT...     

大豆异黄酮抗辐射作用的实验研究

将 8 0只雄性昆明小鼠 ,随机分为照射对照组和补充大豆异黄酮 (IS) 0 .2 %、0 .5 %、1 .0 % (质量分数 ) 3个实验组 ,喂养两周后 ,7.0Gyγ射线照射 ,观察各组小鼠在 30d内的活存率。另取雄性昆明小鼠 30只 ,随机分为正常组、对照组和补充 0 .5 %IS组 ,喂养两周后 ,4 .0Gyγ射线照射 ,于照射前 3d和照射后 6、1 0、1 7、2 5和 30d观察外周血像。结果补充 0 .5 %IS组的小鼠 30d的活存率为 6 0 % ,明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,照射 6d后的血红细胞、白细胞、淋巴细胞水平及淋巴细胞占白细胞的百分比均明显高于对照组水平。说明大豆异黄酮具有抗辐射的作用 ,膳食中补充质量分数 0 .5 %大豆异黄酮可明显提高机体的抗辐射能力     

星虫胶原蛋白的生物学特性研究

本文研究了胶原蛋白的生物学特性.结果显示,胶原蛋白溶液的粘度随浓度的增大而增大,随着温度的升高而下降;酸性条件下,粘度总体呈下降趋势,碱性时粘度变化不大;外加中低浓度的电解质与非电解质对胶原蛋白溶液粘度的影响不显著,溶液的流变学特性相对稳定.星虫胶原蛋白对小鼠皮肤无致敏反应,对创面愈合有明显的促进作用,该胶原蛋白不仅可以应用于食品与化妆品行业,还可以进一步应用于生物医学材料等领域.     

复方薏苡仁方对小鼠肠道菌群及微环境的调节作用

目的观察复方薏苡仁方调节小鼠肠道菌群功能及胃肠运动的效果,并考察复方薏苡仁方对小鼠盲肠内容物pH及肠黏膜结构等肠道内环境的影响。方法参照《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)的规定进行调节肠道菌群实验和小肠墨汁推进试验,检测小鼠盲肠内容物pH,并对肠道黏膜结构进行病理形态学观察。结果 (1)与给样前相比,复方薏苡仁方中、高剂量组肠杆菌数和低、高剂量组肠球菌数均明显减少(P<0.05),中、高剂量组乳杆菌数和双歧杆菌数均明显或显著增加(P<0.05或P<0.01),且高剂量组乳杆菌数和中、高剂量组双歧杆菌数明显高于阳性对照组(P<0.05);(2)复方薏苡仁方各剂量组小鼠盲肠内容物pH值均显著降低(P<0.01),且均低于阳性对照组,其中低、高剂量组差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);(3)与正常对照组相比,复方薏苡仁方低、中、高剂量组小鼠十二指肠、空肠、回肠绒毛长度/隐窝深度比值(A/V)均明显或显著增加(P<0.05或P<0.01),且中、高剂量组十二指肠、空肠及回肠A/V比值明显或显著高于阳性对照组(P<0.05或P<0.01);(4)与模型对照组相比,复方薏苡仁方各剂量组小鼠小肠推进率均显著增加(P<0.01),且均高于阳性对照组(P<0.01)。结论复方薏苡仁方对调节肠道菌群及改善肠道微环境具有一定的促进作用。