丝瓜果实发育过程的蛋白质差异表达分析

丝瓜果实发育过程伴随着明显的形态转变和复杂的生理生化变化,这些变化均影响着果实的采后寿命和品质。为阐明丝瓜果实发育过程中重要蛋白质的功能与调控作用,该研究以同位素标记相对定量联合液相色谱串联质谱(iTRAQ-LC-MS/MS)技术测定丝瓜果实发育过程三个时期(花后5天、花后15天、花后30天)蛋白的表达水平,鉴定差异蛋白,并对它们进行亚细胞定位、GO(gene oncology)和KEGG(kyoto encyclopedia of genes and genomes)途径分析。共鉴定到差异蛋白709个,其中在丝瓜果实不同发育时期共同存在的差异蛋白有229个,上调蛋白有118个,下调蛋白由111个。亚细胞定位显示,差异蛋白的亚细胞主要定位于叶绿体、细胞质和细胞核。GO分析发现,四吡咯结合、过氧化物酶活性、氧化还原酶活性、血红素结合和抗氧化活性是差异蛋白5种主要的分子功能,过氧化氢代谢过程、应激反应和防御反应是差异蛋白3种主要参与的生物过程。代谢途径分析显示,丝瓜果实发育过程的差异蛋白主要富集在3个代谢途径,分别为次生代谢产物生物合成、糖代谢和DNA复制途径,从中筛选出36个在丝瓜果实发育过程发挥重要作用的目标差异蛋白。其中, PAL、C4H、4-CL、COMT和CAD可能是调控果实内酚类物质和木质素合成的5种关键蛋白。PAL、POD、PPO、CAT、APX 5种差异蛋白可能协同参与果实发育后期的酶促褐变。SS和α-AL可能在丝瓜果实蔗糖的累积和淀粉的降解过程中起着重要作用。以上研究结果为进一步阐明丝瓜的发育调控,进而指导丝瓜品种选育和生产栽培提供了理论支持。     

黑果枸杞化学成分研究进展

黑果枸杞是一种独特的药食两用植物,具有抗氧化、抗动脉粥样硬化、增强免疫力、抗衰老、降血脂等药理作用。综述近年来 黑果枸杞的化学成分、生物活性、提取方法和质量分析等方面的研究进展,为黑果枸杞药效成分的进一步开发和利用提供参考。     

黑果枸杞化学成分研究

采用色谱法从黑果枸杞中分离得到22个化合物,利用波谱学方法鉴定了它们的结构,分别鉴定为4-pcumaroyl-α-L-rhamnosyl-(1→6)-β-D-glucose(1)、4-p-cumaroyl-α-L-rhamnosyl-(1→6)-α-D-glucose(2)、isosalipurposide(3)、咖啡酸乙酯(4)、trans-ferulic acid(5)、槲皮素3-O-β-D-芸香糖苷(6)、山柰酚-3-O-芸香糖苷(7)、水仙苷(8)、kaempferol 3-rutinoside-4'-glucoside(9)、柚皮素7-O-β-D-葡萄糖苷(10)、蛇葡萄素4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(11)、helichrysin A(12)、柚皮素(13)、槲皮素(14)、东莨菪亭(15)、evofolin B(16)、(+)-isolariciresinol(17)、methyl-2,4-dihydroxy-5-methoxybenzoate(18)、3-甲氧基没食子酸(19)、4-acetyl-2,6-dimethoxyphenol(20)、香草乙酮(21)和苯甲酸甲酯(22)。其中化合物1为新化合物,化合物2、3、9、11、12和16~19均为首次从本属中被分离得到。     

柴达木野生黑果枸杞营养成分分析

对柴达木野生黑果枸杞果实中的主要营养成分进行了分析,结果表明,黑果枸杞鲜果含水质量分数85.03%,其干果蛋白质量分数10.61%,脂肪6.66%,多糖4.28%,总黄酮质量分数4.29%,原花青素3.42%.果实含有γ-VE及δ-VE,每百克分别为0.0075和0.016 mg,从黑果枸杞籽中提取的构祀籽油维生素E含...     

黑果枸杞的组织培养

1植物名称黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murr.). 2材料类别带腋芽的嫩茎段. 3培养条件诱导分化培养基:(1)MS 6-BA 1.0mg·L-1(单位下同) NAA 0.2,(2)MS 6-BA 0.5 NAA0.2;芽增殖培养基:(3)MS 6-BA 0.5 NAA 0.1(4)MS 6-BA 0.5 NA 0.2;生根培养基为:(5)1/2MS NAA 0.1.以上诱导分化及增殖培养基均加2.5%蔗糖和0.8%琼脂,生根培养基的蔗糖和琼脂量减半,pH 5.8～6.0.培养温度为23～25℃,光照时间10～12 h·d-1,光照度为2000 1x.     

甜瓜乙烯应答因子基因在果实发育成熟过程中的表达特性

根据已报道的甜瓜CMe-ERF1和CMe-ERF2基因cDNA序列设计合成特异性引物,应用RT-PCR技术从甜瓜品种‘河套蜜瓜’成熟果实中克隆得到CMe-ERF1和CMe-ERF2基因cDNA全长编码区序列,分别为498bp和822bp.序列比对分析表明,得到的cDNA序列与已报道的Andes甜瓜相应基因的cDNA序列完全一致.果实不同发育时期实时定量PCR检测结果表明,CMe-ERF1、CMe-ERF2基因表达与甜瓜果实成熟及乙烯生成量显著相关,表明该基因可能对果实成熟起重要作用.     

黑果枸杞育苗繁殖技术

介绍了黑果枸杞的育苗技术,主要包括选地与整地、种子采集和贮藏、种子处理、土壤处理、播种和田间管理等内容,以期为黑果枸杞的种子育苗提供技术参考。     

正交试验优化黑果枸杞果实中花青素的提取工艺

黑果枸杞(Lycium ruthenicum)是西北干旱区特有的小灌木,具有重要的生态和经济价值,而果实中花青素含量多寡是评判其经济价值的重要指标。为找到简单易行的花青素提取技术,本试验采用pH=30的盐酸-乙醇提取法,分别对不同提取溶剂浓度、物料比、提取时间、提取温度以及是否脱脂条件下的花青素提取率进行了研究,结果表明:在黑果枸杞不脱脂的情况下,用乙醇提取花青素的最优条件为pH=30的80%盐酸-乙醇、物料比为1:15、提取时间为5 h、提取温度为40℃,花青素的提取率达到0978%。该试验结果为实验室及产业化提取花黑果枸杞青素提供了较为准确的参数。     

黑果枸杞LrTTG1基因的克隆及表达分析

以黑果枸杞为材料,利用RT PCR和RACE技术克隆了花青素合成相关基因LrTTG1（GenBank登录号为MH633481）。序列分析表明,LrTTG1基因cDNA全长1 453 bp,包含1 029 bp开放阅读框,编码342个氨基酸,含有5个WD40重复基序。同源比对结果表明,LrTTG1与茄子SmTTG1的氨基酸序列相似性较高,达到83.73%。qRT PCR分析显示,LrTTG1基因在茎、叶、花、青果、紫果和黑果中均有表达,且在青果中的表达水平（最高）约为黑果（最低）的4倍;紫外胁迫下LrTTG1基因的表达随胁迫时间的延长呈先降低后升高的变化趋势。花青素含量分析表明,黑果的花青素含量最高（11.3 mg/g）,分别约为紫果（ 1.2 mg/g）和青果（0.53 mg/g）含量的9.4倍和21.3倍。研究表明,随着黑果枸杞果实的发育,LrTTG1基因的表达量呈现下降趋势,而花青素的含量则呈上升趋势,两者呈负相关关系;推测LrTTG1基因在黑果枸杞花青素合成中可能具有重要的调节作用。     

黑果枸杞中的几种营养成分的分析

~~黑果枸杞中的几种营养成分的分析@陈红军$塔里木农垦大学文理学院 @侯旭杰$塔里木农垦大学工学院 @白红进$塔里木农垦大学文理学院 @孔星云$塔里木农垦大学科研处!新疆阿拉尔843300~~     

黑果枸杞提取物活性的研究进展

黑果枸杞是一种具有良好保健功效的药食两用植物,其富含丰富的营养物质,具有多种生物活性。本文综述了黑果枸杞中花青素、多糖和甜菜碱等活性成分的性质及其保健功效的研究进展,为黑果枸杞的深入研究及进一步的开发应用提供科学依据。     

青藏高原黑果枸杞花青素稳定性评价

采用控制变量法分别研究了环境因素(pH、温度、光照)和添加物(氧化剂、还原剂、食用酸、糖、防腐剂和金属离子)对青藏高原黑果枸杞花青素稳定性的影响。用分光光度计法测定花青素含量的变化。结果表明,酸性(pH3)、低温(T60℃)、避光条件有利于花青素溶液稳定保存。氧化剂(H_2O_2)和还原剂(Na_2SO_3)对花青素稳定性有不良影响;食用酸(柠檬酸、抗坏血酸、草酸、酒石酸)、葡萄糖、蔗糖可增加花青素稳定性;防腐剂苯甲酸对花青素稳定性无显著影响;金属离子Na~+、K~+、Ca~(2+)、Mg~(2+)、Al~(3+)对花青素稳定性无不良影响,而Zn~(2+)、Cu~(2+)、Fe~(3+)对花青素稳定性有不良影响。     

新疆产药用植物黑果枸杞有性生殖产出差异的繁殖生态学研究

由于黑果枸杞（Lycium ruthenicum）果实具有重要的保健价值,近年来倍受关注,但其野生资源正遭受着前所未有的采伐压力。目前关于影响黑果枸杞果实产量的有性生殖过程研究较少,本实验对新疆库尔勒地区6个不同生境的野生黑果枸杞居群开展了繁殖生态学观察,并对各居群的访花频率、访花昆虫种类、柱头花粉落置、胚珠数、座果率、结实率和单株果实产量等指标进行了比较分析。结果表明,访花频率与结实率、座果率具有显著正相关关系,说明传粉者是限制黑果枸杞有性生殖的关键因素之一;传粉者种类越丰富的居群其有性生殖产出越高,揭示了传粉昆虫的多样性和丰富度是影响黑果枸杞繁殖成功的重要限制因子。此外,和静县华侨农场和焉耆县霍拉山河沟的黑果枸杞居群生殖产出明显与其传粉成功率相偏离,进一步分析表明,风沙侵蚀和人为采伐对植株的破坏是影响这两个居群果实产量的重要原因。本研究结果对于野生黑果枸杞居群的保护及其人工规模栽培提供了重要的参考依据。     

黑果枸杞和宁夏枸杞FT(Flowering Locus T)基因的克隆及表达分析

黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murr.)和宁夏枸杞(Lycium barbarum L.)系茄科枸杞属植物,具有非常重要的药用价值。本研究通过挖掘黑果枸杞和宁夏枸杞的转录组数据克隆获得其开花关键基因FT(Flowering Locus T),分别命名为Lr FT和Lb FT,通过生物信息学方法分析两个蛋白质的氨基酸序列、功能域及其系统发育关系等;并通过实时定量PCR分析其在两种枸杞不同组织中的表达模式。研究结果表明:Lr FT和Lb FT均编码一个由173个氨基酸组成的蛋白质。蛋白序列分析表明:Lr FT和Lb FT序列相似度达98%,具有保守的PEBP(phosphatidylethanolamine-binding protein)结构域。系统进化分析表明:Lr FT和Lb FT与茄科植物番茄、烟草和马铃薯的FT亲缘关系较近。基因表达结果表明:Lr FT和Lb FT主要在叶片中表达,且在两种枸杞的叶片中表达量有一定的差异。本研究为今后黑果枸杞和宁夏枸杞开花相关功能基因的验证及分子育种奠定了一定的基础。     

NaCl胁迫下黑果枸杞转录组测序分析

研究黑果枸杞在不同浓度盐胁迫下基因表达谱变化情况,为进一步研究黑果枸杞抗盐分子机制奠定研究基础。对0(CK)、50、250 mmol/L NaCl溶液胁迫的黑果枸杞组培苗的根和叶在胁迫时间为0、1、12 h时分别取样,采用转录组测序(RNASeq)技术进行测序分析。结果表明,转录组测序共产生222.49 Gb原始数据,拼接出Unigenes 86 037条,注释到7大功能数据库(GO、KEGG、KOG、NR、Pfam、Swiss-Prot和egg NOG)上的Unigenes总数为46 594个,占总Unigenes的54.76%,还有38 929个Unigenes在这些数据库中没有得到注释。通过GO分类和KEGG Pathway富集性分析,分别归于51个GO类别和211条代谢途径。差异表达基因分析显示,黑果枸杞叶片和根的上调基因和下调基因数随着NaCl浓度的增大和处理时间的延长均呈增加趋势,叶片中的上调基因数(7 514)小于下调基因数(9 032),根中的上调基因数(12 347)大于下调基因数(11 559)。在黑果枸杞盐胁迫下转录组中发现28 325个SSR位点,最多的为单核苷...     

黑果枸杞抗逆性及栽培育种研究进展

黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murr)是集盐碱地绿化价值、经济价值、药用价值等为一体的野生灌木树种,具有很强的抗干旱、盐碱能力,在生态建设和区域经济发展中有巨大的应用前景,也是研究抗逆机制的优良植物材料。对最近几年来黑果枸杞的抗逆性研究和育种基础研究进行了综述,旨在为黑果枸杞抗逆性评价及育种工作提供参考。     

黑果枸杞原生质体培养及植株再生

该研究以黑果枸杞(Lycium ruthenicum)无菌苗为材料,建立了愈伤组织来源的原生质体再生体系,采用ISSR和FCM技术对再生植株进行了遗传稳定性分析。结果表明：(1)黑果枸杞叶片愈伤组织是产生原生质体的最好材料,在含0.5 mg·mL^-1甘露醇的酶液中,继代1次的叶片愈伤组织中原生质体产量为7.77×10⁶个·g^-1,活力为92%。(2)改良MS培养基 固体液体双层培养(MS₂ 固液双层)是培养原生质体的最好方式,培养10 d的原生质体分裂频率为45.9%,培养20 d的细胞团形成频率为22.9%。(3)在1.5 mg·mL^-1 6 BA+0.1 mg·mL^-1 IBA+MS培养基中,叶片愈伤组织产生的原生质体可分化获得再生植株。(4)ISSR分析显示,再生植株的平均遗传相似系数为0.88;FCM显示再生植株为二倍体,与亲本植株一致。该研究结果为进一步研究枸杞体细胞杂交技术转移野生植物抗逆遗传性状提供科学依据,为枸杞优良品种的选育奠定了基础。     

黑果枸杞资源分布及其经济价值

本文就国内外对黑果枸杞资源分布、经济价值、开发利用和发展趋势进行了综述。为黑果枸杞在资源开发与环境保护并举,综合利用方面提供科学依据。     

黑果枸杞果实中抗炎活性成分的筛选及作用机制研究

目的：对黑果枸杞果实中的抗炎活性成分进行筛选和评价,同时对其作用机制进行研究。方法：利用甲醇对黑果枸杞果实进行提取,并分别在微孔树脂（MCI）和大孔树脂柱上进一步分离。利用脂多糖诱导小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7构建炎症模型,对获得的组分进行筛选和评价。采用MTT法检测细胞活力、比色法检测NO水平、ELISA法检测IL-6、IL-1β、TNF-α等炎症因子水平,Western blot检测COX-2、IκBα等蛋白及其磷酸化的表达水平。结果：初步筛选发现经MCI处理后的3个组分中,Fr1表现出较好的抑制NO生成的能力。对Fr1进一步分离获得Fr1-1和Fr1-2组分。Fr1-2在抑制NO生成、炎症因子水平等方面均优于Fr1。对其作用机制进一步研究发现Fr1-2能抑制COX-2、p-IκBα蛋白表达水平从而发挥抗炎作用。对Fr1-2活性部位中的主要成分进一步分离制备,发现其主要成分为5-羟甲基糠醛,5-羟甲基糠醛在所选浓度范围内对细胞活力无显著影响,且其可以抑制炎症模型NO生成,具有一定的抗炎作用。结论：黑果枸杞果实提取物具有一定的抗炎作用,其机制可能与抑制COX-2蛋白的表达、Iκ...     

宁夏枸杞果实与种子形态发育初探

研究了宁夏枸杞不同发育时期果实和种子形态的变化特征及种子内胚的变化.结果表明:宁夏枸杞果实的生长发育曲线为花后8d以前为其第一次快速生长期,花后8～24 d为缓慢生长期,花后24～34 d是第二次快速生长期,属于典型的双“S”型.宁夏枸杞种子的生长曲线既不属于单“S”型,也不属于双“S”型,表现为果实的第一次快速生长期同样也是种子的快速生长期,但种子完成的生长比例快于果实完成的生长比例,此期种子内的胚乳生长快;当果实进入缓慢生长期,种子也表现出缓慢生长的特性,且种子长度和宽度的增加速率均显著低于果实第一次快速生长期种子的生长速率,此期种子主要进行胚的分化;在果实的第二次快速生长期,果实体积和重量迅速增加,而种子的长度和宽度增加很少,此期种子内仅胚进一步增大,从而反映出宁夏枸杞果实的发育与种子发育有一定的相关性.