肉牛屠宰过程中胴体在冲淋前后极端微生物组成的变化

目的对通过高压热水冲淋前后肉牛胴体表面的极端微生物数量及种类的变化规律进行研究。方法细菌菌落计数,并从分离的极端微生物中随机挑出8株厌氧菌和7株嗜冷菌,利用16S r DNA扩增、测序及生化试剂盒鉴定这些微生物的种属特征。结果冲淋前后的肉牛胴体表面细菌菌落总数从106CFU/cm2降低至500 CFU/cm2,同时冲淋前后的肉牛胴体厌氧细菌总数从2×102CFU/g下降至400 CFU/g,嗜冷细菌总数从3×104CFU/g下降至3×102CFU/g。极端微生物主要属于厌氧芽胞杆菌属Bacillus sp.、埃希菌属、肠杆菌属Enterobacter sp.、库特菌属Kurthia sp.、沙雷菌属Serratia sp.、假单胞菌属Pseudomonas sp.等6个属。结论高压热水冲淋可以很好的控制肉牛胴体表面细菌菌落总数,但对于厌氧、嗜冷等极端微生物的减菌效果不是很理想。     

复合益生菌制剂"海生元"的卫生安全性检验

目的 :监测和评估复合益生菌制剂“海生元”在制备、保存和使用过程中微生物污染状况 ,消除对健康造成潜在不良影响的危险。方法 :在有效期 (1年 )和保存 2 4个月 (2年 )时 ,定期随机对“海生元”口服液和胶囊取样 ,按常规方法进行微生物限度检验 ,包括细菌总数、大肠菌群、致病菌检查及霉菌、酵母菌计数。结果 :(1)贮存 12个月时微生物限度检验结果显示 :口服液各项指标均为阴性。胶囊剂分别为细菌数 <2× 10CFU/ g ,大肠菌群数 <3MPN/ 10 0 g、真菌和酵母菌总数分别 <5CFU/g ,未检出致病菌。 (2 )储存 2 4个月时的微生物限度检验结果显示 :口服液细菌总数、霉菌数和酵母菌数均 <1CFU/ g ,大肠菌数 <3MPN/ 10 0 g。胶囊剂细菌总数 <4× 10 3 CFU/ g ,大肠菌数 <30MPN/ 10 0g ,霉菌和酵母菌数 <10CFU/ g ,未检出致病菌。结论 :复合益生菌制剂“海生元”2种剂型 (口服液和胶囊 )在效期内的染菌情况均符合规定限度要求。在普通条件下储存 2 4个月 (2年 ) ,仅对胶囊的细菌总数略有影响 ,但结果仍符合中国药典规定的限度标准。本实验结果证实了复合益生菌制剂制备、储存过程中卫生安全的可靠性。     

改良环介导等温扩增技术快速检测婴儿配方奶粉中的阪崎肠杆菌

[目的]采用改良环介导等温扩增(LAMP)技术,快速检测婴儿配方奶粉中的阪崎肠杆菌.[方法]以阪崎肠杆菌(ATCC29544)的16S-23S rRNA间区序列作为靶序列,设计内、外引物和环引物,通过肉眼观察白色沉淀,判断检测结果.[结果]LAMP检测阪崎肠杆菌的灵敏度为0.101 CFU/mL,人工污染阪崎肠杆菌的婴儿配方奶粉的检出限为1.1 CFU/g.采用试剂盒提取DNA,从样品处理到报告结果,耗时1 h.而对照,PCR检测阪崎肠杆菌的灵敏度为101 CFU/mL,人工污染阪崎肠杆菌的婴儿配方奶粉的检出限为1100 CFU/g.采用同样方法提取DNA,从样品处理到报告结果,耗时3 h.[结论]因此,LAMP检测婴儿配方奶粉中的阪崎肠杆菌灵敏度高,耗时短,方法简便.     

南京市场葡萄干卫生状况调查及清洗方法初探

通过泥沙类杂质和菌落总数的分析测定对南京市场收集的15种(其中散称的6种、袋装的9种)葡萄干进行了卫生状况调查,结果葡萄干泥沙类杂质含量约0.19%,葡萄干原样菌落总数平均约3.9×103CFU/g,表明市场上的葡萄干直接食用是不卫生。经自来水20 s短时间高压冲洗或继而再淋无菌水后测定,结果表明自来水高压冲洗后最高除菌率为92.0%,无菌水冲洗后最高除菌率为98.3%,样品葡萄干的菌落总数都能降到1 000以下。这方法生产上简单可行,对提高市场葡萄干质量具有重要意义。     

不同方法检测鸡蛋表面菌落总数的相关性研究

研究了ATP生物荧光检测法与国标法《GB4789.2-2010食品卫生微生物学检验菌落总数测定》检测鸡蛋壳表面细菌总数的相关性。采用ATP生物荧光检测法和国标法对40个混合样品表面细菌总数进行检测,以log CFU/个蛋壳为横坐标(x),以logRLU/个蛋壳为纵坐标(y),分别进行线性、对数、乘幂、指数拟合。结果表明,ATP荧光检测法与国标法检测结果 Pearson相关系数为0.912,线性模型y=0.7306x-1.0041(R2=0.8322)拟合度较高。该试验结果为ATP荧光检测法在鸡蛋壳表面细菌总数快速检测中应用的可行性提供了依据。     

根际益生菌链霉菌S506固体发酵条件优化

链霉菌S506是一株具有广谱防病、促生和降解根系毒素功能的根际益生菌.采用液固两相发酵工艺,以活菌总数和分生孢子产生量为检测指标,研究了S506活菌制剂固体发酵物料的配方和工艺参数.获得固体发酵物料的最佳参数为:麸皮100 g、M-115g、磷酸氢二钾0.3 g、氯化钠0.25 g、硝酸钾0.1 g、碳酸钙0.8 g,自然pH值,液体菌种种龄84 h,接种量10%,发酵温度30℃,料水比10:6,发酵时间60 h.在最佳发酵条件下,S506固体菌剂的活菌总量达到8.27×109CFU/g,分生孢子数达到6.23×109CFU/g.     

环丙沙星预先处理牙鲆消化道对干酪乳杆菌定植的影响

利用1株干酪乳杆菌,通过实验研究用环丙沙星预先处理牙鲆消化道后乳杆菌的定植和演替规律。在投喂含有1.2×10^9CFU/g乳杆菌的饲料5 d后,消化道定植的乳杆菌超过106CFU/g,其后维持在10^6～10^8CFU/g动态平衡中。同时随着乳杆菌的投喂,不经环丙沙星预先处理牙鲆消化道的正常组,鱼消化道的弧菌数从10^7～8CFU/g降低到10^6CFU/g左右;而经环丙沙星预先处理牙鲆消化道的药饵组,鱼胃、小肠和盲囊的弧菌数则是先增加,然后显著下降。停喂乳杆菌7 d后,2个实验组鱼消化道的乳杆菌均从10^5～6CFU/g下降到10^4CFU/g,干酪乳杆菌正常组鱼盲囊中弧菌从10^5CFU/g回升到10^6CFU/g,胃和小肠中弧菌数量基本不变。干酪乳杆菌药饵组则有所不同：除胃中弧菌数量则基本不变外,盲囊和小肠中弧菌数量继续下降,其原因有待进一步研究。实验结果表明,干酪乳杆菌能在牙鲆消化道内定植,而用预先处理牙鲆消化道后,更有利于乳杆菌的定植;乳杆菌的投喂和定植,使牙鲆消化道中的弧菌数量明显下降。     

降雨对秦皇岛西浴场细菌总数和可培养菌群组成的影响

【目的】研究降雨条件对浴场细菌总数和优势菌群组成的影响。【方法】2014年8月强降雨前后采集秦皇岛西浴场3个站位的海水样品,采用荧光显微镜计数法和平板计数法分别对细菌总数和可培养细菌总数进行计数;对群落结构组成进行分析,并对可培养细菌进行鉴定。【结果】雨前3个站位细菌总数和可培养细菌总数平均值分别为5.6×10~9 CFU/L和8.3×10~7 CFU/L,雨后分别为9.2×109 CFU/L和2.1×10~8 CFU/L。在可培养菌群中,变形菌门(Proteobacteria,雨前占80%,雨后占73%)是主要的微生物类群,其次为拟杆菌门(Bacteroides,雨前占12%,雨后占13%)、厚壁菌门(Firmicutes,雨前占7%,雨后占11%)等;肠杆菌属(Enterobacter spp.,21株)、海杆菌属(Marinobacter spp.,13株)、弓形菌属(Arcobacter spp.,13株)、假单胞菌属(Pseudomonas spp.,10株)、芽孢杆菌属(Bacillus spp.,10株)和弧菌属(Vibrio spp.,6株)为雨前可培养细菌优势属,而雨后可培养细菌优势属为肠杆菌属(22株)、海杆菌属(21株)、芽孢杆菌属(14株)、不动杆菌属(Acinetobacter spp.,11株)、假单胞菌属(9株)和弓形菌属(5株)等。【结论】降雨对细菌总数有显著的影响,同时降雨后浴场微生物群落结构发生了改变。     

抗感青枯病番茄的内生细菌数量动态分析及其对青枯病的生物防治

对番茄内生细菌数量动态及其对青枯病的生物防治研究结果表明:番茄内生细菌可来源于种子内部。番茄不同生育期,内生细菌数量最多在成株期,其中抗病品种根、茎分别为24.3×104CFU/g鲜重和22.9×104CFU/g鲜重,感病品种根、茎分别为9.8×104CFU/g鲜重和13.4×104CFU/g鲜重。抗病品种中具有拮抗青枯菌的内生细菌菌株为17个,感病品种中7个。部分内生细菌具促进番茄种子萌发和防治番茄青枯病的作用,其中5R和3R内生菌株的防病效果分别达91.7%和81.3%。     

大豆内生细菌的分离及根腐病拮抗菌的筛选鉴定

内生细菌存在于健康植物体内,一些内生细菌具有促生长、抗病和固氮等生物学功能.本项研究采用化学药剂表面灭菌方法从黑龙江省大豆品种合丰25的根、茎、叶和种子中分离到大量内生细菌,其种群数量在根部最多,为3.4×103CFU/g,在叶部次之,为2.8×103CFU/g,在茎部和种子中最少,为2.9×102 CFU/g和1.4×102CFU/g.从121株内生细菌中筛选到31株对大豆根腐病菌Fusarium oxysporum f. sp.soybean具有较强抑制作用的拮抗内生细菌,其中菌株TF28抑菌谱广,抑菌率高,对不同植物的病原菌F. oxysporum的抑菌率为80.2%～96.7%.经形态、生理生化和16S rRNA鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens).     

滴水湖沉积物中可培养优势微生物种群初探

于滴水湖湖心采集底泥样品,对底泥中可培养优势菌种进行分离、纯化,并利用Biolog微生物自动分析系统进行鉴定。结果显示,滴水湖沉积物中菌落总数为2.43×104CFU/g,分离纯化后的8株优势菌种中,革兰氏阴性菌占87.5%,其中7株为GN-NENT(革兰氏阴性非肠道菌)、1株为GP-ROD SB(革兰氏阳性芽孢杆菌)。鉴定结果显示,8株菌种分别为:鳗鱼气单孢菌(Aeromonas encheleia)、乙酸钙不动杆菌/基因型1(Acinetobacter calcoaceticus/genospecies1)、舒氏气单胞菌(Aeromonas schubertiiDNA group12)、腐败希瓦氏菌B(Shewanella putrefaciens B)、维罗纳/温和气单胞菌(Aeromonas veronii/sobria DNA group8)、坎氏弧菌(Vibrio campbelli)、蕈状芽孢杆菌(Bacillus mycoides)和梅氏弧菌(Vibrio metschnikovii)。     

基于ATP的微菌含量样品快速检测方法的研究

本实验分别采用ATP生物发光法和营养琼脂平板培养法对血透用水中微量细菌总数进行检测,针对ATP检测方法在微菌含量样品检测中的应用限制,设计并实现了新的集菌方式和进样方式。首先将被测样品中的微量细菌浓缩到集菌膜上,再原位使其充分裂解,然后取微量液体进行测试,这样解决了现有ATP生物发光监测仪微量进样测试要求的弊端。通过这种改进,成功实现了利用ATP发光法快速检测微量浓度菌液。利用该检测装置和测试方法,我们尝试了检测0-100CFU/mL的被测样品,并用平板培养法进行定标,实验结果表明:在2—100CFU/mL被测范围内,其线性度和灵敏度较好,相关系数达到0.99887。这就为微菌含量样品快检领域提供了新的可尝试的实验方法和机遇。     

长双歧杆菌DD98冻干保护剂优化及菌粉保存稳定性研究

以长双歧杆菌DD98为研究对象,通过对冻干保护剂配方的优化,冻干菌粉的存活率提高到90%以上。通过进一步稳定性研究,采用保护剂优化配方制备的冻干菌粉在4℃保存24个月后,活菌数仍在1.0×10^10 CFU/g以上,在25℃条件下可以保存12个月,双歧杆菌的存活率在1.0×10^6CFU/g以上,符合FAO/WHO建议食品益生菌活菌数应在1.0×10^6 CFU/g^1.0×10^7CFU/g的标准。     

市售鲫鱼肠道中沙门菌的调查研究

目的 为摸清市场中出售鲫鱼沙门菌的污染情况.方法 以徐州市某市场上出售的鲫鱼为材料,主要采用SS琼脂平板对120份肠道样品中的沙门菌进行初步鉴定和培养计数.结果 在120份鲫鱼肠道中共检出沙门菌32份,阳性率为26.7％ (32/120),菌群数量分布在(0.32 ～9.12)×103 CFU/g.结论 本研究对徐州地区市售鱼类沙门菌检疫及疾病防治等提供重要参考.     

产磷脂酶C芽孢杆菌Z-13产酶条件优化

以生物量和酶活为主要指标,采用单因素优化方法结合均匀设计试验,对芽孢杆菌Z-13产磷脂酶C(phospholipaseC,PLC)条件进行了优化。结果表明,该菌合适的产酶条件为:魔芋飞粉2.5 g/L、黄豆粉30 g/L、K2HPO4·3H2O 2.8 g/L、Zn2SO4·7H2O 1.3 g/L、接种量0.5%、摇床转速150 r/min、培养温度30℃、初始pH值9.0,在此条件下培养15 h,活菌总数为4.5×109CFU/mL,卵黄琼脂杯碟法测定磷脂酶C产生的沉淀圈(乳白色晕圈)直径可达30 mm。     

中草药复方对草鱼鱼种肠道菌群与血液有形成分的影响

目的探讨中草药复方对鱼种肠道菌群和血液有形成分的影响。方法以草鱼鱼种为动物模型,分别采用平板倾注法和ATB半自动化细菌鉴定法,测定投喂中草药复方药饵前、后鱼种肠道菌群数量及其优势菌群种类。同时使用常规计数法和改良沙利法,测定鱼种血液中红细胞、白细胞和血红蛋白的含量。结果对照组鱼种肠道内的细菌总数为6．6×10^8CFU／g,其优势菌群为气单胞菌、假单胞菌和肠杆菌;投喂2．5％、5．0％和7．5％中草药复方药饵10d后,其肠道内细菌总数均有所减少,分别为3．0×10^7CFU／g、5．0×10^6CFU／g和1．5×10^7CFU／g,其优势菌群为吲哚黄杆菌、产碱假单胞菌和野油菜黄单胞菌。实验组与对照组鱼种的红细胞数量差异无显著性,但白细胞与血红蛋白的含量差异有非常显著性（P〈0．01）。结论以黄连、大黄、金银花、连翘、黄芪和甘草组成的中草药复方对鱼种肠道菌群和血液有形成分均有一定影响,表现出该复方具有较好的免疫抗病作用。     

绿杨春绿茶的抗氧化作用

对绿杨春茶社的绿茶进行了体外抗氧化研究,结果表明:绿茶含有很高的酚(单宁酸,576 mg/g)和类黄酮(儿茶酚,108.77 mg/g),具有很强的自由基清除能力,其对DPPH·和超氧分子清除能力为IC50值8.79和62.86μg/mL;还原能力和总抗氧化能力也很显著,总抗氧化能力超过了正对照BHT;绿茶能很好地保护由自由基所引起的蛋白损伤,并且抑制酪氨酸酶的活性,其酪氨酸酶抑制作用可以和天然氧化物维生素C相抗衡。该结果表明了绿杨春茶社的绿茶是一个很好的抗氧化剂,并且对美白具有一定的作用。     

口服乳酸杆菌对大鼠粪便正常菌群的影响

本文报告Wistar大鼠在口服嗜酸性乳酸杆菌和嗜热性链球菌前,服后1,2,3,4周及停服1周后的粪菌群俭查结果按每克粪便的菌落形成单位(CFU/g)计算。结果表明:大鼠粪便中排出的乳酸杆菌数量在厌氧培养和需氧培养中不同。在厌氧培养中,口服前为19~(9.41),口服后和停服后为10~(8.99～9.42)CFU/g;在需氧培养中,口服前为     

海洋细菌L_1-9双抗菌株的定殖能力及其对黄瓜枯萎病的防治作用

采用抗生素标记法,对海洋多黏类芽孢杆菌L1-9菌株进行标记,抗性菌株L1-9Str,rif对链霉素和利福平的抗性浓度分别为160μg/m L和20μg/m L。双抗菌株L1-9Str,rif的抑菌特性及其对链霉素和利福平的抗性经多次传代仍比较稳定。盆栽试验表明,该双抗菌株能在黄瓜根部土壤及根组织、茎基部、子叶和真叶组织中定殖。菌株L1-9Str,rif在黄瓜外根际、根际和根表土壤及黄瓜组织中的定殖动态基本一致,初期黄瓜组织中L1-9Str,rif菌量较少,随着时间的延长,菌量逐渐增加,达到高峰后逐渐减少。菌株L1-9Str,rif在根表土壤中菌量最多(1.76×109 CFU/g),其次是根际土壤,外根际土壤中菌量较少;在黄瓜组织中,菌株L1-9Str,rif其在子叶中的定殖能力最强(5.63×104 CFU/g),其次是根和茎基部(0-2 cm);调查至第26 d时在根部土壤中的含菌量仍保持在稳定的水平,其中根表土壤中含菌量最高(2.41×107 CFU/g),在黄瓜组织样品中,子叶中的含菌量最高(4.15×104 CFU/g);温室防病实验结果表明,菌株L1-9和L1-9Str,rif菌株对黄瓜枯萎病具有良好的防治效果,不同时期防效均达70%以上。上述结果表明来自海洋的多黏类芽孢杆菌L1-9菌株能在黄瓜根部土壤及幼苗组织中定殖,是一株有潜力的黄瓜枯萎病生防菌株。