培养温度和保存时间对草履虫密度的影响

草履虫是原生动物门纤毛纲的代表动物。在培养与保存草履虫的过程中,培养液中草履虫密度高低,直接影响学生的实验效果。实验证明,草履虫的生长、繁殖受温度影响比较大。草履虫培养液在不同温度条件下、保存时间长短不同,草履虫的密度不同。围绕着这一问题,进行了温度和时间对草履虫密度影响的研究。     

培养液及其浓度和pH值对草履虫种群增长的影响

采用稻草、小麦、奶粉、酵母、玉米粒、荷叶等6种培养液培养草履虫,结果表明,稻草、玉米粒和奶粉培养液为草履虫的理想培养液。另外,对上述3种理想培养液的不同浓度和稻草培养液的不同pH值影响草履虫的生长繁殖进行了实验研究,统计分析表明影响较为明显。稻草培养液的最适浓度为1%~2%;奶粉培养液的最适浓度为0.1%~0.2%;玉米粒培养液的最适浓度为1%~2%;稻草培养液最适pH值为7.0。     

光照周期对大草履虫种群变化的影响

为探究光照周期对大草履虫种群变化的影响,以光照周期为变量,将实验样本按24L/0D、0L/24D、12L/12D及6L/18D的光照周期分为4组进行培养。培养条件为温度25℃,光照强度4 800 lx,先后使用稻草汁培养液和酵母培养液,分别在有限培养环境及食物充足的条件下进行实验。结果表明,在2种实验条件下,光照周期对环境容纳量都有极显著的影响(P0.01),其中全暗条件下环境容纳量最高,光周期对大草履虫种群增长率无显著影响(P0.05)。     

用沼液培养草履虫的方法

草履虫（Paramecium caudatum）作为生物学的代表动物。在揭示生命的一些基本规律中显示出极大的科学价值。其培养方法,已有诸多报道。人教版生物第1册（下）的“培养和观察草履虫”实验一般采用稻草秆的水煮液做培养液。这里介绍一种用沼液来培养草履虫的方法。     

对草履虫培养和观察实验的改进

尾草履虫Paramecium caudatum Ehrenberg,又称草履虫、大草履虫,属原生动物门,纤毛纲,是动物界中较原始、较低等、较典型的单细胞动物。其个体较大、结构典型、繁殖快、观察方便、容易采集和培养,不仅生物学教学中以它做代表动物,也用作一种研究模型,在遗传学、细胞生物学、生物化学及生理学等领域广泛应用,在揭示生命的一些基本规律中显示出极大的科学价值。尽管草履虫很容易采集到,但培养和观察草履虫的实验多安排在初冬季节,此时室外温度一般在10℃左右,天然水体中的草履虫密度远远不能满足实验的要求,必须提前进行人工培养。     

一种培养草履虫的新方法

一种培养草履虫的新方法目前,稻草虽是培养草履虫普遍使用的一种材料,由于稻草受农药污染日趋严重,一般简便的稻草场培养方法,往往不能高速繁殖草履虫,达不到理想的种群。数年来我反复实验发现,以菹草（Ｐｏｔａｍｏｇｅｔｏｎｃｒｉｓｐｕｓ）和玉米粉配制的培养液...     

草履虫培养材料的筛选及与其生长相关因素的初步探讨

草履虫培养材料的筛选及与其生长相关因素的初步探讨合肥一中学生生物课外活动小组我们在准备草履虫实验中发现,常规稻草液的培养效果并不十分理想。虫体长宽值,群体密度都不十分高,直接影响了观察实验的效果。为此,我们从常见的禾本科其他植物和富含蛋白质的花生米入...     

快速繁殖水螅的技术

水螅是腔肠动物门的代表动物 ,是动物学教学中必不可少的实验材料。关于水螅的培养 ,已有诸多报道。这里介绍一种比较方便、短期内就能繁殖大量水螅的方法。1　草履虫的培养培养草履虫的方法很多。玉米、玉米秆、稻草、麦粒、麦秆和槐树叶等的煮液或微小的蛋黄颗粒都是培养草履虫的好材料。2　水蚤的培养水质肥沃的水池或鱼塘 ,水蚤非常丰富 ,用浮游动物网采集并培养于室内的玻璃缸中。待澄清后 ,及时清除缸底杂质。用吸管吸取草履虫培养液上层 ,特别是培养缸边沿的培养液 (草属虫的密度很大 ) ,滴入水蚤培养缸内 ,饲喂水蚤。若饲养量大 ,可…     

培养草履虫的一点经验

取陈旧稻草垫子的稻草,剪成0.5—1寸长,放在150毫升的小烧瓶内,加5克葡萄糖,再放100毫升凉开水(经煮沸10—15分钟后晾凉的),用纱布盖好,放在恒温箱内培养,在23℃左右,经5—7天就可培养出草履虫。此时将表面白膜移开,用肉眼即可观察到草履虫的白色小点。培养液中加葡萄糖的作用是使培养液中增加营养,有利于细菌和其他微生物的繁殖,为草履虫提供了充足的饵料。同样道理,在培养液中加入维生素,草履虫会生长得更好、更大。     

失重对草履虫生长和繁殖的影响

在地球引力场内,草履虫能够正常生长,当它遇到恶劣条件时(如低温、缺水等),就形成胞囊来保护自己。那么,在无引力的情况下,草履虫能否正常生长繁殖呢?本实验用离心、干燥法保存草履虫胞囊,密封瓶盛稻草水培养草履虫,利用小灯泡为革履虫供光、供热,用福尔马林固定实验结果,在航天飞机返回后进行镜检计数,以确定失重情况下草履虫的生长繁殖情况。     

匙吻鲟仔稚鱼消化酶发育的研究

对出膜后0—53d匙吻鲟的酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、α-淀粉酶、脂肪酶以及磷酸酶的活性变化进行了测定。匙吻鲟出膜后饲养于室内水泥培育池中,从第3天开始投喂枝角类,之后于第40天将试验鱼转移至池塘。试验材料为受精卵及出膜后第3、第6、第12、第20、第30、第40、第44、第47、第53天仔稚鱼样品。研究发现主要消化酶在出膜时或卵黄期即可检测出活力。碱性蛋白酶和酸性蛋白酶分别在出膜后3d(3DAH)和刚出膜时(0DAH)检测出活力。碱性蛋白酶活力在44DAH达到最大值[(1.96±0.09)U/fish],47DAH出现下降,但在53DAH开始上升,比活力在53DAH达到最大值[(8.84±0.59)U/mg protein]。酸性蛋白酶在44DAH达到最大值[(0.52±0.05)U/fish],比活力在6DAH出现第一个峰值[(2.08±0.09)U/mg protein],并在30DAH出现最小值[(0.83±0.06)U/mg protein]。试验期间碱性蛋白酶活力高于酸性蛋白酶。在12DAH—40DAH期间α-淀粉酶活力相对稳定,并在47DAH达到最大值[(0.42±0.03)U/fish],比活力在12DAH出现一个峰值[(1.18±0.12)U/mg protein],并于47DAH出现最大值[(1.94±0.16)U/mg protein]。发育早期脂肪酶活力较高,活力和比活力分别在30DAH[(0.20±0.02)U/fish]和6DAH[(2.28±0.22)U/mg protein]出现最大值。碱性磷酸酶活力变化趋势与比活力变化趋势相似,但是最大值分别出现在44DAH[(0.08±0.00)U/fish]和30DAH[(1.96±0.15)U/mg protein]。酸性磷酸酶活力在3DAH出现一个峰值[(0.01±0.00)U/fish],之后显著升高,并在44DAH达到最大值[(0.05±0.00)U/fish],其比活分别在30DAH[(1.19±0.10)U/mg protein]和44DAH[(1.10±0.08)U/mg protein]出现两个峰值。结果表明,蛋白酶、α-淀粉酶和磷酸酶随个体发育活力增加,碱性蛋白酶在个体发育早期对蛋白质的消化具有重要作用。养殖环境发生改变时,酸性蛋白酶、α-淀粉酶、碱性磷酸酶和酸性磷酸酶活力在生长减慢时增加,生长加快时降低,而脂肪酶活力则维持稳定。     

n-6/n-3 多不饱和脂肪酸营养失衡对小鼠精子发生的影响

目的:探讨n-6/n-3多不饱和脂肪酸营养失衡对小鼠精子发生的影响。方法:健康的30只C57/B6雄鼠随机分为对照组(CON)、高脂组(HF)、花生四烯酸组(HF+AA)。喂食16周,做合笼实验并记录致孕率,通过精子动力分析仪检测小鼠精子活力和数量的变化,用Elisa试剂盒测血清中睾酮和甘油三酯水平。通过病理组织染色观察小鼠睾丸组织的形态学变化。利用Realtime-PCR的方法检测小鼠睾丸中Dazl基因表达水平的变化。结果:高脂组、花生四烯酸组与对照组相比精子活力[(16±0.01;12.33±2.83 vs72.2±12.73)%,P0.001],精子数量[(7.5±1.13;6±0.14 vs 13.87±0.35)million/m L,P0.001],致孕率[(28.57;14.29 vs 78.57)%,P0.001]及血清睾酮含量[(0.35±0.14;0.27±0.07 vs 3.51±0.7)ng/m L,P0.001]均显著性降低。高脂组、花生四烯酸组与对照组相比,血清中甘油三酯的含量显著增高[(0.74±0.04;0.74±0.04 vs 0.45±0.04)mmol/L,P0.001]。病理组织染色观察到花生四烯酸组小鼠睾丸组织出现了明显异形,曲细精管内部的初级精母细胞明显缺失,管腔中从初级精母细胞到精子的发生过程出现了变异,精子的数量也显著性下降。参与精子生成过程中的减数分裂前的有丝分裂增殖期、精原细胞的发育等过程的Dazl基因在高脂组和花生四烯酸组小鼠睾丸中的表达量与对照组相比显著降低(0.87±0.05;0.65±0.03 vs 1.07±0.04,P0.05)。结论:膳食中n-3/n-6多不饱和脂肪酸失衡会导致雄鼠精子发生发育的障碍     

不同途径移植脐带血干细胞对兔2型糖尿病的疗效观察

目的观察不同途径移植脐带血干细胞对兔2型糖尿病的治疗效果。方法 30只新西兰白兔,雌雄各半,制备2型糖尿病模型,随机分成5组,其中6只在兔的胰腺内注射脐带血干细胞5×10~5个(A组),6只向胰腺背动脉内注入脐带血干细胞5×10~5个(B组),6只经耳缘静脉输注脐带血干细胞5×10~5个(C组),6只在腹腔内多处注入脐带血干细胞5×10~5个(D组),其余6只向腹腔内注射相同体积的PBS液作为对照组(E组)。HE染色观察胰腺组织形态学变化。以上5组白兔均培养观察4周,每天监测白兔血糖,每周测血浆胰岛素水平,采用单因素方差分析和t检验对血糖值及胰岛素水平进行统计分析。结果 A组及B组在移植后血糖逐渐下降,胰岛素水平逐渐上升,第4周末,血糖降至(6.80±0.64)mmol/L和(6.78±0.57)mmol/L,胰岛素水平逐渐回到正常分别为(25.60±1.47)m U/L和(25.55±1.52)m U/L,与E组(21.77±2.70)mmol/L和(3.80±0.41)m U/L比较,差异均有统计学意义(P0.01)。而C组血糖较前下降,至第4周末血糖及胰岛素均未回正常水平,分别为(9.97±1.19)mmol/L和(15.82±1.05)m U/L,D组仍维持高血糖状态,血糖水平为(21.00±1.99)mmol/L,胰岛素水平无明显变化(3.77±0.31)m U/L,与E组(21.77±2.70)mmol/L和(3.80±0.41)m U/L比较,差异无统计学意义(P0.05)。移植后4周A、B两组胰腺组织形态得到明显改善,C组部分改善,D组无明显改善。结论将脐带血干细胞在胰腺、胰腺背动脉注射及耳缘静脉输注进行移植,可以明显降低血糖,增加胰岛素分泌量,其中,胰腺和胰腺背动脉注射效果优于耳缘静脉输注,腹腔内移植无明显效果。     

草履虫培养方法的比较研究

草履虫(Paramoecium caudatum)是原生动物门纤毛纲的代表动物,是动物学教学最常用的实验材料之一。传统培养草履虫的方法是用稻草液培养,近年来又有采用玉米粒、玉米雄芯、小麦粒、荷叶、动物组织、蚕黄、葡萄糖、奶粉、干酵母等材料制成培养液进行培养的报道。但究竟哪种方法效果较好,缺乏客观的比较与评价,由此特进行了本试验,旨在筛选较好的培养方法,为有效地培养教学实验动物提供科学依据。     

布拉氏酵母对肺炎继发腹泻患儿的辅助治疗效果及对肠道菌群和免疫功能的影响CSCD

目的 探究布拉氏酵母辅助治疗肺炎继发腹泻患儿的疗效及对肠道菌群和免疫功能的影响,以明确布拉氏酵母的干预效果。方法 以便利抽样法选取本院收治的128例肺炎继发腹泻患儿作为研究对象,随机分为对照组(64例)和辅助治疗组(64例)。其中对照组患儿给予蒙脱石散治疗,辅助治疗组给予布拉氏酵母辅助治疗。比较两组患儿治疗效果,免疫球蛋白(IgM、IgG、IgA)、T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)水平,肠道菌群及不良反应发生情况。结果 辅助治疗组患儿住院时间[(5.31±0.53)d]、止泻时间[(3.15±0.32)d]、退热时间[(1.25±0.15)d]、大便次数恢复正常时间[(3.56±0.36)d]均显著低于对照组[(7.45±0.75)d、(4.36±0.45)d、(2.46±0.25)d、(4.11±0.40)d](均P<0.05)。辅助治疗组患儿治疗后外周血IgM、IgG、IgA、CD3+细胞、 CD4+细胞、肠球菌属、乳杆菌属、 CD8+细胞、真杆菌属数量和水平分别为(1.52±0.17)g/L、(15.36±1.57)g/L、(1.85±0.25)g/L、(58.37±5.86)%、(40.57±4.12)%、(12.53±1.25)lgCFU/g、(10.68±1.08)lg CFU/g、(18.42±1.86)%、(2.80±0.28)lg CFU/g,对照组分别为(1.23±0.13)g/L、(12.43±1.26)g/L、(1.42±0.15)g/L、(51.24±5.15)%、(36.78±3.71)%、(11.05±1.12)lgCFU/g、(9.23±0.95)lgCFU/g、(21.64±2.18)%、(3.27±0.33)lg CFU/g,与治疗前比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);且两组治疗后组间比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。两组患儿不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 布拉氏酵母菌辅助治疗肺炎继发腹泻患儿可有效提高免疫功能,改善肠道微生态,缩短治疗时间,安全有效。     

共生小球藻对宿主绿草履虫形态、生长、抗氧化能力及细胞质糖含量的影响

以含共生藻绿草履虫 (CCP)、恢复型绿草履虫 (RCCP)和无共生藻绿草履虫 (CFP)为材料 ,探讨共生体对宿主生长、细胞大小、抗氧化能力和细胞质糖含量的影响。 3种细胞培养液中 ,细胞培养密度峰值分别为 15 0 0、 80 0和 5 0 0个 /mL ,对应的生长峰值期分别在第 14天、第 14天和第 8天。CCP细胞比CFP约长 2 2μm ,约宽 16 μm ;RCCP在CCP和CFP之间。对邻苯三酚自氧化产生O2 化学发光的抑制效果不同 :随匀浆液浓度 (μL/mL)从 2 0增加到 10 0时 ,CCP抑制率提高了 6 7% ,RCCP提高了 4 2 % ,而CFP和小球藻仅分别为 2 7%和<10 %。细胞质葡萄糖和麦芽糖含量差异巨大 :CCP分别为RCCP的 4和 2倍 ,而CFP是RCCP的 1/ 4和 1/ 2。看来 ,绿草履虫在这个共生系统中受益。     

对“草履虫培养方法”的一点补充

初中《动物学》教材第7页,关于草履虫的采集和培养,有这样一段话:“……还可将稻草秆切成1寸左右的小段,浸泡在盛有淡水的培养器里,放在温暖的地方,过两周后,在液体上层可以看见很多游动的小白点,这就是草履虫”。我认为这句话说得不准确,容易使人误认为草履虫是由稻草长出来的,同时在实践中,有的同学根据上述方法做实验,并未培养出草履虫。其关键是没有介绍出稻草秆上要粘有草履虫的胞囊。因此,我建议将上述方法修改如下:     

Cd++对草履虫种群的毒性作用

通过研究20℃培养条件下Cd 对草履虫(Paramecium caudatum)种群毒性影响,结果表明:Cd 对草履虫的24hLC50为0.3294mg/L,Cd 浓度对草履虫的种群增长率有极显著影响,多重比较结果显示高浓度组(0.25和0.30mg/L)下草履虫的种群增长率显著小于低浓度下(0.05、0.15和0.20mg/L)的值。回归分析结果表明草履虫种群增长率(Y,/d)与Cd 浓度(X,mg/L)之间呈曲线相关。在一定浓度范围内,草履虫种群增长率随Cd 浓度的升高而呈增大,但高的Cd 浓度显著地降低了草履虫的种群增长率;当Cd 浓度为0.1179mg/L时,草履虫种群有最大增长率1.5442/d。各浓度组与对照组之间的t-检验结果表明在较低的Cd 浓度范围内(0.05、0.10和0.15mg/L)草履虫的种群增长率显著大于对照组的值,而Cd 浓度为0.30mg/L时的草履虫种群增长率显著小于对照组的值。     

甘利欣联合阿奇霉素治疗支原体肺炎伴肝功能损害患儿的效果 及对血清炎症因子、KL-6 及NF-κB 水平的影响

目的:探讨甘利欣联合阿奇霉素治疗对支原体肺炎伴急性肝功能损害患儿血清炎症因子、Ⅱ型肺泡表面抗原-6(KL-6)及核因子-κB(NF-κB)水平的影响。方法:选取86例支原体肺炎伴急性肝功能损害患儿为受试对象,随机数字表法分成研究组和对照组各43例。对照组中途脱落1例,共42例有效病例入组,予以常规对症治疗+阿奇霉素疗法;研究组中途脱落3例,共40例有效病例入组,在对照组治疗基础上联合甘利欣静脉滴注疗法。观察对比两组受试患儿治疗前后血清炎症因子[白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-12(IL-12)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、血清KL-6、血清NF-κB、肝功能指标[血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)]变化情况,记录其发热、咳嗽、肺部湿罗音等消失时间差异。结果:治疗4w后,两组患儿IL-6[(44.5±6.2)pg/m L vs(60.3±6.6)pg/m L]、IL-12[(42.4±6.2)pg/m L vs(52.1±6.8)pg/m L]、TNF-α[(128.6±44.8)ng/L vs(201.4±51.8)ng/L]等血清炎症因子检测结果、ALT[(46.8±9.5)U/I vs(83.6±9.8)U/I]、AST[(62.2±10.1)U/I vs(84.8±10.2)U/I]、TBIL[(38.2±8.5)μmol/L vs(49.3±9.0)μmol/L]等肝功能指标检测结果及血清KL-6[(5.9±0.6)pg/m L vs(6.5±0.7)pg/m L]、NF-κB[(7.8±0.4)pg/m L vs(8.1±0.3)pg/m L]水平均较治疗前显著降低,且研究组小于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。研究组患儿治疗后发热、咳嗽、肺部湿罗音等消失时间均显著短于对照组患儿,差异有统计学意义(P0.05)。结论:甘利欣联合阿奇霉素疗法可在促进支原体肺炎伴急性肝功能损害患儿病情转归、改善其血清炎症因子、调节肺功能、肝功能状态等方面发挥积极作用。     

急性高血糖影响小鼠第一时相胰岛素分泌的机制

目的观察急性高血糖影响小鼠第一时相胰岛素分泌的功能及形态学变化特点。方法给C57/BL 6J小鼠完成颈静脉插管后输注20%高糖溶液4 h,建立急性糖毒性小鼠模型,行腹腔葡萄糖耐量实验(intraperitoneal glucose tolerance test,IPGTT)及口服葡萄糖耐量实验(oral glucose tolerance test,OGTT)评价葡萄糖耐量及胰岛素分泌功能。HE染色及电镜观察胰岛形态变化及细胞内胰岛素分泌颗粒亚细胞结构变化。结果 IPGTT实验中急性糖毒性组15 min血糖值较对照组显著增加[(10.3±0.33)mmol/L vs(19.3±1.66)mmol/L],上升87%(P0.05),OGTT实验中30 min血糖值较对照组显著增加[(9.8±0.31)mmol/L vs(18.16±1.01)mmol/L],升高85%(P0.05),且早期胰岛素分泌高峰受损且分泌延迟。GSIS实验中急性糖毒性组在基础状态时(葡萄糖浓度2.8 mmol/L)和高糖(16.7 mmol/L)刺激后,胰岛素分泌较对照组显著降低[(0.481±0.003)ng/m L vs(0.702±0.121)ng/m L,(2.43±0.03)ng/m L vs(4.07±0.34)ng/m L],分别下降46%和67%(P0.05);胰岛素含量测定结果显示,急性糖毒性组比对照组降低[(97.01±2.05)ng/m L vs(65.12±0.42)ng/m L,(121.40±0.58)ng/m L vs(62.7±0.48)ng/m L],下降49%和94%(P0.05)。HE染色显示急性糖毒性胰岛边界不规则、内部细胞排列不整;透射电镜可见细胞内胰岛素分泌颗粒空泡,线粒体嵴断裂。结论急性葡萄糖毒性使胰岛β细胞内胰岛素储备减少,导致第一时相分泌胰岛素峰值降低及延迟。