50株泌尿系感染的大肠埃希氏菌对6种头孢菌素类抗生素的耐药性 …

用Ｋ－Ｂ法测定了５０株来自临床尿液标本的大肠埃希氏菌６种头孢菌素类抗生素的耐药性,结果显示头孢噻甲羧肟耐药率为４％,头孢噻肟的６％,头孢呋肟为１４％,头孢唑啉及头孢哌酮为３０％,头孢噻吩为５０％。     

50株泌尿系感染的大肠埃希氏菌对6种头孢菌素类抗生素的耐药性分析

用Ｋ—Ｂ法测定了５０株来自临床尿液标本的大肠埃希氏菌对６种头孢菌素类抗生素的耐药性,结果显示头孢噻甲羧肟耐药率为４％,头孢噻肟为６％,头孢呋肟为１４％,头孢唑啉及头孢哌酮为３０％,头孢噻吩为５０％。     

一种用于检测5′-核苷酸磷酸二脂酶的荧光底物合成方法

本文利用间苯二酚为原料合成4-甲基伞形酮,继而经过磷酸酯化,缩合等反应过程合成4-甲基伞形酮-5′-胸腺嘧啶核苷磷酸二酯。反应过程中对胸腺嘧啶核苷的3′位羟基未加任何保护,缩合反应特异地发生在核苷的5′位羟基上。产品经过DEAE-葡聚糖凝胶柱层析分离纯化。利用纸层析、吸收光谱和酶学反应特征鉴定都证明合成的产品对于5′-核苷酸磷酸二酯酶具有专一性,可以用于5′-核苷酸磷酸二酯酶活性测定以及其同工酶谱分析。     

我院2008-2011年抗菌药物使用量与铜绿假单胞菌耐药相关性的研究

目的:探讨2008-2011年我院抗菌药物使用与铜绿假单胞菌(PA)耐药水平变化之间的关系.方法:计算10种抗菌药物平均每日每百张床住所消耗的限定日剂量(DDD)及同期PA的耐药率,并对抗菌药物用量与耐药率进行相关性分析.结果:发现头孢哌酮/舒巴坦及左氧氟沙星DDD分别与铜绿假单胞菌对头孢噻肟、头孢吡肟、左氧氟沙星、亚胺培南、头孢噻肟、头孢哌酮/舒巴坦、头孢吡肟耐药率的相关性有统计学意义,其它组数据无统计学意义.结论:呼吸病区左氧氟沙星及头孢哌酮/舒巴坦DDD的使用量与PA耐药率相关.     

信使核糖核酸5′末端帽状结构和功能

信使核糖核酸(mRNA)5′末端帽状结构是病毒mRNA和真核细胞mRNA的重要修饰之一。1974年Reddy在研究Novikoff肝瘤细胞时首先发现细胞核的一种低分子量RNA5′末端具有封闭的帽状结构,其特点是2,2,7-三甲基鸟苷由5′-5′焦磷酸连接于2′-邻甲基腺苷。此后,陆续证实帽状结构存在于多种病毒mRNA和真核细胞mRNA中,并对其结构、功能和合成进行了大量研究。     

人乳寡糖2′-岩藻糖基乳糖的功能及其全细胞生物合成

母乳是新生儿最理想的营养剂。其中,人乳寡糖作为母乳的第三大固体组分,对新生儿的生长、发育及健康状况有重要影响,被应用于婴幼儿配方食品中。2′-岩藻糖基乳糖(2′-fucosyllactose,2′-FL),是分泌型母乳中含量最高的人乳寡糖,约占人乳寡糖总量的30%,具有重要的营养和医学价值。2′-FL能够促进婴幼儿生长发育、提高其认知能力、增强免疫力、抗过敏、抗病毒,以及调节肠道菌群,是极具潜力的新型营养强化剂。但是,2′-FL来源于母乳,依靠分离、提取获得大量2′-FL并不现实,因此亟需进行人工合成。人工合成2′-FL的方法有3种,包括：化学合成法、酶催化合成法和全细胞生物合成法。全细胞生物合成法因其成本相对低廉,且易于规模化扩大,而引起了国内外的广泛关注和研究。目前,国外很多跨国公司均开始布局2′-FL的工业化生产和应用,而我国在该领域尚处于研发阶段,因此,了解和掌握2′-FL的合成方法对我国开展2′-FL规模化生产具有重要的意义。本文旨在介绍2′-FL的功能特性,系统阐述其全细胞生物合成的关键技术和最新进展,讨论了针对限速步骤进一步提高产量的策略,旨在为2′-FL的合成和商业化生...     

可溶性核糖核酸的研究 Ⅲ.酵母可溶性核糖核酸中抗碱二核苷酸的分离与鉴定

利用Tomlinson和Tener的DEAE-纤维素柱层析方法,我们从酵母SRNA的碱水解产物分得抗碱二核苷酸的层析峰。将抗碱二核苷酸混合物用大肠杆菌碱性磷酸单酯酶处理后,纸层析分离可得到四个部分,分别称A_1,A_2,A_3及A_4。经鉴定A_1为2′-O-甲基鸟便嘌呤核苷-3′-磷酸-5′-鸟便嘌呤核苷(G'pG),A_2主要为2′-O-甲基胞嘧啶核苷-3′-磷酸-5′-鸟便嘌呤核苷(C'pG,纯度约为87%),A_3则至少合2′-O-甲基胞嘧啶核苷-3′-磷酸-5′-腺嘌呤核苷(C'pA)和2′-O-甲基鸟便嘌呤核苷-3′-磷酸-5′-腺嘌呤核苷(G'pA),A_4较为复杂,未最后鉴定。因此酵母SRNA中至少含有下列四种抗碱二核苷酸:2′-O-甲基鸟便嘌呤核苷-3′-磷酸-5′-鸟便嘌呤核苷酸(G'pGp),2′-O-甲基胞嘧啶核苷-3′-磷酸-5′-鸟便嘌呤核苷酸(C'pGp),2′-O-甲基胞嘧啶核苷-3′-磷酸-5′-腺嘌呤核苷酸(C'pAp)及2′-O-甲基鸟便嘌呤核苷-3′-磷酸-5′-腺嘌呤核苷酸(G'pAp)。除此以外,还得到核苷二磷酸的层析峰,其中主要为鸟便嘌呤核苷-2′(3′),5′-二磷酸,只有少量的腺嘌呤核苷-2′(3′),5′-二磷酸。     

用于肝癌检测的酶底物——5′-(5-碘吲哚酚-[3])胸腺嘧啶核苷酸的制备

检测人血清中5′-核苷酸磷酸二酯酶同工酶谱的变化,是诊断人类原发性肝癌的一个有效的血清酶学方法。和甲胎蛋白诊断法协同,可使肝癌的诊断符合率自80％提高到约94％。减少了甲胎蛋白诊断肝癌存在的假阴性问题,具有重要的临床诊断意义。 检测5′-核苷酸磷酸二酯酶(5′-NPDase)同工酶的底物,5′-(5-碘吲哚酚-[3])胸腺嘧啶核苷酸,我所潘禄兴等已有直接合成法报道。本文在潘禄兴等工作基础上对工艺作了改进,使产率有了明显提高。     

多核苷酸的3′-端磷酰化

本文报导了一种使寡聚核苷酸3′-端磷酰化的新方法。其原理是用多核苷酸磷酸化酶(PNPase),使7-甲基鸟苷5′二磷酸(m~7GDP)在引物存在下聚合,然后在温和的化学条件下,选择性消去7-甲基鸟苷(m~7G)。我们应用两种三核苷二磷酸CpCpA,CpUpC 作引物,结果成功地合成了两种三核苷酸CpCpAp,CpUpCp。此方法还可用于多核苷酸的3′-~(32)P 标记。     

头孢吡肟的研究进展分析

头孢吡肟属于第四代的头孢菌素类的抗生素,药物继承第四代头孢良好的抗菌效果,且抗菌谱比较广,有较强抗菌活性。头孢吡肟的毒性比较低且对于酶具有很强的耐受力等优势,在临床抗生素的应用中具有重要价值。本文主要介绍了头孢吡肟的化学分子式和作用机制,并对头孢吡肟的药理作用、药代动力学、临床疗效和应用前景等进行分析。     

pppA2′p5′A2′p5′A保护病毒感染细胞的普遍性

pppA2′p5′A2′p5′A(简称2′-5′P_3A_3)是干扰素作用于细胞后诱导产生的物质。干扰素的作用机理很复杂,其中之一是2′-5′寡聚腺苷酸合成酶的活力增加,此酶以ATP为底物合成2′-5′P_3A_3及其同系物2′-5′P_3An。但2′-5′P_3A_3或2′-5′P_3A_n本身是否具有抗病毒作用,干扰素的抗病毒作用是否通过2′-5′P_3A_3或2′-5′P_3A_n而进行,这是一个很     

一步酶法制备药物中间体7-氨基头孢烷酸的研究分析

医学临床实验证明,将头孢菌素类抗生素用在中度以及重度干扰症状的疾病上有着非常明显的疗效作用,对于提高患者的免疫力有着非常重要的意义,而7-氨基头孢烷酸则属于头孢类抗生素合成过程中不可或缺的重要中间体,常见的7-氨基头孢烷酸制备工艺有化学法以及生物酶法两种类型。本文将针对7-氨基头孢烷酸的生物酶法制备工艺中的一步酶法制备工艺进行具体的研究和分析。     

人碘化甲腺原氨酸及其衍生物的脱碘过程

甲状腺在种系发生上是最古老的内分泌腺,也是合成T_4的唯一场所。它还分泌含碘量比T_4少的其它碘化甲腺原氨酸,如3,5,3′-三碘甲腺原氨酸(T_3),3,3′,5′-三碘甲腺原氨酸(简称反T_3或rT_3)及T_2等。虽然,本世纪初即已发现T_4,以后相继又发现了其它几种碘化甲腺原氨酸;但对这些碘化甲腺原氨酸在外周组织的代谢过程一直认识不清,致使对一些生理和病理现象困惑不解。近几十年来,随着研究方法和技术的改进,对碘化甲腺原氨酸的代谢,特别是对它们在外周组织脱碘代谢过程的研究日益深入。     

人胎肝匀浆碘化甲腺氨酸5′脱碘酶的研究

<正> 甲状腺素(T_4)在外周组织5′单脱碘为3.5.3′-三碘甲腺氨酸(T_3)而使其生物学活性大大提高,故催化此反应的碘化甲腺氨酸5′脱碘酶被视为甲状腺激素生物学作用的重要调节因子。不同胎令脏器该酶活性的研究将为了解胎儿期间甲状腺激素的代谢及共对胚胎生长发育的影响提供重要线索。本文将对人胎肝匀浆碘化甲腺氨酸5′脱碘酶研究结果作一简要报道。     

注射头孢菌素头孢他美钠β—内酰胺酶稳定性研究

对新三代头孢他美钠(cefetamet)对临床分离产酶耐药菌β-内酰胺酶稳定性进行了研究,并与头孢噻肟、头孢哌酮、西力欣、凯塞欣等其它4种头孢菌素做了比较.结果表明头孢他美具有很强的β-内酰胺酶稳定性.在临床分离产酶耐药菌所产β-内酰胺酶中,头孢他美钠表现出与头孢噻肟、西力欣、凯塞欣相似的相对水解率,其相对水解率与头孢哌酮比有显著性差别.     

基因工程菌酶法合成抗癌新药6-甲基嘌呤-2′-脱氧核苷

6-甲基嘌呤-2′-脱氧核苷(MePdR)是一种新型抗癌药物,它作为药物前体应用于PNP自杀基因治疗系统可以选择性杀伤肿瘤细胞。本实验构建了一个高效表达大肠杆菌来源的嘌呤核苷磷酸化酶重组质粒,并利用基因工程菌以15mmol/L 6-甲基嘌呤和60mmol/L 2′-脱氧尿苷为底物合成6-甲基嘌呤-2′-脱氧核苷,在40mmol/L pH7.0的磷酸缓冲液中,2%菌体在55℃反应2h,转化率可达83.78%。用硅胶制备薄层提纯得到白色针状晶体,收率为76.4%。HPLC测定该产物纯度99.3%,核磁共振鉴定该产物为MePdR。     

ABA分解代谢及其代谢关键酶——8'-羟化酶

脱落酸(ABA)在植物的生长发育和环境胁迫响应等过程中具有重要作用。ABA合成与分解代谢的动态平衡共同调控植物内源ABA水平。ABA8′位甲基羟基化途径是高等植物内源ABA代谢的主要途径;8′-羟化酶是该代谢途径的关键酶,属于P450酶系。生物化学和基因组学研究表明,拟南芥CYP707A家族基因编码8′-羟化酶,该基因家族广泛存在于高等植物中,调控植物内源ABA代谢,介导ABA相关的生理生化过程。本文综述了ABA分解代谢的基本途径,详细概述了ABA8′位甲基羟基化途径及该代谢途径的关键酶8′-羟化酶。同时介绍了8′-羟化酶编码基因-CYP707A家族基因的生物学特征和功能。     

多核苷酸合成的研究 Ⅺ.酵母丙氨酸转移核糖核酸5′-端半分子中含N,N-二甲基鸟苷的四核苷三磷酸(CpGpCpm_2~2G)的合成

(1)参照已报道方法,从鸟苷合成了N,N-二甲基鸟苷(m_2~2G)。(2)N、2′、5′-O-三苯甲酰胞苷酸[_(Bz)C~(Bz)(OB_z)p],与2′、3′-O-二乙酰基-N,N-二甲基鸟苷[m_2~2(OAc)_2]经DCC缩合,脱去保护基后可分离出胞苷酰-(3′→5′)-N,N-二甲基鸟苷(Cpm_2~2G)。(3)_(Bz)C~(Bz)(OBz)p与N-二甲基氨基甲叉鸟苷酸(G_P~(DMM)),用DCC缩合,脱保护基后可得到胞苷酰-(3′→5′)-鸟苷-2′,3′-环状磷酸(CpG>p)。(4)用RNase N_1(E.C.2.7.7.26)催化CpG>p与Cpm_2~2G反应生成26%产率的CpGpCpm_2~2G。经纯化后产物不含酶,用RNase N_1水解得到等克分子的CpGp CpG>p和Cpm_2~2G,碱解可分离出Cp(2′ 3′),Gp(2′ 3′)及m_2~2G,克分子比为2.07:1.0:1.1。     

头孢克肟对健康SD大鼠甲状腺功能的影响

本研究探讨头孢克肟对健康SD大鼠甲状腺功能的影响。采用SPF级雄性SD大鼠40只,随机分为正常组、对照组、头孢克肟高、低剂量组各10只。除正常组外,分别给予生理盐水、头孢克肟18 mg/kg、36 mg/kg灌胃,每日1次,连续4周。给药结束1周后,取血及甲状腺,ELISA法测定血清FT3、FT4、TSH、rT3,HE染色、光镜观察甲状腺组织病理变化。ELISA法结果显示,与正常组和对照组比较,头孢克肟高、低剂量组血清FT3、FT4、rT3水平均降低,差异有统计学意义(p0.05),正常组与对照组之间对比无统计学意义(p0.05)。HE染色结果显示,头孢克肟高、低剂量组甲状腺滤泡大小不均匀,滤泡明显萎缩,滤泡间可见大量淋巴细胞。本研究结果提示,头孢克肟可导致健康SD大鼠甲状腺功能减退。     

多核苷酸合成的研究 Ⅺ.酵母丙氨酸转移核糖核酸5′-端半分子中含N,N-二甲基鸟苷的四核苷三磷酸(CpGpCpm_2~2G)的合成

(1)参照已报道方法,从鸟苷合成了N,N-二甲基鸟苷(m_2~2G)。(2)N、2′、5′-O-三苯甲酰胞苷酸[_(Bz)C~(Bz)(OBz)p],与2′、3′-O-二乙酰基-N,N-二甲基鸟苷[m_2~2G(OAc)_2]经DCC 缩合,脱去保护基后可分离出胞苷酰-(3′→5′)-N,N-二甲基鸟苷(Cpm_2~2G)。(3)_(Bz)C~(Bz)(OBz)p 与N-二甲基氨基甲叉鸟苷酸(G_p~(DMM)),用DCC 缩合,脱保护基后可得到胞苷酰-(3′→5′)-鸟苷-2′,3′-环状磷酸(CpG>p)。(4)用RNase N_1(E.C.2.7.7.26)催化CpG>p 与Cpm_2~2G 反应生成26%产率的CpGpCpm_2~2G。经纯化后产物不含酶,用RNasc N_1水解得到等克分子的CpGp CpG>p 和Cpm_2~2G,碱解可分离出Cp(2′ 3′),Gp(2′ 3′)及m_2~2G,克分子比为2.07:1.0:1.1。