铁皮石斛腋芽的快速繁殖

目的利用组织培养技术建立铁皮石斛的高效快繁体系,克隆繁殖种苗,为野生居群的恢复提供材料。方法以铁皮石斛腋芽为外植体,研究不同浓度和配比的基本培养基、激素以及天然提取物对腋芽萌发生长,丛生芽的诱导增殖以及壮苗生根的影响,比较不同培养阶段的增殖倍数,筛选各时期的最适培养基。并对试管苗的形态学特征进行了调查。结果1/2MS+NAA 0.2 mg/L+BA 1 mg/L适合腋芽的成活生长。BA与香蕉汁组合有利于丛生芽的诱导增殖,其最适比例为1/2MS+NAA 0.5 mg/L+BA 2.0 mg/L+香蕉汁100 g/L,增殖倍数最大可达14.0,平均增殖倍数为6.4。培养基中添加100 g/L香蕉汁或200 g/L马铃薯汁均有利于壮苗生根。结论铁皮石斛通过腋芽形成丛生芽途径建立高效的快繁技术体系获得优质种苗是可行的。     

米槁组织培养不定芽发生与继代增殖

该研究以米槁的带腋芽茎段为实验材料,建立米槁不定芽诱导及增殖培养体系,探究不同消毒时间、取材时间及不同激素种类和浓度配比条件对米槁带芽茎段不定芽诱导及增殖的影响。结果表明：(1)外植体最适消毒方式为75%酒精30 s + 0.1% HgCl₂ 6.5 min,11月为外植体取材进行消毒的最佳时期。(2)最适不定芽诱导培养基为MS + 3.0 mg/L 6 BA + 0.3 mg/L IBA + 6.5 g/L琼脂+ 30 g/L蔗糖,不定芽诱导率可达到81.24%;6 BA和NAA均能促进米槁不定芽的增殖,且NAA是不定芽增殖的主要影响因素。(3)最适不定芽增殖培养基为MS + 0.1 mg/L 6 BA + 1.0 mg/L NAA + 0.3 g/L AC + 6.5 g/L琼脂 + 30 g/L蔗糖,不定芽平均增殖系数达到2.79。该研究基本建立了米槁不定芽诱导及增殖培养体系,为其深层次的资源开发、利用及快速繁殖提供了一条新的路径。     

不同植物生长调节剂对铁皮石斛(Dendrobium candidum)再生的影响

本实验以铁皮石斛无菌苗茎段为外植体,通过添加不同浓度的植物生长调节剂,诱导铁皮石斛愈伤组织形成与分化,建立铁皮石斛组织培养再生体系。结果表明,外植体接种5 d后,在改良MS培养基上添加2 mg/L PBU和0.05 mg/L IAA,可达到100%的愈伤诱导率。将愈伤组织接种在MS培养基上,添加0.1 mg/L NAA和0.5 mg/L 6-BA,不定芽诱导率为90.8%。适合铁皮石斛芽增殖培养基为:MS+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+100 mg/L Vc+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA。PBU浓度为0.5 mg/L,NAA浓度为0.05 mg/L时,芽苗生长情况良好,最适合用于不定芽伸长。铁皮石斛最适生根的培养基为:MS+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+100 mg/L Vc+0.5 mg/L IBA,生根率可高达94.1%。本研究成功建立了铁皮石斛高效再生体系。     

铁皮石斛同源四倍体工厂化快繁工艺研究

以实验室前期诱导的铁皮石斛四倍体为研究材料,利用气孔、叶绿体、染色体计数及流式细胞仪等方法,对铁皮石斛同源四倍体株系的纯合性进行鉴定,在此基础上利用茎段扩繁和原球茎诱导、增殖、分化两种方案比较增殖效率,并对原球茎的倍性稳定性进行再鉴定。结果表明：（1）实验室的‘花自 2’株系为纯合同源四倍体。（2）茎段扩繁最佳增殖培养基为MS＋2.0 mg/L 6 BA+0.5 mg/L NAA+15%香蕉汁,茎段诱导原球茎最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6 BA+0.5 mg/L NAA+0.2 mg/L KT,诱导率达到76.66%;原球茎增殖最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6 BA+0.5 mg/L NAA+15%马铃薯提取液,原球茎分化最佳培养基为1/2 MS+0.5 mg/L 6 BA+20%马铃薯提取液,原球茎分化率达到85.70%;生根最佳培养基为1/2 MS＋0.5 mg/L NAA＋15%香蕉汁,生根率达到92.77%。（3）原球茎根尖鉴定结果表明,诱导的倍性可以稳定遗传。（4）瓶苗移栽的最佳炼苗时间为5 d,移栽成活率达92.30%。该试验建立了铁皮石斛同源四倍体株系新的快繁技术体系,为四倍体试管苗的工厂化生产和推广奠定了技术基础。     

太子参‘柘参1号’离体快繁试验

以太子参‘柘参1号’叶片、茎段为外植体进行离体快繁试验,结果表明：带腋芽的茎段能够诱导出丛生芽,且诱导率较高,最佳诱导培养基为MS + 6-BA 1.0 mg/L + NAA 0.2 mg/L +蔗糖30 g/L;增殖培养基为MS + 6-BA 1.0 mg/L + NAA 0.2 mg/L +蔗糖30 g/L;生根培养基为MS + NAA 0.2 mg/L +蔗糖30 g/L。     

玉竹的组织培养与快速繁殖

以玉竹[Polygonatum odoratum (Mill.) Druce]根状茎、叶片和茎段为外植体,于附加不同激素配比的MS培养基中诱导愈伤组织、不定芽和不定根,探讨增殖培养和植株再生的条件.结果表明,叶片和茎段外植体诱导愈伤组织和芽的分化率很低;而根状茎外植体易于培养,有较高的诱导率和增殖倍数,其愈伤组织、不定芽和不定根的诱导率分别可达87%、90%和99%以上.适宜根状茎外植体愈伤组织诱导的培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,有利于增殖和丛生芽分化的培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA和MS+3.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,而1/2MS+3.0～5.0 mg/L NAA适宜诱导试管苗生根培养.试管苗的移栽成活率可达85%以上.     

春石斛丛生芽组培快繁研究

本试验采用正交设计,探讨春石斛组培以丛生芽途径进行快速繁殖的方法。研究主要集中在不同基本培养基类型、不同生长调节剂配比及不同添加物等因素对丛生芽增殖的影响,从中筛选最优技术参数组合,提高丛生芽增殖系数,建立春石斛最优再生体系。结果表明：影响丛生芽增殖的显著因子分别是基本培养基、6-BA、KT;最适宜的培养基配方是1/2 MS + 6-BA 1.0 mg/L + NAA 1.0 mg/L + KT 0.5 mg/L +蔗糖30.0 g/L +琼脂7.0 g/L +椰汁150.0 ml/L,pH 5.4。此外,春石斛丛生芽增殖的外植体以1.5 cm带节茎段、接入密度每瓶3株较适宜。     

黄山药丛生芽诱导与植株快速繁殖

采用黄山药的带芽茎段为外植体,试验了不同激素处理对芽诱导的影响,通过继代培养诱导丛生芽使大量增殖,经诱导生根和炼苗移栽而完成植株的快速繁殖再生。结果表明,MS 6-BA2.0mg/L NAA0.5-1.0mg/L为芽诱导的最适培养基,MS 6-BA1.0mg/L NAA0.5-1.0mg/L为继代增殖的最佳培养基,月增殖系数约为3倍,1/2MS 1BA0.5mg/L培养基诱导生根相对较好,诱导率为50%,组培苗经炼苗后,移栽成活率可达80%。     

铁皮石斛的组织培养(简报)

以铁皮石斛当年生茎段为材料,在MS＋6-BA 0.1 mg/L＋NAA 0.02 mg/L培养基上进行不定芽诱导培养;在MS＋6-BA 2.5 mg/L＋NAA 0.05 mg/L＋AC（活性炭）1g/L培养基上进行丛生芽诱导与增殖培养,50 d为一个继代周期,繁殖系数为5～8;在1/2 MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 0.05 mg/L＋椰子100 g/L＋AC 1g/L培养基上进行壮苗培养;在1/2 MS＋IBA 1.0 mg/L＋AC 1g/L培养基上进行生根培养;最后移栽到小颗粒化树皮中,成活率可达95%。     

齿瓣石斛茎段快繁技术研究

本文对齿瓣石斛茎段快繁技术进行研究,结果表明：齿瓣石斛最佳诱导培养基为MS + 6-BA 2.0 mg/L + NAA 0.05 mg/L;芽增殖培养基以MS + 6-BA 3.0 mg/L + NAA 0.5 mg/L较好;生根培养基以MS + IBA 1.0 mg/L + NAA 0.5 mg/L较好。     

睡菜离体快繁技术的研究

以睡菜的幼嫩茎段为外植体,接种到附加不同浓度激素配比(6-BA/NAA)的MS培养基,诱导睡菜愈伤组织、芽及根的生长。研究发现,外植体在1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA+MS的培养基上培养10d,可观察到浅绿色的愈伤组织。愈伤组织转接到4.0mg/L 6-BA+0.3mg/L NAA+MS培养基上2周左右可生成芽。对带芽的愈伤组织再进行诱导生根进而形成完整再生植株,最适根诱导培养基为0.3mg/L 6-BA+1.0mg/L NAA+MS培养基。该实验采用植物离体快繁技术成功建立了睡菜再生体系,为睡菜种苗规模化奠定了技术基础。     

活血丹组织培养与快速繁殖技术研究

以活血丹为材料,应用组织培养和快速繁殖技术,对适于活血丹增殖分化的培养基、培养方式进行了系统的研究。用活血丹叶片作为外植体,在MS添加生长素2,4-D和细胞分裂素BA的培养基上成功诱导出愈伤组织,并对其继代培养条件进行研究,分析了继代培养中褐化的原因。在MS添加NAA和BA的培养基中,活血丹的茎尖和带腋芽茎段能直接诱导出大量丛生芽,随后将不定芽转入MS添加IBA和KT的培养基中,可生成不定根,完成快速繁殖技术体系。结果表明:活血丹愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D(1.5mg/L)+BA(1.0mg/L),诱导率高达91.38%。丛生芽诱导的适宜培养基为MS+NAA(0.1mg/L)+BA(1·0mg/L),在此培养基上,出芽率达100%,芽增殖系数接近于10,有利于生物量的积累。而根的诱导则在MS+IBA(1.0mg/L)+KT(1.0mg/L)培养基上进行最好,此基础上能诱导出健康、粗壮的根。试管苗炼苗后移栽,成活率达100%。     

紫茉莉不定芽诱导和植株再生

紫茉莉(Mirabilis jalapa)观赏价值较高,是一种重要的污染修复植物.组织培养技术为植物品种改良和选育的重要途径,但紫茉莉离体快繁方面的研究尚未见有相关报道.该研究以紫茉莉叶片和茎段为外植体,通过观察和统计外植体愈伤组织和不定芽的诱导情况,分析不同植物生长物质对紫茉莉植株再生的影响.结果表明:紫茉莉带芽茎段比较适合丛生芽的诱导,当带芽茎段在MS+1.0 mg·L-16-BA+1.5 mg·L-1 KT+1.0 mg·L-1 NAA+0.05 mg·L-1 TDZ培养基中培养时,不定芽的增殖系数较高.无论是MS或1/2MS培养基,都可诱导不定根的产生,其中生根效果较好的培养基为1/2 MS+0.5 mg·L-1 NAA.该研究结果探索了紫茉莉组织培养的最适条件,根据愈伤组织诱导率和不定芽的增殖系数筛选出了适宜不定芽诱导的培养基类型,根据不定芽生根情况确定了最佳的生根诱导培养基,为建立紫茉莉高效稳定的再生和遗传转化体系奠定了基础.     

栀子带芽茎段愈伤组织诱导分化及丛生芽增殖和生根研究

以栀子带芽茎段为试材,对其愈伤组织诱导分化及丛生芽增殖与生根进行初步研究。结果表明,栀子带芽茎段愈伤组织快速诱导和分化最佳培养基是MS+KT 1 mg/L+NAA 0.05 mg/L;栀子带芽茎段丛生芽增殖和生根最佳培养基是MS+KT 2.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L。     

八角莲组织培养研究

以八角莲种子为外植体,MS为基本培养基,通过不同的激素种类和浓度配比,对八角莲进行组织培养研究。结果表明:种子在MS+BA1.0mg/L+IBA0.5mg/L+GA34.0mg/L培养基上容易萌芽,发芽率为72.4 %;培养基MS+BA10.0mg/L+GA30.5 mg/L可诱导种子幼苗形成丛生芽;继代繁殖在MS+BA(8.0～10 .0)mg/L+GA32 .0mg/L与低浓度BA或无BA的培养基上进行循环培养效果较好;MS+NAA1.0 mg/L+AC0.2g/L适宜诱导生根获得再生植株,生根率100%。带叶叶柄在MS+BA1.0mg/L+2-ip(0.5～1.0) mg/L+NAA0.02 mg/L培养基上可诱导愈伤及根,直接形成再生植株。生根苗移栽成活率90 %。     

湖北双蝴蝶的组织培养研究

以湖北双蝴蝶带芽茎段、不带芽茎段及叶片为外植体,以MS为基本培养基,通过添加不同的植物生长物质种类和浓度配比,建立湖北双蝴蝶组培快繁体系。结果如下:在所有实验方案中,带芽茎段的出愈率最高,是理想的离体快繁材料。较适宜的初代培养基为MS+BA2.0mg/L+蔗糖3.0%,增殖培养基为MS+BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖3.0%,而根的诱导则在1/2MS+NAA0.5mg/L+蔗糖1.5%的培养基上进行较为适宜。同时对组织培养过程中湖北双蝴蝶植株再生的方式进行了讨论。     

文心兰花梗茎段植株再生培养的影响因子研究

应用正交试验设计法研究基本培养基、植物生长调节剂种类及浓度对文心兰花梗茎段芽再生丛生芽诱导、增殖和生根培养的影响。筛选出最佳基本培养基为1/2 MS;最佳诱导培养基为1/2 MS+6-BA 5.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖20 g/L;最佳增殖培养基为1/2 MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.05 mg/L+NAA 0.3 mg/L+香蕉泥100 g/L+蔗糖20 g/L。     

不同生长调节剂对丹参快速繁殖的影响

探讨了丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge)快速繁殖过程中不同生长调节剂的影响.实验表明:MS 6-BA 2.0mg/L NAA 0.05 mg/L是诱导初代培养的芽产生大量丛生芽的最佳培养基,其诱导生芽率为100%;最佳的丛生芽增殖培养基为MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.01 mg/L,其增殖倍数为15倍;MS 6-BA 0.5～2.0 mg/L是诱导大量不定芽的最佳培养基,其诱导生芽率为100%,最佳的不定芽增殖培养基为MS 6-BA 1.0 mg/L,其增殖倍数为24倍;诱导生根较好的培养基为1/2MS IBA 0.1 mg/L,生根率为98%,移栽成活率为100%.     

山嵛菜离体培养与快速繁殖研究

山嵛菜是一种重要的经济植物,用于医药、食品加工等领域。取山嵛菜带腋芽茎段作为外植体进行组织培养,利用长出的新芽直接诱导生成丛生芽。结果表明:MS+BA2.0mg/L+NAA0.05mg/L为最佳的丛生芽诱导和增殖培养基;生根较适宜的培养基为1/2MS+NAA0.05mg/L。     

巴西橡胶成龄无性系茎段的试管微繁技术研究

巴西橡胶成龄无性系茎段组织培养在生产中有很大的潜在应用价值,但一直是橡胶树组织培养的难点,至今国内外鲜有成功的报道.本研究以在中国热带地区大面积推广种植的巴西橡胶树优良品种热研7-33-97不同生长时期成龄树茎段为外植体,进行无性系试管微繁技术研究.研究结果表明不同生长时期的茎段在自然条件中受污染程度不同,茎段真菌污染率为稳定期＞淡绿期＞古铜期,细菌污染率为淡绿期＞稳定期＞古铜期.不同生长时期的成龄树茎段需要通过不同的灭菌方法才能显著提高外植体的利用率,外植体灭菌方法显著影响橡胶成龄树茎段的组织培养效率;与稳定期相比,古铜期和淡绿期茎段在组织培养过程中诱导丛生芽萌芽快、萌芽多,是较优的外植体材料;古铜期和淡绿期茎段在激素配比为4.0～5.0 mg/L6-BA+0.5 mg/L GA3的条件下能很好的诱导抽出丛生芽;丛生芽在激素配比为2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/LNAA,1.0 mg/t 6-BA+1.0 mg/L KT+0.5 mg/L NAA或0.5 mg/L 6-BA+1.5 mg/L KT+0.5 mg/L NAA的条件下能很好的诱导丛生芽抽出健壮的芽条;丛生芽抽出的健壮芽条在激素配比为0.5 mg/L IBA+0.5 mg/L IAA的条件下能较好的抽根成苗.外植体生长时期、激素种类和浓度配比都是影响巴西橡胶成龄无性系茎段的试管微繁的重要因素.