龙胆叶肉原生质体再生愈伤组织的研究

从龙胆试管苗的叶肉细胞分离得原生质体。培养4—5天后能见到第一次分裂,一个月后形成肉眼可见的小愈伤组织。试管苗的低温预处理是龙胆叶肉原生质体能否分裂的重要条件;似乎只有体积小的原生质体能保持持续分裂。获得的愈伤组织正在诱导器官分化。     

人参原生质体培养再生愈伤组织

人参原生质体培养未见报道成功。Harn(1974)曾用人参幼叶,幼根和上胚轴进行原生质体分离,但得到的数量很少,无法进行培养。本实验以人参培养细胞为材料,通过培养再生了愈伤组织。     

桃原生质体培养再生愈伤组织

1 植物名称桃(Prunus Persica)“砂子早生”品种。 2 材料类别胚性愈伤组织的原生质体。 3 培养条件基本培养基采用MT,根据需要附加K8p、CH(椰乳)、ME(麦芽提取物)、LMP(低熔点琼脂糖)及活性炭等分。pH 5.7,培养温度26±1℃,光照12 h/d,光照度1500～2000 lx。 3.1 胚性愈伤组织的获得与继代取花后8周果实中的败育胚培养在MT固体培养基上,50 d后部分败育胚产生白色的胚性愈伤     

湖北海棠原生质体培养获得愈伤组织

对湖北海棠成熟胚下胚轴诱导愈伤组织并建立悬浮细胞系,用０．５％纤维麦０和０．２％果胶酶分离悬浮系细胞,将酶解的原生质体培养在附加激素和有机成分的ＭＴ培养基中,采用液体浅层培养,获得了愈伤组织。     

硬紫草悬浮细胞原生质体培养形成愈伤组织及其体细胞克隆变异

从硬紫草悬浮细胞系ＡＲ１２６分离原生质体,只有用葡萄糖作渗透剂经琼脂糖－液体双层培养才能获得可见的原生质体克隆,从中选择３４个克隆,用两阶段法生产紫草素及其衍生物,测量了它们在两阶段的细胞生长量及生产阶段的色素含量,并比较了其分布规律,其中最好的原生质体克隆色素生产量是起始悬浮系的２．５４倍,经培养４０ｄ达４４．０６ｍｇｇ－１ＦＷ,而且其生产量在所测的８０ｄ内无明显下降。     

从胡萝卜根木质部愈伤组织分离的原生质体培养成再生植株

以胡萝卜(Daucus L.var.sativa DC.)根的中央木质部切段为外植体诱导了松软的愈伤组织。用酶法从这种愈伤组织分离出大量有活力的原生质体。当在补加有0.11毫克/升玉米素和0.18毫克/升萘乙酸的C81V培养基中进行液体浅层培养时,原生质体能再生新细胞壁,进行连续分裂,产生大量小愈伤组织。再转移到含有1毫克/升的激动素和0.2毫克/升萘乙酸的MS固体培养基上后,愈伤组织继续长大,并分化出小植株。从原生质体开始培养到形成再生植株的时间为1个半月至2个月。     

从胡萝卜愈伤组织分离的原生质体获得再生植株

植物原生质体培养技术广泛地应用于体细胞杂交、遗传物质转移、核及细胞器的移植及其他的研究工作。目前几种植物的原生质体培养已经能够再生成完整植株。我们研究了用自己制备的纤维素酶分离固体培养的胡萝卜愈伤组织原生质体的条件和再生细胞分裂、植株分化的条件。     

芥菜子叶原生质体愈伤组织的形成及形态发生

从芥菜无菌苗子叶游离的原生质体,经在 Nitsch 液体培养基中培养,再生细胞有比较高的分裂频率;所形成的愈伤组织经分化处理后产生了根,有些愈伤组织出现了绿点,但未分化出芽。     

向日葵下胚轴原生质体高频率愈伤组织形成与根发生

向日葵籽苗下胚轴原生质体,培养在含有ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ,２,４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ,ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ和葡萄糖０．５５ｍｇ／Ｌ的改良Ｋａｏ培养基中,２４～２８ｈ后,原生质体开始分裂。包埋在琼脂糖０．６％中的原生质体,培养５ｄ后,分裂频率达９５％以上。生长旺盛的小愈伤组织转移到含有２ｉｐ０．１ｍｇ／Ｌ,ＩＡＡ０．０１ｍｇ／Ｌ,腺嘌呤４０ｍｇ／Ｌ和ＧＡ３０．０１ｍｇ／Ｌ的Ｔｈｏｍｐｓｏｎ液体培养基上１３ｄ后,原生质体诱导的少数愈伤组织发生根分化。     

附地菜叶肉原生质体的分离、培养和分化

研究了附地菜叶肉原生质体的分离条件,得到了大量的有活力的原生质体。用改良的NT培养基做液体静置培养,41.7％的原生质体可以分裂,进而形成细胞团,转移到MS固体培养基后形成愈伤组织。最后在MS分化培养基上分化出芽和根。经一年继代培养的愈伤组织,分化能力无明显减弱。     

新疆杨愈伤组织原生质体的游离与纯化

目的:以愈伤组织为材料,研究新疆杨原生质体的游离、纯化。方法:以新疆杨愈伤组织为材料,采用简单试验设计和方差分析方法,对新疆杨原生质体游离的影响因素进行研究,并利用二乙酸荧光素染色法观察原生质体活力。结果:适宜新疆杨愈伤组织原生质体游离的较适宜条件是:CPW+2.0%纤维素酶R-10+1.0%离析酶R-10+1.0%果胶酶Y-23+0.6 mol/L甘露醇,酶解温度27℃,酶解时间8 h。在此条件下,原生质体产量达8.5×106个/(g.FW),活力达83.6%。原生质体纯化可采用蔗糖等密度离心法,较适蔗糖浓度为30%。结论:研究筛选出的酶解因素组合与等密度离心条件较适宜新疆杨愈伤组织原生质体的游离和纯化。     

茶树叶肉原生质体的分离与纯化

以茶树幼苗叶片为材料,分析了甘露醇浓度、不同酶液组合、酶解时间等因素对叶肉原生质体分离及2种高密度分离液对原生质体纯化的影响。结果表明,叶片在含0.6 mol/L的甘露醇、1.5%的纤维素酶和2.5%的离析酶的酶解液中黑暗酶解16~18 h,叶肉原生质体的分离效果最好。此外,研究发现原生质体在10%的甘露醇与25%的碘克沙醇界面处聚集形成了一条带。     

小麦与多年生黑麦草原生质体的电融合及杂种愈伤组织的形成

多年生黑麦草(Lolium perenne L.)悬浮培养细胞来源的原生质体和小麦(Triticumaestivum L.)含叶绿体的悬浮培养细胞来源的原生质体间,用直流方波脉冲进行电融合,获得了体细胞杂种愈伤组织。小麦的原生质体经过碘乙酰胺失活。愈伤组织的形态和颜色被用作识别预期杂种的标记。为了对杂种愈伤组织进行同工酶分析,观察了亲本的9种同工酶谱,其中3种在亲本间表现出差异(ADH、GOT 和 SDH)。酒精脱氢酶(ADH)的分析结果表明,有6个细胞系表现出杂种带。这些细胞系经过其他两种同工酶分析和 rDNA 探针杂交试验表明,一个细胞系表现出基本完全的亲本基因组间的组合,其余5个细胞系是部分杂种。     

湖北海棠原生质体培养获得愈伤组织(简报)

由湖北海棠成熟胚下胚轴诱导愈伤组织并建立悬浮细胞系,用0．5％纤维素酶R－10和0．2％果胶酶分离悬浮系细胞,将酶解的原生质体培养在附加激素和有机成分的MT培养基中,采用液体浅层培养,获得了愈伤组织。