胡杨器官和体胚发生方式的植株再生

目的：为以胡杨为亲本的体细胞杂交育种奠定基础。方法：以胡杨苗叶片为外植体,通过器官和体胚两种不同发生方式建立了离体再生体系。结果：附加0．75mg/L BA、0．5mg/L NAA基本培养基及3w暗培养是愈伤组织诱导的最佳条件;附加0．25mg/L BA和0．1mg/L NAA的基本培养基上不定芽的诱导率最高;1／2大量元素的MS培养基附加0．1mg/l NAA、0．05mg／L和1．5％蔗糖对不定芽生根效果最好;诱导并筛选出的胚性愈伤组织在附加了0．5mg/L BA、0．5mg／L NAA的基本培养基上诱导获得大量胚状体,干化处理后大部分能经子叶胚期萌发成苗。结论：外植体的采集周期和培养条件影响胡杨离体叶片的形态发生途径。     

姜花属种间杂交胚拯救研究

为提高姜花属种间杂交胚挽救中幼胚萌发率,以白姜花×金姜花的胚珠为试材,研究不同胚珠发育时期、不同培养基及低温处理果实对幼胚萌发率的影响.结果表明,白姜花×金姜花胚挽救的适宜培养基是MS+0.1 mg/L BA十0.1 mg/L NAA;接种时期以60 d的幼胚培养效果最佳;低温处理果实3～6 d能有效提高幼胚的萌发率.     

两种细胞分裂素对大白菜子叶再生的影响

以华阳三号(HY)和鲁白六号(LB)大白菜具柄子叶为外植体,建立了高频率不定芽再生体系,并比较了所使用的2种细胞分裂素作用的异同。MS 0．25mg／L TDZ O．5mg／L NAA 5mg／L AgN03组合中,HY的再生频率达到98．8％,在MS 2mg／L BA 0．5mg／L NAA 5mg／L AgN03组合中,HY和LB的再生频率分别为92．8％和82．4％。TDZ具有比BA高的细胞分裂活性,含有TDZ的培养基中,子叶再生频率高、出芽迅速、芽点多。子叶再生过程中,硝酸银的作用必不可少。     

花生成熟胚胚轴的植株再生和快繁

利用正交试验筛选出了以花生成熟胚胚轴为外植体获得较高频率的不定芽分化和植株再生的条件,并在此基础上对花生试管苗的快速繁殖进行了研究,研究表明,4d龄实生苗的花生胚轴,接种于MS NAA0.4mg/L TDZ0.2mg/L诱导培养基上培养28d后,转移到MSo可获得丛生的再生苗。将丛生苗分离,接种到P1培养基（MS NAA0.4mg/L BAP0.5mg/L）,小苗长大,把较大的试管苗切成带叶节的茎段,接种于含不同浓度的TDZ和BAP的快繁培养基,结果表明,TDZ0.2mg/L最适宜试管苗的快繁,繁殖系数可达4.8/月,试管苗经IBA诱导生根后,移栽田间,开花结果。     

不同激素对花生离体分化的影响

对TDZ和2,4-D等激素在花生成熟胚外植体分化中的影响进行了研究.结果表明,花生成熟胚3～5 d龄实生苗的幼叶和胚轴在低浓度TDZ的诱导下,可分化产生高频不定芽和少量体细胞胚,转到无激素MS培养基或MS BA 0.5 mg/L NAA 0.4 mg/L的培养基后形成丛生苗.丛生苗分离后转入含1/2 MS(大量元素) IBA 0.4 mg/L的培养基中诱导生根,可形成完整的再生植株.幼叶分化率高于胚轴,但胚轴分化成苗速度快.无菌水浸泡16～24 h的胚轴在5～ 30 mg/L 2,4-D的诱导下,分化产生低频不定芽;而胚叶则产生高频体细胞胚,但畸形较严重.     

花生幼叶为外植体的植株再生系统的建立

本文报道利用花生成熟胚幼叶为外植体获得高频植株再生的方法,为花生转基因提供有效的受体系统。通过诱导培养基TDZ、BA、NAA的浓度以及种子萌发时问、继代培养基种类五个因素不同水平的正交试验,筛选出了分化高频发生的最佳组合为：MS培养基中应含有TDZ 1．0／μmol／L、BA0．4μmol／L、NAA5．0μmol／L,种子萌发4d,继代培养基为MS0。本研究表明,五因素中诱导培养基TDZ浓度为诱导花生幼叶分化的主要影响因素,其次为继代培养基、种子萌发时问,而诱导培养基中BA和NAA的浓度作用较小。试管苗生根后移栽田间,可正常开花结果。     

应用正交设计建立青花菜植株的再生体系

通过L16(4 5)正交试验 ,研究最适合青花菜 2周龄下胚轴愈伤组织诱导和不定芽发生的植物生长调节物质的种类和浓度组合。结果发现在NAA、6 BA、TDZ和KT四种激素中 ,NAA对下胚轴愈伤组织发生指数、不定芽发生频率的影响作用最大 ,确定以MS +NAA 0 .2 5mg/L +6 BA 0 .2 5mg/L +TDZ 0 .0 1mg/L(琼脂 0 .8% ,蔗糖 3 % ,pH5 .8)作为单因子试验的培养基。NAA、6 BA和TDZ浓度的单因子试验结果表明最适合下胚轴的培养基配方为 :MS +NAA 0 .1mg/L +6 BA 1 .0mg/L +TDZ 0 .0 6mg/L(琼脂 0 .8% ,蔗糖 3 % ,pH5 .8)。     

普通荞麦植株茎段快速繁殖技术的研究

以普通养麦（Fagopyrum esculentum Moench）植株带节茎段为外植体,用正交设计法研究不同激素处理对荞麦腋芽、丛生芽和根的诱导及分化过程的影响,建立了荞麦离体培养快速繁殖技术。极差分析表明,6-BA是诱导荞麦茎段腋芽和根发育的主要因素,TDZ是诱导丛生芽的关键因素。诱导荞麦茎段腋芽发育的最佳培养基为：MS0＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．1mg／L,腋芽诱导率为67．9％。其中,以第二、三节位的腋芽诱导率较高,达80％以上。诱导荞麦茎段丛生芽发育的最佳培养基为：MS0＋6-BA4．0mg／L＋TDZ0．06mg／L,丛芽分化率为166．7％。诱导生根的最佳培养基为：1／2MS0＋6-BA1．0mg／L＋NAA1．0mg／L,生根率为82．8％。该组织培养技术的建立为养麦快速繁殖提供了新途径。     

酿酒葡萄"梅尔诺"再生系统建立的研究

以酿酒葡萄“梅尔诺”离体胚珠、叶柄为材料．通过控制激素水平、光照和温度等,对建立再生体系的器官发生途径和体胚发生途径进行了研究。结果表明,体胚的诱导和不定芽的再生与基本培养基、叶柄的着生部位、生长调节物质种类和浓度等因素有关。由“梅尔诺”的胚珠愈伤组织再生出体细胞胚的最佳培养基配方为CPSE培养基(CP287 BA 0．2mg／L NOA 1．0mg／L),体细胞胚再生率可达47．50％。“梅尔诺”体细胞胚在CPSE培养基上100％萌发为芽状,将其切断置于培养基MS TDZ 4．0mg／L上可直接诱导出绿色不定芽,再生率为52．25％;同时在培养基MS TDZ2．0mg／L上获得了“梅尔诺”离体叶柄再生不定芽．再生率为62．42％．二者再生的不定芽的最他增殖培养基为MS BA0．5mg／L。“梅尔诺”体细胞胚的萌发芽在WPM培养基中能很好的生根及成苗,并建立了单芽茎段微繁体系。     

小桐子的组织培养和植株再生

以小桐子（Jatropha curcas）的胚芽、子叶、下胚轴、叶柄、叶片和茎段作为外植体,用不同浓度的6-苄基腺嘌呤（6-BA）和α-萘乙酸（NAA）对其进行愈伤组织的诱导和植株再生的研究。结果表明：在MS培养基中加入5．0mg／L6-BA和1．0mg／LNAA对愈伤组织的诱导效果最好;加入5．0mg／L6-BA和0．1mg／LNAA对不定芽的诱导最为有效,加入0．1mg／L6-BA和1．0mg／LNAA有利于芽的生长;加入1．0mg／LNAA的1／2MS培养基对生根最为有利。     

大花美人蕉茎尖组织培养技术研究

以大花美人蕉(Canna×generalis)根茎茎尖为外植体进行组织培养技术研究,筛选出芽诱导适宜的培养基为MS+6-BA 8.0mg/L (单位下同)+TDZ 0.03;MS+6-BA 8.0+TDZ 0.03+NAA 0.1培养基能较好地诱导分化出丛生芽,继代增殖培养中与MS+6-BA 3.0+TDZ 0.03+NAA 0.1培养基交替使用可减少畸形芽,增殖系数达1.67;适宜的生根培养基为MS+6-BA 1.0+NAA 0.5,生根率达66.67%,且植株生长健壮,移栽易成活。     

彩色大白菜子叶的不定芽再生

以彩色大白菜子叶为外植体,研究不同激素配比和AgNO3对不定芽再生的影响。结果表明:单独附加细胞分裂素(6-BA或TDZ)的MS培养基,不能诱导子叶不定芽分化;而同时附加生长素(NAA)和细胞分裂素(6-BA或TDZ),不定芽的再生频率提高,最高为15%;AgNO3与细胞分裂素及生长素配合使用,能大幅度提高子叶不定芽的再生频率,提高率最高达42.5%。与6-BA相比,TDZ对不定芽再生的效果更好。当TDZ浓度为0.05mg/L、NAA为0.3mg/L、AgNO3为8mg/L时,产生丛状芽数目最多,再生率最高,达50%。     

匙羹藤组织培养条件优化研究

以匙羹藤无菌种子苗为外植体,通过预备实验确定基本培养基后,采用完全实验和正交设计相结合的方法,研究植物生长调节剂两因素配合和多因素组合(NAA、TDZ、2-ip、IAA、6-BA和KT)对匙羹藤芽体诱导及继代培养的影响。结果显示,匙羹藤组织培养最适的基本培养基为N68;N68+NAA0.05mg/L+2-ip0.4mg/L+TDZ0.001mg/L利于芽体增殖,可用于继代培养;N68+NAA0.05mg/L+TDZ0.005mg/L促进植株长根,可用于生根培养。     

三叶半夏悬浮培养下的体细胞胚胎发生及植株再生

用三叶半夏幼嫩叶片诱导产生的胚性愈伤组织建立了胚性细胞悬浮系,研究了悬浮培养下体细胞胚胎的发生及植株的再生。结果表明,胚性悬浮细胞在附加1．0mg／L2,4-D、0．2 mg／LBA和300mg／L LH的MS液体培养基中产生大量的球形胚,转入液体分化培养基(MS 0．1 mg／LNAA 0．2 mg／L BA 300 mg／L LH)中进一步发育成心形胚、鱼雷形胚和子叶形胚。收集成熟胚转移到MS固体分化培养基上培养获得了再生植株。另外还观察到某些成熟胚上产生了许多次生胚。     

彩色马蹄莲的组织培养

以彩色马蹄莲芽眼为外植体,在添加不同激素配比的MS培养基上进行培养.结果表明:(1)较适宜诱导愈伤组织的激素组合是1.5 mg/L Zt+0.1 mg/L NAA、3.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA或0.5 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L NAA,出愈率分别为94.12%、100%和86.67%;较适宜诱导不定芽的激素组合是2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,芽丛诱导率可达87.3%;芽增殖较适宜的激素组合是2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA或2.0 mg/L KT+1.0 mg/L NAA,而且在继代培养中,交替使用这两种激素组合,繁殖系数可达4倍以上;生根培养基以1/2 MS+0.3 mg/L NAA+0.2 mg/L IAA较为适宜,生根率达95%以上.(2)彩色马蹄莲小块茎形成的主要影响因素是培养基中的蔗糖浓度,最适宜蔗糖浓度为10%;10 mg/L多效唑和8 mg/L NAA对小块茎的形成有明显的促进作用,而分裂素则表现出较强的抑制作用.     

Combination of 6-Benzylaminopurine and Thidiazuron Promotes Highly Efficient Shoot Regeneration from Cotyledonary Node of Mature Peanut (<i>Arachis hypogaea</i> L.) Cultivars

Efficient in vitro plantlet regeneration is an important step to successfully transform genes for the improvement of agronomic traits. A combination of 6-benzylaminopurine (BAP) and thidiazuron (TDZ) plant growth regulators was applied to evaluate shoot regeneration capacity whereas α-naphthalene acetic acid (NAA) combination with 6-benzylaminopurine (BAP), and 2, 4-dichlorophenoxyacetic acid (2, 4-D) with 6-benzylaminopurine were tested to optimize root induction for two peanut cultivars. The result showed combination (BAP with TDZ) was found to be effective in promoting shoot. The highest shoot regeneration frequency (93%) was obtained on a medium supplemented with 4 mg/L BAP and 0.5 mg/L TDZ while an average regeneration frequency (87%) was achieved in a medium containing combinations of 2 mg/L BAP with 1 mg/L TDZ. The shooting rate increased for both cultivars as the concentrations of BAP increased and TDZ decreased. The highest rooting rate (93%) was obtained on a medium supplemented with 3.5 mg/L NAA with 2.5 mg/L BAP for both cultivars. The rooting rate increased as the concentration of auxin to cytokinin ratio increased. The maximum rooting rate (83%) was obtained on MS medium supplemented with 0.3 mg/L 2, 4-D with 0.2 mg/L BAP for the cultivar N3. The result indicated that BAP with NAA was much better than BAP with 2, 4-D in rooting rate. Thus, the protocol developed was genotype independent and effective for peanut tissue culture.     

鱼腥草体细胞胚胎发生和植株再生

目的:利用鱼腥草的叶片和叶柄为材料,进行体细胞胚胎诱导及植株再生研究。方法:运用正交设计试验,考察在改良的MS固体培养基上添加不同种类、不同浓度的植物生长物质组合及其配比对鱼腥草愈伤组织诱导、体细胞胚胎发生及植株再生的影响。结果:鱼腥草无菌苗叶片在含有2,4-D 1.0 mg/L 6-BA 0.5 mg/L的改良MS培养基上能诱导出胚性愈伤组织;胚性愈伤组织在含有6-BA 1.0 mg/L的改良的MS培养基上诱导体细胞胚的发生;叶柄在含有6-BA 1.0 mg/L改良MS培养基上直接产生体细胞胚。体细胞胚在改良的MS NAA0.1 mg/L 6-BA 1.0 mg/L的培养基上能够快速繁殖,形成大量不定芽,在不加任何激素的MS培养基上就可以萌发出不定根,发育为成完整植株,在MS IBA 1.0 mg/L的固体培养基上能够形成大量的根。结论:建立了鱼腥草体细胞胚胎发生及植株再生的体系。     

TDZ对喜树愈伤组织生长及色素积累的影响

目的:研究苯基噻二唑基脲(Thidiazuron,TDZ)对喜树愈伤组织生长及叶绿素、花青素积累的影响。方法:采用TDZ单独应用及合并植物激素对喜树愈伤组织进行了继代培养。结果:单独应用TDZ时1mg/L为组织生长最适浓度。1mg/L TDZ+0.5mg/L NAA可显著促进愈伤组织的生长及叶绿素的积累,1mg/L TDZ+0.5mg/L 2,4-D培养条件下花青素含量高于单独应用TDZ培养。结论:TDZ在喜树愈伤组织培养中可替代植物激素并对细胞植物色素积累有明显影响。