白杨杂种三倍体小孢子母细胞减数分裂及花粉形态观察

通过醋酸洋红压片等方法观察毛新杨×银腺杨杂种三倍体小孢子母细胞减数分裂及花粉形态,以探讨杂种三倍体雄配子的育性及其细胞学机制.结果显示:(1)在小孢子母细胞减数分裂过程中可观察到部分染色体提前分向两极、落后染色体、微核等一系列染色体异常行为,表明该三倍体存在染色体的高度不平衡性.(2)在减数第二次分裂过程中存在大量胞质分裂提前现象;减数分裂产物中发现有少量二分体、三分体的存在,同时毛新杨×银腺杨杂种三倍体花粉粒的直径变化范围为22.6～62.6 μm,呈现双峰分布,由此推测有一定数量的具可育性的未减数花粉产生.     

海芋细胞遗传学及花粉发育的研究

采用常规压片法和去壁低渗Giemsa法,研究了海芋Alocasia odora(Lindl.)K.Koch同一居群5株不同个体的细胞遗传学行为和花粉发育过程.结果表明:(1)海芋的体细胞染色体核型为2n=28=20 m 8 sm,染色体长度变化在7.84～12.08 μm,核型不对称类型为2A ;(2)5个不同植株减数分裂中期I构型在同一个体中是相对稳定的,在不同个体间存在差异,各株平均构型分别为① 5.61Ⅱ0 3.72Ⅱ 0.89Ⅳ0 0.06Ⅴ 0.78Ⅵ0 0.06Ⅻ;② 10.38Ⅱ0 3.63Ⅱ;③ 9.15Ⅱ0 2.85Ⅱ 1Ⅳ0;④ 7.76Ⅱ0 3.76Ⅱ 1.24Ⅳ0 ;⑤ 8.52Ⅱ0 3.41Ⅱ 1.03Ⅳ0.有4个株型具有多价体配对,可形成4条、5条、6条、以及12条染色体连成的环状或链状结构,推测存在染色体相互易位等异常现象,为易位杂合体.(3)减数分裂过程中后期Ⅰ存在染色单体桥和落后染色体,占观察细胞的15.5%;(4)成熟花粉球形,有刺状纹饰,为二细胞型花粉,醋酸洋红压片统计成熟花粉的育性,其败育率为9.3%.     

响叶杨小孢子母细胞减数分裂及染色体行为的研究

采用醋酸洋红压片法对响叶杨（Populus adenopoda）小孢子母细胞减数分裂进程中的染色体行为进行了研究。结果表明：响叶杨小孢子发生发育过程与其雄花芽／花序的外部特征和花药颜色有着密切关系;住其减数分裂进程中染色体行为正常,表明响叶杨同源染色体间表现出了较高的同源性,在中期Ⅱ平行纺锤体的出现与天然花粉中大花粉的存在可能有一定的联系;同时,减数分裂过程中核仁数目存在若动态变化,这种现象叮能与杨属植物占多倍性起源有关。同一花芽的不同部位,减数分裂进程较不同步,这种小同步性是响叶杨适应环境的一种进化表现。     

两种山羊豆属植物花粉形态与花粉母细胞减数分裂行为观察

采用扫描电镜与1%醋酸洋红压片的方法,观察山羊豆属两种植物的花粉形态及花粉母细胞减数分裂行为,从而为山羊豆属的遗传学及分类学提供依据。两种山羊豆属植物立体形状为近球形或扁球形,均具三孔沟,穴—网状纹饰,极面观为近三角形,赤道面观为圆形。东方山羊豆的大小为:赤道轴×极轴=14.3（13.5～15.0）×12.6（12.1～13.7）μm,山羊豆的大小为：赤道轴×极轴=13.7（12.3～14.8）×12.4（10.6～13.0）μm.花粉母细胞减数分裂为同时型胞质分裂,终变期染色体构型为8Ⅱ,没有出现落后染色体及微核现象。小孢子四分体为四面体型。减数分裂过程有一定规律,与花蕾大小,颜色有密切关系。减数分裂进程存在一定差异,同一个花蕾中的不同花药花粉母细胞分裂速度基本相同,所处的时期及观察的分裂相一致,在同一个花药中的不同花粉母细胞中,可见各种不同时期的细胞。     

黄芩的花粉母细胞减数分裂及核型分析

采用压片法,对黄芩花粉母细胞减数分裂及核型进行了研究。结果表明:黄芩的大多数花粉母细胞减数分裂中染色体的行为正常,在终变期同源染色体配对后可形成9个二价体,后期Ⅰ染色体以9∶9的方式向细胞两极分离,其减数分裂为同时型;在少数花粉母细胞减数分裂中观察到落后染色体、染色体桥等异常行为;其花粉粒育性为76.49%。黄芩的染色体数目为2n=2X=18,核型公式为K(2n)=2X=18=16m+2 sm,染色体相对长度组成为2n=1 s+4M1+3M2+1L,其核型为"1A"型。     

麦蓝菜的花粉母细胞减数分裂及核型分析

采用压片法,对麦蓝菜的花粉母细胞减数分裂及体细胞核型进行了研究。结果表明,麦蓝菜的绝大多数花粉母细胞减数分裂中染色体的行为正常,在终变期同源染色体配对后可形成15个二价体;在少数花粉母细胞减数分裂中观察到落后染色体、染色体桥等异常行为;其减数分裂为同时型,其花粉粒育性为88.04%。麦蓝菜的染色体数目为2n=2X=30,核型公式为K(2n)=2X=30=22m(2SAT)+8 sm,染色体相对长度组成为2n=16M2+14M1,其核型为"1A"型。     

石竹花粉母细胞减数分裂的观察

采用常规压片法对石竹(Dianthus chinensis L.)花粉母细胞减数分裂进行了细胞学观察。结果表明,减数分裂过程中存在二价体提前分离、赤道板外染色体、落后染色体、染色体不均等分离等异常现象,各时期的畸形率都低于3%,石竹的减数分裂过程基本正常,石竹染色体数目2n=2x=30。     

OT杂种系百合品种‘Cocossa’小孢子败育细胞学研究

以OT百合‘Cocossa’为材料,采用醋酸洋红染色烤片法和石蜡切片法,对该品种花粉母细胞减数分裂过程以及绒毡层在花粉母细胞发育过程中的变化进行系统的细胞学观察。研究发现:(1)当百合花蕾长度在2.5~4.5 cm时,花粉母细胞处在减数分裂时期。(2)在花粉母细胞减数分裂的过程中,出现了较多染色体异常现象:中期Ⅰ出现染色体环;后期Ⅰ出现了滞后染色体和染色体桥;在末期Ⅰ和末期Ⅱ细胞出现不均等分裂和微核;处于同一花蕾和同一花药的花粉母细胞减数分裂具有不同步性,能同时观察到2个不同时期的分裂相;形成畸形、无核、多核的异常小孢子。(3)在末期Ⅱ和单核花粉粒时期,绒毡层延迟降解,引起多核花粉粒、畸形花粉粒以及花粉粒自溶现象。结果表明:OT百合‘Cocossa’小孢子败育是花粉母细胞异常减数分裂与绒毡层异常降解共同导致的。     

一种新的花粉压片染色法

在发育生物学研究中 ,常常需要搞清雌、雄器官的发育进程。采用压片技术一般可以观察到雄花不同发育时期的花粉形态。花粉压片染色多采用醋酸———洋红法[2 ] 。但是 ,我们在观察黄瓜雄花发育过程中发现醋酸———洋红法染四分体之前的花粉染色很淡 ,无法进行显微摄影。在制片过程中 ,我们尝试了多种对染处理法 ,结果发现醋酸———洋红与固绿对染能非常清晰地观察到花粉母细胞和四分体时期的花粉。现将这一方法予以介绍 ,以期为植物制片研究提供一种新的方法。1　染色剂的配制参照李正理的方法[1] 配制醋酸———洋红与固绿溶液。1 1　醋…     

小钻‘白城杨2号’小孢子发生及花粉大小变异

利用醋酸洋红染色压片技术,以温室水培小钻‘白城杨2号’(Populus×xiaozhuanica W.Y.Hsu et Liangcv.‘Baicheng-2’)为材料,对其小孢子发生过程中染色体行为及花粉大小变异进行研究。结果表明:(1)‘白城杨2号’小孢子母细胞减数分裂过程中染色体行为存在一定比例的异常现象,包括终变期单价体、中期Ⅰ染色体提前分离、后期Ⅰ和Ⅱ落后染色体和染色体桥、末期Ⅰ和Ⅱ微核、中期Ⅱ纺锤体定位异常以及胞质分裂异常等,这些异常现象的发生与‘白城杨2号’杂种起源有密切关系。(2)‘白城杨2号’小孢子母细胞减数分裂过程中核仁数目存在动态变化,末期Ⅰ和Ⅱ的子核中最多可看到8个小核仁,可能与杨属树种的多倍体起源有关,其染色体组中可能包含8对具核仁组织者区的染色体。(3)‘白城杨2号’产生空瘪花粉率为3.67%,饱满花粉直径在21.3～52.2μm之间,频率分布总体呈近似高斯分布,0.69%的花粉直径超过37μm,表明其可能产生少量未减数的2n花粉。     

一种新的六倍体细胞类型水生薏苡的细胞遗传学鉴定

通过醋酸洋红压片和荧光原位杂交技术(包括基因组原位杂交技术), 确定在我国广西西南部地区广泛分布着的水生薏苡(Coix aquatica Roxb.)属于一种新的六倍体细胞类型。这种水生薏苡与已报道的几种水生薏苡细胞类型的染色体数目均不相同,它的染色体数目是2n = 30,在减数分裂前期Ⅰ和中期Ⅰ的细胞中形成10个二价体和10个单价体。基因组原位杂交结果表明,这种水生薏苡的20条染色体与四倍体的薏苡(C. lacryma-jobi, 2n = 20)的基因组DNA是高度同源的。45S 和5S rDNA分别杂交到这种水生薏苡的两条染色体上,其中各有一条染色体与薏苡中携带45S和5S rDNA杂交信号的染色体具有相同的形状和信号的分布状态。据此推测: 四倍体的薏苡可能是这种新的水生薏苡细胞类型的一个亲本,它的另一个亲本可能是八倍体的水生薏苡(C. aquatica, 2n = 40), 因为这种八倍体的水生薏苡在核型、植株形态及生长环境等方面与新的六倍体细胞类型的水生薏苡相似。     

观察有丝分裂方法的改进

在观察植物细胞的有丝分裂实验中,通常的步骤为:将取下的根尖在固定液中固定15—30分钟,然后用95％酒精洗净醋酸,移入70％酒精中,再水洗后转入1N盐酸中60℃下水解10分钟,之后水洗1—2次,压片,用醋酸洋红染色10分钟。整个过程约需35—50分钟,耗时长,且操作繁琐。近年来,我们采用了一种较为简便的方法,具体如下:     

甘紫菜的染色体观察

甘紫菜是我国海藻养殖的重要对象之一。搞清楚它的染色体数目和生活史中减数分裂的时期,这在理论上和实际应用上都有一定的意义。材料和方法:实验材料采集于青岛市栈桥附近的海边。所采集的新鲜材料用3:1的无水酒精和冰醋酸固定。用铁醋酸洋红和水合氯醛酸铁苏木精染色。对染色体分裂相较多,分散较好的标本,经酒精脱盖片,用油派胶(Euparal)封片。本研究的凭证标本保存在山东海洋学院遗传研究室。     

用改良苯酚品红染色液替代醋酸洋红染色液的研究

以往在动物遗传学实验“果蝇唾液腺染色体标本的制作和观察”中,采用醋酸洋红染色液对染色体染色。本文对用改良苯酚品红染色液替代醋酸洋红染色液对果蝇唾液腺染色体染色的问题进行了研究。结果表明,改良苯酚品红染色液对果蝇唾液腺染色体的染色效果与醋酸染洋红染色液的染色效果是相同的。而且用改良苯酚品红染色液还人提高工效,简易节约的优点。因此认为,在对果蝇唾液腺染色体染色中,用改良苯酚品红染色液替代酸酸洋红染色液     

一种改进的果蝇唾液腺染色体装片制作方法

提出一种改进的果蝇唾液腺染色体装片制作方法,整个实验流程为:50℃水浴处理果蝇幼虫—剥离唾液腺—压片—冰冻—脱片—浸染—脱水—封片。与传统方法相比较,改进的地方主要有3点:1)热水处理果蝇幼虫;2)玻片冰冻;3)先压片后染色。该方法显著改善了实验效果,提高了实验成功率。改进后的果蝇唾液腺染色体装片制作技术简单实用、可操作性强,同样适用于蝗虫精巢减数分裂装片的制作。     

蝗虫性细胞减数分裂永久玻片的制备方法

性细胞减数分裂是一个复杂的有丝分裂。在动物方面,雄性蝗虫是很好的材料,因为它的染色体数目少(■:2n=23,xo),蝗虫的种类很多,用任何一种都可以,从精巢里一般可得到大量减数分裂的图像。观察减数分裂的方法多采用临时压片法,其操作简便,染色体不易丢失,但标本不能长期保存,所以必须制备永久玻     

红花(Corthamus tinotorius L.)和党参(Codonopsis pilosula Nannf.)的核型研究

本试验采用常规压片技术,对两种应用较广的中药材——红花和党参的染色体核型进行了分析,其结果报道如下: 1.红花(图1):淋细胞染色体数为2n=24,有10对染色体具中部着丝点,1对具随体(表1),2对染色体为亚中部着丝点。核型公式为:2n=24=20m(2SAT)+4sm。染色体绝对长度介于1.990μm-3.483μm之间,相对长度变动幅度为3.663—4.649。     

一种新的六倍体细胞类型水生薏苡的细胞遗传学鉴定

通过醋酸洋红压片和荧光原位杂交技术(包括基因组原位杂交技术),确定在我国广西西南部地区广泛分布着的水生薏苡(Coix aquatica Roxb.)属于一种新的六倍体细胞类型.这种水生薏苡与已报道的几种水生薏苡细胞类型的染色体数目均不相同,它的染色体数目是2n=30,在减数分裂前期Ⅰ和中期Ⅰ的细胞中形成10个二价体和10个单价体.基因组原位杂交结果表明,这种水生薏苡的20条染色体与四倍体的薏苡(C.lacryma-jobi,2n＝20)的基因组DNA是高度同源的.45S和5S rDNA分别杂交到这种水生薏苡的两条染色体上,其中各有一条染色体与薏苡中携带45S和5S rDNA杂交信号的染色体具有相同的形状和信号的分布状态.据此推测:四倍体的薏苡可能是这种新的水生薏苡细胞类型的一个亲本,它的另一个亲本可能是八倍体的水生薏苡(C.aquatica,2n＝40),因为这种八倍体的水生薏苡在核型、植株形态及生长环境等方面与新的六倍体细胞类型的水生薏苡相似.     

甘蔗-滇蔗茅杂交F_1花粉母细胞减数分裂过程GISH分析

研究甘蔗属与滇蔗茅属间远缘杂交F1染色体遗传行为具有重要科学意义,可为发掘利用滇蔗茅野生优异基因资源提供细胞学依据。本研究采用常规压片技术对可育父本及不育杂交F1花粉母细胞减数分裂过程进行比较观察,结果显示可育父本云南95-19减数分裂正常,而不育杂交F1分裂异常;进一步对F1花粉母细胞减数分裂过程进行基因组荧光原位杂交(GISH,genome in situ hybridization)分析,结果表明:滇蔗茅与甘蔗属热带种的亲缘关系较远,双亲染色体在F1细胞中不能进行同源配对,终变期,15条滇蔗茅染色体以单价体形式存在,花粉母细胞减数分裂细胞中存在滞后染色体、染色体丢失和不均衡分离现象。甘蔗-滇蔗茅属间远缘杂交F1花粉母细胞减数分裂异常因而杂交F1花粉完全败育。     

欧洲黑杨花粉母细胞减数分裂观察及其不同步性分析

以欧洲黑杨的雄花枝为材料,采用温室切枝水培和醋酸洋红染色制片法,观察花粉母细胞减数分裂进程及其与花芽发育外部形态的关系。结果表明:(1)欧洲黑杨花粉母细胞的减数分裂进程快慢与温度高低关系密切;(2)减数分裂发生时其花芽的外部形态发育没有明显变化;(3)花粉母细胞减数分裂不同步性突出,同一花药内的花粉母细胞处于不同的减数分裂时期,且同一花芽尖端发育明显滞后于中部和基部;(4)减数分裂过程中有少量的核仁异常现象,虽观察到较多平行纺锤体现象,但未发现天然2n花粉。该研究结果揭示了欧洲黑杨减数分裂的遗传变异规律,为诱变育种、倍性育种以及分子水平的进一步研究奠定了细胞学基础。