细菌性阴道病肠道菌群与阴道菌群16S rDNA测序分析

目的通过对细菌性阴道病(BV)患者肠道菌群及阴道菌群16S rDNA扩增子测序,分析其结构、多样性、相关性以及BV对肠道菌群的影响,为今后治疗BV提供新的思路。方法选取符合纳入标准的BV患者11例(BV组),健康者9例(C组),留存阴道分泌物及新鲜粪便进行16S rDNA基因检测分析。结果C组阴道菌群以乳杆菌属为主,BV与加德纳菌属、普雷沃菌属、Sneathia、窄食单胞菌属(Stenotrophomonas)、阿托波菌属、Shuttleworthia、巨型球菌属密切相关。BV组肠道、阴道菌群丰富度均高于C组。Alpha多样性分析中C组和BV组肠道菌群、阴道菌群的Shannon指数组间比较,χ²值为29.137, P=0.000<0.05,两组阴道菌群Shannon指数组间比较差异具有统计学意义(P<0.05),BV组高于C组。物种多样性曲线反映本研究样本测序数据量的合理性,表明BV组的肠道菌群多样性、丰富度均高于C组,主坐标分析表明C组肠道与阴道的菌群结构差距较大,BV组肠道与阴道的菌群结构有相似之处,且两组肠道菌群结构接近。BV组阴道菌群中厚壁菌门丰度较C组低,放线菌门、拟杆菌门较C组高;BV组肠道菌群中拟杆菌门丰度较C组低;C组肠道中拟杆菌门明显高于阴道,厚壁菌门明显低于阴道; BV组阴道菌群中放线菌门丰度高于C组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论BV阴道菌群与肠道菌群具有相关性,BV可能引起肠道菌群结构比例和多样性的改变。     

基于实时定量PCR技术的育龄期细菌性阴道病患者阴道菌群结构分析及其临床应用

目的 探讨育龄期女性细菌性阴道病（bacterial vaginosis,BV）患者阴道优势菌群变化及其与临床指标的相关性。方法 选择本院门诊确诊的育龄期BV患者35例和同期入院体检的健康体检女性37例,无菌拭子采集阴道中段壁分泌物,提取细菌基因组DNA,采用实时定量PCR技术（real-time quantitative PCR,qPCR）进行阴道优势细菌检测,并进行其与临床指标如阴道pH和Nugent评分相关性分析。结果 乳杆菌属细菌及其种水平的细菌如惰性乳杆菌、卷曲乳杆菌、詹氏乳杆菌等在BV患者中均显著下降,BV相关阴道致病细菌如加德纳菌属、奇异菌属、埃格特菌属、巨型球菌I型菌属、纤毛菌属和普氏菌属显著升高（P<0.05）。阴道致病菌群与阴道pH和Nugent评分呈显著正相关,而阴道卷曲乳杆菌和惰性乳杆菌与其呈负相关。结论 育龄期BV患者阴道优势菌群显著失衡,并与阴道pH和Nugent评分显著相关,提示阴道优势菌群改变参与BV发生发展。     

需氧菌阴道炎、细菌性阴道病阴道菌群分析

用阴道分泌物直接涂片、革兰染色、选择性培养分离和细菌预成酶谱分析等微生物学方法和生物化学方法,分析了正常女性、AV、BV患者的阴道菌群。正常女性阴道中以乳酸杆菌为主,产H2O2乳酸杆菌的检出率89%,AV的致病菌主要是革兰阳性率需氧菌、检出率可达80%,其中金黄色葡萄球菌,粪肠球菌和埃希氏大肠菌较为常见,B族链球菌的检出率较低;BV的致病菌主要是厌氧菌,以革兰阴性厌氧菌的检出率最高,加德纳菌的检出率不足40%。48例BV患者中有8例合并AV感染,31例AV患者中有6例合并BV感染。细菌谱分析发现,AV患者易感染消化链球菌、普雷沃菌等厌氧菌和加德纳菌,BV患者易感染粪肠球菌、大肠埃希菌等需氧菌。     

细菌性阴道病及其合并盆腔炎患者的阴道菌群分析

目的 对比细菌性阴道病及其合并盆腔炎患者与健康个体的阴道菌群,分析阴道菌群的结构,为确定该疾病的特征细菌及研究致病机制奠定基础。方法 采用临床Amsel标准筛选的17例细菌性阴道病患者、13例细菌性阴道病合并盆腔炎患者和52例健康者,使用无菌拭子采集阴道后穹窿分泌物以提取细菌基因组DNA。采用PCR技术扩增上一步得到的16S rRNA片段,而后将扩增产物通过变形梯度凝胶电泳（DGGE）分离以得到阴道细菌种属结构图谱,应用Quantity One软件进行聚类分析,应用凝胶测序法进行特异条带分析。检测16S rRNA基因,具体研究样品中的物种分类。结果 细菌性阴道病及其合并盆腔炎患者的阴道菌群的构成与健康者相比较具有显著性差异。其中,Firmicutes等菌门细菌减少,Actinobacteria等菌门细菌增多;G. vaginallis、P. vaginallis等厌氧菌数量均增加,L.crispatus、L.iners等益生菌数量均有减少。结论 细菌性阴道病及其合并盆腔炎患者的生殖道内的合并感染改变了阴道内的原有微生态平衡。两组疾病组患者的阴道菌群构成相比于健康对照组变化明显。     

健康妇女及3例细菌性阴道病患者阴道菌群的非培养分析

根据Amsel标准及Nugent标准, 确诊筛选健康妇女及细菌性阴道病(bacterial vaginosis, BV)患者各3例。提取其阴道分泌物样本的总DNA, 构建16S rRNA基因克隆文库, 并对阳性克隆进行ARDRA和测序分析。结果表明, 健康妇女样本的基因文库中, 分别以卷曲乳酸杆菌(L. crispatus)和惰性乳酸杆菌(L. iners)的克隆子占较大比例, 另外存在少量的阴道乳酸杆菌(L. vaginalis)或詹氏乳酸杆菌(L. jensenii)的克隆子。BV患者样本的基因文库中, 克隆子所代表的菌种类型明显增多, 但均以阴道加德纳氏菌(Gardnerella vaginalis)和阴道阿托波氏菌(Atopobium vaginae)的克隆子占较大比例, 且无乳酸杆菌克隆子。说明健康妇女阴道菌群的种类单一, 以乳酸杆菌占优势, L. iners为优势菌种之一; BV患者阴道菌群的种类复杂多样, 但均以Gardnerella vaginalis及Atopobium vaginae共同占优势。     

细菌性阴道病的菌群亚型与治疗结局的相关性研究

目的探讨细菌性阴道病的菌群亚型与不同治疗结局的相关性,为细菌性阴道病分型诊断及个体化治疗提供理论依据。方法选取2012年9月至2013年7月在北京大学第一医院妇产科门诊诊断为细菌性阴道病的育龄期女性为研究对象,规范使用甲硝唑凝胶治疗,分别采集患者用药前、用药后6~8d、用药后1个月的阴道分泌物,提取细菌组DNA,进行454焦磷酸测序,分析阴道微生物菌群的多样性和丰度差异,探讨细菌性阴道病患者阴道菌群的构成差异与预后之间的相关性。结果共有109例细菌性阴道病患者,其中61名患者完成了2次随访,共计183份阴道分泌物样品。对所有采集的标本进行454焦磷酸测序分析,共发现192种细菌。根据高通量测序结果分析,可将细菌性阴道病的菌群结构分为3种亚型:普雷沃菌型(Prevotella,I型)、阿托波菌型(Atopobium,II型)和乳杆菌型(Lactobacillus,III型)。细菌性阴道病不同的菌群亚型,其治愈率是不同的。乳杆菌型的治愈率最高,约为76.5%,阿托波菌型的治愈率最低,约为42.8%。结论细菌性阴道病的菌群存在不同亚型,且与治疗结局存在相关性,乳杆菌型菌群结构的患者对甲硝唑的治愈率最高。     

乳酸菌阴道胶囊干预对孕晚期细菌性阴道病患者阴道菌群及分娩结局的影响

目的 探讨乳酸菌阴道胶囊干预对孕晚期细菌性阴道病（BV）患者阴道菌群及分娩结局的影响。方法 2017年12月‒2019年2月在泰山医学院附属青岛医院接受治疗及分娩的BV患者136例,参照随机数表法分为对照组、研究组各68例。对照组患者接受甲硝唑治疗,研究组患者接受乳酸菌阴道胶囊＋甲硝唑治疗。持续1周后,对比两组患者的疗效、乳酸菌计数情况、用药不良反应发生情况的差异,记录两组患者分娩结局。结果 治疗1周后,两组患者的疗效分级差异有统计学意义（U=7.062、P=0.029）;治疗总有效率的差异无统计学意义（2=2.030、P=0.154）。两组患者的阴道乳酸菌计数分级差异有统计学意义（U=9.179、P=0.047）,研究组患者的乳酸菌计数正常率高于对照组患者（2=6.103、P=0.013）。用药期间,两组患者皮肤瘙痒、下腹疼痛、头晕头痛等不良反应发生率差异无统计学意义（2=0.341、1.007、0.208,P=0.559、0.316、0.649）。两组患者均无一例发生心律失常。研究组患者的胎膜早破、早产、产褥感染、子宫内膜炎发生率低于对照组患者（2=4.087、4.561、3.765、4.121,P=0.043、0.033、0.049、0.042）。两组患者的新生儿感染、新生儿高胆红素血症发生率差异无统计学意义（2=2.030、2.944,P=0.154、0.086）。结论 乳酸菌阴道胶囊干预对优化孕晚期BV患者阴道菌群、改善妊娠结局具有一定积极作用。     

乳杆菌泡腾片治疗细菌性阴道病

目的观察10例BV患者采用了信谊制药总厂生产的阴道嗜酸乳杆菌泡腾片1个疗程(7 d)后阴道菌群的变化。方法采用7种选择或非选择培养基对阴道分泌物的细菌总数、乳杆菌等7个指标进行检测。结果治疗后阴道中乳杆菌显著增多,厌氧革兰阴性杆菌显著减少(两者P<0.001)。细菌总数、肠杆菌、酵母菌和阴道加德纳菌均减少(P<0.01)。结论信谊阴道嗜酸乳杆菌泡腾片具有较好的调整阴道微生态平衡的作用。     

健康妇女及3例细菌性阴道病患者阴道菌群的非培养分析

根据Amsel标准及Nugent标准,确诊筛选健康妇女及细菌性阴道病(bacterial vaginosis,BV)患者各3例.提取其阴道分泌物样本的总DNA,构建16S rRNA基因克隆文库,并对阳性克隆进行ARDRA和测序分析.结果表明,健康妇女样本的基因文库中,分别以卷曲乳酸杆菌(L.crispatus)和惰性乳酸杆菌(L. iners)的克隆子占较大比例,另外存在少量的阴道乳酸杆菌(L.vaginalis)或詹氏乳酸杆菌(L.jensenii)的克隆子.BV患者样本的基因文库中,克隆子所代表的菌种类型明显增多,但均以阴道加德纳氏菌(Gardnerella vaginalis)和阴道阿托波氏菌(Atopobium vaginae)的克隆子占较大比例,且无乳酸杆菌克隆子.说明健康妇女阴道菌群的种类单一,以乳酸杆菌占优势,L. iners为优势菌种之一;BV患者阴道菌群的种类复杂多样,但均以Gardnerella vaginalis及Atopobium vaginae共同占优势.     

绝经前后细菌性阴道病厌氧菌群及耐药性分析

目的了解绝经前后细菌性阴道病患者标本中优势厌氧菌群,检测厌氧菌分离株对5-硝基咪唑类和林可霉素类抗生素的耐药性。方法采集165例未绝经和125例绝经阴道病患者以及84例未绝经和68例绝经正常妇女的阴道分泌物,测定其pH。采用选择性厌氧培养基分离类杆菌、梭杆菌、乳杆菌、优杆菌、消化链球菌和消化球菌,将分离的厌氧菌株鉴定至种。同时采用二倍平皿稀释法,测定塞克硝唑、替硝唑、甲硝唑、林可霉素和克林霉素对760株厌氧菌的最低抑菌浓度。结果100%细菌性阴道病患者、97.6%未绝经和98.5%绝经正常妇女的阴道分泌物中分离出厌氧菌。阴道炎患者标本中,类杆菌属、普氏菌属和紫质单胞菌属厌氧菌分离率高于相应对照组(P<0.05;P<0.01),其中以多毛类杆菌、腐败类杆菌、脆弱类杆菌、产黑普氏菌、不解糖紫质单胞菌为优势菌群;梭杆菌属、优杆菌属、消化球菌属和消化链球菌属厌氧菌分离率与相应对照组比较差异无显著性(P>0.05);乳杆菌属分离率明显低于相应对照组(P<0.01)。未绝经正常妇女和患者及绝经正常妇女和患者阴道分泌物pH分别为4.5±0.2、5.5±0.8、6.5±0.3和6.5±1.0。塞克硝唑、替硝唑和甲硝唑对355株革兰阴性厌氧菌M IC90值为1~8μg/m l,林可霉素和克林霉素则为4~16μg/m l;塞克硝唑、替硝唑和甲硝唑对405株革兰阳性厌氧菌M IC90值为8~32μg/m l,林可霉素和克林霉素则为4~16μg/m l。     

890例疑似细菌性阴道病患者阴道分泌物检测结果与分析

目的探讨BV三项检测法在阴道感染诊断中的价值。方法对890例阴道分泌物进行常规检查和BV三项检测。结果 890例疑似细菌性阴道病患者中,BV三项检测法检出BV患者772例(占总数的86.74%),常规镜检(Am sel标准法)检出BV患者763例(占总数的85.73%),二者的符合率为93.40%,具有中度一致性(Kappa=0.746,P0.05)。890例疑似细菌性阴道病患者中,BV合并VVC感染患者129例(占总数的14.49%),BV合并TV感染患者41例(占总数的4.61%),混合感染(BV+VVC、BV+TV)的发病率达到了19.10%(170/890)。结论 BV三项检测法不仅可初筛混合感染,而且与Am sel标准法在诊断BV方面具有较高的一致性,该检测方法快速准确,适宜临床推广与应用。     

细菌性阴道病微生态与益生菌

细菌性阴道病(BV)是育龄妇女阴道炎的最常见原因,其特征是栖居在阴道内的乳酸杆菌减少导致阴道菌群平衡失调的复杂变化。用乳酸杆菌替代抗生素是治疗BV的一种有效的治疗措施。乳酸杆菌产生过氧化氢、乳酸、杆菌素能抑制引起BV的细菌生长。多胺在BV的病理机制中有重要作用。本研究拟综述BV患者阴道菌群的变化,免疫防御反应,阴道乳酸杆菌对BV的影响,多胺的意义,益生菌在治疗选择中的作用。     

650例疑似细菌性阴道病BV患者阴道分泌物检测分析

目的探讨生化检测法在细菌性阴道病（BV）诊断中的应用价值。方法对绍兴市人民医院妇科门诊650例阴道分泌物进行常规及生化检测。结果在650例疑似细菌性阴道病患者中,以“唾液酸苷酶阳性＋过氧化氢阳性”为诊断标准,共检出BV患者483例（占总数的74．31％）;使用Amsel法检出细菌性阴道病患者481例（占总数的74％）。使用生化检测法和Amsel法检出细菌性阴道病的阳性率差异无统计学意义（x2=0．53,P〉O．05）,二者的符合率为94．15％（612／650）,具有很高的一致性。结论生化检测准确、快速,具有较高的临床应用价值。     

微生态调节剂黄瓜香治疗细菌性阴道炎疗效观察

目的 观察微生态调节剂黄瓜香治疗细菌性阴道炎的疗效.方法 用黄瓜香提取液治疗细菌性阴道炎,治疗前后分别进行测阴道分泌物pH、做线索细胞和胺试验检查,进行总有效率评定.结果 经2种药物治疗后所有患者临床症状均明显减轻,治疗前后自身比较差异有显著性(P<0.01); 83%以上的患者呈现线索细胞转(-)、胺试验转(-) ,超过一半的患者阴道分泌物pH低于4.5;临床治疗总有效率分别为76.66%和79.4%%.2种药物组间比较治疗效果差异无显著性(P>0.05).结论 阴道补充黄瓜香与使用甲硝唑治疗产生了相似的效果,有可能成为治疗细菌性阴道炎的新药.     

细菌性阴道病联合测定技术在BV诊断中的应用

目的 探讨生化法在细菌性阴道病(BV)诊断中的应用价值.方法 分别使用镜检法和生化法对1466例就诊者的阴道分泌物进行检测.结果 在1 466例受检者中,使用生化法检出BV患者1 297例,使用镜检法检出BV患者1 301例.经统计学分析,二者检出BV的阳性率差异无统计学意义(x2=0.46,P＞0.05),且二者的符合率为97.14％ (1424/1466).结论 生化法检测准确快速,适宜在基层医院推广使用.