印度木薯花叶病毒DNA在寄主植物中可能存在的形式

从印度木薯花叶病毒（ＩＣＭＶ）侵染的植物中纯化特异的核酸,经ＲＮＡａｓｅ,ＤＮＡａｓｃ,Ｎｕｃｌｅ－ａｓｅＳｌ,ＥｘｏｎｕｃｌｅａｓｅⅢ和ＥｃｏＲＩ酶切,Ｓｏｕｔｈｅｒｎ和Ｄｏｔｂｌｏｔｓ杂交证实,在感病的植株中,存在两种形式的病毒核酸：环状双链ＤＮＡ和环状单链ＤＮＡ,后者可能是病毒ＤＮＡ的（－）链,环状双链ＤＮＡ经限制性内切酶作用可得２．７ｋｂ的线性双链ＤＮＡ纯化的病毒核酸含ＤＮＡ１和ＤＮＡ２两个分子量相近的组份。     

毛细血管扩张性共济失调突变蛋白在细胞凋亡过程中被Caspase┐3降解

新近的研究揭示：ｃａｓｐａｓｅ蛋白酶在细胞凋亡中起着死亡执行者的重要功能．一些蛋白相继被证明在细胞凋亡中可被ｃａｓｐａｓｅ特异切割,其中参与ＤＮＡ损伤修复过程的聚ＡＤＰ核糖聚合酶（ＰＡＲＰ）以及ＤＮＡ依赖的蛋白激酶（ＤＮＡ－ＰＫ）,在细胞凋亡过程中被ｃａｓｐａｓｅ选择性切割具有特殊的功能意义．为探索与ＤＮＡ－ＰＫ催化亚基有较高同源性,含有ｃａｓｐａｓｅ切割位点,且功能上目前也被认为是感受ＤＮＡ损伤和参与信号传导途径的ＡＴＭ（Ａｔａｘｉａｔｅｌａｎｇ－ｉｅｃｔａｓｉａｍｕｔａｔｅｄ）蛋白,是否在凋亡过程中也可被切割而降解？应用体外转录与翻译系统获得ＡＴＭ蛋白的ＰＩ３Ｋ结构域,同时通过建立无细胞反应体系获得含ｃａｓｐａｓｅ活性的细胞抽提液,将两者在体外共同保温．结果发现：ＡＴＭ蛋白与ｃａｓｐａｓｅ－３能免疫共沉淀,ＡＴＭ蛋白的ＰＩ３Ｋ结构域可被ｃａｓｐａｓｅ－３特异切割,并观察到辐射诱发细胞调亡中ＡＴＭ蛋白的降解．从而进一步证实了ＤＮＡ损伤修复的抑制,促进细胞凋亡的发生．     

一种新的脉冲电泳分子量标记*

在脉冲电泳（ｐｕｌｓｅｄ－ｆｉｅｌｄ　ｇｅｌ　ｅｌｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ,ＰＦＧＥ）研究中,经常使用的分子量标记有啤酒酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ　ｃｅｒｅｖｅｓｌａｅ）和粟酒裂殖酵母（Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ　ｐｏｍｂｅ）的染色体完整ＤＮＡ。其中,啤酒酵母（如菌株ＹＮＮ２９５）有１６条染色体,分子量变化范围为０．２５Ｍｂ～２．２Ｍｂ（ＭｃＣｌｕｓｋｅｙｅｌａｌ,１９９０）,适于作为小于２．２Ｍｂ的染色体ＤＮＡ的分子量标记;粟酒裂殖酵母（如菌株９７２ｈ－）有３条染色体,分子量…     

核酶的抗病毒作用

反义核酸技术（ａｎｔｉｓｅｎｓｅｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄｓｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）是根据核酸杂交原理设计的以选择性地抑制特定基因表达为目的的一类核酸研究新技术,它包括反义ＲＮＡ（ａｎｔｉｓｅｎｓｅＲＮＡ,ａｓＲＮＡ）、反义ＤＮＡ（ａｎｔｉｓｅｎｓｅＤＮＡ,ａｓＤＮＡ）及核酸（ｒｉｂｏｚｙｍｅ,Ｒｚ）三大技术领域,反义核酸技术同基因治疗一样已经成为一项引人瞩目研究领域。本文对核酸作用的原理和在抗病毒方面的研究进展作一综述     

Detection and Analysis of an Estrous－associated Oviductal Glycoprotein DNA Fragment from Primates by PCR

ＤｅｔｅｃｔｉｏｎａｎｄＡｎａｌｙｓｉｓｏｆａｎＥｓｔｒｏｕｓ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄＯｖｉｄｕｃｔａｌＧｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎＤＮＡＦｒａｇｍｅｎｔｆｒｏｍＰｒｉｍａｔｅｓｂｙＰＣＲ￥ＣＨＥＮＱｉｎｇ－ｘｕａｎ（陈清轩）;ＣｌａｙｔｏｎＥ．Ｗａｌｔｏ...     

核骨架结合元件功能研究的进展

细胞核骨架结合元件（ｎｕｃｌｅａｒｓｃａｆｏｌｄ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｒｅｇｉｏｎ,ＳＡＲ）或称核基质结合元件（ｎｕｃｌｅａｒｍａｔｒｉｘ－ａｔｔａｃｈｍｅｎｔｒｅｇｉｏｎ,ＭＡＲ）,是８０年代发现的一个新的ＤＮＡ元件。到９０年代初,由于发现ＳＡＲ／...     

人肿瘤坏死因子基因在变铅青链霉菌中的克隆与表达

以质粒ｐＩＪ４８６为载体,将来源于质粒ｐＨＴ１的肿瘤坏死坏因子（ＴＮＦ－ａ）ｃＤＮＡ克隆至变铅青链霉菌,以新霉素（３０μｇ／ｍｌ）为选择标记,获得了数百转化子,实验表明Ｎｏ．７转化子ｓ．ｌｉｖｉｄａｎｓ ＴＫ５４－ＨＴ所含重组质粒ｐＩＪＴ７已克隆有ＴＮＦｃＤＮＡ。Ｌ９２９细胞毒实验结果表明该转化子ＴＮＦ表达量可达１０＾８活性单位／升以上,中和实验确证其表达产物为人ＴＮＦ－ａ,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ表明克     

产气肠杆菌α—乙酰乳酸脱羧酶基因的克隆和表达及影响重组酶活性？…

用ＰＣＲ方法从产气肠杆菌（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）中克隆出０．９ｋｂ的ＤＮＡ片段,经ＤＮＡ测序证明是α－乙酰乳酸脱羧酶（α－ａｃｅｔｏｌａｃｔａｔｅ ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ,α－ＡＬＤＣ）基因。将α－ＡＬＤＣ基因重组到质粒,ｐＢＶ２２０后,转化大肠杆菌,经筛选获得的高效表达的重组子菌株。     

细胞松驰素B促微丝解聚对DNA合成的作用

利用微丝（ｍｉｃｒｏｆｉｌａｍｅｎｔ,ＭＦ）解聚药物细胞松驰素Ｂ（ｃｙｔｏｃｈａｌａｓｉｎＢ,ＣＢ）处理Ｇ_０期小鼠Ｃ_３Ｈ_（１０）Ｔ_（１／２）成纤维细胞,对Ｇ_０至Ｓ期ＤＮＡ合成,胸腺嘧啶核苷激酶（ｔｈｙｍｉｄｉｎｅｋｉｎａｓｅ,ＴＫ）活性、ＴＫ基因表达、钙调素（ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ,ＣａＭ）水平和一些细胞周期早期基因的表达进行了观察,Ｇ_０期细胞经３ｍｇ／ＬＣＢ处理２ｈ,促ＭＦ解聚增强了血清对Ｓ期细胞ＴＫ活性、ＴＫ基因表达和ＤＮＡ合成的刺激作用,并促进细胞提前进入Ｓ期．血清刺激Ｇ_０期细胞进入晚Ｇ_１期和Ｓ期时,ＣａＭ水平明显升高,而ＣＢ预处理则使ＣａＭ含量进一步增加,特别是ＣＢ处理促使Ｓ期ＣａＭ增加向核内转移．ＣＢ处理明显增强血清对ｃ－ｊｕｎ、ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ基因表达的刺激作用,而ＰＫＣ抑制剂Ｈ_７则抑制ＣＢ处理对这些基因转录的刺激作用,说明ＣＢ使Ｇ_０期细胞ＭＦ解聚刺激ｃ－ｊｕｎ、ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ的转录活性与ＰＫＣ的作用有关．结果表明Ｇ_０至Ｓ期早期ＭＦ的重组可促进细胞进入Ｓ期,增强ＤＮＡ合成．     

核酸靶序列的体外选择和扩增技术

核酸靶序列的体外选择和扩增技术王成济（第四军医大学生化教研室,西安７１００３２）关键词寡聚核苷酸,体外选择,ＰＣＲ基因表达的转录水平调控很大程度上依赖于基因的顺式调控元件（ｃｉｓ－ａｃｔｉｎｇｅｌｅｍｅｎｔｓ）与反式调节因子（ｔｒａｎｓ－ａｃｔｉｎｇ...     

云衫针层孔菌化学成分的研究

从云衫针层孔菌Ｐｈｅｌｌｉｎｕｓ ｙａｍａｎｏｉ（Ｔａｍｚ．）ｓｈａｗ分离得到１２个化合物,借助光谱分析鉴定为：８,１１,１３－ａｂｉｅｔａｄｉｅｎ－１８－ｏｉｃ ａｃｉｄ（１）,１,２－ｂｅｎｚｅｎｅｄｉ－ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄｂｉｓ（２－ｅｔｈｙｌ－ｈｅｘｙｌ）ｅｓｔｅｒ（２）,ｅｒｇｏｓｔｅｒｏｌ ｐｅｒｏｘｉｄｅ（３）,ｅｒｇｏｓｔａ ７,２２（Ｅ）－ｉｄｅｎ－３－ｏｌ（４）,ｅｒｇｏｓｔａ ７,２２（Ｚ）－ｄｉｅｎ－３－ｏｌ（５）,ｏｃｔａｄｅｃａｎｏｉｃ ａｃｉｄ－１,３－ｐｒｏｐａｎｅｄｉｙｌ ｅｓｔｅｒ（６）,ｏｃｔａｄｅｃａｎｏｉｃ ａｃｉｄ（７）,８（１９）,１４－ｌａｂｄａｄｉｅｎ－１３－ｏｌ（８）,ｅｒｇｏｓｔａ－４,６,８（１４）,２２－ｔｅｔｒａｅｎ－３－ｏｎｅ（９）,化合     

细胞凋亡中的关键蛋白酶—Caspase—3

在哺乳动物细胞凋亡执行阶段起重作用的一系列半胱氨酸蛋白酶基因相继被克隆。Ｃａｓｐａｓｅ－３（又称ＣＰＰ３２,Ｙａｍａ,ａｐｏｐａｉｎ）被认为是各种凋亡刺激因子激活的ｃａｓｐａｓｅ家族中的关键蛋白酶,活性ｃａｓｐａｓｅ－３可作用于一些其他ｃａｓｐａｓｅ成员,并降解凋亡细胞中的某些蛋白质。Ｃａｓｅｐａｓｅ－３抑制物是细胞凋亡抑制剂,有希望成为治疗因细胞过度死亡所致相关疾病的重要分子。     

Bst DNA聚合酶大片段的克隆,表达,性质及其应用

用耐高温的ＤＮＡ聚合酶进行酶法ＤＮＡ序列测定在分子生物学中具有十分重要的实际应用价值,从耐高温的嗜热脂肪芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）特异菌株中克隆分离了编码去除了５′－３′外切酶活性的ＢｓｔＤＮＡ聚合酶大片段的结构基因。经重组于表达质粒载体ｐＹＺ２３,在大肠杆菌ＪＦ１１２５（ＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉＪＦ１１２５）中得到了稳定的高效表达,经分离纯化,此基因工     

黑木耳电泳核型分析

采用等高锁状均质电场（ＣＨＥＦ）凝胶电泳技术,对黑木耳（Ａｕｒｉｃｕｌａｒｉａ ａｕｒｉｃｕｌａ）电泳核型进行分析,以酿酒酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）菌株ＹＰＨ７５５和粟酒裂殖酵母（Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｐｏｍｂｅ）菌株ＡＳ２．２１４的染色体ＤＮＡ大小作为分子量标记,估计黑木耳基因组中至少包含９条ＤＮＡ分子量在８５０ｋｂ至５８００ｋｂ之间的染色体,     

红藻氨酸致敏癫痫大鼠海马内AP-1 DNA结合活性和成分的改变

一次皮下注射惊厥剂量（７．５ｍｇ／ｋｇ）的红藻氨酸（ｋａｉｎｉｃ ａｃｉｄ,ＫＡ）诱发Ｆｉｓｈｅｒ３４４大鼠出现急性癫痫发作,７ｄ后即可形成癫痫敏感大鼠,继用Ｇｅｌ ｓｈｉｆｔ、Ｓｕｐｅｒ－ｓｈｉｆｔ和Ｗｅｓｔｅｍ ｂｌｏｔ方法测定大鼠海马内ＡＰ－１ ＤＮＡ结合活性及其组成成分。Ｇｅｌ ｓｈｉｆｔ结合显示,癫痫敏感大鼠海马内ＡＰ－１ ＤＮＡ结合活性的基础水平较对照组为高;Ｓｕｐｅｒ－ｓｈｉｆｔ实研     

用三色荧光原位杂交（Three—Color FISH）检测小鼠精子中染色体数目 …

用小鼠Ｘ,Ｙ和８号染色体特异的ＤＮＡ探针,与经ＤＴＴ（ｄｉｔｈｉｏｔ６ｒｅｉｔｏ）和ＬＩＳ（ｌｉｔｈｉｕｍ－３,５－ｄｉｉｏｄｏｓａｌｉｃｙｌｉｅ ａｃｉｄ）解 小鼠附睾精子进行三色荧光原位杂交（ｆｌｕｏｒｅｓｅｎｃｅ ｉｎ ｓｉｔｕ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ,ＦＩＳＨ）以检测精子中的染色体数目异常,并与ＭＭⅡ染色体分析比较。     

TBP的联结因子TAFs的结构与功能

ＴＢＰ的联结因子ＴＡＦｓ的结构与功能潘建伟赵章杏朱睦元（杭州大学生命科学学院,杭州３１００１２）潘伟槐黄承才（绍兴文理学院生化系,绍兴３１２００）ＳｔｒｕｃｔｕｒｅｓａｎｄＦｕｎｃｔｉｏｎｓｏｆＴＢＰ－ａｓｏｃｉａｔｅｄＦａｃｔｏｒｓＴＡＦｓＰＡＮＪ...     

中国大陆若干群体的黑果蝇的线粒体DNA多态性研究

本文研究了果蝇Ｄ．ｖｉｒｉｌｉｓ种群Ｄ．ｖｉｒｉｌｉｓ线粒体ＤＮＡ（ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌＤＮＡ,ｍｔＤＮＡ）的多态性。用９种限制性内切酶ＸｂａⅠ,ＥｃｏＲⅠ,ＰｓｔⅠ,ＨｉｎｄⅢ,ＢｇｌⅡ,ＳａｃⅠ,ＳｃａⅠ,ＥｃｏＲＶ和ＰｕｖⅡ,对青岛、南京、上海、宁波与泉州５个Ｄ．ｖｉｒｉｌｉｓ群体的ｍｔＤＮＡ进行了限制性片段长度多态性（ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｆｒａｇｍｅｎｔｓｌｅｎｇｔｈｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ,ＲＦＬＰ）的研究。在５群体中,发现５种不同的酶切图谱,它们彼此之间的遗传差异π为０．４６％－１．７６％,群体内遗传差异πｉｊ为０．００％－０．３３％,群体间的差异ｄｘｙ,为０．００％－０．８２％。分布于中国大陆的Ｄ．ｖｉｒｉｌｉｓ的群体间遗传差异在总遗传差异中所占比例γｓｔ值为２４．６２％。我们发现,Ｄ．ｖｉｒｉｌｉｓ的栖息环境对ｍｔＤＮＡ的遗传变异有十分明显的影响,而不同地理纬度的群体之间其遗传距离并无倾群（ｃｌｉｎｅ）表现。     

编码天麻抗真菌蛋白cDNA的分子克隆

用重组ＤＮＡ 技术研究了编码天麻抗真菌蛋白（ＧＡＦＰ）的基因,从天麻（Ｇａｓｔｒｏｄｉａ ｅｌａｔａＢｌ．）块茎中提取Ｐｏｌｙ（Ａ） ｍ ＲＮＡ 后合成ｃＤＮＡ,构建成表达型ｃＤＮＡ 文库,用纯化的蛋白质探针通过免疫筛选找出对应的ｃＤＮＡ 克隆。在进一步证明所选用的ｃＤＮＡ 克隆含有重组的λ－ｐｈａｇｅ ＤＮＡ 后,提取和纯化含有插入片段重组子的ＤＮＡ,用Ｅｃｏ ＲＩ酶切分析可见插入片段。已分离出编码天麻抗真菌蛋白的基因     

匙叶翼首花的化学成分

从药用植物匙叶翼首花（Ｐｔｅｒｏｃｅｐｈａｌｕｓ ｈｏｏｋｅｒｉ）中分离了７个化合物。通过波谱分析及已知物数据对照,分别鉴定为ｓｏｎｇｏｒｏｓｉｄｅＡ⑴,ｌｏｇａｎｉｎ⑵,软脂酸（ｐａｌｍｉｔｉｃ ａｃｉｄ,３）,乌索酸（ｕｒｓｏｌｉｃ ａｃｉｄ,４）,齐墩果酸（ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ,５）,β－谷甾醇（β－ｓｉｔｏｓｔｅｒｏｌ,６）,β－龙胆二糖（β－ｇｅｎｔｉｏｂｉｏｓｅ,７）,其中２是