伯氏疟原虫氯喹敏感株和抗性株感染红细胞精脒合成酶体内观察

给伯氏疟原虫氯喹敏感株(CS)和抗氯喹株(CR)感染鼠腹腔注入~3H-丁二胺(0.74MB_q/鼠),4h后用荧光法与液闪法测定CS、CR感染RBC中产生的~3H-精脒量,以示精脒合成酶的活力(以dpra/10~9感染RBC表示),并观察了氯喹对酶活力的影响。两株感染RBC的酶活力在治疗前接近,CS为59 987.9±17403(16),CR为53818.4±15565(13)。氯喹治疗20h后CS与CR分别为20033±3260(8)与65304±20176(11)即CS酶活力降低66.6％,CR的活力不变,推测氯喹对两株疟原虫感染RBC精脒抑制的差异点是在精眯合成酶环节。     

氯喹对伯氏疟原虫摄取次黄嘌呤、甲硫氨酸、精氨酸及其氨基酸组成的影响

伯氏疟原虫氯喹敏感株和抗氯喹株感染的RBC,与0.4mmol/L氯喹一起培养2小时后,敏感和抗氯喹株感染的RBC,对[~3H]次黄嘌呤、[~(14)C]精氨酸和[~3H]甲硫氨酸的摄入量分别被抑制67.3％、41.8％和35.7％以及65.4％、45.6和46.9％。 感染疟原虫的小鼠,经氯喹10mg/kg肌注20小时后,各氨基酸组成,在敏感株疟原虫中普遍的较不服药的对照组上升,而在抗氯喹疟原虫中,升高的氨基酸主要是与多胺、谷胱甘肽有关,如精氨酸、鸟氨酸、甲硫氨酸、脯鼠酸、甘氨酸和半胱氨酸。     

精脒／精胺N^1-乙酰转移酶与肿瘤

多胺是人体中一类重要的含高密度正电荷的小分子有机化合物,肿瘤细胞快速生长对多胺的依赖使多胺代谢途径成为抗肿瘤治疗的新靶点。精脒／精胺N^1-乙酰转移酶（spermidine／spermine N^1-acetyltransferase,ssAT）是多胺降解代谢的限速酶,在维持细胞内多胺稳恒中发挥重要作用。研究发现,SSAT持续性高表达能促进肿瘤发生,而急性诱导性ssAT高表达则能抑制肿瘤生长和诱导肿瘤细胞凋亡。本文对近年来SSAT与肿瘤相关性最新研究进展进行简要综述。     

多胺代谢与癌肿的研究

研究多胺与癌肿的关系。这些癌肿包括Raji癌肿细胞 ,急性淋巴细胞白血病 ,妇产科癌肿 (卵巢癌等 ) ,卵巢癌HO— 891 0细胞 ,肺癌以及胃癌等。研究结果 :(1 )Raji癌细胞株及卵巢癌细胞株 (HO— 891 0 )在培养过程中 ,第 2 4～4 8h多胺水平出现高峰 ,它与这两种癌细胞的核酸合成 ,细胞增殖呈现正相关 ;(2 )急性淋巴细胞白血病患者淋巴细胞及红细胞中多胺水平均升高 ,这有助于对这些病的早期诊断及判断预后 ;(3 )妇科癌症 (尤其卵巢癌 ) ,肺癌 ,胃癌等患者尿液中多胺水平明显高于正常 ,所以尿液中多胺对这些癌肿也是一种有效的诊断标记物     

单甲脒降解菌的分离筛选

从土壤、水体和受单甲脒长期污染的样品中通过富集培养,从中分离筛选到一株单甲脒耐性较高的ＤＲ－８菌株。该菌株在牛肉汁培养基中对单甲脒的耐性可达１２５０ｍｇ／Ｌ,而在无机盐培养基中的耐性则为５００ｍｇ／Ｌ。该菌株可以利用单甲脒作为唯一氮源,但是不能以单甲脒作为碳源和能源而生长。降解单甲脒的最适温度为３７℃,最适ｐＨ为７．０,其完整细胞悬液对５５０ｍｇ／Ｌ左右单甲脒的降解率最高可达６４．８２％。经鉴定该菌株为门多萨假单胞菌（ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｍｅｎｄｏｃｉｎａＤＲ－８）。     

氯喹与氟康唑联合对新生隐球菌的体外药敏实验

目的研究氯喹与氟康唑体外联合应用对隐球菌生长作用的影响。方法参考M27-A方案,检测10μmol/L,100μmol/L与1 000μmol/L 3种浓度氯喹与氟康唑联合后对20株菌株的氟康唑对隐球菌最小抑菌浓度与最小杀菌浓度的变化。结果与10μmol/L氯喹组相比,100μmol/L以上浓度的氯喹组可以显著降低氟康唑对隐球菌的M IC与MFC。结论氯喹在体外可以提高氟康唑抗隐球菌的作用,与氟康唑具有协同抗隐球菌的作用。     

干旱期间春小麦叶片多胺含量与作物抗旱性的关系

使用两种抵制剂ＭＧＢＧ（抑制ＳＡＭＤＣ活性）和ＡＯＡ（抑制ＡＣＣ合成酶活性）研究了干旱期间两个春小麦品种８１３９（抗旱性较弱）和５０４（抗旱性较强）叶片多胺（Ｐｕｔ、Ｓｐｄ和Ｓｐｍ）含量、ＲＷＣ水平、ＳＯＤ和ＰＯＤ活性以及ＭＤＡ含量的变化,并由此探讨了不同类别多胺与作物抗旱性的关系以及多胺与乙烯在作物对干旱胁迫响应过程中对共同前体ＳＡＭ的竞争趋向及其生理意义。     

亚精胺诱导黄瓜幼苗对白粉病抗性的研究

以黄瓜品种‘长春密刺’幼苗为材料,研究了亚精氨(Spd)诱导黄瓜幼苗对白粉病的抗性,并测定Spd处理和白粉菌接种对黄瓜叶片4种防御酶活性及3种防卫基因表达的影响。结果显示:(1)0.2～1.0mmol.L-1 Spd对黄瓜幼苗白粉病抗性均有不同程度的诱抗效果,并以0.8mmol.L-1 Spd处理效果最明显,诱导效率可达55.3%。(2)喷施Spd或接种白粉菌均可提高黄瓜叶片过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶的活性,且诱导并接种处理的植株叶片上述酶活性均比只诱导不接种处理的上升速度更快;同时,Spd处理和接种白粉菌可以提高植株叶片中POX、PAL、PR-1a基因的表达量。研究表明,Spd处理可以诱导防卫基因表达的增强,提高防御酶活性,显著降低病情指数,增强黄瓜幼苗对白粉病的抗性。     

外源亚精胺对荇菜抗Hg2+胁迫能力的影响

3 mg/L的Hg2降低了叶内亚精胺(spermidine,Spd)、精胺(spermine,Spm)含量,促进了腐胺(put resci ne,Put)合成,喷施Spd可提高叶内Spd、Spm含量,对Put含量则在低浓度下使其下降、高浓度(将近1mmo1/L)下使之上升.3mg/L的Hg2 可显著降低SOD、CaT、APx活性,提高02-产生速率,导致膜脂过氧化物(MDA)过量积累,造成叶绿素、可溶性蛋白大幅度下降.而喷施Spd可减轻Hg2 处理的这些作用,喷施的最适浓度为0.1～0.5 mmol/L.     

外源Spd预处理对甜瓜白粉病抗性及其内源多胺的诱导分析

以甜瓜感病品种‘0544’为试材,测定外源亚精胺(Spd)预处理和白粉病菌接种后甜瓜幼苗的光合参数、抗氧化酶活性、内源多胺含量及多胺合成与代谢相关基因表达等的变化,探讨外源Spd处理对甜瓜幼苗白粉病抗性的诱导作用机制。结果显示:(1)1.0mmol·L-1外源Spd处理可显著降低甜瓜幼苗的白粉病病情指数,缓解植株发病症状;(2)外源Spd处理可诱导甜瓜幼苗的多胺合成以及代谢相关基因(SAMDC、ADC、ODC、Spd、Spm、PAO)显著上调表达;(3)外源Spd处理可诱导甜瓜幼苗腐胺(Put)和Spd含量显著增加,而外源Spd并接种白粉病菌处理对甜瓜幼苗精胺(Spm)含量积累的诱导更加显著;(4)接种白粉病菌诱导了甜瓜幼苗的多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性,外源Spd预处理后再接种白粉病的诱导作用更大,同时外源Spd处理还诱导了甜瓜幼苗过氧化氢(H_2O_2)含量的升高;(5)在观测期(120h)内,接种白粉病菌对甜瓜叶片的光合作用抑制较小,而外源Spd预处理并接种白粉病菌共同诱导了甜瓜幼苗的光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)和蒸腾速率(Tr)的显著升高。研究认为,在外源Spd预处理甜瓜幼苗后再接种白粉病菌,甜瓜幼苗可以通过多胺的快速积累及代谢产生的H_2O_2来启动响应机制,进而通过增强防御酶活性等途径来提高对白粉病的抗性。     

Relationship between Ethylene and Spermidine in the Leaves of Glycyrrhiza uralensis Seedlings under Root Osmotic Stress1

The correlation between ethylene (ETH) production and spermidine (Spd) content was studied in the leaves of Glycyrrhiza uralensis seedlings under root osmotic stress. After 4-h root osmotic stress, Spd inhibited ETH production significantly while ETH had no significant influence on Spd content in leaves. After 24-h root osmotic stress, ETH production and Spd content showed significant negative correlations in leaves, and the negative correlations were still significant even if the common precursor S-adenosylmethionine (SAM) was abundant. This result suggested that the significant negative correlations were not mainly caused by the competition for the common precursor SAM. The results also showed that, after 24-h root osmotic stress, ETH enhanced while Spd reduced the production rate of H₂O₂ and markedly in leaves; furthermore, exogenous H₂O₂ accelerated the increase in ETH production and the decrease in Spd content caused by deep stress. So it could be concluded that reactive oxygen species played important roles in the significant negative correlations in the deeply stressed leaves of G. uralensis seedlings.     

外源亚精胺对Hg2+胁迫下凤眼莲抗氧化系统的影响

通过Hoagland溶液培养实验,研究了外源亚精胺(Spd)(0.1 mmol?L-1)对Hg2+(0、10、20、30和40μmol?L-1)胁迫下凤眼莲叶片细胞内叶绿素、可溶性糖、可溶性蛋白含量及抗氧化系统的调节作用.结果显示,(1)随Hg2+处理浓度的升高,各处理凤眼莲叶片叶绿素a(Chl a)和叶绿素b(Chl b)含量均先升后降,并均在10μmol?L-1时达到最高值,但外源Spd处理组显著高于相应对照.(2)各处理凤眼莲叶片可溶性蛋白含量随Hg2+处理浓度的升高也呈先升后降趋势,而可溶性糖含量则呈持续上升趋势,但外源Spd处理亦明显高于相应对照.(3)随Hg2+处理浓度的升高,抗氧化物质AsA和GSH含量及抗氧化酶SOD、CAT、POD、APX及GR活性也均呈先升后降的变化趋势,而外源Spd处理植株的含量和活性均显著高于相应对照.(4)各处理凤眼莲叶片的H2O2、MDA含量及O2?-产生速率随Hg2+处理浓度的升高均持续上升,但在外源Spd处理后均比对照组下降.研究表明,Hg2+胁迫使凤眼莲生长受到严重伤害,外源Spd可大幅度地提高其抗氧化物质含量和保护酶活性,从而增强凤眼莲抗Hg2+胁迫的能力.     

外源亚精胺对甜瓜幼苗白粉病抗性的影响

以高感白粉病甜瓜‘066’、感病品种‘0544’、抗病品种‘Yuntian-930’为试材,对白粉病菌胁迫下外源亚精胺（Spd）处理的甜瓜幼苗叶片超氧化物岐化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）和多酚氧化酶（PPO）活性,以及过氧化氢（H₂O₂）、丙二醛（ MDA）和光合色素含量进行了研究,探讨外源Spd对甜瓜白粉病抗性的诱导效应及其生理机制。结果表明：（1）白粉病菌接种后甜瓜叶片的防御酶活性、光合色素含量先升后降,MDA含量升高;（2）外源Spd处理缓解了白粉病菌胁迫下甜瓜叶片防御酶活性、光合色素含量的下降,降低MDA含量及甜瓜的病情指数,并以1.0 mmol/L Spd处理效果最佳;（3）外源Spd处理使甜瓜叶片产生了更多的H₂O₂;（4）外源Spd提高甜瓜对白粉病抗性具有一定广谱性,且可向上传导。研究认为,H₂O₂可能参与白粉病胁迫下信号的传递,外源Spd可通过缓解白粉病菌胁迫下甜瓜防御酶活性和光合色素含量的下降来诱导甜瓜对白粉病的抗性。     

Plasmodium vivax Drug Resistance Genes; Pvmdr1 and Pvcrt-o Polymorphisms in Relation to Chloroquine Sensitivity from a Malaria Endemic Area of Thailand

The aim of the study was to explore the possible molecular markers of chloroquine resistance in Plasmodium vivax isolates in Thailand. A total of 30 P. vivax isolates were collected from a malaria endemic area along the Thai-Myanmar border in Mae Sot district of Thailand. Dried blood spot samples were collected for analysis of Pvmdr1 and Pvcrt-o polymorphisms. Blood samples (100 μl) were collected by finger-prick for in vitro chloroquine susceptibility testing by schizont maturation inhibition assay. Based on the cut-off IC₅₀ of 100 nM, 19 (63.3%) isolates were classified as chloroquine resistant P. vivax isolates. Seven non-synonymous mutations and 2 synonymous were identified in Pvmdr1 gene. Y976F and F1076L mutations were detected in 7 (23.3%) and 16 isolates (53.3%), respectively. Analysis of Pvcrt-o gene revealed that all isolates were wild-type. Our results suggest that chloroquine resistance gene is now spreading in this area. Monitoring of chloroquine resistant molecular markers provide a useful tool for future control of P. vivax malaria.     

外源亚精胺对棉花幼苗抗冷性的生理生态特征影响

以棉花幼苗为试材,分析不同浓度的亚精胺（Spermidine,Spd）（0．01mmol／L、0．10mmol／L、0．50mmol／L和1．00mmol／L）处理对棉花幼苗生长、生理生态特性的影响,以弄清Spd增强棉花抗冷性的效果及其生理机制。结果表明,Spd预处理棉花叶片可提高冷胁迫条件下棉花幼苗抗冷性,具体表现为Spd处理棉花幼苗可增加幼苗体内干物质和含水量,降低叶片冷害指数、电解质渗漏率和丙二醛（MDA）含量,增强超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）活性,提高抗坏血酸、脯氨酸和可溶性糖含量。表明Spd可以改变冷胁迫条件下棉花幼苗体内生理生化指标,从而缓解冷胁迫对棉花的伤害,其中以0．50mmol／L的Spd处理效果较理想。     

亚精胺诱导自噬的作用机制

亚精胺(spermidine)是含有3个胺基的低分子量脂肪族碳化物,是存在于所有生物体中的天然多胺之一。自噬(autophagy)对于降解细胞内受损蛋白质和细胞器是必需的。外源性亚精胺可作为自噬的天然诱导剂,并且是安全和无毒的。新近研究表明,亚精胺可通过AKT/AMPK-FoxO3-Atg途径诱导自噬,还能促进组蛋白脱乙酰基酶4(histone deacetylase 4,HDAC4)向细胞核转运,降低细胞质HDAC4含量,进而增强微管相关蛋白1S(microtubule-associated protein 1S,MAP1S)乙酰化和稳定性以激活自噬。此外,亚精胺可作为乙酰转移酶抑制剂调节EP300活性,进而改变Atg5、Atg7、LC3和Atg12的乙酰化状态。同时,还可通过诱导哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)去磷酸化,激活ULK1/2-Atg13-FIP200复合物参与调控动物机体内的自噬过程。本文就自噬概念和亚精胺诱导自噬作用途径的最新研究进展作一综述。