绿僵菌属血清学的初步研究

本文采用凝集试验和免疫电泳的方法对不同来源的七株绿僵菌属真菌进行了免疫学对比研究。抗原是孢子悬液和菌丝体清液,通过对家兔接种抗原而获得抗血清。每一种抗原与其同源抗血清和异源抗血清进行交叉试验,并对凝集试验的结果以及免疫电泳反应产生的沉淀弧数目和免疫电泳图谱加以对比分析,试验结果表明:不同菌株间存在着明显的抗原类似性,同时各菌株间也表现出一定的抗原专一性。根据试验数据对供试菌株进行血清学分型的结果与形态学分类相符合。     

对流免疫电泳与其他的血清学试验在诊断人布氏病上的比较

<正> 在标准快速血清学试验的比较中使用了65个临床诊断为布氏病的病人的血清。孟加拉红试验与标准试管凝集试验所到结果的相关性很好,而快速平板凝集试验和Coombs (抗球蛋白)试验则较差。用特异的抗——人免疫球蛋白血清吸收病人的血清表明IgM在孟加拉红试验中是有作用的而在Coombs试验中则没有作用。IgG和IgA在这两个试和Co验中都起作用。在凝集试验、孟加拉红试验、Coombs试验中起着最重要的作用的A和M抗原之外,用沉淀试验还检出了布氏其他的抗原部份。在对流——免疫电泳中有一种蛋白质抗原与94％的血清起反应。根据两组血清所得的结果,孟加拉红试验和对流-免疫电泳试验对于诊断临床布氏病是最有希望的方法。由于使用布氏抗原不同试验的性质也不同。     

固氮螺菌的血清学研究——Ⅱ.固氮螺菌五个血清型的抗原定性分析

本文采用琼脂双扩散、对流电泳及免疫电泳等技术对固氮螺菌五个血清型的代表菌株进行抗原定性分析。试验结果说明:五个不同的血清型的可溶性抗原具有共同的抗原成份,但各自存在着特异性抗原。     

用免疫学方法检测脑脊液中抗原诊断隐球菌脑膜炎

1．本文报道成功地用改良的对流免疫电泳及微量补体结合技术检测隐球菌脑膜炎病人脑脊液中多糖体抗原的方法。对流免疫电泳的改进要点是电泳凝胶板采用国产琼脂糖。由于琼脂糖电渗流很弱,将凝胶板放在冰箱中7天后使用或在紧急待用时,在琼脂糖中掺入30％普通琼脂就可以使抗体产生足够的负向移动。改良对流免疫电泳后敏感度提商10倍左右。 2．本室制成的1号抗血清与本市所收集的9个菌株都能起凝集反应,也能与9个菌株的多糖体抗原起免疫反应,特异性和敏感性都是比较满意的。 3．用多糖体对1号抗血清的吸收试验,初步证叫所有多糖体实际上都可移走1号扰血清的凝集活性,但是用5号菌株吸收后,残留有少量的对几个菌株的凝集素,这可能是指它们存在有不能完全吸收的微量抗原。 4．用这批抗血清检测了临床几年来收集的16份脑脊液标本和11份血清标本,其中三例临床确诊为新型隐球曲脑膜炎,我们的抗原测定也全部阳性,其它疾病的24份标本抗原测定 全部阴性。 5．测定抗原的效价能反映出病情严重程度,迁延和治疗效果。     

百日咳的血清学诊断

<正> 血清学试验可确诊百日咳,用凝集试验或补体结合试验(CFT)方法能证明百日咳抗体。凝集试验检出不耐热血清型抗原的1,2,3型和耐热的菌体抗原的抗体。活的或福尔马林杀菌的菌悬液检出不耐热抗原的抗体。新近的两个试验中应用了不同的CFT抗原。1972年Bradstreet等用60℃加热1小时菌悬液的远沉上清作抗原,菌株血清型抗原并不影响血清效价,提示发现的主要抗体是对抗原1的(所有菌株所共有)而不是型特异抗体。苏格兰联合研究用新近分离的1,3型菌株并用NaOH37℃2小时提取抗原,他们没有证明是否测出了型特异抗体。 用间接血凝试验(IHA)测定人血清百日咳抗体的报导很多,除了Schuber等用百日咳可疑病例的双份血清做过试验,没有任何别的作者指出抗原附着到红血球上。     

对流免疫电泳对El Tor型霍乱弧菌与不凝集弧菌抗原相关性的初步探讨

本文对37株NAG 8株El Tor弧菌的抗原性进行了初步分析,用对流免疫电泳不同程度地出现有交叉沉淀线,这说明它们之间有血清学相关性;通过血清吸收试验,发现“H”抗原吸收后的血清大部分仍出现沉淀线,而用同一菌株的可溶性抗原吸收后的血清与5种NAG可溶性抗原进行对流免疫电泳,除少数仍有沉淀线外,大部分均消失,因而证明它们之间的抗原有相关性,而此相关部分并非弧菌共同的H抗原,以对流电泳与糖发酵反应双盲试验结果也证明二者之间亦有一定联系。本文还介绍了用去氧胆酸钠裂解细菌的方法、原理和注意事项。     

茶毛虫核型多角体病毒的血清学特性

用免疫双扩散、对流免疫电泳、酶联免疫吸附试验(ELISA),固相免疫电镜(SPIEM)等技术,对茶毛虫核型多角体病毒(EpNPV)的抗原特性及与其它10种核型多角体病毒的血清学关系进行分析。结果表明,EpNPV粒子的抗血清只能与EpNPV粒子起反应,不与EpNPV的多角体蛋白及其它10种昆虫核型多角体病毒(NPV)粒子发生交叉反应;EpNPV多角体蛋白抗血清除了和其同源的多角体蛋白起反应外,还能和其它两种NPV的多角体蛋白起反应。以上结果说明了EpNPV的结构蛋白具有较高的抗原特异性,而多角体蛋白则没有种间特异性。同时将固相免疫电镜技术应用到昆虫病毒的血清学检测中,取得了较为理想的结果。     

亚硝酸诱变导致枯草杆菌中L-丙氨酸脱氢酶对L-谷氨酸脱氢酶的转换——Ⅲ.野生型中有与GDH抗原性上类似的蛋白质的存在

由枯草杆菌野生型菌株的ADH制剂所制备的抗ADH抗血清能中和ADH与GDH。免疫电泳试验的结果指出抗ADH抗血清中含有二个抗体;一为抗ADH抗体,另一为抗GDH抗体。在野生型细菌的无细胞抽出液中亦找到了与GDⅡ在抗原性上近似的蛋白质即GDH-ORM。5株不同来源的野生型细菌,细胞内仅有ADH而没有GDH活力,但均有GDH-CRM的存在。葡萄糖能促进GDH~+型变种的GDH的合成,同时也促进野生型细菌的GDH-CRM的合成。但是葡萄糖对GDH合成的促进作用要比其对GDH-ORM的作用显著得多。作者对野生型细菌的CRM与变种中GDH的形成的遗传学关系进行了讨论。张景六同志参加技术工作;在制备抗血清过程中,承上海生物制品研究所协助,谨此致谢。     

2308、M28、S1330、16M四株布鲁氏菌灭活参数研究

【目的】比较不同灭活方法对布鲁氏菌灭活的效果,确定灭活参数,为制备布鲁氏菌灭活抗原提供参考。【方法】将4株布鲁氏菌参考强毒株2308(牛种)、M28(羊种)、S1330(猪种)以及16M(羊种)分别经大豆酶消化蛋白胨(TSA)培养基培养繁殖后,用生理盐水制成(4-8)×1010 CFU/m L的菌悬液,分成等份于80 oC灭活不同时间,另将同样浓度的菌悬液分别用不同浓度甲醛于37 oC灭活不同时间,通过灭活检验,确定灭活效果。取经甲醛和热灭活的16M抗原,分别以1×1010 CFU/只剂量皮下注射1.5-2.0 kg家兔2只,免疫6周内,每周采血用虎红平板凝集试验(RBT)和试管凝集试验(SAT)测定抗体效价。【结果】80 oC、5 min可灭活2308、S1330和16M三种菌株,80 oC、10 min可灭活全部4种菌株。0.2%甲醛灭活7 d,4种试验菌株均不能被彻底灭活;0.4%甲醛在12 h内只能灭活16M,72 h可灭活M28;0.4%甲醛灭活2308和S1330两次试验结果差异较大。0.6%甲醛可在72 h内灭活4种试验菌。不同方法灭活的16M抗原免疫家兔后,其血清抗体虎红平板凝集和试管凝集效价消长趋势基本一致,甲醛灭活的抗原免疫原性略高于热灭活抗原。【结论】80 oC热灭活和0.6%甲醛灭活均可用于对布鲁氏菌的灭活,且不影响布鲁氏菌的免疫原性。     

小肠结肠炎耶氏菌Vi抗原的研究

从小肠结肠炎耶氏菌发现ⅵ抗原,这是首次报道。用ⅵ抗原的抗血清测定菌株的毒力,与vw抗原和毒力因子血清测定的结果完全一致,即仅毒力株有ⅵ抗原,无毒株则无。故可肯定ⅵ抗原是小肠结肠炎耶氏菌的一种毒力抗原。利用ⅵ抗血清测定菌株的毒力,是非常简便的。     

酶标抗原火箭免疫电泳法及其在蛇毒抗原成分含量测定中的应用

为解决目前蛇毒成份检测困难以及寻找一种可用于蛇伤快速鉴别诊断的方法,本研究建立了酶标抗原火箭免疫电泳法。本法结合了酶标法灵敏度高和火箭电泳操作简单的特点,对待测的同种抗原标记辣根过氧化物酶(酶标抗原),检测时把微量的酶标记抗原掺入被测样品中,在含多价抗血清的免疫电泳板进行电泳。最后用辣根过氧化物底物3.3′-二氨基联苯胺在板上直接显色,显色后观察到的免疫沉淀线高度与被测抗原含量呈正相关(r=+0.98)。采用本方法检测眼镜蛇毒细胞毒素和限镜王蛇毒 L-氨基酶氧化酶,细胞毒素的最低检测浓度为110ng/ml,氨基酸氧化酶为60ng/ml。比单向火箭免疫电泳法灵敏度高30倍。用同一原理的酶标记抗原融合电泳法监测L-氨基酸氧化酶的层析分离时,比酶活性法检测灵敏度高20倍。全部检测只需30分钟。初步观察商品眼镜蛇毒抗血清可对蛇毒15种成分产生免疫沉淀线,眼镜蛇的细胞毒与同科异科蛇毒的细胞毒素无交叉免疫反应。因此,采用本法可以确定不同蛇种蛇毒中所含的特异性抗原,获得蛇伤鉴别诊断的依据。     

中国对虾两种球状病毒的免疫检测

以江苏、河北某虾场病虾组织中提取的对虾的两种球状病毒作为抗原,制备出特异性强、效价较高的抗血清,用对流免疫电泳,酶联免疫吸附,免疫电镜技术对五个不同地区的病虾材料进行检测,结果表明：江苏、青岛、河北地区的病虾组织中均含有相应的球状病毒病原。     

一株能表达987P和F_(41)两种粘附素的猪源性大肠杆菌的研究

通过直接凝集试验、免疫荧光试验、SDS-PAGE和Western印迹,对一株猪源性大肠杆菌的粘附素进行了研究.结果表明,该菌株是一株同时表达987P和F_(41)两种粘附素抗原的猪源性大肠杆菌.     

点免疫结合测定法检测谷氨酸产生菌噬菌体污染

点免疫结合测定法(简称DIBA法)是近几年建立的检测抗原抗体的新方法。关于用该法对照常规双扩法、对流免疫电泳法检测某些动、植物病毒从而表现出很高的灵敏度方面已有一些报道,但尚未见到有关用DIBA法检测噬菌体方面的有关材料。本文仅以谷氨酸产生菌T_(613)噬菌体为抗原,制备特异抗血清;并用DIBA法对照SPA法检测T_(613)菌噬菌体,发现在抗原抗体反应中DIBA法比SPA法具很高的灵敏度。现将结果报道如下。材料与方法一、材料 1、T_(613)菌噬菌体裂解液。 2、T_(613)菌噬菌体抗血清。 3、冻干酶联葡萄球菌A蛋白(HRP     

一株能表达987P和F41两种粘附毒的猪源性大肠杆菌的研究

通过直接凝集试验,免疫荧光试验．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹,对一株猪源性大肠杆菌的粘附素进行了研究,结果表明,该菌株是一株同时表达９８７Ｐ和Ｆ４１两种粘附素抗原的猪源性大肠杆菌。     

大熊猫与各种动物亲缘关系的免疫化学研究

用6只大熊猫(Ailuropoda melanoleuces)的混合血清(雌雄各3只)作抗原,给1只青紫兰雄兔作每隔一周注射1次的连续4次免疫注射。在末次注射后10天,由兔子颈动脉放血,收集抗血清,经琼脂扩散实验测得青紫兰雄兔血清的抗体效价为1:4。将这些血清分装,冰冻干燥,封存于冰箱中,作为本实验的标准抗血清备用。 分别以大熊猫、黑熊(Selenarctos thibetanus)、小熊猫(Ailurus fulgens)、家狗(Canisfamiliaris)、家猫(Felis domestica)、黄鼬(Mvstela sibirica)、刺猬(Erinaceus europaeusdealbatus)、大鼠(Rattus norvegicuss)、黄鼠(Citellus dauricus)、山羊(Capra hircus)……等动物的血清作抗原与上述标准抗血清进行免疫扩散实验、对流免疫电泳实验、微量免疫电泳实验和单向定量免疫电泳实验。 对上述各种动物血清中的蛋白质还作了聚丙烯酰胺凝胶电泳的分析。     

霍乱弧菌EL－Tor35A3菌株外膜蛋白主区带的纯化

选用霍乱弧菌ＥＬ－Ｔｏｒ生物型３５Ａ３菌株（血清稻叶型）以ＥＤＴＡ－溶菌酶法与超速离心法提取其外膜蛋白,并将聚丙烯酰胺凝胶电泳后一条蛋白主区带分离。ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳测得该蛋白主区带的分子量为２５ｋＤ,免疫电泳显示一条线,免疫双扩试验表明,不同的霍乱弧菌菌株均有该蛋白抗原存在。     

兔抗人和大鼠烧伤皮肤毒素提取物的免疫血清制备及抗原性分析

为进一步确证和研究人和大鼠烧伤毒素提取物的抗原性及其特征,以及同以新鲜皮制成的提取物在免疫学特性方面的异同,将人和大鼠烧伤皮肤与新鲜皮肤的提取物,经各种生物化学分析及定量后,分成四组,每组(?)只兔子,分别以福氏完全佐剂抗原、不完全佐剂和水剂抗原免疫,制成(?)种免疫血清。对上述抗血清先后经过免疫双相扩散、单相扩散、免疫电泳、火箭免疫电泳等方法的分析,结果表明,兔抗人和大鼠烧伤皮肤毒素提取物的抗原性较强,(?)双扩和免疫电泳上均出现一很强的抗原成分,抗体效价可达1∶16～1∶32(双扩);而人和大鼠新鲜皮肤提取物的抗原性很     

不同细胞来源的F_1-腺三磷酶的进化比较

由于F_1-ATP酶广泛分布于真核细胞的线粒体膜、叶绿体膜以及原核细胞的质膜上,我们用免疫学方法将猪心F_1-ATP 酶与牛心、鼠肝、酵母、玉米以及支原体的F_1或似F_1-ATP 酶作了进化比较,为此,我们以提纯的猪心F_1为抗原制备了抗猪心F_1的免疫抗血清,用Ouchterlony 双向免疫扩散以及免疫电泳鉴定了其效价及均一性,此抗血清能抑制猪心F_1-ATP 酶和猪心亚线粒体的H~ -ATP 酶活力达90%左右,此抗血清对不同真核细胞来源如牛心、鼠肝、酵母的F_1-ATP 酶或亚线粒体H~ -ATP酶呈现不同的抑制程度,即牛心>鼠肝>酵母,而对植物界的玉米线粒体膜以及支原体质膜上的ATP 酶活性不但不抑制反而提高。从这结果可看出F_1-ATP 酶活力被抑制的程度愈大,其亲缘关系愈近,也就是F_1分子结构愈相似,一般看来真核细胞与原核细胞间F_1-ATP 酶的分歧程度比不同真核细胞间的分歧程度要大得多。并且动植物间的分歧也很大。     

SDS—PAGE垂直板电泳技术鉴定脆弱类杆菌及相关菌株的探讨

本文报告了采用SDS—PAGE垂直板电泳技术对脆弱类杆菌及相关菌株超声波粉碎的可溶性蛋白抗原进行了电泳谱分析。结果证明这些菌株有三种共同的蛋白抗原组分,但不同菌种间蛋白成分存在着差异。