福建圆斑蝰蛇（Vipera russelli siamensis Smith）毒新的磷脂酶A_2的分离纯化及理化、药理性质的初步研究

本文应用离子交换柱层析和凝胶过滤技术从福建产圆斑蝰蛇泰国亚种蛇毒中纯化出一个新的ＰＬＡ,（ＰＬＡ２－３）。经聚丙烯酰胺凝胶电泳,ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳和Ｏｕｃｈｔｅｒｌｏｎｙ双向免疫扩散证明为均一蛋白质。其理化及酶学性质如下：由约１２０个氨基酸残基组成（不包括半胱氨酸和色氨酸）;分子量为１４８００;等电点为７．８;ＰＬＡ２酶比活力用自动电位滴定法测定为２５５μｍｏｌ／ｍｉｎ·ｍｇ,用间接溶血法测定半数溶血量（ＨＵ５０）在家兔和大白鼠分别为０．０２５μｇ／ｍｌ和０．０５μｇ／ｍｌ;小鼠静脉注射的近似ＬＤ５０为３１５４ｍｇ／ｋｇ。与从该蛇毒中分离出的毒性和碱性ＰＬＡ,相比,具有ＰＬＡ。酶比活力高,毒性小的特点。此酶具有明显降压作用。抗血小板聚集效应和可逆性负性心肌收缩力作用,但未观察到心肌挛缩现象．     

呋喃那斯对暴发性鱼病的防治方法研究

呋喃那斯对暴发性鱼病的ＢＳＫ－１０菌株的最低抑制浓度为０．０１９ｍｇ／Ｌ,比呋喃唑酮的用量低３２倍。用０．２和０．５ｍｇ／Ｌ浸泡药浴病鱼的治愈率为９０％和１００％;５０ｍｇ／Ｌ呋喃唑酮的治愈率为０。１０ｍｇ／Ｌ和２０ｍｇ／Ｌ药浴１０分种的死鱼时间比５０ｍｇ／Ｌ呋喃唑酮迟１天。以０．５和４．０μｇ／ｇ腹腔注射给药的防治效果也优于同剂量的呋喃唑酮。对鲢以１００ｍｇ／Ｌ药浴２小时或白鲫ｉｐ６００ｍｇ／ｋ     

中麻黄悬浮培养体系的建立

本文用中麻黄无菌苗为外植体,其切段培养在附加２ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ和０．５ｍｇ／Ｌ　６　ＢＡ的ＭＳ培养基上,全部脱分化形成白色疏松愈伤组织。愈伤组织继代培养于ＭＳ＋０．５ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ＋０．２ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．２ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ＋４％蔗糖的培养某上。以继代培养愈伤组织为材料进行悬浮培养,培养基为附加０．２ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ＋０．１ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ＋２％蔗糖的ＭＳ液体培养基,得到分散性好,细胞形状接近圆形,细胞大小均一,细胞团多由２－３０个细胞组成的悬浮培养体系。第三代悬浮培养细胞增长率为０．３５ｇ·ｆｗ／２０ｍｌ·ｄ,细胞有丝分裂指数为１１．２％。条件培养和高密度接种可缩短延迟期,条件培养不能提高分裂指数,１ｇ／１０ｍｌ接种密度可使分裂指数提高至２１．２％。     

黄花蒿培养细胞中青蒿素合成代谢的体外调节

黄花蒿培养细胞通过两步培养积累青蒿素．第１步在含有０．２～０．４ｍｇ／Ｌ６－苄基氨基嘌呤（６－ＢＡ）和３～４ｍｇ／Ｌ吲哚乙酸（ＩＡＡ）的Ｎ６培养基中进行细胞的增殖培养,第２步将培养好的细胞转入含０．２～０．４ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ和０．２～０．４ｍｇ／ＬＩＡＡ的改良Ｎ６培养基中进行青蒿素的合成．青蒿素的合成量为１９０μｇ／ｇ干细胞左右．当在第２步培养中加入青蒿素合成前体青蒿酸,青蒿素合成量比仅靠激素诱导提高了３倍多．青蒿素的合成途径是植物固醇合成途径的分支途径,当在青蒿素合成过程即第２步培养中加入固醇生物合成抑制剂双氯苯咪唑和氯化氯胆碱处理,可使代谢向合成青蒿素的方向移动,青蒿素合成量明显提高．经２００ｍｇ／Ｌ氯化氯胆碱处理２ｄ,黄花蒿细胞合成青蒿素量为３７２μｇ／ｇ干细胞;经２０ｍｇ／Ｌ双氯苯咪唑处理４ｄ,黄花蒿细胞合成青蒿素量为１５４０μｇ／ｇ干细胞,比靠激素诱导提高了８倍多,与诱导脱分化细胞的黄花蒿叶中所含的青蒿素（３０００μｇ／ｇ干细胞）处于同一个数量级．以上结果表明：在通过植物激素调节可以合成青蒿素的黄花蒿培养细胞中,缺乏青蒿素合成前体是青蒿素合成量低的重要原因．因此,在青蒿素合成的过程中通过体外调节,     

玫瑰茄悬浮细胞合成花青素的光效应研究

光照对悬浮培养的玫瑰茄细胞生物量无影响。随着光照强度增大,玫瑰茄细胞合成花青素的量增加,光照强度３１．０ｗ／ｍ２为饱和光照强度,超过该强度,玫瑰茄细胞合成花青素的量不再进一步增加;可见光中蓝光（４２０～５３０ｎｍ）是促进玫瑰茄细胞合成花青素最有效单色光,光强为３０．０ｗ／ｍ２,接种量为０．２ｇ湿细胞的５０ｍｌ培养液经１６ｄ培养,花青素产量为８．９７ｍｇ／５０ｍｌ,高出相同光照强度全色光下的６．５３ｍｇ／ｍｌ;黄光和绿光分别有一定的促进作用。当黑暗下的培养时间不超过８ｄ,后期经过不少于８ｄ的光照可以诱导出和全程光照相当的花青素产量,分别为６．６４和６．７２ｍｇ／５０ｍｌ（总培养时间不少于１６ｄ）。当黑暗下培养时间超过１２ｄ,由于营养成分消耗,光照延长,花青素产量也无法提高,添加１０ｍｌ新鲜培养基再进行光诱导,花青素产量可以提高（６．７５ｍｇ／５０ｍｌ）。     

天竺葵花清除自由基作用的研究

用化学发光法研究了天竺葵花粗担液对超氧阴离子自由基（Ｏ２）＾＝和羟自由基（ＯＨ）的清除作用,用分光不镀法研究了它对１,１－二苯基－２－苦肼基自由基（ＤＰＰＨ０的清除作用。结果表明,天竺葵花具有很强的清除自由基活性。其粗提物清除Ｏ２＾－分别为３．５μｇ／ｍｌ（红花）,３．０μｇ／ｍｌ（粉花）,１．６μｇ／ｍｌ（浅粉花）,与茶多酚（ＩＣ５０＝１．１μｇ／ｍｌ）相近,清除ＯＨ的ＩＣ５０分别为５．７μｇ／     

粉叶小檗愈伤组织的培养及小檗碱的含量

由粉叶小檗（Ｂｅｒｂｅｒｉｓ ｐｒｕｉｎｏｓａ）的茎、腋芽、叶、实生苗的子叶及胚轴均可诱导出愈伤组织。Ｂ５＋２,４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ０．２ｍｇ／Ｌ培养基对诱导较好,而Ｂ５＋２,４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ０．５ｍｇ／Ｌ对愈伤组织生长较适宜。接种量在０．４－０．８ｇ（２０ｍｌ培养基）之间较为适宜。经薄层层析－分光光度法、薄层扫描法是鉴定,证明愈伤组织具有合成小檗碱的能力,含量高达１．８１４８％。     

高效液相色谱法测定酵母中麦角固醇含量

本文建立了酵母中麦角固醇含量高效液相色谱测定方法。其色谱条件为,色谱柱ＨＹ Ｐｅｒｓｉｌ ＢＤＳ Ｃ１８ ５ｕ反相柱,流动相为甲醇：水（９７：３）,紫外检测波长为２８３ｎｍ。酵母样加碱乙醇皂化、提取、洗涤、蒸干、定量测定。结果表明：标准曲线范围是０．０２－０．８ｍｇ／ｍｌ线性良好,最低限量为０．０１ｍｇ／ｍｌ;日内及日间ＲＳＤ（ｎ＝４）分别在２．１－４．０％和２．４－４．８％,回收率为９６．０－９     

玫瑰茄县浮细胞合成花青素的光效应研究

光照对悬浮培养的玫瑰茄细胞生物量无影响。随着光照强度增大,玫瑰茄细胞合成花青素的量增加,光照强度３１．０ｗ／ｍ＾２为饱和光照强度,超过该强度,玫瑰茄细胞合成花青素的量不再进一步增加;可见光中蓝光（４２０￣５３０ｎｍ）是促进玫瑰茄细胞合成花青素最有效单色光,光强为３０．０ｗ／ｍ＾２,接种量为０．２ｇ湿细胞的５０ｍｌ培养液经１６ｄ培养,花青素产量为８．９７ｍｇ／５０ｍｌ,高出相同光照强度全色光下的６．     

青霉素V对牙周及根尖周感染的疗效观察

从临床分离获得口腔常见厌氧菌,除非脆弱类杆菌４株外,其余消化球菌及锭球菌１４株,革兰氏阳性无芽胞杆菌４株,以及需氧及瘘性厌氧菌α－溶血链球菌４株对青霉素Ｖ敏感,ＭＩＣ５０≤０．０６－０．１２５ｍｇ／Ｌ,ＭＩＣ５０为０．１２５０－０．２５ｍｇ／Ｌ,急性牙周及根尖周感染患者的临床症状,白细胞总数和中性粒细胞分类计数在服用青霉素Ｖ后３天明显改善和好转。实验结果表明除过敏性体质患者外,并且首次后经过观察地     

体外乳酸菌素促双歧杆菌生长实验初步观察

目的 在体外观察乳酸菌素是否有促双歧杆菌生长的作用。方法 将浓度为１００ｍｇ／ｍｌ、１０ｍｇ／ｍｌ、１ｍｇ／ｍｌ的乳酸菌素液按三角形对等距离分别滴种在接种了双歧杆菌（１０＾６ＣＦ／ｍｌ）的ＢＨＩ培养基上,然后置３５℃厌氧箱培养２ｄ后观察细菌生长情况。结果 不同浓度的乳酸菌素液促进双歧杆菌生长能力不同。浓度为１００ｍｇ／ｍｌ、１０ｍｇ／ｍｌ、１ｍｇ／ｍｌ的乳酸菌素液促双歧杆菌生长的阳性率（％）分别为：９６．７、５６．７、１．０。经统计学秩和检验方法将３种浓度乳酸菌素液促双歧杆菌生长作用进行两两比较得知：１００ｍｇ／ｍｌ与１０ｍｇ／ｍｌ,１００ｍｇ／ｍｌ与１ｍｇ／ｍｌ之间Ｐ〈０．０１,１０ｍｇ／ｍｌ与１ｍｇ／ｍｌ比较Ｐ〈０．０５。结论 乳酸菌素有促进益生菌－－双歧杆生长的作用,而且与其浓度高低有极密切关系,高浓度的     

牛微量白细胞样品的处理及其Y染色体特异DNA的扩增

本文建立了牛微量白细胞样品的处理及其Ｙ染色体特异ＤＮＡ的扩增的方法。采集成年公牛全血,用ＥＤＴＡ抗凝血。分离白细胞,用０．１４５ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ洗净,用０．１４５ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ稀释,计数。分别将０．５、５０、５００细胞在含１０ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌ、５０ｍｍｏｌ／ＬＫＣｌ、２ｍｍｏｌ／ＬＭｇＣｌ２、０．４５％ＮＰ－４０、０．４５％Ｔｗｅｅｎ－２０、０．１ｍｇ／ｍＬ蛋白酶Ｋ、总体积２０μ     

角质蛋白酶固态发酵工艺及酶解条件的研究

曲霉Ａ２８－８是一株优良的角蛋白酶分泌突变菌株。其最佳固体发酵培养基为：２０％羽毛粉,８０％麸皮和微量无机氮（每克培养基中加０．５ｍｇ）;最适产酶条件为：起始ｐＨ７．５～８．０,温度２８℃～３０℃,时间为６０～７０小时,酶活高达２５００ＫＵ／ｇ曲;最适酶解条件为ｐＨ７．０～９．０,温度４５℃～５０℃。     

HPLC法检测红豆杉细胞培养物中的紫杉醇

在对紫杉醇和干扰紫杉醇测定的６种常见紫杉烷进行色谱化分离的基础上,建立了红豆杉细胞培养物中紫杉醇的高效相色谱检测方法。样品经提取后,在Ｋｒｏｍａｓｉｌ Ｃ１８柱上以乙腈：水为流动相进行梯度洗脱,于２２７ｎｍ处进行检测。紫杉醇在０．２μｇ／ｍｌ－２０μｇ／ｍｌ浓度范围内线性关系良好,经测定检测限为０．１μｇ／ｍｌ,检测精密度为３．４％,回收率为８８．４％。     

香椿离体快繁技术研究

６～７月取香棒当年生半木质化、具腋芽的茎段为外植体,诱导腋芽萌发,进行繁殖培养。通过大量试验,筛选出各阶段适宜的培养基组成。萌芽诱导阶段培养在ＭＳ＋６－ＢＡ０．２ｍｇ／Ｌ中,腋芽萌发早,生长快;在继代和增殖培养中以ＭＳ＋６－ＢＡ０．２ｍｇ／Ｌ效果较好,ＭＳ＋ＺＴ０．２ｍｇ／Ｌ＋ＧＡ３２．０ｍｇ／Ｌ次之。培养３０天繁殖倍数３．１～４．０,在仅含ＭＳ有机元素。铁盐减半、蔗糖１５ｇ／Ｌ的固体培养基中,附     

大叶紫花苜蓿愈伤组织原生质体再生植株

大叶紫花苜蓿下胚轴诱导的愈伤组织在继代培养基上生长快速,易于分散。继代第１２ｄ的愈伤组织原生质体的得率为６．５×１０７／ｇ鲜重。原生质体培养基为ＳＨ基本培养基,含有１．０ｍｇ／Ｌ２,４－０、０．５ｍｇ／ＬＢＡ、２．０ｇ／ＬＣＨ、２％蔗糖、６％葡萄糖、５ｍｍｏｌ／ＬＭＥＳ,培养密度为１．０×１０５／ｍＬ。培养至第１２ｄ时的原生质体再生细胞植板率为３．７％。由原生质体形成的小愈伤组织在含２．０ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ的ＭＳ固体培养基上大量增殖。增殖的愈伤组织转移至２．０ｍｇ／Ｌ２－ｉｐ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ的Ｂ５培养基上,形成体细胞胚并发育成完整植株。     

茶儿茶素氧化产物体外清除·OH自由基作用的研究

本文采用２－脱氧－Ｄ－核糖（ＤＲ）法产生．ＯＨ,测定了不同浓度的茶儿素氧化产物Ａ及Ｃ对．ＯＨ的清除作用。结果表明,在一定的浓度范围内,氧化产物Ａ及Ｃ均有很强的清除．ＯＨ的作用且最佳清除浓度为２００μｇ／ｍｌ。在茶多酚、氧化产物Ａ及Ｃ三种物质中,以产物Ｃ的清除作用最强,其ＩＣ５０值为７．３μｇ／ｍｌ,其次是Ａ,ＩＣ５０为１０．１μｇ／ｍｌ,最后是茶多酚,ＩＣ５０值为７０μｇ／ｍｌ。     

海南省潜伏香蕉果实的炭疽菌对特克多的抗药性

对来自海南省１３个地区的６７个Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ ｍｕｓａｅ（Ｂｅｒｋ．＆Ｃｕｒｔ．）Ａｒｘ菌株进行抗药性检测,所测菌株均表现出敏感,即未产生特克多抗药性。室内采用高浓度特克多和９０－９５％致死剂量紫外光进行抗性诱导,获得的抗性菌株均能在１０００μｇ／ｍｌ。特克多的ＰＤＡ培养基上生长,但ＥＣ５０值相差很大,最高达１３０μｇ／ｍｌ,而最低为０．８７μｇ／ｍｌ。抗性菌株对多菌灵和甲基托布津均     

防腐剂对苏云金杆菌制剂活力毒力测定的影响

采用不同防腐剂剂处理苏云金杆菌制剂及毒力生物测定,结果表明,７＃（１００ｍｌ中含０．５ｍｌ１０％甲醛和１ｍｌ１５％尼泊金）防腐剂处理苏云金杆菌剂剂０－９６ｈ,抑制芽孢萌发和菌体活性的效果最佳,其次为２＃（１００ｍｌ中含１ｍｌ１５％尼泊金）,８＃（１００ｍｌ中含１ｍｌ１５％尼泊金和０．０５ｇ土霉素）;毒力生物测定７＃防腐剂最稳定,ＬＣ５０最小,灵敏度最高。     

高密度发酵生产突变型重组人肿瘤坏死因子rhTNFα-DK2的研究

通过对发酵基质和发酵关键参数的优化,确定了发酵培养基的磷酸盐浓度为０．１５Ｍ,甘油浓度为１．２ｍｌ／Ｌ,补料中甘油浓度为２０ｍｌ／Ｌ,发酵过程中溶解氧控制在３０％～６０％,ｐＨ控制在６．８５左右。在５Ｌ在ＮＢＳ－Ｂｉｏｆｌｏ３０００型自动控制发酵罐中采取加速补料的补料分批培养,重组大肠杆菌ＹＫ５３７／ｐＳＢ－ＴＫ经１０ｈ３０°Ｃ培养和５ｈ４２°Ｃ诱导培养,最终密度达到６０ＯＤ６００,ｒｈＴＮＦα－ＤＫ２的表达量占菌体总蛋白的５０％以上,每升发酵液纯化可得到近２ｇ的ｒｈＴＮＦα－ＤＫ２。