梧宁霉素产生菌链霉素抗性基因突变株的筛选初报

采用紫外线、亚硝酸、亚硝酸与紫外线复合处理对菌株的孢子进行诱变 ,在含有链霉素最小抑制浓度(4μg/mL)的高氏平板筛选 ,分别得到 114株、110株、12 4株链霉素抗性突变株 ,其中梧宁霉素效价高于出发菌株的分别为 9株、9株、18株 ,正突变率分别达到 7.89%、8.18%、14 .5 2 % ,其中突变株HU 74的效价比出发菌株提高了 12 %。     

马铃薯晚疫病生防木霉菌的筛选及鉴定

采用马铃薯活体筛选法从268株木霉菌中筛选获得两株对致病疫霉有较强抑菌活性的木霉菌株R-5和T-15。这两株木霉菌代谢液可抑制病原菌生长及孢子囊萌发。温室防病试验发现,接种两株木霉菌可以减轻晚疫病的发生。田间试验进一步证明,两株木霉菌对晚疫病具有良好的田间防治效果,防效分别达到了72.4%和70.0%。经分子生物学方法鉴定,两株木霉菌分别为拟康氏木霉和棘孢木霉。实验构建的以活体筛选为基础的生防木霉菌筛选方法是一种可行高效的生防木霉菌筛选方式。     

基于细胞的抗单增李斯特菌单域重链抗体的筛选及鉴定

【目的】获得针对单增李斯特菌的特异性单域重链抗体,并对筛选过程中特异性克隆的富集规律进行分析,为筛选具有种属特异性的噬菌体展示抗体提供参考。【方法】采用固相筛选技术,以热灭活的单增李斯特菌菌体为抗原,通过四轮常规筛选和一轮消减筛选,从驼源天然噬菌体展示文库中筛选针对单增李斯特菌的单域重链抗体。采用Phage-ELISA法,对后四轮筛选洗脱物中随机挑选的噬菌体进行鉴定,阳性克隆进行基因测序及结合特异性分析。通过多序列比对分析将获得的基因序列进行分组和统计。【结果】成功筛选到2株单增李斯特菌特异性的单域重链抗体。【结论】在优化的筛选条件下,基于全细胞的筛选方法能够获得特异性识别单增李斯特菌的单域重链抗体,消减筛选对于去除非特异性克隆是有效的和必要的。     

浅谈动物疾病预防措施及防疫药品的使用

本文根据防疫工作的基本原则:依靠党的领导;坚持群众路线,坚持预防为主。论述了平时动物的生活习性,容易引起的疾病和预防措施。     

犬猫对人类健康的危害

就犬、猫传播给人的几种常见的人畜共患病,从传染源、传播途径及预防措施等方面进行了综合论述。     

草菇低温诱导基因的分离

应用ｍＲＮＡ差别筛选法,对低温处理草菇（Ｖｏｌｖａｒｉｅｌａｖｏｌｖａｃｅａ）及正常草菇基因表达进行筛选、分析,结合ＲＮＡ斑点杂交技术加以验证,分离得到草菇低温诱导基因。研究表明草菇菌丝体在低温胁迫下,存在着基因表达的变化。     

更聪明的小鼠!?

美国普林斯顿大学的Ｊｏｅ．Ｚ．Ｔｓｉｅｎ（钱卓）最近因发表于《自然》杂志上的一篇论文而成为新闻人物。这篇论文报告了他们实验室利用转基因技术培育的一种小鼠具有超常的学习和记忆能力。实验的最初思路来自于Ｈｅｂｂ于１９４９年提出的一条法则,推测学习和记忆的基础在于神经元之间突触联系的紧密程度,提示增强突触间的信息联系即可提高学习和记忆的能力。ＮＭＤＡ（ＮｍｅｔｈｙｌＤａｓｐａｒｔａｔｅ）受体是皮层、海马等脑区广泛存在的与学习和记忆密切相关的一种受体,它在生理状态下主要接受来自兴奋性氨基酸（谷氨酸…     

几种杀螺细菌的筛选与功效研究

湖北钉螺是日本血吸虫的唯一中间宿主,生物杀螺具有环保、成本较低以及对钉螺定向特异的优点。从鄱阳湖草洲土壤及病螺体内分离出4株对钉螺具有高毒性作用的细菌。革兰氏染色和显微镜观察表明,一株为芽孢杆菌,其余3株均为革兰氏阴性杆菌。16srDNA扩增及序列比对鉴定其种属类型,结果显示分别为Enterobactersp．、B．cereus、S．putrefaciens和Aeromonassp．。杀螺研究结果表明,4株细菌的发酵液、发酵上清液和菌体对钉螺均表现出不同程度的毒杀作用,其中S．putrefaciens和Aeromonassp．的杀螺效果最好,72h发酵液和发酵上清液对钉螺的毒杀作用分别达100％和95％以上。各细菌发酵上清SDS-PAGE结果发现了丰富蛋白带,推测这些蛋白中存在对钉螺具有毒杀功效的组分。     

应用原位双膜法快速筛选人Flt3配体甲醇酵母高表达转化子

原位双膜法是一种基于免疫原理的快速筛选高表达甲醇酵母转化子的方法,即首先将固体培养基上的菌落转印至醋酸纤维素薄膜上,再利用硝酸纤维素薄膜原位捕获穿过醋酸纤维素薄膜的菌落外泌蛋白,然后用免疫方法检测与硝酸纤维素薄膜结合的蛋白.利用此法筛选到人Flt3配体（hFL）的甲醇酵母高表达转化子,液体诱导表达量约20 mg/L.ELISA结果证明,原位双膜法所得的菌落染色强度与该菌落液体诱导表达水平正相关.蛋白质印迹结果显示,培养上清在25 ku处有明显杂交条带,而对照组杂交呈阴性,且表达量随诱导天数增加.原位双膜法是一种良好的筛选方法,可以快捷、准确地筛选高表达酵母转化子.     

细胞毒性T细胞表位预测

细胞毒性T细胞表位是由8～10个连续的氨基酸残基构成的特殊肽段。本文对基于基序、基于结构、基于人工神经网络和隐马尔可夫模型的各类细胞毒性T细胞表位预测方法进行了综述。     

土壤霉菌菌丝球的筛选、鉴定及固定化菌丝球的应用

从土壤中分离纯化真菌并鉴定为烟曲霉L-3。以菌株L-3作为固定化载体,将地衣芽孢杆菌固定在真菌上组成固定化体系。研究了混菌菌丝球,菌丝饼,发酵混合液,粗漆酶液对刚果红染料废水的降解情况并对染料废水进行毒性试验。结果表明,菌丝球对染料废水的降解效果最显著,降解率高达99.96%,菌丝饼仅用20 s降解率为91%,发酵混合液与粗漆酶液的处理效果并不显著。该体系对染料废水的去毒率较明显,尤其是菌丝球的去毒率可达到78%。可见,固定化体系对染料废水不但有较高的降解能力,也有较高的去毒率。     

乳腺癌发生的特征基因筛选及模式识别

本文选取癌症基因组图谱数据库的乳腺癌样本作为数据集,在全基因组的水平上研究乳腺癌病人从正常到发病Ⅰ期基因表达的变化,寻找与乳腺癌发病密切相关的特征基因,建立乳腺癌发生的模式识别分类方法,为乳腺癌预防及早期诊断提供理论支持.研究中,综合利用相关性、t检验、置信区间等统计学方法,建立乳腺癌发生特征基因筛选方法,获得与乳腺癌发生具有显著性差异的特征基因336个.通过机器学习方法建模,得到的分类准确率能达到98%以上,与之前乳腺癌相关的研究相比,准确率更高.同时采用KEGG(kyoto encyclopedia of genes and genomes)通路分析得到与基因显著相关(P0.05)的通路有8个,GO(gene ontology)基因功能富集分析显示与基因显著相关(P0.05)的功能有18个.最后对映射在8个通路中的一部分基因进行简要功能分析,说明了其在调控水平上的密切关系,表明识别的特征基因在乳腺癌的发生过程中有重要的作用,这对了解乳腺癌发病机理以及乳腺癌的早期诊断非常重要.     

乳酸菌细菌素的研究动向

乳酸菌是一类发酵糖产生大量乳酸、分解蛋白质但不产生有毒物质的细菌,主要包括乳球菌(Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ)、明串珠菌(Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ)、片球菌(Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ)、乳杆菌(Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ)和肉食杆菌(Ｃａｒｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ)等属?..     

斑马鱼模型在药物筛选中的应用

斑马鱼具有子代数量多、体外受精、胚胎透明、可以做大规模遗传突变筛选等生物学特性, 因此成为一种良好的脊椎动物模式生物。随着研究的深入, 斑马鱼不仅应用于遗传学和发育生物学研究, 而且拓展和延伸到疾病模型和药物筛选领域。作为一种整体动物模型, 斑马鱼能够全面地检测评估化合物的活性和副作用, 实现高内涵筛选。近年来, 科学家们不断地发展出新的斑马鱼疾病模型和新的筛选技术, 并找到了一批活性化合物。这些化合物大多数在哺乳动物模型中也有相似的效果, 其中前列腺素E2(dmPGE2)和来氟米特(Leflunomide)已经进入临床实验, 分别用来促进脐带血细胞移植后的增殖和治疗黑素瘤。这些成果显示了斑马鱼模型很适合用于药物筛选。文章概括介绍了斑马鱼模型的特点和近年来在疾病模型和药物筛选方面的进展, 希望能够帮助人们了解斑马鱼在新药研发中的应用, 并开展基于斑马鱼模型的药物筛选。     

草菇低温诱导基因的分离

应用ｍＲＮＡ差别筛选法,对低温处理草菇及正常草菇基因表达进行筛选,分析,结合斑要交技术加以验证,分离得到草菇低温诱导基因,研究表明草菇菌丝体在低温腔胁迫下,存在着基因表达的变化。     

mRNA差别显示技术分离草菇低温诱导基因

本文报道采用改良的mRNA差别筛选法,通过选用3'锚定引物和18-25碱基的PCR随机引物组合,以琼脂糖凝胶电泳,EB显色替代聚丙烯酰胺凝胶电泳和放射自显影,对低温处理草菇(Volvariella volvacea)及正常草菇基因表达进行筛选、分析,结合RNA斑点杂交技术加以验证,分离得到70个草菇低温诱导DNA片段。     

mRNA差别显示技术分离草菇低温诱导基因*

本文报道采用改良的mRNA差别筛选法,通过选用3'锚定引物和18-25碱基的PCR随机引物组合,以琼脂糖凝胶电泳,EB显色替代聚丙烯酰胺凝胶电泳和放射自显影,对低温处理草菇(Volvariella volvacea)及正常草菇基因表达进行筛选、分析,结合RNA斑点杂交技术加以验证,分离得到70个草菇低温诱导DNA片段。     

α-突触核蛋白的细胞毒性作用

神经系统变性疾病的一个重要特征就是α-突触核蛋白功能障碍,形成含有α-突触核蛋白的胞质包含体。虽然对α-突触核蛋白损伤神经系统的作用做了大量的研究,但其神经毒性机制尚不清楚。该文从α-突触核蛋白的结构、生理功能及其对泛素-蛋白酶体、线粒体、内质网及高尔基体等的毒性作用方面介绍近年来对其的研究进展。