使用差示扫描量热仪测定抗冻蛋白热滞活性方法的研究

抗冻蛋白因具有独特的抗冻活性而被研究者广泛关注。但是,目前抗冻活性的检测没有一个标准的、统一的检测方法,这严重制约了该方面的研究进展。作者详细研究了采用差示扫描量热仪测定样品热滞活性的方法,并对该方法的稳定性、专一性和精密度进行评价。结果显示,采用差示扫描量热仪测定样品的热滞活性具有较高的稳定性、重复性和精密度。因此,差示扫描量热仪法可以作为一种通用的方法进行抗冻蛋白热滞活性的检测。     

荔枝核淀粉特性研究

本文采用扫描电镜观察荔枝核淀粉颗粒呈椭圆或多边形。差示扫描量热仪分析荔枝核淀粉的热力学特性表明,其起始温度、峰温度、终止温度和吸热焓值分别为69．04℃、78．79℃、87．08℃和7．5J/g。X射线衍射分析表明荔枝核淀粉呈C型结晶。Brabender粘度分析表明荔枝核淀粉糊化温度为85．3℃,淀粉糊高温稳定。     

水稻谷胱甘肽磷脂氢过氧化物酶的热稳定性研究

谷胱甘肽磷脂氢过氧化物酶是唯一能够直接还原生物膜上脂类过氧化物的过氧化物酶．本文利用圆二色光谱（CD）、内源荧光光谱和差示扫描量热仪（DSC）研究了温度对谷胱甘肽磷脂氢过氧化物酶（OsPHGPx）活性及其构象变化的影响．在温度为 20－27.5℃ 期间,随着温度的逐渐升高,OsPHGPx 的活性逐渐上升,到 27.5℃ 时达到最大值;在 27.5－45℃ 时,随着温度逐渐升高,其活性迅速下降;当温度超过45℃时,其活性完全尚失. 在20－40℃,CD 光谱、内源荧光光谱和 DSC 均没有发生明显变化,暗示OsPHGPx 的结构基本保持完整;在 40－55℃,CD 光谱显示该酶二级结构发生去折叠;内源荧光光谱的变化暗示该酶三级结构发生去折叠．其中在40－45℃,DSC显示该酶可能存在两个去折叠中间体．当温度超过 55℃ 时,整个酶的构象不再发生变化,呈现去折叠状态．     

海藻糖对膜脂液晶相到六角相变温度的影响

应用荧光偏振技术,差示扫描量热技术（Differential Scanning Calorimetry,DSC）,傅立叶变换红外光谱技术（Fourier-transform infrared spectroscopy,FTIR）等检测手段,通过测定磷脂液晶相到六角相（Lα→HⅡ）的相变温度来研究不同浓度的海藻糖对水化棕榈油酰磷脂酰乙醇胺（L－α-phosphatidylethanolamine,β-oleoyl-γ-palmitoyl,POPE）的多脂多型性的影响,发现海灌糖存在时,在30℃-70℃温度范围内HⅡ相相变消失,表明海藻糖有稳定脂质体于双层相的能力。     

用量热法研究水稻线粒体不同条件下的能量释放

用精密微热量计（ＬＫＢ－２２７７生物活性检测系统）和差示扫描量热仪分别测定了广丛４１Ｂ水稻线粒体体外能量释放热谱和ＤＳＣ曲线。探讨了它在恒温和变温条件下能量释放的规律和特性,建立了广丛４１Ｂ水稻线粒体在不同条件下能量释放的动力学模型,计算了它在能量释放过程中的动力学模型,计算了它在能量释放过程中的热力学和动力学参数,并比较了它们之间的差异。结果表明,温度愈低,线粒体能量释放速率愈慢。线粒体在零上低     

在蔗糖预培养诱导耐脱水性过程中黄皮胚轴的水分状态和可溶性蛋白含量的变化

逐步增加培养基的蔗糖浓度可提高黄皮胚轴的耐脱水性。用差示扫描量热仪（DSC）和SDS—PAGE方法探讨了黄皮胚轴在耐脱水性获得过程中的水分状态和可溶性蛋白的变化。DSC图谱显示,蔗糖预培养胚轴的升温图谱与对照不同,有比较明显的台阶式变化,有玻璃化形成的倾向;应用线性回归方程法或冰熔化热法计算黄皮胚轴的不可冻结水,发现蔗糖预培养胚轴的不可冻结水含量与对照胚轴无显著差异。蛋白分析表明,蔗糖预培养诱导黄皮胚轴中可溶性蛋白增加68％,其中尤以20kD蛋白的增幅最大。     

PEG差示扫描谱线分析技术的建立

本工作建立了CIC的PEG差示扫描谱线分析技术.其方法是在PEG沉淀比浊法基础上应用双光束分光光度计从600nm到240nm连续读取△OD值.得到一条差示扫描谱线.该谱线反应了CIC分子结构的差异,因而在一定程度上反映了疾病的特异性,具有较广泛的临床应用价值.     

人胎盘中胶原蛋白的提取和表征

采用碱-酶结合法以人胎盘为原料提取胶原蛋白,并使用原子力显微镜(AFM)、差示扫描量热仪(DSC)、圆二色光谱(CD)和傅立叶变换红外光谱(FTIR)对所得胶原蛋白产品进行表征。结果表明:此工艺路线的胶原蛋白得率高,达到0.102%;提取时间由48 h以上减少到24 h以内,而且所得胶原蛋白分子完整地保留了其螺旋纤维结构。此法是从人胎盘中提取胶原蛋白的一种行之有效的方法。     

mRNA差示技术的缺陷及对策

差示ＰＣＲ技术（Ｄｉｆｉｆｅｒｅｎｔｉａｌ Ｄｉｓｐｌａｙ ＰＣＲ１简称ＤＤ－ＰＣＲ）是近年迅速发展起来的一种ＲＮＡ指纹技术,它被广泛应用于医学领域的各个学科。尤其是在寻找新基因的工作中有很大的潜力。但是,差示ＰＣＲ技术前很多缺陷,本文讨论了在差示ＰＣＲ技术的应用中常见的问题,并针对这些问题提出了相应的对策。     

东北槭属的种子表皮雕纹及其在分类上的意义

借助于扫描电子显微镜,对我国东北地区槭属（Ａｃｅ）的１１种变种的种皮雕纹进行了扫描观察,并拍制了电镜照片。从种皮的雕纹类型看,槭树属的种皮可以概括为四种类型：（１）嵌合型;（２）穴状条纹型;（３）条纹型;（４）网格型;雕纹的形态也支持了色木槭和元宝械作为两个独立种的处理意见;以及小果紫花槭作为紫花槭（Ａｃｅｒｐｓｅｕｄｏ－ｓｉｅｂｏｌｉｄｉａｎｕｍ（Ｐａｘ．）Ｋｏｍ）的种下等级变种（ｖａｒ．ｋｏｒ     

应用差示扫描量热法检测昆虫总蛋白的热滞活性

产生抗冻蛋白是寒带昆虫抵御低温的重要机制之一, 但检测其活性仍存在一些困难, 尤其对于个体较小的昆虫样品。为了探索差示扫描量热法是否适于检测昆虫总蛋白的热滞活性, 本研究利用差示扫描量热法对黄粉虫Tenebrio molitor幼虫的总蛋白和血淋巴分别进行了热滞活性检测。结果表明： 黄粉虫总蛋白的热滞活性（0.49~0.98℃）要低于血淋巴（2.54~4.34℃）。通过这种方法, 进一步检测了3种在内蒙古大兴安岭林区采集到的越冬昆虫： 稠李巢蛾Yponomeuta evonymallus幼虫、 舞毒蛾Lymantria dispar卵和落叶松八齿小蠹Ips subelongatus成虫。结果发现, 它们都存在热滞活性, 其中稠李巢蛾的热滞活性为0.34~0.43℃, 舞毒蛾的热滞活性为0.35~0.42℃, 落叶松八齿小蠹的热滞活性为0.37~0.40℃, 说明这3种昆虫能以产生抗冻蛋白的方式作为越冬策略之一。本研究表明通过差示扫描量热法检测昆虫总蛋白是否存在热滞活性来判断抗冻蛋白的存在是可行的。     

运用于原核生物表达谱的研究技术

越来越多基因组序列的公布,掀起了功能基因组学研究的热潮。新的表达谱研究技术也不断涌现和发展。它们包括：差异显示PCR技术（Differential display PCR,DD-PCR）;基因表达指纹分析（gene ex—pression fingerprinting,GEF）;抑制性消减杂交技术（Suppression subtractive hybridization,SSH）和代表性差示分析（Representational difference analysis,RDA）;体内表达技术（In vivo expression technology,IVET）;     

胆固醇对二棕榈酰磷脂酰胆碱（DPPC）多层膜结构的影响

用小角Ｘ射线衍射（ＳＡＸＤ）和差示扫描量热（ＤＳＣ）方法研究胆固醇对二棕榈酸磷脂酰胆碱多层膜结构的影响。在不同胆因醇浓度及不同温度下的衍射实验和热吸收曲线实验显示纯磷脂的尖锐的凝胶－液晶相变随胆固醇含量增加而逐渐消失。当胆固醇含量约为４０（ｍｏｌ）％或更多时,衍射曲线和热吸收曲线均显示存在分相现象。     

DIDS和ConA对带3蛋白转运活性及结构的影响

测定了伴刀豆球蛋白（ＣｏｎｃａｎａｖａｌｉｎＡ）和ＤＩＤＳ对人红细胞带３蛋白活性及结构的影响。（１）ＣｏｎＡ使带３转运速度常数Ｋ显著增加。ＣｏｎＡ浓度达到０．０５ｍｇ／ｍｌ时,Ｋ值增加３４．４％。ＤＩＤＳ对带３活性有明显的抑制作用。（２）荧光探针ＤＰＨ,３ＡＳ,９ＡＳ,１６ＡＰ分别测定ＣｏｎＡ和ＤＩＤＳ与带３结合后膜流动性的变化。ＣｏｎＡ能明显增加膜脂的流动性,而ＤＩＤＳ则降低膜脂流动性。（３）差示扫描量热法（ＤＳＣ）测定带３蛋白变性性质,发现ＣｏｎＡ使红细胞膜上带３蛋白变性峰出现温度从６９．２５°Ｃ减小到６６．２５°Ｃ,而ＤＩＤＳ则使之增至７９．５°Ｃ。     

探索用差热分析技术测定麻栎叶片的自由水含量

探索了用差热扫描曲线分析麻栎（Quercus acutissima Carruth.）在不同状态下的自由水含量的方法。结果显示,在降温过程中以时间为主轴的时域差热扫描曲线能够清楚地显示叶片降温过程中样品的结冰温度、放热峰高度和峰下积分面积与组织含水量的关系,而以温度为主轴的温域差热扫描曲线具有更大的峰下积分面积,在测定样品中的自由水含量时有更高的灵敏度。结冰麻栎叶片在升温过程中的温域差热分析曲线显示,组织内自由水与束缚水的分界点为（-8.23±0.21）MPa,接近2 mol/kg NaCl溶液的渗透势（-8.71 MPa）。死亡麻栎叶片的结冰放热峰显示出均一溶液的结冰特征,即快速结冰升温和快速降温形成尖锐的峰形和高峰值（活叶片峰高的1.91倍）,而活叶片的的结冰放热过程则有明显的受细胞膜系统阻碍和迟滞的特征,出现较低的峰值和缓慢的散热峰。研究结果表明,差热分析不仅能够获得植物组织的结冰-融冰过程的自由水相变参数,也能够定量分析植物组织的自由水含量。     

不同嵌体修复MOD洞型的三维有限元分析

目的：建立近中-合面-远中（MOD）洞型嵌体修复下颌第一磨牙的计算机三维实体和有限元模型,并进行初步应力分析。方法：通过螺旋CT扫描,利用Mimics、GeomagicStudio7等图像处理软件建立第一恒磨牙的云纹点模型,通过UG软件建立下颌第一恒牙的三维几何模型,通过有限元软件ABAQUS进行网格划分,并在MSC．MARC有限元软件中建立下颌第一磨牙三维有限元模型。结果：建立起包含牙釉质、本质、髓腔以及牙槽骨的精细下颌第一磨牙三维有限元模型。结论：将CT扫描技术、数字图像处理技术与有限元方法结合起来,建立出高精度的下颌第一磨牙MOD洞型的三维有限元模型,为MOD洞型采用嵌体修复提供了研究手段．     

高效液相色谱分析银杏萜内酯的含量

用高效液相色谱法测定银杏叶及提取物中银杏内酯Ａ、Ｂ、Ｃ和白果内酯的含量。采用Ｃ１８分离柱,示差检测器,甲醇：水（３３：６７）为流动相,方法回收率平均达９７％以上,变异系数（ＣＶ）为２．１％。     

内蒙古地区鄂伦春族人红细胞CR1基因组密度多态性的研究

目的：研究内蒙古地区鄂伦春族人红细胞CR1基因组密度多态性。方法：PCR-SSP技术是使用能够特异识别特定等位基因的引物通过PCR扩增检测序列多态性的方法,根据PCR产物的有无进行等位基因的分型。本研究采用PCR-SSP技术对内蒙古地区198例鄂伦春族人群进行CR1基因组密度多态性分析。结果：198例鄂伦春族中CR1基因高表达（HH）型占63．64％,中表达（HL）型占34．34％,低表达（IJL）型占2．02％,与北方汉族相比HH和HL型差异有显著性（P〈O．05）。结论：鄂伦春族人群CR1基因密度分布有其独特的规律。     

低剂量胸部CT自动管电流调节技术在超重体型患者检查中的可行性研究

目的：探讨16层螺旋CT自动管电流调节技术（CAREDose4D）在超重体型患者检查中的可行性。方法：收集行胸部CT检查的超重体型患者（BMI值于24-27．9之间）100例,扫描分低剂量组（A组）和常规剂量组（B组）,其中A组扫描运用CAREDose4D技术自动调节管电流;B组扫描运用常规剂量管电流为70mAs扫描。扫描完成后记录加权CT剂量指数（CTDlvol）、有效mAs值、剂量长度乘积（DLP）,计算出有效剂量（ED）及剂量减低比值（DR）,并比较两组的剂量及图像质量。结果：与B组相比,A组常规扫描辐射剂量显著降低,差异有显著统计学意义（P〈0．01）,A组剂量减低比值（DR）降低约20．84％,而图像质量无明显下降,不影响诊断,在主动脉弓上4cm（肺尖）层面A组图像质量优于B组,差异有统计学意义（x^2=8．442,P=0．015）。结论：自动管电流调节技术既可以减少患者的辐射剂量,对待超重体型患者个体化、人性化,又不影响影像诊断,是一项有价值的检查方法。     

差示扫描量热法在红细胞研究中的应用

差示扫描量热法(DSC)是在程序控制温度下,测量试样和参比物能量差随温度(时间)的变化关系的一种技术。它通过捕捉细胞升降温过程中的吸放热现象,利用热学参数(焓变、比热、相变温度)来表征其间细胞结构的变化情况。量热学方法与结构分析方法相结合,有助于深入剖析细胞的生理变化。本文从预测低温保存过程中最佳降温速度及分析细胞膜损伤机理两方面探讨差示扫描量热法在红细胞研究中的应用。