灵芝多糖抗肿瘤作用的初步探讨

目的 :初步探讨灵芝多糖对小鼠肿瘤的抑制作用。方法 :观察灵芝多糖对 S180 、U14腹水型荷瘤小鼠生存期的影响 ,了解灵芝多糖对 S180 、U14、H2 2 肿瘤细胞有无直接杀伤作用 ,以寻找治疗肿瘤的新方法。结果 :灵芝多糖能够显著延长荷瘤小鼠的生存期 (P<0 .0 5) ,治疗组小鼠的生存期比对照组小鼠的生存期明显延长 ,但是灵芝多糖对肿瘤细胞无直接杀伤作用 (P<0 .0 5)。结论 :灵芝多糖抗肿瘤作用是通过机体的免疫系统介导的。     

层迭灵芝子实体的体外抗肿瘤及免疫活性

【背景】层迭灵芝Ganoderma lobatum是灵芝属中的一个种,在民间有药用历史,但缺乏对其化学成分和药理活性的科学研究。【目的】以赤芝Ganoderma lingzhi子实体为参照,研究对比层迭灵芝子实体的抗肿瘤及免疫活性的强弱,探讨层迭灵芝的药用价值。【方法】采用化学分析及仪器分析的方法,比较2种灵芝子实体中三萜及多糖含量差异,并进行体外抗肿瘤及免疫活性研究。【结果】层迭灵芝和赤芝的子实体中三萜含量差异不大,分别为1.14%和1.21%,但2种灵芝中三萜化合物的种类差异较大。层迭灵芝子实体中的多糖含量较赤芝稍高,分别为3.60%和2.67%,2种子实体中多糖的重均分子量分布特征有所差别。2种灵芝醇提物对肿瘤细胞K562及SW620的增殖均具有一定的抑制活性,其中,层迭灵芝对SW620细胞具有较强的抑制活性,其IC50值达到了52.5μg/mL。2种灵芝水提物可以促进RAW 264.7细胞释放NO,说明两者均具有一定的免疫活性。【结论】层迭灵芝具有较好的抗肿瘤及免疫活性,可以作为药用开发的原料来源。     

灵芝多糖抗肿瘤作用的免疫分子机制研究

灵芝多糖是一种从灵芝实体中被提取出来的多糖组份,灵芝多糖极易溶于水。很多科学研究表明,灵芝多糖具有一定的免疫调节功能以及一定的抗肿瘤等作用,并且认为在体外灵芝多糖并没有直接的对肿瘤细胞有抑制作用或者杀伤作用,反而在体内灵芝多糖则具有很好的抗肿瘤作用。所以,通常情况下,对灵芝多糖的抗肿瘤作用的研究主要就是通过增加免疫功能,尽管我国很多科学家已经从免疫功能的角度对灵芝多糖的抗肿瘤作用进行研究,但确切的机制并没有明确。因此文章结合具体实验对灵芝多糖的抗肿瘤作用的免疫分子机制进行深入研究。     

灵芝中有效成分灵芝酸的抑制肿瘤作用研究

本文采用了体外肿瘤细胞培养增殖抑制试验与体内肿瘤细胞抑制试验,结果显示灵芝酸在体外对肿瘤细胞株SW620、LS180、S180的增殖具有明显的抑制作用,体内抗肿瘤疗效试验显示灵芝酸对Lewis肺癌(足趾接种)具有一定的疗效,对荷Lewis肺癌的小鼠IL-2的生成及NK细胞的免疫活性均有一定的促进作用。因此可以认为灵芝酸通过直接细胞毒作用与激活免疫体系实现抑制肿瘤作用。     

虫草素预防佐剂诱导的小鼠脚掌炎性肿胀的抗炎作用

探究虫草素(3'-脱氧腺苷,3'-deoxyadenosine,Cor)预防佐剂诱导的小鼠脚掌炎性肿胀模型的抗炎作用。随机将小鼠分为空白对照组(control)、模型组(modle)、虫草素(Cor)组(20 mg/kg)、地塞米松(dexamethasone,Dexa)阳性对照组(2 mg/kg)。各组小鼠均为腹腔注射给药,1次/d。用完全弗式佐剂(complete Freund's adj,CFA)诱导脚掌产生炎性水肿模型。观察脚掌肿胀变化;ELISA法检测各组小鼠血清中炎性因子TNF-α、VEGF释放水平的变化;计算脾脏指数;HE染色观察脚掌足跖部位炎症病理变化。结果显示与空白组比较,模型组的脾脏指数以及血清中炎性因子含量显著增加(p0.01或p0.05);与模型组相比,Cor组能显著降低小鼠脚掌肿胀厚度、脾脏指数以及血清炎症因子含量(p0.01或p0.05),且能显著改善小鼠脚掌病理反应。本研究揭示了虫草素对佐剂诱导的小鼠急性脚掌炎性肿胀有抑制作用,其机制可能与虫草素通过下调TNF-α及VEGF等炎性因子,减轻脚掌组织炎性细胞浸润,抑制炎症部位血管内皮生长因子释放及降低致炎小鼠脾脏指数有关。     

羧甲基茯苓多糖的制备及体内抗肿瘤作用的实验研究

目的 :探讨羧甲基茯苓多糖的制备方法及体内抗肿瘤作用。方法 :选择性氧化茯苓菌发酵液得羧甲基茯苓多糖 ,检测三个剂量的羧甲基茯苓多糖 (2 mg/ ml、4mg/ ml、6mg/ ml)对 H2 2 荷瘤小鼠淋巴细胞转化率和 NK细胞杀伤活性以及血清中 TNF-α含量的影响。结果 :羧甲基茯苓多糖三个剂量组均可提高荷瘤小鼠的淋巴细胞转化率和 NK细胞杀伤活性 ,与生理盐水组相比差异有显著性 (P<0 .0 5) ,中剂量组抗肿瘤的效果显著 ,与其他两组相比差异有显著性 (P<0 .0 5) ;羧甲基茯苓多糖三个剂量组均可提高荷瘤小鼠血清中 TNF-α的含量 ,与生理盐水组相比差异有显著性 (P<0 .0 5) ,但三个剂量组之间比较差异无显著性 (P<0 .0 5)。结论 :羧甲基茯苓多糖可改善荷瘤小鼠的免疫功能 ,具有抗肿瘤作用 ,且功效与作用剂量间有一定的关系 ,在最佳剂量时活性最高     

梭柄松苞菇多糖组分的部分理化性质及对S-180瘤抑制活性研究

【目的】分离和纯化梭柄松苞菇子实体多糖, 并对其结构和抗肿瘤活性进行研究。【方法】采用热水浸提法提取梭柄松苞菇子实体多糖, 采用DE-52纤维素柱和Sephadex G-100进行多糖的分离纯化, HPGPC测定多糖分子量, HPLC测定单糖组成, 红外光谱进行结构分析, 甲基化实验测定连接方式, 核磁共振测定异头碳构型, 采用S-180荷瘤小鼠模型对梭柄松苞菇子实体多糖抗肿瘤活性进行研究, 并测定了荷瘤小鼠血清细胞因子TNF-α、IL-2和IL-6的含量。【结果】从梭柄松苞菇子实体中分离纯化得到多糖命名为CVP-A, 结果表明, CVP-A平均分子量为10 289, 单糖组成主要为葡萄糖, 还含有少量木糖, 含量比约为15:2, 甲基化实验, 核磁共振以及红外光谱分析结果表明CVP-A主链为(1→4)-α-D-葡聚糖, 侧链连接在主链葡萄糖残基2号碳位置, S-180荷瘤小鼠模型实验表明, CVP-A对实验性S-180实体瘤具有较好的抑制作用, 连续10 d腹腔注射25、50和75 mg/(kg·d) CVP-A的昆明小鼠的肿瘤抑制率分别为31.99%、42.68%和60.18%, 小鼠血清细胞因子测定表明, CVP-A能提高荷瘤小鼠血清TNF-α、IL-2和IL-6的含量。【结论】梭柄松苞菇多糖可能作为一个潜在的抗癌药物而开发利用。     

石斛多糖对肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞抗肿瘤作用的影响

目的:探讨石斛多糖对肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞抗肿瘤作用的影响。方法:利用石斛多糖和肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)共同作用荷瘤小鼠,测量小鼠的肿瘤重量和观察小鼠的生存期。结果:石斛多糖和肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)共同作用能明显抑制小鼠的肿瘤生长和延长小鼠的生存期。结论:石斛多糖能加强肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的抗肿瘤作用。     

当归多糖对免疫细胞增殖作用的实验研究

探讨当归多糖对免疫细胞的直接和间接作用。用MTT法分别检测当归多糖(PCA)对PBMC的直接作用、PCAPBMC培养液对PBMC的间接作用;用流式细胞术检测PCA作用于健康人PBMC后各种免疫细胞表型的改变;检测PCA注射BALB／c小鼠后脾细胞增殖变化和巨噬细胞的吞噬能力。当归多糖对PBMC具有直接的抑制作用,而当归多糖PBMC培养液可促进PBMC增殖。PCA注射BALB／c小鼠后脾细胞增殖能力和巨噬细胞吞噬能力均得到了不同程度的增强。研究结果为进一步阐明当归多糖的免疫机理提供了理论依据。     

软骨复合物对小鼠类风湿性关节炎的预防作用

目的观察口服软骨复合物对类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）的预防作用。方法口服软骨复合物两周后,再注射弗氏完全佐剂（Freund’s complete adjuvant,FCA）诱发小鼠RA模型,通过观察小鼠关节炎分数的变化,测定小鼠各器官的指数,检测小鼠血清中一氧化氮（nitric oxide,NO）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平以及关节组织病理学的变化来评价口服软骨复合物对类风湿性关节炎的预防作用。结果软骨复合物能较有效的改善关节的肿胀度,并显著地提高小鼠的胸腺指数（P〈0．01）,显著地提高脾指数（P〈0．05）,明显降低NO和TNF-α水平;组织病理学显示给药组关节的变形破坏得到减轻。结论软骨复合物能有效地起到预防佐剂性关节炎的作用,然而其治疗作用还有待进一步研究。     

灵芝抗氧化清除自由基作用的研究

文中综述了灵芝的抗氧化清除自由基作用。灵芝对各种因素引起的脑、心脏、胰腺、肝脏、胃肠道、肾脏和其他重要脏器的脂质过氧化损伤具有明显的保护作用。灵芝可显著减少脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的含量,增强抗氧化酶如超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)以及其他抗氧化酶的活性。稹灵芝对体外培养的巨噬细胞(小鼠)、胰岛细胞(小鼠)、大脑皮层细胞(大鼠)、嗜铬细胞瘤细胞(大鼠)、血管内皮细胞(大鼠、人)和皮肤角质细胞(人)的氧化损伤具有明显保护作用。灵芝在体内外对不同动物模型和细胞模型的抗氧化清除自由基作用可能与其免疫调节、抗肿瘤、降血压、降血糖、保肝、心血管保护和抗衰老作用的机制有关。     

枸杞多糖对H5N1流感全病毒灭活疫苗的体液免疫增强作用

探讨枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharide,LBP)作为佐剂对H5亚型流感病毒全病毒灭活疫苗的体液免疫增强效果。将流感病毒A/Vietnam/1194/2004(H5N1)灭活疫苗与不同剂量的枸杞多糖混合后以腹腔注射的方式共同免疫小鼠,免疫后三周收集血清用于特异性抗体检测。实验中设立氢氧化铝佐剂组作对照共同评价LBP作为佐剂的免疫增强效果。结果显示,小鼠血清中针对H5灭活疫苗的特异性抗体水平在一定范围内随着LBP剂量的增加而提高。LBP在800μg剂量时血清特异性抗体水平较无佐剂组显著增强,并与氢氧化铝佐剂组大致相当。因而,LBP有可能成为一种有效的流感灭活疫苗免疫佐剂。     

人工栽培灵芝中多糖的部分理化性质及免疫调节作用

【背景】灵芝是一种广受关注的药食两用真菌,在中国作为传统药材和健康食品已有几千年历史,近年来中国人工栽培灵芝规模扩展迅速,而多糖被认为是灵芝中最主要的活性成分。【目的】分离和纯化人工栽培灵芝子实体多糖,并对其结构和免疫调节活性进行研究。【方法】采用水提醇沉法提取灵芝子实体多糖(GLP),采用DE-52纤维素柱和Sephadex G-100进行多糖的分离纯化,高效凝胶渗透色谱法测定多糖分子量,1-苯基-3-甲基-5-吡啶啉酮(PMP)柱前衍生法测定单糖组成,红外光谱进行结构分析,噻唑蓝(MTT)比色法测定多糖对小鼠脾细胞增殖的影响,同时评价其对RAW 264.7细胞吞噬能力和细胞因子分泌能力的促进作用。【结果】GLP平均分子量为1.93×10~4 Da,单糖组成包含葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)及甘露糖(Man),占比为Glc:Gal:Man=3.3:1.3:1.0。红外光谱显示,GLP的异头碳为β构型。GLP能直接促进脾细胞的增殖,且能显著增强刀豆蛋白A(Con A)诱导的T淋巴细胞和脂多糖(LPS)诱导的B淋巴细胞的增殖。此外,对于RAW 264.7细胞的吞噬能力及细胞因子分泌具有一定的促进作用。【结论】灵芝多糖可作为一个潜在的免疫调节药物而开发利用。     

树灵芝中三萜类成分及其保肝作用研究

研究树灵芝Ganoderma sessile中三萜类成分及其保肝作用。树灵芝乙醇提取物经凝胶色谱、硅胶色谱、硅胶薄层色谱、C18反相硅胶色谱、高效液相色谱和反相制备色谱等色谱技术分离纯化,通过各种波谱学方法鉴定化合物的结构。从树灵芝中分离得到16个三萜类化合物,分别为灵芝酸LM2(1)、灵芝孢子酸A(2)、灵芝酸J(3)、灵芝酸C(4)、灵芝酸A(5)、灵芝酸B(6)、灵芝酸M(7)、灵芝酸C6(8)、灵芝酸AM1(9)、灵芝酸G(10)、灵芝酸I(11)、灵芝赤芝酸A(12)、灵芝酸ε(13)、灵芝酸H(14)、灵芝赤芝酸E(15)和灵芝酸D(16)。化合物1~16均为首次从该种植物中分离得到。其中化合物2、5、6、11、15和16对人肝HL-7702细胞的成活率分别为60%、45%、56%、44%、47%和47%,均高于双环醇42%的成活率,具有肝保护的作用。     

茯苓多糖对流感灭活疫苗的免疫增强作用

探讨茯芩多糖作为流感病毒灭活疫苗佐剂的免疫增强作用.将不同剂量(200 μg或1000 μg)的茯苓多糖分别与低剂量(0.015 μg)或高剂量(1.5 μg)流感病毒(A/PR/8)灭活疫苗共同免疫小鼠,以相应剂量灭活疫苗的单独免疫组、灭活疫苗与氢氧化铝(100 μg)共同免疫组、PBS免疫组作为对照组.一次免疫后3周收集血清,ELISA检测血清中IgG、IgG1和IgG2a的抗体水平;并用致死量(40×LD<,50>)流感病毒(A/PR/8)攻击小鼠,通过观察小鼠的体重丢失率、肺部病毒量、存活率来反映佐剂的免疫增强效果和疫苗的保护作用.结果显示,茯苓多糖能显著增加血清抗体水平,并提高小鼠抗致死量流感病毒攻击的能力,其免疫增强效果与氢氧化铝相当.茯苓多糖可作为一种新型的流感病毒灭活疫苗的免疫佐剂.     

药用昆虫蜣螂对灵芝发酵和抗小鼠肝癌活性的影响

采用液体深层发酵方式,研究了药用昆虫蜣螂对灵芝细胞生长、关键活性产物发酵动力学和抗小鼠肝癌活性的影响。结果表明,药用昆虫蜣螂在各添加浓度下对灵芝的细胞生长均无显著促进作用;但在添加量为5g/L时,对灵芝多糖和灵芝三萜的发酵动力学有显著影响(P<0.05),在发酵第7天时,灵芝总多糖和总三萜的产量分别达到2.81g/L和539.0mg/L(对照组分别为2.25g/L和428.2mg/L)。小鼠体内抗肝癌结果表明,灵芝对照发酵物的抑癌率为41.61%,灵芝-蜣螂配合物的抑癌率为42.24%;而补加蜣螂发酵后的灵芝加蜣发酵物的抑癌率高达57.21%,与灵芝对照发酵物的抑癌率相比,提高了37.49%。研究表明,采用昆虫蜣螂补料-分批发酵后,灵芝发酵物抗小鼠肝癌的活性得到显著增强。     

灵芝多糖的抗癌构效关系及其抗癌作用机制

灵芝多糖是灵芝的主要抗癌活性成分,但灵芝多糖的抗癌构效关系和抗癌机制仍不明了。现有的研究表明,具有抗癌活性的灵芝多糖大多是β-(1→3)-D-葡聚糖。β-葡聚糖中分支度高的有较高的活性,分子量高的也较分子量小的活性大。但新近的一些研究发现,含有其它结构的灵芝多糖和某些小分子量的灵芝多糖也具有免疫调节和抗癌活性。因此,这些灵芝多糖在灵芝抗癌中的作用不可忽视。灵芝多糖的抗癌作用机制目前尚不明了。现已知通过免疫介导作用发挥抗癌作用是灵芝多糖抗癌的主要机制之一。新近的研究发现,膜Ig和TLR-4为灵芝多糖激活机体B细胞的免疫受体,TLR-4也与灵芝多糖激活机体巨噬细胞有关。此外,灵芝多糖抗癌的可能机制还包括活化促分裂原活化蛋白(MAP)激酶,以及抑制肿瘤血管新生等。     

灵芝发酵液多糖提取物对荷瘤小鼠细胞免疫的动态观察

目的:观察灵芝发酵液多糖提取物对S180荷瘤小鼠部分免疫指标的动态调节作用,探讨其抗肿瘤机制.方法:S180瘤细胞荷瘤昆明小鼠80只建立动物模型,生理盐水组(NS组)与灵芝发酵液多糖组(GFG组)各40只,分别于荷瘤后第4,7,10,13,16天每组各处死8只小鼠,检测GFG对NK细胞活性、淋巴细胞转化率的影响.结果:GFG能显著提高荷瘤小鼠NK细胞活性和淋巴细胞转化率.随荷瘤时间延长,GFG组较NS组能维持较高水平(P＜0.01),但总体呈下降趋势.结论:灵芝发酵液多糖提取物能显著提高NK细胞活性和淋巴细胞转化率,并维持一定水平.     

灵芝多糖对单核巨噬白血病细胞株的体外作用

目的:研究灵芝多糖对单核巨噬白血病细胞THP-1和RAW264.7的肿瘤生物学活性的影响。方法:用1、50和100μg/ml的灵芝多糖和脂多糖(LPS)刺激THP-1和RAW264.7细胞,CCK-8法测定巨噬细胞的增殖活力、流式细胞仪检测细胞的凋亡活性、Q-PCR检测细胞因子TNF-α、IL-1、IL-6和IL-12基因、相关凋亡信号通路基因TRADD、TNFSF10、TNFRSR10b、NFκBI、Caspase10和Caspase 3基因的mRNA表达水平。结果:灵芝多糖可以呈反浓度依赖性地刺激两种细胞的增殖,在50和100μg/ml浓度下可引起细胞凋亡,凋亡信号基因TNFRSR10b和NFκBI的mRNA水平在24h升高了53%和48%;在1~100μg/ml浓度下可上调细胞因子TNF-α、IL-1、IL-6和IL-12细胞因子mRNA的表达水平。结论:灵芝多糖对白血病细胞株具有双重作用,在低浓度下促进细胞增殖,而在高剂量时诱导细胞凋亡,均可上调免疫相关细胞因子的表达。     

仿刺参多糖抗肿瘤及对荷瘤小鼠免疫调节作用

目的 观察仿刺参多糖(AJPS)抗肿瘤及免疫调节作用.方法 采用MTT法检测AJPS对人肝癌HepG-2细胞抑制率;以Hca-F肝癌小鼠为模型,采用MTT法、放免法测定荷瘤小鼠细胞免疫指标.结果 AJPS抑制HepG-2细胞生长,抑制小鼠移植瘤生长;增强脾淋巴细胞和巨噬细胞活性,促进TNF-α和IL-2的产生.结论 AJPS具有对HepG-2细胞的直接杀伤作用;AJPS对荷瘤小鼠有免疫调节活性,在肿瘤的免疫治疗中发挥作用.