草鱼出血病

草鱼Ctenopharyngodon idella是我国重要的淡水鱼类养殖品种,但养殖过程极易发生出血病导致草鱼大量死亡,给草鱼养殖业带来巨大损失。我国在20世纪70年代开始进行病原的研究,1980年发现病毒颗粒并确认为草鱼出血病病原,1991年国际病毒分类委员会将其命名为草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)。一直以来除呼肠孤病毒感染草鱼引起出血病外,未见有病毒和细菌混合感染的报道。本刊2009年8期介绍了邓国     

草鱼(Ctenopharyngodon idellus)FGF21基因克隆及其表达分析

采用RT-PCR技术从草鱼肝脏中克隆了成纤维细胞生长21(FGF21)基因序列,并利用实时荧光定量PCR(q PCR)技术对该基因在草鱼幼鱼不同组织中表达进行了研究。结果表明,草鱼FGF21基因(Gen Bank登录号为MF_094727)c DNA序列全长615 bp,其中5'端非翻译区51 bp,开放阅读框564 bp,编码187个氨基酸。氨基酸序列同源性分析表明,草鱼FGF21基因与斑马鱼同源性最高(78.86%),与犀角金线鲃、鲤、虹鳟、大西洋鲑、罗非鱼和日本青鱂的同源性分别为77.66%、73.94%、53.29%、52.41%、43.71%和35.96%,与人和小鼠同源性较低,分别为31.87%和30.39%。q PCR分析表明:FGF21基因在草鱼幼鱼肝脏、前肠、中肠、后肠、心脏、肌肉、肾脏和全脑中均有表达,在肌肉、前肠和中肠表达量最高,表明该基因可能在草鱼肌肉和肠道等组织发挥重要作用。     

草鱼出血病病原的研究

草鱼出血病是草鱼种的一种严重疾病,通常在水温25—30℃时发病,其症状表现为全身性组织器官充血。其病原悬液能通过赛氏滤器(Seitz,EKS石棉滤板),能在草鱼种体内及草鱼鳍单层细胞中传代繁殖,在草鱼肌肉单层细胞和性腺单层细胞中感染并出现细胞病变。病原悬液对脂溶剂乙醚敏感,耐热性强,对四环素类药物不敏感。试验结果,我们认为草鱼出血病的病原是病毒。     

草鱼(Ctenopharyngodon idellus)集约化养殖中浮游植物对饲料氮磷比的响应

为研究养殖系统中浮游植物对饲料氮磷比(N:P 比)的响应, 在草鱼(Ctenopharyngodon idellus)集约化养殖池塘开展不同N:P 比饲料投喂的观测试验。设置两个处理组进行对比试验, 分别投喂N:P 比为4.74(A 处理)和8.63(B 处理)的配合饲料, 进行为期10 周的观测。结果表明, B 处理组观测到更高的浮游植物生物量, 推测浮游植物可能加速了水体食物链的物质循环效率,这解释了B 处理组具有更高饲料效率和更高鱼产量的原因。B 处理组中绿藻成为优势种类, 蓝藻相对生物量显著低于A 处理组, 生物多样性也较低。因此草鱼集约化养殖过程中过低N:P 比的饲料不利于鱼产量提高, 合理的N:P 比(8.63)可以更好地促进水体中浮游植物生长, 抑制可食性较低的蓝藻生物量比例, 间接提高饲料效率, 达到养殖增产和保护环境的双重效益。     

脆化草鱼(Ctenopharyngodon idellus C.et V)的病理生理生态学

分别就形态、生态和病理学性状对处于脆化终极阶段（LD50≥6．67kg／kgbw）的草鱼与普通草鱼进行比较分析。高度脆化的草鱼在生态学上出现明显变化,体长和体重的指数方程W=al^n显著不同于普通草鱼,DO阈值由平均值O．54mg／L上升到平均值1．68mg／L,CO2麻醉浓度（呼吸抑制值）由194mg／L高浓度下降到52．42～65．36mg／L,Root效应及Broh效应显著改变。解剖分析表明,草鱼脆化过程是渐进性组织病变的生理过程,包括各系统器官的功能性病变,最终使过度脆化的草鱼由于血液循环障碍直接导致死亡。草鱼脆化死亡具有明显的饲料（蚕豆）累积剂量——效应反应的毒理学规律,脆化草鱼的体长与体重的指数方程W=18．1719L^2.4360可作为华南地区商品脆肉鲩标准的参考。研究结果将为脆化草鱼规模化集约养殖和提高脆化草鱼长途运输成活率提供参考。     

草鱼出血病病原的研究

草鱼出血病是草鱼种的一种严重疾病,通常在水温25-30℃时发病,其症状表现为全身性组织器官充血。其病原悬液能通过赛氏滤器(Seitz,EKS石棉滤板),能在草鱼种体内及草鱼鳍单层细胞中传代繁殖,在草鱼肌肉单层细胞和性腺单层细胞中感染并出现细胞病变。病原悬液对脂溶剂乙醚敏感,耐热性强,对四环素类药物不敏感。试验结果,我们认为草鱼出血病的病原是病毒。     

草鱼(Ctenopharyngodon idellus)线粒体DNA控制区及其两侧tRNA基因的克隆与结构分析

动物线粒体ＤＮＡ控制区是线粒体基因组复制与基因表达的最主要的调控区．采用杂交和测序的方法对草鱼线粒体ＤＮＡ控制区进行定位、克隆并测定了控制区及其旁侧的ｔＲＮＡＰｈｅ、ｒＲＮＡＰｒｏ和ｒＲＮＡＴｈｒ三个基因的序列,与多种脊椎动物的相应序列进行了比较,并进行了结构分析．草鱼线粒体控制区全长９２７ｂｐ,含有与酵母和爪蟾线粒体启动子相似的序列,其ＣＳＢⅠ、ＣＳＢⅡ和ＣＳＢⅢ序列与其他几种动物的ＣＳＢ比较相当保守,ＴＡＳ与其回文基序可形成稳定的茎环结构,成为Ｈ－链复制的终止信号．草鱼线粒体ｔＲＮＡＰｈｅ、ｔＲＮＡＰｒｏ和ｔＲＮＡＴｈｒ可折叠成三叶草形二级结构,其基因具有许多不同于细胞质ｔＲＮＡ基因的结构特点,可能反映了线粒体ｔＲＮＡ与线粒体核糖体具有不寻常的作用方式     

草鱼(Ctenopharyngodon idellus)烂鳃病的研究 Ⅰ.细菌性病原的研究

本文主要是报导1972年从患细菌性烂鳃的草鱼和其他鱼的鳃上分离到的病原粘细菌。通过多次人工感染(包括再分离和再感染),证明G4菌株是草鱼细菌性烂鳃病的病原菌,它能引起草、鳙、鲢、草鳙杂种、团头鲂、鲤等鱼的烂鳃病。对G4菌株的菌体、子实体、小孢子的形态、培养特性、生理生化特性作了较详细的观察和试验;根据其特征,定名为鱼害粘球菌——新种(Myxococcus piscicola Lu,Nie Ko,sp.nov.)。较详细地观察了G4菌株在胰胨液体培养中的群集习性,“柱子”形成、繁殖散发和衰老死亡的全过程。认为“柱子”形成是G4菌株,也可能是所有鱼类寄生粘细菌所共有的一种运动、繁殖的表现形式,它是不会转化为真正的子实体的。草鱼细菌性烂鳃病是危害很大的鱼病之一。其病原菌分离的成功,对有效地防治该病,控制该病的流行,提供了有利条件,同时也丰富了研究鱼类寄生粘细菌的学术内容。       

草鱼出血病病毒的血清学鉴定

草鱼出血病病毒(GcHV)具有弱的凝集人“O”型红血球的能力。其抗体与呼肠孤病毒、轮状病毒不发生免疫反应,说明此病毒与上述病毒无共同的抗原关系。     

草鱼出血病病毒多肽的免疫原性

采用中和试验比较了草鱼出血病病毒ＧＣＨＶ８７３的１１个多肽的免疫原性,确定了主要中和抗原。纯化的单个病毒多肽免疫家兔获得抗血清,多太ＶＰ１、ＶＰ５、ＶＰ６和ＶＰ９的抗血清具有中和效价,而ＶＰ２、ＶＰ３、ＶＰ４、ＶＰ８、ＶＰ１０和ＶＰ１１则不能诱生中和抗体。其中ＶＰ５的抗血清中和效价最高,因此,ＶＰ６极可能是病毒多肽中的主要中和抗原。     

草鱼白头白嘴病的研究

白头白嘴病是夏花鱼种阶段严重病害之一。本文对草鱼白头白嘴病的病原、病理和防治方法进行了研究。经从病鱼分离到90株菌株的人工感染试验,证明该病的病原是粘球菌属(Myxococcus)的一种。通过组织病理观察,病鱼不仅是体表、口腔、眼、鳃等上皮组织产生明显的病变,而且头部的软骨组织、横纹肌纤维也有不同程度的病变,使这些组织丧失了生理机能。筛选了多种药物进行治疗试验,以1.5ppm 福美砷的疗效最好。在饲养管理方面,鱼苗一级饲养阶段,采用了合理密养(15万尾/亩)和及时分池(饲养20天左右)等措施能起到一定的预防作用。       

二龄草鱼肠炎病发病机理

本文通过对患肠炎病的二龄草鱼病鱼和正常草鱼的肠道及血液中的产气单胞菌(Aeromonas)的数量和毒力的比较,病鱼肠道、血液和其他内脏中的产气单胞菌所出现比率的调查,不同水温对该菌致病力的影响和用菌体提取液接种鱼体,以及用鲎试剂(鲎变形细胞溶解物Tachypleus Amebocyte Lysate“TAL”)对病鱼和正常鱼体内的内毒素进行测定等一系列的试验和观察,从而推断出二龄草鱼细菌性肠炎病的发病机理。     

二龄草鱼肠炎病的研究

本文从细菌学、血清学、鱼体免疫以及药物治疗等几个方面,阐明了点状产气单胞菌是二龄草鱼肠炎病的病原菌。另外还对这种细菌特性及其致病方式进行了讨论,并对该病的诊断提供了方法。     

草鱼生长与台湾棘带吸虫囊蚴内种群的关系

通过对草鱼鳃上台湾棘带吸虫囊蚴内种群的研究发现,随着草鱼的生长。其感染率,下蚴的平均密度都下降,其感染强度也呈下降的的趋势;草鱼鳃上囊蚴的频率分布,表明有大量的囊蚴寄生于少数草鱼鳃上,多数草鱼感染少量的囊蚴;囊蚴在草鱼不同组鳃片上的分布具有相同的变化规律;     

氨对草鱼的急性和亚急性毒性

试验测定了氯化铵对草鱼的急性和亚急性毒性。急性试验采用26,47,60和125日龄的草鱼,亚急性试验用60日龄草鱼种,经0.970,0.455,0.099,0.054和0.012(对照)毫克NH_3/升(未离解氨,un-ionized ammonia)暴露45天。26,47,125日龄草鱼的96小时LC_(50)(半数致死浓度)分别是0.570,1.609和1.683毫克NH_3/升,而47,60,125日龄的48小时LC_(50)则分别为1.727,2.050和2.141毫克NH_3/升。急性毒性试验结果表明,26日龄草鱼最为敏感。在亚急性毒性试验中,根据氨对草鱼生长和鳃组织的影响,求得未离解氨的最大允许毒物浓度为0.054—0.099毫克NH_3/升。     

草鱼与团头鲂肠道菌群结构比较分析

选取湖泊养殖的草鱼（Ctenopharyngodon idellus）和团头鲂（Megalobrama amblycephala）为研究对象, 通过对其消化道细菌群落16S rDNA进行细菌群落聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳（PCR-DGGE）分析, 比较了其消化道微生物群落结构。在两种草食性鱼类消化道中分别检测到不同的谱带, 其中草鱼的平均谱带数为（33.32.8）条, 团头鲂的平均谱带数为（38.02.5）条。基于所得PCR-DGGE指纹图谱谱带丰度值数据的UPGMA聚类分析和PCA排序均显示草鱼消化道微生物群落并没有与团头鲂消化道微生物群落分开; 相比于草鱼和团头鲂消化道微生物群落之间的差异, 草鱼和团头鲂个体间差异更加明显, 而且草鱼消化道微生物群落的个体分化更为明显。对特定条带的切胶回收测序结果显示, 草鱼和团头鲂消化道内检测到的菌群都主要来自-变形菌门、梭杆菌门和厚壁菌门, 另外草鱼消化道中还检出少量拟杆菌门细菌。以上结果表明同一生境中食性相同的野生草鱼与团头鲂消化道微生物群落组成不存在显著差异, 条带回收测序检测到相似的微生物种类。研究结果补充了人们在食性对消化道微生物群落结构影响方面的认识, 同时也暗示草鱼和团头鲂消化道内微生物群落对营养物质的代谢方式类似, 这为深入研究草食性鱼类消化道微生物菌群参与营养物质代谢积累了资料。       

草鱼(AG)微卫星标记克隆及特征分析

报道了一种简便高效克隆微卫星序列的方法。这一方法的实施步骤包括小片段基因组文库构建、三螺旋捕获、磁珠分离和PCR 扫描。草鱼AG 重复文库的冗余率为7.2%, 富集效率为60.25 倍, PCR 扫描的准确率达100%, 采用这一方法克隆到的AG 重复序列中完美型、非完美型和混合型的比例分别为66.87%、17.17%和15.96%, 不间断重复序列长度大于30 bp 的微卫星座位占51%。34 个微卫星座位中有25 个表现出多态性,PIC 值0.50—0.91, 进一步分析表明AG 重复序列的多态信息含量(PIC)与不间断重复序列长度相关, 不间断重复序列长度大于30 bp 的座位表现出丰富的多态性。较高的富集率和有效引物获得率证明此方法在分离草鱼微卫星中的成功应用, 并将为草鱼养殖品系的优化、遗传多样性的检测及遗传图谱的构建等打下基础。       

草鱼肠道酸碱度的研究

胃肠道是一个复杂的消化系统, 每一部分都具有独特的生理特征。酸碱度(pH)是消化道重要的生理指标之一, 其对营养物质的消化、吸收和肠道微生物的生长等具有重要影响。为了研究草鱼在食物消化过程中, 肠道的酸碱度变化, 测定了草鱼肠道食物糜、肠液和黏膜的pH。结果显示, 随着食物的消化, 它们的pH都有下降的趋势。肠道食物糜pH在6.86±0.24到8.43±0.10之间, 肠液pH在7.14±0.22到8.63±0.02之间, 相同时间点相同肠段两者之间的pH差异很小, 并且在实验期间两者的pH变化趋势相同。黏膜pH在6.23±0.04到6.7±0.13之间, 为弱酸性。除了时间点12h外, 相同时间点和相同肠道部位黏膜的pH与食物糜、肠液的pH相比均有显著性差异(P<0.05)。分析发现草鱼摄食食物的pH与上述三相的pH之间均有显著性差异(P<0.05), 研究结果为草鱼消化生理及营养学研究提供了基础资料。     

草鱼胆绿素IXa的纯化与光学特性

制备胆绿素,有人根据Bonnet and McDonagh方法1,先把毗咤血红素和抗坏血酸偶联氧化为四种胆绿素异构体的二甲酷,再按O'Carra and Colleran方法2用薄层层析进一步纯化各种异构体.也有人根据Lemberg法用结晶胆红素氧化;再分离胆绿素.研究表明,胆绿素是鱼类、两栖类、爬行类和鸟类动物体中血红素之分解终产物及排泄物3,4.因此,可以利用这些动物的胆汁和血液等分离提纯胆绿素,再把胆绿素转变为胆红素.这是广开材料来源,制备更多名贵药用胆红素的途径之一.本文报告用硅胶柱分离纯化淡水草鱼胆汁中的胆绿素IXa及其光学特性.       

草鱼脑的发育和结构

对刚孵化至全长500毫米草鱼脑的发育过程中的形态变化和脑在颅腔中的位置变动作了详细观察;对发育完善脑的结构进行了研究,并叙述了副脑上腺、脑上脑、脑垂体和血管囊的形态和位置变化.全长7.4毫米端脑前端分化出嗅球,全长53.4毫米嗅球开始与大脑分离,真正的嗅神经位于嗅囊和嗅球之间一些细而短的神经.全长125毫米以后脑的发育已基本趋于完善,形态构造亦基本稳定;全长227毫米以后脑已位于颅腔后部.