流行性出血热病毒血凝素抗原位点分析

用八株不同来源的流行性出血热(EHF)病毒的单克隆抗体(McAb),采用血凝抑制试验、反向间接血凝抑制试验、间接酶联免疫及阻断酶联免疫试验等,对两种方法(TE、SA)制备的血凝素抗原进行分析。根据A35、2A6McA5试验的结果,证实血凝素抗原中的核蛋白上存在有非构象依赖性的血凝结合位点;而另外5株McAb在血凝抑制活性方面,虽具有明显的株间交叉,但在反向间接血凝抑制试验、间接酶联免疫试验时则均为阴性,故认为其血凝结合位点位于病毒的膜蛋白,可能与G_2糖蛋白有关,为构象依赖性位点。有关4G6McAb,在阻断酶联免疫试验时,虽与A35、2A6一样具有较高的阻断率,但在反向间接血凝抑制试验、间接酶联免疫试验时明显有别于后二者,对其属性有待进一步确定。     

影响麻疹病毒血凝素滴度的某些因素的探讨

自从Peries等报告麻疹病毒具有凝集猴血球的特性之后,近来有不少作者证实了这一研究。但麻疹病毒的血凝滴度较低,作血凝抑制试验时,一般均采用理化方法将血凝素加以浓缩。我们曾对麻疹病毒的血凝性质进行研究,可以不经浓缩而获得滴度较高的血凝素。关于应用麻疹病毒血凝抑制试验检查麻疹抗体的研究,已有报告。现将影响麻疹病毒血凝素滴度的某些因素报告如下:     

A型肉毒毒素血清学诊检的研究

应用肉毒毒素血清学诊检和分析肉毒毒素的方法,早已引起人们的注意。目前文献中介绍的血清学诊检肉毒毒素较好的方法有:(1)免疫电泳扩散法:可在两小时内检出14—50个小鼠LD_(50)的A型肉毒毒素。(2)间接血凝和血凝抑制试验:在4—18小时内,血凝试验     

几种水稻植株中血凝活性物质的分布与变化及其稻胚凝集素的比较

开花前的水稻旗叶提取液中不含有血凝活力,但开花后旗叶提取液中能测得血凝活力,并随着开花后天数增加而逐渐升高。雄蕊和成熟花药中无血凝活力,开花前和开花早期的子房提取液中有血凝活性,开花5d后子房或胚乳中测不到血凝活性,但胚中血凝活性随种子发育而明显增加。分别从“寒丰”和“双丰一号”水稻成熟胚中分离得到凝集素,用电泳、免疫学方法和血凝试验表明两者的分子特性和血凝性质完全相同。     

酶联免疫吸附试验在传染病血清学方面的作用

<正>血凝抑制(HAI)、间接血凝(IHA),补体结合试验(CF),病毒中和试验(VN)或琼脂扩散试验已经成为应用于传染病中定量测定特异性抗原或抗体的常规方法。然而,这些方法都受到许多限制。操作程序复杂,需要较长时间,各种试剂和样品的预先处理或滴定,同时各个实验室之间缺乏统一的标准。     

大肠杆菌新菌毛抗原的研究Ⅶ.用凝集反应检验菌毛抗原

为了建立对新菌毛抗原F_(1987)的检验方法,本试验采用了玻板凝集反应和反向间接血凝试验及葡萄球菌A蛋白(SPA)协同凝集试验等凝集性试验方法;经用不同菌毛抗原菌株及对照试验等,证明了三种方法的可行性。玻板凝集反应和SPA协同凝集试验可用于F_(1987)新菌毛抗原的定性试验;反向间接血凝试验不仅能用于定性,而且能用于定量。三种方法均具有特异性,且简便易操作,便于广泛应用。     

关于双醛化被动血凝法若干问题的探讨

本文报道了探讨双醛化被动血凝法一些影响因素的结果,认为固定方法,致敏时的pH,致敬物的浓度,以及致敏红细胞的浓度,均对血凝滴度有影响。用纯化的乙型肝炎抗体致敏双醛化羊红细胞,作反向被动血凝试验,可以测出每毫升含3．73毫微克的乙型肝炎抗原。用纯化的乙型肝炎抗原致敏双醛化羊红细胞,作被动血凝法可检测,乙型肝炎抗体;在4℃保存的致敏红细胞,其滴度至少在4个半月内无明显变化。比较了对流免疫电泳、放射对流免疫电泳和反向被动血凝三种方法,用于检测病人血清中乙型肝炎抗原的敏感性和特异性。三种方法的相对敏感度相应为l：20：600。用这三种方法检测407侧患者血清样品的阳性率,相应为2．2％、11.3％和13．3％,反向被动血凝法敏感性最高,但特异性差;放射对流免疫法敏感度虽稍差,但特异性高。如果与抑制试验结合应用,反向被动血凝法是一种可以推广的简便检查方法。     

肾综合征出血热病毒血凝素的研究 Ⅱ.血凝和血凝抑制试验影响因素的探讨

本文探讨了肾综合征出血热病毒(HFRSV)血凝和血凝抑制(简称血抑)试验的主要影响因素,观察到HFRSV血凝素的制备要求较高,4℃保存的效果较好,血凝素对热似有一定的稳定性,血凝作用的条件较为严格,最佳pH在5.7—6.1,鹅血球较为敏感,氯仿法去除血清中非特异性抑制物有效而简便。通过试验条件的模索和方法的改进,使之适用于基层。     

快速检测成人腹泻轮状病毒(ADRV)抗原和抗体的研究

本文报道应用反相间接血凝和间接血凝试验技术快速检测ADRV抗原和抗体,一般在60分钟左右作出诊断。用ELISA方法和协同凝集试验作对照,结果一致。本实验与其它肠道病毒不发生交叉凝集反应,与菌痢、肠炎病人粪便和正常人粪便标本也不发生非特异性反应。实验准确可靠。本实验用间接血凝试验技术快速检测了ADRV抗体,观察了流行性腹泻病人血清中ADRV抗体持续时间。发现流行性腹泻患者发病后ADRV抗体存在半年以上,八个月有不同程度的下降,流行地区的健康人的ADRV抗体水平占33％左右,非流行地区正常人的ADRV抗体占11.3％左右。并用血凝抑制试验检测ADRV抗体,与小儿轮状病毒抗体无交叉反应。本试验对流行性腹泻的流行病学研究和临床诊断具有实用意义。     

犬细小病毒血凝的检测和血凝抑制试验方法的优化

目的优化血凝和血凝抑制（HA／HI）试验条件,提高HA／HI试验的稳定性和准确性。方法在不同的缓冲液、pH值、猪红细胞浓度、BSA浓度下进行HA／HI试验,选择合适的HA／HI条件。结果pH7．0、0．1％BSA、0．2mol／LPBS、1％猪红细胞可作为HA／HI试验合适的反应条件,猪血球可保存12d不影响试验结果。结论方法优化后稳定性增强、检测时间缩短、准确性提高。     

可溶性止血纱布与蛇毒血凝酶联合应用对止血效果的影响

目的 评价非离子化可溶性止血纱布与蛇毒血凝酶联合应用对手术出血及创面渗血的止血效果.方法 将涂布蛇毒血凝酶冻干品的可溶性止血纱布,与可溶性止血纱布、普通医用纱布、涂布蛇毒血凝酶的普通医用纱布以小鼠剪尾试验法和兔肝、脾创面止血法比较各组止血效果.结果 涂布血凝酶的可溶性止血纱布、可溶性止血纱布、普通纱布、涂布血凝酶的普通纱布分别缩短出血时间约56%、43%、10.2%、33%.结论 可溶性止血纱布和蛇毒血凝酶联合应用能获得良好的止血效果.     

间接血凝试验检测抗乙型肝炎表面抗原的抗体

间接血凝试验是将抗原吸附在红血球上,当遇到血清中存有相应抗体时,即可发生血球凝集。间接血凝试验检测抗乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的抗体(Anti-HBs)较琼脂扩散、对流电泳和补体结合试验敏感性高,而与放射免疫试验敏感性近似,且具有优于放射免疫的简     

一种诊断肾综合证出血热的新方法——血凝与血凝抑制试验

第四军医大学微生物教研室和安徽省医学科学研究所病毒室共同协作,首次用国内分离出的毒株建立了肾综合证出血热(HFRS)病毒血凝与血凝抑制试验。该法首先将国内各代表毒株和朝鲜出血热(KHF)病毒76/118株适应于乳鼠,在此基础上,参照汤一苇等报导的方法加以简化,从感染乳鼠脑中制备血凝素。对国内主要代表毒株血凝活性进行了研究。     

钩端螺旋体(三宝垄群巴托型)耐热、耐碱性红血球致敏物质用于血凝试验的研究

我们从钩端螺旋体(三宝垄群巴托型)中提出一种耐热性、耐碱性红血球致敏物质(Fss),并进行了血凝试验的研究。初步发现这种物质可使绵羊红血球致敏。致敏后的红血球能与相应的免疫血清发生血凝反应。三宝垄群巴托型钩端螺旋体血清与其它型红血球致敏物质抗原的血凝试验,具有较高的敏感性和一定的型特异性,除与钩端螺旋体的独立群独立型和澳洲群巴力科型有一定的凝集价外,与其它8个群钩端螺旋体代表型均不产生凝集。由此提供了用这种抗原物质作钩端螺旋体抗原型鉴定的可能性。钩端螺旋体红血球致敏物质血凝试验受温度、红血球浓度及红血球致敏时间等因素的影响而使血凝增强或减弱。     

脆弱拟杆菌粘附特性的研究

对４５株脆弱拟杆菌进行试验,及电镜检查,受检菌株对硫酸铵的盐凝及对人、兔和豚鼠红细胞的血凝试验一部阴性;ＨｅＬａ细胞粘附试验有１５．６％阳性,电镜下４／６株可见到菌毛结构,该菌毛不同于一般肠道病,与血凝和粘附试验无一致的关系。     

用反向间接血凝试验检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)

本文介绍一种简便、快速、敏感、适宜于一般临床化验室使用的反向间接血凝检测HBsAg方法。以丙酮醛、甲醛固定羊红细胞,在酸性条件下,用四种不同方法纯化的抗-HBs／豚鼠血清直接致敏。其中以免疫纯或固相吸收经DEAE-纤维素层析-葡聚糖凝胶G-200过滤的抗-HBs／豚鼠血消致敏效果最好,效价最高可达220。这种致敏羊红细胞检测HBsAg灵敏度高,特异性强,凝集模式稳定,重复性良好,比对流免疫电泳法的敏感度提高500倍左右。作者老对不川红细胞作了选择,比较了几种常用固定剂,井对致敏红细胞的pH、时间、温度、蛋白量等条忭进行了摸索。用反向间接血凝试验,免疫粘附血凝试验,放射免疫对流自显影三种敏感方法测定796份样品,阳性率分剧为28．57％、28.39％、27.18％。以反向间接血凝法稍高。     

流行性出血热病毒单克隆抗体的反向被动血凝和被动血凝抑制试验在诊断中的初步应用

本文用流行性出血热病毒单克隆抗体致敏羊血球,做反向被动血凝和被动血凝抑制试验。检查出血热病毒抗原和抗体,不仅敏感,性能稳定,而且操作简便、快速。     

兔出血症抗体间接ELISA检测试剂盒的研制与初步应用

目的建立检测兔病毒性出血症(RHD)血清抗体的间接ELISA方法并组装成试剂盒,进行初步应用。方法通过差速离心和蔗糖密度梯度离心提纯RHDV病毒粒子作为包被抗原,优化反应条件和筛选试剂,建立间接ELISA检测方法,组装试剂盒并对其总体性能进行评价。结果试剂盒敏感性为血凝抑制试验的4~32倍,重复性和特异性良好,保质期为4℃3个月。对105份兔血清进行随机检测,与血凝抑制试验的复核率为95%。结论本试剂盒可以在检测和科研中初步应用。     

麻疹病毒血凝素基因H的点突变与血凝作用的转变

经Ｂ９５ａ细胞系纯化分离的三株麻疹病毒Ｆｕ、ＩＭＡ、ＳＭＤ的血凝试验（ＨＡＤ）为阴性,但将它们分别感染Ｖｅｒｏ细胞并传代培养后其血凝试验由阴性转变为阳性。实验证明这种血凝表型的转变与血凝素基因Ｈ的表达与吸附无关。以ＰＣＲ扩增血凝素基因Ｈ和融合基因Ｆ,并分别进行序列分析。表明三株病毒在两种培养细胞中传代后其融合基因Ｆ的序列未发现差异。但血凝素基因Ｈ的序列却有显著的点突变并伴随血凝表型的转变。其中Ｆｕ     

抗体捕捉ELISA法检测特异性IgM在流行性乙型脑炎诊断中的应用

用抗体捕捉ELISA法(Mac ELISA)检测了临床疑似流行性乙型脑炎病人109例,75例阳性,阳性率为68.8％。经与血凝抑制试验和2-ME处理试验进行比较,结果MacELISA查出的75例阳性中,血凝抑制试验和2-ME处理试验也阳性者54例,阴性者21例,说明本法较常规方法敏感。有6例病人在发病第1天就可测到IgM抗体。第一周的阳性检出率为83.8％。对正常人、其它疾病病人和类风湿因子阳性者的血清测试结果均为阴性。 本试验底物采用3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)代替OPD,使方法的敏感性提高4～8倍。用NaN_3终止反应能保持蓝色数月不变,视差明显,易于肉眼观察。