3种模拟中医体征的体虚便秘大鼠模型建立及效果观察

目的：分别建立大鼠血虚、阴虚和阳虚便秘模型并比较其结肠动力、结肠水代谢、结肠黏液分泌和结肠水通道蛋白2（AQP2）的表达水平。方法：40只SD大鼠,雌雄各半,随机分为4组（n=10）：正常对照组（N）、血虚便秘组（XC）、阴虚便秘组（YC）、阳虚便秘组（YAC）。分别采用放血+洛哌丁胺、甲状腺素+洛哌丁胺、冰水刺激+洛哌丁胺建立血虚便秘、阴虚便秘、阳虚便秘大鼠模型,放血每周1次,药物每天灌胃1次,连续42 d。检测大鼠活动状态、体质量、大便性状、口肛传输时间、小肠推进率、粪便和结肠含水量等体征指标,对结肠组织进行AB-PAS染色和免疫组化染色,观察黏液分泌情况和AQP2表达水平。结果：与正常对照组比较,3种模型大鼠体重增长减慢;造模第40天自主活动量变化率由大到小依次为YC、XC和YAC;造模第30天出现固体硬质粪便,粪便评分升高顺序为XC、YC和YAC;口肛传输时间均显著延长、小肠推进率均显著降低（P < 0.05,P < 0.01）,肠动力减低顺序为YC、YAC和XC;粪便含水量均显著减少（P < 0.05,P < 0.01）,XC和YAC组大鼠结肠含水量显著减少（P < 0.05,P <0.01）,YC大鼠结肠含水量有减少趋势,结肠水代谢顺序为YC、YAC和XC;3种模型大鼠结肠黏膜层腺管和杯状细胞出现不同程度缩小,黏液分泌减少,分泌功能障碍顺序为YAC、YC和XC,且近端和远端结肠AQP2的表达均显著增加（P < 0.05,P < 0.01）,增加顺序近端结肠为YAC、YC、XC,远端结肠为YAC、XC和YC。结论：复合因素长期刺激均可建立符合中医体征的便秘大鼠模型,且各模型大鼠结肠运动、结肠水代谢、结肠黏液分泌和AQP2表达水平存在一定的差异。     

基于数据挖掘及动物实验探讨维持洛哌丁胺诱导便秘小鼠模型稳定性的研究

目的 通过文献数据挖掘与实验研究相结合的方法,挖掘洛哌丁胺诱导便秘小鼠模型造模特点及影响因素,为建立稳定的实验便秘模型提供一定参考。方法 文献研究部分以便秘及动物模型为主题词,检索中英文数据库,筛选使用洛哌丁胺诱导便秘小鼠模型的实验研究,提取资料并进行分析;动物实验部分,采用雄性C57BL/6小鼠,给予5 mg/kg及10 mg/kg的洛哌丁胺灌胃,每日给药1次。从含水率、首次黑便时间、小肠推进率等评价造模效果,观察洛哌丁胺不同剂量及给药时间对便秘小鼠的影响。结果 纳入符合标准的文献69篇,洛哌丁胺给药剂量多为5、10 mg/kg,多用灌胃给药,频率为给药1次,给药时间多为30 min。根据文献研究结果,实验部分从造模第1天开始,5 mg/kg及10 mg/kg组与空白组相比含水率显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05),而造模第7～14天,5 mg/kg组与10 mg/kg相比含水率明显升高(P<0.05),对比造模3、7、14 d后含水率变化情况,各模型组均在停药1 d后升高,至停药后14 d含水率均保持在较高水平;对比造模3、7、14 d的首次黑便时间,造模7、1...     

蜂蜜对洛哌丁胺诱导的便秘小鼠肠道微生态的影响

目的 观察蜂蜜对洛哌丁胺诱导的便秘小鼠肠道微生态的影响。方法 雄性Balb/c小鼠30只,随机分成两组：正常对照组（10只）、模型组（20只）,同时模型组再分为自然恢复组（10只）、蜂蜜组（10只）。应用洛哌丁胺制备便秘小鼠模型,分别于造模后、给蜂蜜后第5天对每只小鼠进行称重、采便;之后于第12天称重、采便,处死小鼠,进行小肠推进率、结肠组织血管活性肠肽（VIP）、P物质（SP）、5-羟色胺（5-HT）测定和肠道菌群检测。结果 洛哌丁胺造模后的第5天,模型组小鼠粪便含水量及体质量下降;蜂蜜组小鼠体质量下降,但粪便含水量无明显变化。蜂蜜治疗至第12天时,蜂蜜组小鼠与模型组比SP增加,粪便含水量及小肠推进率增加,蜂蜜组小鼠与模型组比VIP、5-HT变化不明显。此外蜂蜜干预后便秘小鼠肠道中拟杆菌属和厚壁菌属的细菌丰度有所降低,Alistipes obesi的含量增加。结论 蜂蜜对小鼠5-HT分泌水平无明显影响;可以提高便秘小鼠结肠组织中SP含量、增加粪便含水量、加快小肠推进率;调节肠道微生态失衡,对便秘发挥一定的治疗作用。     

裙带菜多糖及其寡糖对洛哌丁胺诱导便秘小鼠的肠道菌群的影响

目的 比较裙带菜多糖及其寡糖对洛哌丁胺引起小鼠便秘的肠道菌群的影响。方法 给予小鼠9.6 mg/kg浓度的洛哌丁胺每日2次连续灌胃14 d,分别给予裙带菜多糖和裙带菜寡糖,通过PCR-DGGE技术获得菌群指纹图谱和16S RNA测序,用Quantity One软件构建进化树,对图谱进行相似性及多样性分析,并选取差异条带进行测序。结果 裙带菜多糖可以明显改善小鼠由洛哌丁胺引起的便秘并且增加菌群多样性,裙带菜寡糖虽然也可以改善但效果不是很明显（对便秘和菌群有改善,但差异无统计学意义）。结论 裙带菜多糖及其寡糖可以（通过改善肠道菌群从而）改善由洛哌丁胺引起的便秘。     

益生菌联合膳食纤维改善便秘

目的建立标准化的洛哌丁胺诱导的大鼠便秘模型,分别使用益生菌、膳食纤维以及益生菌联合膳食纤维对模型进行干预,用以探讨益生菌联合膳食纤维对便秘的改善作用及其机制。方法洛哌丁胺腹腔注射(5mg/kg),连续5d,建立大鼠便秘模型,益生菌(2mL/只),膳食纤维(1g/kg),益生菌联合膳食纤维(2mL/只)干预7d。造模5d后,通过观察各组大鼠的粪便性状以及检测其粪便含水率,用以判断造模是否成功。第12天通过碳粉推进率实验检测各组大鼠小肠推进率。利用PCR-DGGE指纹图谱技术分析各组菌群多样性的改变。ELISA法测定各组大鼠结肠组织样品中VIP、P、Cl~-、Ca~(2+)浓度。Western blotting实验方法对各组大鼠结肠组织中AQP3、C-Kit进行含量检测。RT-PCR实验方法测定各组大鼠结肠组织中PKA、NK1的含量变化。应用Na~+-K~+-ATP酶活性测定试剂盒对各组大鼠结肠组织中Na~+-K~+-ATP酶活性进行测定。结果造模后模型组大鼠粪便干结呈颗粒状,粪便含水率显著下降,提示造模成功。经益生菌、膳食纤维以及益生菌联合膳食纤维干预7d后,与经自然恢复的便秘模型组相比,各组大鼠肠道菌群多样性升高,更接近正常大鼠,小肠推进率、VIP、P、Cl~-、Ca~(2+)、AQP3、C-kit、PKA、NK1以及Na~+-K~+-ATP酶活性均有不同程度的恢复,而其中益生菌联合膳食纤维组效果最为显著。结论益生菌和膳食纤维均可不同程度的改善便秘,而益生菌联合膳食纤维可显著改善便秘。     

雌、雄大鼠去势对HPA轴分泌功能影响的比较

目的观察去势手术后雌、雄大鼠在低性激素状态下,下丘脑—垂体—肾上腺(HPA)轴功能的变化,证实性激素可对HPA轴的功能产生影响,并分析这种影响是否存在性别差异和时长效应。方法选用SPF级8周龄SD大鼠80只(雌雄各半),体重180~220 g,采用完全随机设计法,利用随机数字表将其分为雄性模型组、雄性对照组、雌性模型组、雌性对照组,每组20只大鼠,适应性饲养一周后行去势手术,于造模后第3周及第13周心脏取血,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)含量并进行统计分析。结果经检测造模第3周雄性模型组大鼠血清CRH、CORT含量显著低于对照组(P0.01),血清ACTH含量低于对照组(P0.05);雌性模型组大鼠血清CRH、CORT含量均低于对照组(P0.05),血清ACTH含量有下降趋势。造模第13周,雄性模型组大鼠血清CORT含量显著低于对照组(P0.01),其他激素含量变化不明显;雌性模型组大鼠血清CORT含量低于对照组(P0.05),其他激素含量变化不明显。雌、雄模型组大鼠造模后第13周与第3周组内相比CRH、ACTH、CORT的含量均无统计学差异(P0.05)。结论无论雌、雄,去势均可造成大鼠HPA轴功能的紊乱,表现为外周血CRH、ACTH、CORT水平下降,雄激素对雄鼠HPA轴的影响要大于雌激素对雌鼠的影响。推测雄激素可能更加有利于上述三种激素的产生。当雌、雄大鼠处于稳定的低性激素状态,其HPA轴分泌功能不随着大鼠周龄的增长而发生改变。     

双胶润通胶囊润肠通便功能的研究

目的:探讨双胶润通胶囊的润肠通便作用的效果及剂量.方法:实验采用动物试验,将小白鼠(雌雄各半,体重18～22 g)分成两个实验组,每组50只,实验一组进行小肠推进试验,实验二组进行排便试验,时间均为7 d.按推荐剂量每人每日5 g设计,分为低、中、高3个剂量组,另设空白对照和模型对照组.结果:在不影响小鼠体重的情况下,双胶润通胶囊高剂量组小肠推进率与模型对照组比较差异均有显著性变化(P《0.05);3个剂量组小鼠的首便时间、粪便粒数均高于便秘模型对照组,差异具有极显著性差异(P《0.01);结论:双胶润通胶囊对小鼠小肠运动有增强作用,并能缩短小鼠首便时间、增加小鼠的粪便粒数与重量,即:具有润肠通便作用.     

当归对实验性血虚便秘模型小鼠结肠组织形态和黏液分泌的影响

目的：观察当归对实验性血虚便秘模型小鼠的治疗作用及其对小鼠结肠组织形态和黏液分泌的影响。方法：60只KM小鼠,雌雄各半,随机分为6组（n=10）：正常对照组、血虚便秘组、阳性对照组、当归高、中、低剂量组。除正常对照组小鼠外,其余各组小鼠灌胃给予复方地芬诺酯（DNP）,皮下注射乙酰苯肼（APH）,腹腔内注射环磷酰胺（CPA）,复制血虚便秘小鼠模型。从实验的第14天起,当归组小鼠灌胃给予不同剂量的当归煎液（16.67,8.33,4.17 g/kg）,阳性对照组给予常通舒颗粒（5 g/kg）,血虚便秘模型组和正常对照组小鼠给予等体积生理盐水,每日1次,连续28 d。观察小鼠一般状态,检测首粒黑便排出时间（FBDT）、粪便和结肠含水量,取结肠组织进行HE和AB-PAS染色,观察小鼠结肠组织形态变化和黏液分泌情况。结果：与正常对照组比较,血虚便秘组小鼠出现血虚和便秘体征,FBDT显著延长、粪便和结肠含水量显著降低（P<0.01）,结肠黏膜和大肠腺萎缩、黏膜层变薄（P<0.01）,黏液分泌减少。与血虚便秘模型组比较,3个剂量的当归均能改善血虚便秘体征,显著缩短FBDT（P<0.05,P<0.01）,显著升高小鼠结肠含水量（P<0.05,P<0.01）;高、中剂量的当归能显著升高小鼠粪便含水量（P<0.05）;3个剂量当归均能改善血虚便秘模型小鼠的结肠黏膜和大肠腺萎缩,增加结肠黏液分泌,改善结肠润滑功能。结论：当归可改善结肠黏膜萎缩、增加结肠黏液分泌,从而软化粪便促进粪便排出。     

鸟苷酸环化酶C激动剂对便秘小鼠肠道菌群的影响

通过动物模型和16S rDNA高通量测序,探究鸟苷酸环化酶C（guanylate cyclase C,GC-C）激动剂（利那洛肽）对便秘的治疗作用和肠道菌群的影响,以期为便秘的治疗提供理论依据。

随机将30只雄性C57BL/6小鼠平均分为对照组、便秘模型组及治疗组,每组10只。其中对照组小鼠给予生理盐水灌胃,便秘模型组和治疗组小鼠给予洛哌丁胺灌胃构建便秘模型,造模成功后治疗组小鼠给予GC-C激动剂灌胃。干预结束后检测各组小鼠粪便含水率、首粒黑便排出时间、小肠推进率以及血清中P物质（Substance P,SP）、血管活性肠肽（vasoactive intestinal peptide,VIP）水平;使用16S rDNA高通量测序分析3组小鼠肠道菌群特点和差异。

与便秘模型组相比,治疗组小鼠粪便含水量、小肠推进率显著提升（t = 3.418,P = 0.003 1;t = 3.141,P = 0.005 6）,首粒黑便排出时间缩短（t = 4.756,P = 0.000 2）;血清VIP水平降低（t = 4.894,P = 0.000 5）,SP水平有升高趋势。与对照组相比,便秘模型组小鼠肠道菌群多样性显著降低,门水平上,Firmicutes丰度升高和Bacteroidetes丰度降低;属水平上,便秘模型组小鼠Muribaculaceae、Lachnospiraceae、Akkermansia丰度降低（均P＜0.050 0）,Allobaculum、Turicibacter、Clostriclium丰度升高（均P＜0.001 0）,通过GC-C激动剂干预可以改善便秘引起的菌群改变,并显著提高了Lactobacillus丰度（P = 0.030 5）。

GC-C激动剂可能通过影响血清中SP、VIP水平,并调节便秘小鼠的肠道菌群趋于正常,增加Lactobacillus、Muribaculaceae等产短链脂肪酸菌群丰度,提高肠道动力,从而起到改善便秘的作用。

     

肠道内容物和黏膜菌群对枳实导滞汤剂治疗食积便秘的响应差异

目的 通过枳实导滞汤剂对食积便秘小鼠肠道内容物和黏膜菌群的影响差异探讨肠道菌群在枳实导滞汤剂干预食积便秘中的作用。方法 采用网络药理学预测枳实导滞汤剂缓解便秘的药物成分和潜在功能;通过高脂高蛋白饮食结合腹腔注射盐酸洛哌丁胺制备食积便秘小鼠模型,造模成功后,治疗组小鼠给予枳实导滞汤剂0.4 g/mL,正常组和模型组给予等剂量蒸馏水,每天2次,连续7 d。治疗结束后,分别收集各组小鼠肠道内容物和黏膜,通过高通量测序技术分析肠道菌群。结果 网络药理学分析表明,从枳实导滞汤剂中共获得128个潜在活性成分,并获得1 379个便秘相关的靶点,药物和便秘检测到共同靶点74个。食积便秘小鼠肠道内容物与黏膜菌群相比,ASV（扩增子序列变异）数量和多样性均较高;Beta多样性分析显示黏膜和内容物菌群差异较大。模型组内容物样本中富集Prevotella、Akkermansia、Clostridium、Jeotgalicoccus及Planococcaceae Staphylococcus,黏膜样本中富集Candidatus arthromitus、Bacillus及Acinetobacter。治疗组内容物样...     

Investigation of the mechanism of temperature sensitivity of the electroreceptors of ampullae of lorenzini

In experiments on Black Sea skates (Raja clavata), the potential of the receptor epithelium of the ampullae of Lorenzini and spike activity of single nerve fibers connected to them were investigated during electrical and temperature stimulation. Usually the potential within the canal was between 0 and –2 mV, and the input resistance of the ampulla 250–400 k. Heating of the region of the receptor epithelium was accompanied by a negative wave of potential, an increase in input resistance, and inhibition of spike activity. With worsening of the animal's condition the transepithelial potential became positive (up to +10 mV) but the input resistance of the ampulla during stimulation with a positive current was nonlinear in some cases: a regenerative spike of positive polarity appeared in the channel. During heating, the spike response was sometimes reversed in sign. It is suggested that fluctuations of the transepithelial potential and spike responses to temperature stimulation reflect changes in the potential difference on the basal membrane of the receptor cells, which is described by a relationship of the Nernst's or Goldman's equation type.I. P. Pavlov Institute of Physiology, Academy of Sciences of the USSR, Leningrad. I. M. Sechenov, Institute of Evolutionary Physiology and Biochemistry, Academy of Sciences of the USSR, Leningrad. Pacific Institute of Oceanology, Far Eastern Scientific Center, Academy of Sciences of the USSR, Vladivostok. Translated from Neirofiziologiya, Vol. 12, No. 1, pp. 67–74, January–February, 1980.     

Principles of organization and evolution of systems of regulation of functions

Evolution of living organisms is closely connected with evolution of structure of the system of regulations and its mechanisms. The functional ground of regulations is chemical signalization. As early as in unicellular organisms there is a set of signal mechanisms providing their life activity and orientation in space and time. Subsequent evolution of ways of chemical signalization followed the way of development of delivery pathways of chemical signal and development of mechanisms of its regulation. The mechanism of chemical regulation of the signal interaction is discussed by the example of the specialized system of transduction of signal from neuron to neuron, of effect of hormone on the epithelial cell and modulation of this effect. These mechanisms are considered as the most important ways of the fine and precise adaptation of chemical signalization underlying functioning of physiological systems and organs of the living organism