胃泌素放射免疫测定的几个关键问题

胃泌素(gastrin)是一种具有较重要生理功用的消化道激素。胃泌素放射免疫测定(RIA)对于消化系统生理和病理的研究及临床诊断都有重要的意义。胃泌素RIA是1968年由McGuigan首次建立的,目前已发展成为一项比较成熟与可     

杆状病毒重组蛋白金鱼生长激素Ⅰ的纯化

利用放射免疫分析(RIA)证实了含金鱼生长激素ⅠcDNA的重组病毒在感染细胞96h后所表达的生长激素达到最高水平,平均每105个细胞可分泌金鱼生长激素Ⅰ最高达288.07ng;平均每克干虫可产生金鱼生长激素Ⅰ 925.3μg。从感染重组病毒的无血清细胞培养基中纯化生长激素Ⅰ,平均每毫升培养基可纯化具免疫活性纯度95%以上的金鱼生长激素Ⅰ达664.224ng。纯化后蛋白的N\|末端首20个氨基酸序列测定的结果表明其信号肽得到了准确的切割。从而保障了表达蛋白的生物活性。     

生长激素和催乳素放射免疫测定法的建立与应用

目的：建立测定大鼠垂体和血浆中生长激素（GH）和催乳素（PRL）含量的高特异性、高灵敏度的双抗放射免疫测定（RIA）法;研究急性低氧对垂体激素GH和PRL的作用。方法：用氯胺－T法进行抗原放射性碘标记;采用平衡饱和加样程序的双抗RIA法测定。结果：用该方法测定急性低氧（0．5h）时血浆和垂体GH和PRL含量,7km低氧,垂体GH含量明显升高（P＜0．05）,血浆则相反;7km低氧,明显降低垂体和血浆PRL含量（P＜0．01）;而5km低氧对GH和PRL的作用与对照组比无统计学差异。结论：本双抗RIA法具有高特异性、高灵敏度及简便易行等特性;用该法测定提示急性低氧可抑制大鼠GH和PRL的分泌。     

β2-微球蛋白放射免疫测定的质量控制

放射免疫分析法(RIA)在临床检验中占有重要地位,目前人们越来越重视RIA结果的准确性和可靠性。本文以β₂mG为例阐述建立RIA质量控制方法和制定质量控制指标。采用自制质控血清和国产微机放免仪的数据处理程序,均能满足WHO对质控的要求。     

植物样品ABA RIA中亲脂色素干扰的去除方法

用放射免疫法(RIA)测定植物内源激素与生物试法或常规的理化方法相比,具有快速、简便,专一等特点,因此不需要对植物样液的ABA进行高度的捉纯。但在使用     

高亲和力抗血管紧张素Ⅱ抗血清的制备——五种免疫原的制备及其免疫效果的比较

为了提高放射免疫分析法(RIA)的灵敏度,达到度量人外周血浆中血管紧张素Ⅱ(ATII)的要求,必需采用亲和力特别高的特异性抗ATII 抗血清。我们使用不同的载体和结合方法,制备了五种ATIIa 免疫原,以提高其抗原性。它们是:1)聚乙烯吡咯酮吸附血管紧张素II 酰胺(ATIIa);2)碳二亚胺缩合兔血清白蛋白与ATIIa;3)戊二醛(GDA)结合牛血清白蛋白(BSA)与ATIIa;4)GDA 结合多聚赖氨酸(PL)与ATIIa;5)碳二亚胺缩合琥珀酰化多聚赖氨酸(PL-Succ)与ATIIa。在分组免疫家兔(皮内多点或多途径注射)后,用生物鉴定、被动血球凝集试验和放射免疫稀释曲线法检测及跟踪抗血清的抗ATII 效价。并用RIA 法以Scatchard 图求亲和常数K_(?)统计显示在组间存在显著差别,以BSA-GDA-ATIIa 及PL-Succ-ATIIa 效果为佳。在3～5个月内成功地获得了K_a>10~(10)升/克分子,适用于ATII 的放射免疫测定的一些抗血清。其中之一已经满意地用于建立一个特异、灵敏的RIA,可以直接测定人体外周血中低浓度的ATII。另一些也有相似的能力。对工作中涉及一些问题,如免疫原制备、影响抗血清质量的因素以及抗ATII 检测方法等,作了初步的比较和讨论。本试验结果,从抗原消耗量、抗体产生速度、成功率及抗血清的效价和亲和力等方面,看来较某些报告有优越之处。     

检测脂肪酸化胰岛素放射免疫分析方法的建立

目的:建立一种高灵敏度、高特异性、操作简单快捷的放射免疫分析法(RIA),用于检测比格犬血浆中的脂肪酸化胰岛素。方法:所用试剂盒主要以豚抗胰岛素抗体为主要特异性试剂,利用均相竞争抑制原理,采用平衡竞争法对比格犬血浆进行直接测定。在该系统中加入未标记的标准品或样品,则标记抗原和非标记抗原将竞争有限且定量的抗体结合位点。结果:建立了检测脂肪酸化胰岛素的RIA法并进行了确证,方法的线性范围为3.125~800μU/mL,最低检测限为3.125μU/mL,批内和批间精密度分别为4.5%~7.0%和3.9%~7.6%,冻融稳定性和稀释稳定性等良好。结论:方法学确证结果表明,本研究建立的脂肪酸化胰岛素RIA检测方法符合新生物制品临床前药代动力学研究指导原则要求,可用于脂肪酸化胰岛素在临床前药代动力学试验的检测。     

放射免疫测定法

放射免疫测定(Radioimmunoassay,简称RIA)是六十年代发展起来的一种体外分析新技术。它综合了放射性同位素的灵敏性与抗原-抗体反应的特异性两大优点,因此样品(如血、尿)无需提纯,而且能检出毫微克甚至微微克量的待测物质     

β_2-微球蛋白放射免疫测定的质量控制

放射免疫分析法(RIA)在临床检验中占有重要地位,目前人们越来越重视RIA结果的准确性和可靠性。本文以β_2mG为例阐述建立RIA质量控制方法和制定质量控制指标。采用自制质控血清和国产微机放免仪的数据处理程序,均能满足WHO对质控的要求。     

超微量荧光抗体膜抗原法(FAMA)测定麻疹抗体

<正>麻疹抗体的测定,现在一般采用红血球凝集抑制法(下称HI法),该法和中和抗体测定法相关,在实践中被广泛使用。但在评价疫苗接种后的抗体效价上,灵敏度存在问题。 灵敏度好的麻疹抗体测定法除中和法(下称NT法)外,还有放射免疫测定法(下称RIA法)、酶联免疫吸附测定法(下称ELISA法)。然而NT法     

免疫测定仪近期国际市场预测

临床实验室将兴起利用抗体一抗原反应检测和治疗疾病的热潮,预计到1990年,有关的仪器销售额将增加一倍。1984年销售额为1.47亿美元,今后的年增长率为25%。无法与用放射免疫测定(RIA)装备的大实验室竞争的较小的实验室是酶免疫测定(EIA)设备的主顾。EIA 测定仪器占1983年免疫测定仪市场的52%。即0.55亿美元,1985年估计     

抗精氨酸加压素血清的制备及其初步应用

用戊二醛为偶联剂将精氨酸加压素(AVP)与甲状腺球蛋白连接合成AVP免疫原,免疫家兔获得了高滴度和良好特异性与亲和力的抗精氨酸加压素血清。用此抗血清进行了大鼠和豚鼠下丘脑内AVP样免疫反应物质的定位研究,测定了正常人血浆及大鼠部分脑区AVP免疫活性物质含量,结果与国外报道相近,初步应用结果表明此抗血清适用于放射免疫测定(RIA)和免疫细胞化学(ICC)研究。     

双链RNA技术在植物病毒研究中的应用

含ＲＮＡ基因组的植物病毒在复制时会产生双链ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）。本文介绍了用ＣＦ－－１１纤维素粉提取ｄｓＲＮＡ的步骤,并列举了ｄｓＲＮＡ在植物病毒研究中的应用,其主要应用有（１）用于检测植物病毒;（２）用于病毒株系分化;（３）用于病毒卫星ＲＮＡ及亚基因组ＲＮＡ研究;（４）用于侵染性测定及病毒基因组功能研究等。     

男性随意尿LH、FSH和睾酮的测定——一种观察垂体—睾丸功能的简易放免方法

用放射免疫方法(RIA)测定血清或血浆中LH、FSH和睾酮的含量已经成为观察男性垂体—睾丸功能变化的一个重要手段。但血样采集有损人体而不易被人接受;特别是需要连续采样时倍感困难。此外,由于这些生殖激素本身的生理波动,仅仅测定一次血样并不能完全反映其变化的真实状况。因此,寻找一种简单且能替代血清测定的方法对临床诊断和治疗将会大有帮助。尿液易采集,而且测定尿液中LH、FSH和睾酮的变化有可能得到与测定血清相近的资料。Baghdassarian等人就曾发现24小时尿中     

单克隆抗体——一种制备血清学试剂的新工艺

<正>多年来抗体在多种疾病的诊断上具有重要作用。放射免疫测定和其它免疫学检测方法被广泛地运用在诊断试验室以检测并定量药物、细菌或病毒制品、肿瘤抗原和循环中的免疫球蛋白。然而免疫学检测方法往往由     

黑曲霉病毒含量与寄主葡萄糖淀粉酶产量之间的相关性

我国工业上广泛应用的葡萄糖淀粉酶生产菌黑曲霉(Aspergil nider)体内含有大量病毒。选择在育种筛选中葡萄糖淀粉酶产量不同的茁株,挑选不同方式保藏传代造成葡萄糖淀粉酶产量不同的菌株．纠及经化学试剂处理后葡萄糖淀粉酶产量不同的菌株。分别进行病毒提取,电镜观察、免疫双扩散、’H标记放射免疫测定病毒在体内的滴定度,’H标记后提取病毒及病毒核酸测定对体内病毒核酸的参入,及Pas—ELIsA(酶联A蛋白夹层酶联免疫吸附法Staphyllococ亡us pⅢeln^邮dwich E LlsA)与sA—test(病毒葡萄球菌共凝集试验Virus sta—phlococcal co-aggluintion test)检测病毒含量,并且测定了葡萄糖淀粉酶的产量．证实了黑曲霉细胞内病囊的含量与黑曲霉的葡萄铯淀粉酶产量之间呈正相关性。     

内分泌学和免疫学的关系

内分泌学的进展很大一部分受益于现代免疫学,例如放射免疫测定法的建立,导致肽类激素研究的进展,从而改变了整个内分泌学的面貌。又如血中一些特异性抗体的发现,改变了对一些内分泌疾病的认识。一、免疫学技术在内分泌学中的应用Yalow和Berson第一次提出的放射免疫测定法(RIA)就是应用于内分泌学的。此法的特点是将抗体的特异性和放射活性测定的敏感性相结合。此法已广泛应用;但有许多缺点,主要是因使用放射性物质带来的损害及标记物的不稳定性,因而需寻找其他的标记物。近十年来应用较广的其他标记法是用荧光团标记的荧光免疫测定法和用酶标记的酶免疫测     

大鼠血浆β—内啡肽放射免疫测定

β内啡肽(β Endorphin,β-EP)在脑内分布广泛,对神经、内分泌、体温、呼吸、心血管、疼痛及免疫等都有一定的调节作用。当前,β-EP 的研究已成为神经内分泌领域中最受人重视的课题之一。鉴于β-EP 有种属特异性问题,本工作旨在建立大鼠血浆β-EP 的放射免疫测定(RIA)。 β-EP 的抗血清制备及其放射免疫测定,参照祝元祥、张崇理的工作。 大鼠断头后,将躯干血(约4—5毫升)收入预冷的,加有EDTA Na_2 12毫克、杆菌肽 400微克的塑料指形管中,离心(4℃,2,000xg)15分钟,取血浆贮存于-40℃ 冰箱中待测。     

HCG诱导排卵期间黄鳝血浆6-酮-前列腺素F1α含量的变化

在已研究过的鱼类中,用放射免疫分析法(RIA)所检测的PGS仅限于前列腺素E(PGE)和前列腺素F(PGF),而其他前列腺素类化合物例如前列环素(PGI2)等与鱼类排卵的关系,则未见报道。本文探讨PGI2在排卵中的作用,为鱼类排卵机制的研究积累资料。       

亚洲玉米螟末龄幼虫促前胸腺激素与蜕皮甾类激素滴度的变化

用放射免疫分析法(Radioimmunoassay,RIA)以12小时间隔测定了亚洲玉米螟Ostrinia tfurnacalis末龄非滞育幼虫血淋巴中蜕皮甾类激素滴度.通过前胸腺体外培养,以12小时间隔测定了前胸腺体外分泌活性的变化.发现二者的变化在相同发育阶段是一致的.在亚洲玉米螟上建立了促前胸腺激素(PTTH)体外测定法,并用此法以24小时间隔测定了末龄幼虫脑和血淋巴中PTTH滴度.发现血淋巴中PTTH滴度在末龄第5和7天各有一高峰,脑中只在第5天有一高峰.