皖南尖吻蝮蛇毒出血毒素IV的纯化与初步鉴定

从皖南尖吻蝮蛇毒液中经ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ和Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ Ｓ－２００两步凝胶柱层析首次纯化出一种中分子量血毒素（简称ＡａＨⅣ）。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和等电聚焦凝胶电泳测定其分子量为４４ｋＤ,等电点为ｐＨ５．０。从５００ｍｇ粗毒中可获得２０ｍｇ ＡａＨⅣ纯品。ＡａＨⅣ有较强的出血活性,最小出血剂量（ＭＨＤ）为０．４μｇ。     

湖南尖吻蝮蛇毒两个出血毒素的纯化和理化性质

经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５凝胶过滤,ＱＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０和ＣＭ－ＳｅｐｈａｄｅｘＣ－２５离子交换层析的步骤,从湖南产尖吻蝮（Ｄｉｅｎａｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎａｃｕｔｕｓ）蛇毒中纯化出两个出血毒素（ＤａＨＴ－１和ＤａＨＴ－２）．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得分子量均为２３．５ｋＤ,ＩＥＦ－ＰＡＧＥ测得等电点分别为５．６和５．２,两者具有相似的氨基酸组成,其中酸性氨基酸（Ａｓｘ,Ｇｌｘ）分别占２３％和２４％,ＤａＨＴ－１和ＤａＨＴ－２的最小出血剂量（ＭＨＤ）分别为０．５μｇ和０．８μｇ。都具蛋白水解酶活性,无对ＴＡＭＥ,ＢＡＥＥ的水解活性和ＰＬＡ２酶活性．两者的蛋白水解酶活力与出血活性并非正相关．ＤａＨＴ－１和ＤａＨＴ－２的最适温度分别为３５℃和４０℃,最适ｐＨ为６－９,对热均不稳定,温度高于６０℃活性完全丧失。金属离子的分析显示每摩尔毒素蛋白约含０．５ｍｏｌ的Ｚｎ,１ｍｏｌ的Ｃａ,较多的Ｎａ、Ｋ、Ｍｇ,不含Ｃｏ。     

地衣芽孢杆菌β—甘露聚糖酶的纯化及其性质的研究

地衣芽孢杆菌１Ｂａｃｉｕｕｓ Ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）ＢＬ－３０６产生的胞外β－甘露聚糖酶经硫酸铵分级盐析,ＤＥＡＥ－纤维素柱层析。Ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ｇ１００柱凝胶过滤和ＤＥＡＥ－纤维素柱再层析分离纯化,得到ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）均一样品。用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得纯化后β－甘露聚糖酶分子量为２６０００道尔顿。用凝胶等电聚焦电泳（ＰＡＧＥＩＥＦ）测得等电点ＰＩ为５．０。该酶     

南方鲇碱性磷酸酶的分离纯化及部分性质的研究

用正丁醇抽提,硫酸铵分级沉淀,ＤＥＡＥ－纤维素和Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ Ｓ－２００柱层析,从南方鲇（Ｓｉｌｕｒｕｓ ｍｅｒｉｄｉｏｎａｌｉｓ Ｃｈｅｎ）肠粘膜中提取出碱性磷酸酶（ＡＫＰ）。提纯倍数为３９．５０倍,比活为６８．３５μ／ｍｇ蛋白,提取酶液经ＰＡＧＥ和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ只呈现一条区带。该酶的分子量为１３２ １４０,Ｎ末端氨基酸为门冬氨酸,最适ｐＨ为１０．１０,７．５＞ｐＨ＞１１．５时不稳定,最     

地衣芽孢杆菌β—甘露聚糖酶的纯化及酶学性质

地衣芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）ＮＫ－２７菌株发酵产生的β－甘露聚糖酶（β－ｍａｎｎａｎａｓｅ）经硫酸铵盐析沉淀,两次ＤＥＡＥ纤维素和Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１００离子交换柱层析以及制备ＰＡＧＥ等步骤,获得了凝胶电泳均一的样品。用ＳＤＳ－凝胶电泳测得纯化后的β－甘露聚糖酶分子量为２６ｋＤ,用凝胶聚焦电泳测得等电点Ｐ１为５．０。酶反应的最适ｐＨ为９．０,最适温度为６０℃,稳     

地衣芽孢杆菌β－甘露聚糖酶的纯化及酶学性质

地衣芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）ＮＫ－２７菌株发酵产生的β－甘露聚糖酶（β－ｍａｎｎａｎａｓｅ）经硫酸铵盐析沉淀,两次ＤＥＡＥ纤维素和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００离子交换柱层析以及制备ＰＡＧＥ筹步骤,获得了凝胶电泳均一的样品。用ＳＤＳ－凝胶电泳测得纯化后的β－甘露聚糖酶分子量为２６ｋＤ,用凝胶聚焦电泳测得等电点ＰＩ为５．０。酶反应的最适ｐＨ为９．０,最后温度为６０℃,稳定ｐＨ为６．０—９．０,稳定温度为４０℃。金属离子中Ｍｇ￣（２＋）、Ｃａ￣（２＋）、Ｆｅ￣（２＋）、Ｎｉ￣（２＋）对该酶有一定的激活作用;而Ｓｎ￣（２＋）、Ｚｎ￣（２＋）、Ａｌ￣（３＋）、Ａｇ￣＋和Ｈｇ￣（２＋）对该酶有强烈的抑制作用。ＮＫ－２７菌株的β－甘露聚糖酶对魔芋葡萄甘露聚糖和角豆胶半乳甘露聚糖的Ｋｍ值分别为７．１４和５．５６ｍｇ·ｍｌ￣（－１）;Ｖ＿（ｍａｘ）分别为２００．５３和１５７．４５μｍｏｌ·ｍｇ￣（－１）·ｍｉｎ￣（－１）。     

芦荟凝集素的分离、纯化和部分性质的研究

新鲜芦荟叶（Ａｌｏｅ ｖｅｒａ Ｌ．ｖａｒ．ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ（Ｈａｗ．）Ｂｅｒｇｅｒ）于室温用低浓度ＮａＣｌ溶液提取。离心和透析后,经Ｎ－乙酰氨基葡萄糖０Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ亲和层析,分离纯化出芦荟凝集素（ＡＣＬ）。用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００测表观分子量为３５ＫＤ,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ出现两条色带;染色 ;宽带和较浅的罕带。亚基分子量分别为１５ＫＤ和２０ＫＤ。能专一性凝集兔血细胞和人血红细胞     

枸杞子糖蛋白的分离纯化、物化性质及糖肽键特征

从宁夏枸杞子提取得到的粗多糖,经ＤＥＡＥ－Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００柱层析,得到均一的枸杞子糖蛋白ＬｂＧＰ。分子量由ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定为８８ｋｄ,糖含量为７０％,糖组成为Ａｒａ：Ｇａｌ：Ｇｌｃ＝２．５：１．０：１．０（摩尔比）,并含有其他１８种天然氨基酸。初步分析表明ＬｂＧＰ是Ｏ－连接的糖蛋白。     

苏云金杆菌超氧化物歧化酶的纯化和性质研究

苏云金杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）９１６５超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）,经硫酸铵分级沉淀、ＳｅｐｈａｄｅｘＦ－１００凝胶过滤及非变性凝胶电泳（ＰＡＧＥ）三步纯化,纯酶比活力为４３８８ｕ／ｍｇ,属Ｍｎ－ＳＯＤ,分子量为４７．９ｋｕ,由二个亚基组成,含１９种氨基酸。     

湖南尖吻蝮蛇毒两个出血毒素的纯化和理化性质

经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５凝胶过滤,ＱＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０和ＣＭ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｃ－２５离子交换层析的步骤,从湖南产尖吻蝮蛇毒中纯化出两个出血毒素。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得分子量均为２３．５ｋＤ,ＩＥＦ－ＰＡＧＥ测得等电点分别为５．６和５．２,两者具有相似的氨基酸组成,其中酸性氨基酸分别占２３％和２４％。ＤａＨＴ－１和ＤａＨＴ－２的最小出血剂量（ＭＨＤ）分别为０．５μｇ和０．８μｇ。都具     

鲁西北平原高产夏玉米生育模式

鲁西北平原高产夏玉米生育模式董振国,鲁全国（中国科学院地理研究所,北京１００１０１）ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔＭＯｄｅｌｏｆＨｉｇｈＹｉｅｌｄｉｎｇＳｕｍｍｅｒＣｏｒｎｏｎＮｏｒｔｂｗｅｓｔＳｋａｎｄｏｎｇＰｌａｉｎ￥ＤｏｎｇＺｈｅｎｇｕｏ;ＬｕＱｕａｎｇｕｏ（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＧｅｏｇｒａｐｈｙ,ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ,Ｂｅｉｊｉｎｇ１００１０１）,ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＥ－ｃｏｌｅｇｙ,１９９３,１２（２）：６９－７２．Ｅｒｅｃｔａｎｄｐｌａｎｅｖａｒｉｅｔｉｅｓｏｆｃｏｒｎｈａｖｅａｌｅａｆｉｎｃｌｉｎａｔｉｏｎｏｆ６５°ａｎｄ５０°ａｎｄｔｈｅｉｒｏｐｔｉｍｕｍｐｌａｎｔｉｎｇｄｅｎｓｉｔｉｅｓａｒｅ７５０００－８２０００ａｎｄ５２５００－６００００ｓｔｅｍｓ·ｈａ￣（－１）．Ｔｈｅｌｅａｆａｒｅａｉｎｄｅｘａｔｅａｒｓｐｒｏｕｔｉｎｇｓｔａｇｅａｎｄｌｅａｆａｒｅａｄａｙ（ＬＡＤ）ｆｏｒｔｈｅｆｏｒｍｅｒａｒｅｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ５．５－６．０ａｎｄ３６０－４００,ｗｈｉｌｅｔｈｏｓｅｆｏｒｔｈｅｌａｔｔｅｒａｒｅ３．５－４．０ａｎｄ２６０－３００．ＴｈｅＬ     

尖吻蝮蛇毒内一种新抗凝血因子ACFⅡ的纯化及特性

利用阴离子交换层析、凝胶过滤及阳离子交换层析三步方法,从皖南尖吻蝮蛇毒中分离纯化到一个新的抗凝血因子ＡＣＦⅡ（ａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒⅡ）。纯化的ＡＣＦⅡ在ＰＡＧＥ、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＩＥＦ－ＰＡＧＥ图谱上均呈单一区带。ＡＣＦⅡ由两条分子量为１４．６ｋＤ的肽链通过二硫键连接在一起,其等电点为７．０。ＡＣＦⅡ具有显著的抗凝血活性,在体外延长ＰＰＴ时间的最终浓度为０．４ｍｇ／Ｌ。Ａ     

系统感染TMV的番茄叶胞外β-1,3-葡聚糖酶

系统感染ＴＭＶ （ｔｏｂａｃｃｏ ｍ ｏｓａｉｃ ｖｉｒｕｓ）的番茄（Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｏｎ ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍ Ｍｉｌｌ．）叶胞外蛋白提取液经冰冻干燥浓缩、－ ２０℃丙酮沉淀、ＣＭ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｃ－２５离子交换层析、ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ－２５离子交换层析和Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－７５凝胶层析纯化,获得ＰＡＧＥ均一的β－１,３－葡聚糖酶．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ证明,它包含分子量为３６ ｋＤ 和２７ ｋＤ的两个同工酶．以昆布多糖为底物,酶的最适ｐＨ 在４．８—５．２之间,在ｐＨ ４—８稳定;酶的最适温度在３０—４０℃之间,在４０℃保温１ｈ 后酶活性不变;Ｋｍ 值为９．２ ｍ ｇ／ｍ Ｌ．在系统感染ＴＭＶ 的番茄叶胞外蛋白提取液中,有分子量为２２ ｋＤ、２７ ｋＤ和３６ ｋＤ的３个β－１,３－葡聚糖酶同工酶     

黑曲霉ρ-葡萄糖甘酶的提纯与性质

从黑曲霉Ａｓｐｅｒｇｉｌｕｓｎｉｇｅｒ发酵液中分离提纯了β－葡萄糖苷酶。提纯步骤通过（ＮＨ４）２ＳＯ４分级沉淀,ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００等三步纯化,得到凝胶电泳均一的β－葡萄糖苷酶。该酶的最适ｐＨ４．５,最适温度６０℃,Ｋｍ为０．４４（ＮＰＧ）,并有较好的热稳定性。用ＳＤＳ－凝胶电泳法和凝胶色谱法测得该酶的分子量为１２００００     

枯草芽孢杆菌中性内切β-甘露聚糖酶的纯化及性质

三草芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）ＢＭ９６０２产生的中性内切β－甘露聚糖酶（ｅｎｄｏ－β－１,４－Ｄ－ｍａｎｎａｎ ｍａｎｎａｎｏｈｙｄｒｏｌａｅｓ,ＥＣ,３．２．１．７８）经硫酸铵分级沉淀、ＤＥＡＥ－纤维素（ＤＥ２２）离子交换柱层析,得到电泳纯的样品,提纯了４５．５倍,收率为５．９％。用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得该酶的分子量为３５ｋＤ。用ＰＡＧＥＩＥＦ测得其等电点ｐⅠ为４．５。酶反应的     

地衣芽孢杆菌β－甘露聚糖酶的纯化及酶学性质

地衣芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）ＮＫ－２７菌株发酵产生的β－甘露聚糖酶（β－ｍａｎｎａｎａｓｅ）经硫酸铵盐析沉淀,两次ＤＥＡＥ纤维素和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００离子交换柱层析以及制备ＰＡＧＥ筹步骤,获得了凝胶电泳均一的样品。用ＳＤＳ－凝胶电泳测得纯化后的β－甘露聚糖酶分子量为２６ｋＤ,用凝胶聚焦电泳测得等电点ＰＩ为５．０。酶反应的最适ｐＨ为９．０,最后温度为６０℃,稳定ｐＨ为６．０—９．０,稳定温度为４０℃。金     

苏云金杆菌超氧化物歧化酶的纯化和性质研究*

苏云金杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）９１６５超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）,经硫酸铵分级沉淀、ＳｅｐｈａｄｅｘＦ－１００凝胶过滤及非变性凝胶电泳（ＰＡＧＥ）三步纯化,纯酶比活力为４３８８ｕ／ｍｇ,属Ｍｎ－ＳＯＤ,分子量为４７．９ｋｕ,由二个亚基组成,含１９种氨基酸。     

大熊猫乳酸脱氢酶同工酶H_4的分离纯化和某些性质的研究

采用８－（６－氨己基）－氨基－５＇－ＡＭＰＳｅｐｈａｒｏｓｅ亲和层析法和ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ离子交换层析法从大熊猫心肌中分离纯化出了乳酸脱氢酶同工酶Ｈ４．纯化的大熊猫ＬＤＨ－Ｈ４,比活为４４５Ｕ／ｍｇ蛋白,经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ,ＰＡＧＥ,等电聚焦电泳鉴定均为一条带,其亚基分子量为３６０００,等电点为５．４５．经测定大熊猫ＬＤＨ－Ｈ亚基Ｎ端被封闭,Ｃ端氨基酸残基经测定为Ｌｅｕ．氨基酸组成分析表明每个亚基含有５个Ｃｙｓ,９个Ｍｅｔ．     

五步蛇毒中低分子量蛇毒类凝血酶的分离纯化

目的 寻找五步蛇毒新的蛇毒类凝血酶组份。方法 用ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－Ｆａｓｔ Ｆｌｏｗ（－ＦＦ）,ｃｍ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－ＦＦ纯化经常规化学提纯的五步蛇毒;以血凝活性和精氨酸酯酶活性（ＢＡＥＥ）检测酶活力;以ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳法测定分子量。结果 得到分子量为１４０００左右的电泳纯蛇毒类凝血酶组份。结论 五步蛇毒中含有低分子量蛇毒类凝血酶。     

枸杞子糖蛋白的分离纯化,物化性质及糖肽键特征

从宁夏枸杞子提取得到的粗多糖,经ＤＥＡＥ－Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００柱层析,得到均一的枸杞子糖蛋白ＬｂＧＰ。分子量由ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定为８８ｋｄ,糖含量为７０％,糖组成为Ａｒａ：Ｇａｌ：Ｇｌｃ＝２．５：１．０：１．０,并含有其他１８种天然氨基酸。初步分析表明ＬｂＧＰ是Ｏ－连接的糖蛋白。