γGABA对大离体培养颗粒细胞生成雌二醇的影响及作用机制

目的和方法：实验采用离体培养大颗粒细胞的方法,观察儿源性γ－ＧＡＢＡ对其雌二醇生成影响。为进一步探讨其作用机制,还观察在γ－ＧＡＢＡ受体激动剂蝇覃醇、蛋白质合成抑制剂放线菌酮、腺苷酸环化酶激动剂ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ作用下,γ－ＧＡＢＡ对颗粒细胞生成雌二醇的影响。结果：γ－ＧＡＢＡ抑制大鼠颗粒细胞的雌二醇生成,蝇覃醇有同样γ－ＧＡＢＡ减少ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ作用下的大鼠颗粒细胞的雌二醇生成。结论：γ－Ｇ     

肾上腺素和去甲肾上腺素对离体大鼠颗粒细胞雌二醇生成的影响

本工作采用离体孵育大鼠颗粒细胞的方法,观察了肾上腺素和去甲上腺素对颗粒细胞雌二醇生成的影响,为进一步探讨其作用机制,实验还观察了β－肾上腺素能受体阻断剂心得安,外源性ｃＡＭＰ和腺苷酸环化酶激动剂对肾上腺素和去甲肾上腺素诱导颗粒细胞雌二醇生成的影响,结果发现,肾上腺素和去甲肾上腺素可明显促进离体大鼠颗粒细胞雌二醇的生成,此作用可被心得安阻断,外源性ｃＡＭＰ和Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ可促进肾上腺素和去甲肾上     

γ—氨基丁酸（GABA）对离体大鼠卵巢颗粒细胞孕酮分泌的影响

本文观察了ＧＡＢＡ对大鼠分散颗粒细胞生孕酮的影响。结果表明：当ＧＡＢＡ浓度为１０＾－＾６ｍｏｌ／Ｌ时明显促进颗粒细胞基础孕酮分泌（Ｐ＜０．０５）。但更高浓度（１０＾－＾５ｍｏｌ／Ｌ）时则表现抑制ＨＣＧ刺激孕酮生成的效应（Ｐ＜０．０２）。提示颗粒细胞的激素分泌功能可能受到ＧＡＢＡ的调控。     

不同强度电针对PCPA失眠大鼠下丘脑γ-氨基丁酸及受体的影响

通过观察不同强度电针对睡眠节律紊乱大鼠下丘脑γ-氨基丁酸(GABA)及受体(GABRA1)的影响,初步探讨针灸治疗失眠的作用机制及不同强度电针的效应差异.用免疫组织化学技术观察失眠大鼠下丘脑GABA阳性细胞的表达情况,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测失眠大鼠下丘脑GABRA1 mRNA表达改变.研究发现,对氯苯丙氨酸(PCPA)化失眠大鼠下丘脑GABA阳性细胞染色较浅,且表达量减少,GABRA1mRNA表达明显降低(P＜0.01);经电针治疗5 d后,失眠大鼠下丘脑GABA阳性神经元染色较深,表达量较多,GABRA1 mRNA表达显著升高(P＜0.01),且2 V电针刺激作用比1 V电针刺激更为明显.结果表明电针可增加失眠大鼠下丘脑GABA及受体的表达,调节睡眠-觉醒周期,发挥镇静催眠作用,且2 V电针刺激效果优于1 V电针刺激.     

γ-氨基丁酸信号对小鼠胎盘早中期建立的影响

为了观察γ-氨基丁酸B型受体R1亚基(GABAB1R,GB1)在妊娠小鼠第1天至第8天(D1～D8)子宫中的表达规律,探讨γ-氨基丁酸(GABA)信号是否参与了胎盘早中期建立.应用半定量RT-PCR、免疫组织化学及Western blotting检测GB1在妊娠小鼠D1～D8子宫中的表达情况,原代分离D8.5的绒毛膜锥(EPCs)及蜕膜细胞,检测GABA及GABA B型受体激动剂baclofen、拮抗剂2-hydroxysaclofen对EPCs黏附及外延生长以及对蜕膜细胞侵袭能力的影响.D8时体内注射0.05 g/kg、0.5 g/kg及5 g/kg的GABA,于D14收集胎盘,制作石蜡切片.结果显示,GB1 mRNA及蛋白动态表达于D1～D8子宫.100μmol/L GABA及5μmol/L Baclofen促进EPCs的外延生长,抑制蜕膜细胞的侵袭,同时,20μmol/L 2-hydroxysaclofen成功逆转GABA对EPCs及蜕膜细胞的侵袭调节作用.5 g/kg的GABA可导致D14小鼠胎盘的迷路层滋养层细胞增多,母鼠血窦及胎鼠血管减少或发育不良,海绵滋养层的细胞滋养层细胞变小,糖原细胞减少或消失.结果提示,在小鼠早中期胎盘建立过程中,GABA信号促进滋养层侵袭至母体蜕膜组织,而抑制蜕膜细胞积极主动的侵袭行为,并可损害胎盘的结构.     

γ-氨基丁酸对烟草MAPK和ACS1基因表达的分叉调节

为探讨γ-氨基丁酸(GABA)在植物生长发育中的调控机理,以含有3种不同浓度的GABA的1/2 MS培养基培养烟草(Nicotiana tabacum)品种‘SR1'种子,结果表明:低浓度GABA(1 mmol/L)促进了烟草幼苗的生长,主根的长度比对照高30%,同时该浓度处理提高了MAPK基因的表达水平;较高浓度(10-100 mmol/L)GABA抑制了主根的伸长,表现出乙烯反应的效应.在叶和根中,ACS1基因表达水平的提高受不同浓度GABA的调节.MAPK和ACS1基因对GABA信号的不同表达模式可能与不同的信号途径有关.     

甜菜碱对戊四氮致痫大鼠血清中同型半胱氨酸以及对海马γ-氨基丁酸及其受体的影响

目的 观察甜菜碱对癫痫大鼠血清中同型半胱氨酸以及对海马γ-氨基丁酸及其受体的影响.方法 将健康雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(腹腔注射生理盐水,1.0 mL生理盐水灌胃),癫痫组(腹腔注射戊四氮,1.0 mL生理盐水灌胃),甜菜碱高、中、低浓度组(腹腔注射戊四氮,甜菜碱灌胃),丙戊酸钠组(腹腔注射戊四氮,丙戊酸钠灌胃),实验结束后大鼠眼眶取血检测血清中同型半胱氨酸的含量;在低温条件下迅速取脑,ELISA实验检测γ-氨基丁酸含量的变化;兔疫荧光和Western bloting检测海马区γ-氨基丁酸受体的变化;取肝组织进行HE染色观察组织形态变化.结果 癫痫组同型半胱氨酸的含量与正常组比较显著降低(P＜0.01),甜菜碱高、低浓度组同型半胱氨酸含量与癫痫组比较明显降低(P＜ 0.05);ELISA结果表明癫痫组γ-氨基丁酸的含量与正常对照组相比显著下降(P＜0.01).甜菜碱高、中浓度组γ-氨基丁酸的含量与癫痫组比较显著增高(P＜0.01);免疫荧光与Western bloting检测结果,癫痫组γ-氨基丁酸受体的表达与正常对照组相比显著降低(P＜0.01),甜菜碱高、中、低浓度组较癫痫组显著升高(P＜0.01);HE染色结果,丙戊酸钠组动物肝脏组织镜下观察可见明显的空泡变性(P＜0.05).结论 甜菜碱具有较好的抗癫痫作用,且无肝毒性.     

γ-氨基丁酸对离体大鼠延髓头端腹外侧区神经元单位放电的抑制作用

在７３张脑片上观察了γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）对１０６个延髓头端腹外侧区（ＲＶＬＭ）神经元单位放电的影响。外源性的ＧＡＢＡ（０．１￣３．０ｍｍｏｌ／Ｌ）抑制了１０６神经元中的８４个神经元的电活动,这些抑制效应呈剂量－反应关系。ＧＡＢＡ的抑制效应大部分可被ＧＡＢＡＡ受体选择性拮抗剂荷苞牡丹碱甲基碘化物（ＢＭＩ）和Ｃｌ＾－通道阻断剂印防己毒素（ＰＴＸ）所阻断,而单独灌流ＢＭＩ和ＰＴＸ对ＲＶＬＭ神经元主要     

氨基酸快速分析法测定高原低氧大鼠下丘脑γ-氨基丁酸的含量

建立一种快速、准确、可靠的γ 氨基丁酸定量检测方法 ,并观察高原低氧大鼠下丘脑γ 氨基丁酸 (GABA)含量变化。采用 6 30 0黄金系统氨基酸分析仪 ,在锂柱 130min程序生理体液分析方法基础上 ,根据γ 氨基丁酸 (GABA)的特性 ,建立了GABA的快速测定方法 ,并用此方法检测了高原低氧条件下大鼠下丘脑GABA的含量变化。结果高原低氧组大鼠下丘脑GABA的含量明显增多。此方法分析GABA的保留时间为 8.87min ,比原方法缩短了 6 5 .96min ;并且有较好的重现性 (CV :1.39% )、回收率高 (98.81% )。是一种快速、准确、可靠的GABA定量检测方法 ,可用于大批量样品的快速测定     

酸菜中高产γ-氨基丁酸乳酸菌的筛选

从酸菜中筛选到2株相对高产γ-氨基丁酸的乳酸菌(GABA)菌株,酸菜1号和酸菜3号。酸菜1号初步鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum);酸菜3号初步鉴定为乳酸链球菌(Streptococcus lactis)。实验还对酸菜1号菌株的培养基和培养条件进行了优化:用蔗糖为碳源、蛋白胨和牛肉膏作为复合氮源、培养基初始pH为6.0、培养温度为30~34℃时该菌株发酵产GABA的量最多,发酵过程中的振荡培养(100 r/min)和静置培养对GABA的产量无明显影响;在最佳培养基组合和发酵条件下,发酵液中GABA含量可达4 g/L以上,表明利用乳酸菌进行富含GABA食品的生产是可行的。     

γ-氨基丁酸对烟草MAPK和ACS1基因表达的分叉调节

为探讨γ-氨基丁酸(GABA)在植物生长发育中的调控机理,以含有3种不同浓度的GABA的1/2MS培养基培养烟草(Nicotiana tabacum)品种‘SR1’种子,结果表明:低浓度GABA(1mmol/L)促进了烟草幼苗的生长,主根的长度比对照高30%,同时该浓度处理提高了MAPK基因的表达水平;较高浓度(10~100mmol/L)GABA抑制了主根的伸长,表现出乙烯反应的效应。在叶和根中,ACS1基因表达水平的提高受不同浓度GABA的调节。MAPK和ACS1基因对GABA信号的不同表达模式可能与不同的信号途径有关。     

碳代谢基因gabT调控生防菌Snea253的γ-氨基丁酸代谢途径影响杀线虫活性

【背景】委内瑞拉链霉菌Snea253是本实验室前期获得的具有杀植物线虫活性的生防放线菌,通过生物信息学分析,γ-氨基丁酸转氨酶基因(gabT)是参与Snea253碳代谢的重要基因之一。【目的】明确gabT基因通过调控Snea253的γ-氨基丁酸(γ-Aminobutyric acid,GABA)代谢通路,从而影响菌株的活性。【方法】以紫外诱变所得弱毒株(Snea253-R)为材料,以南方根结线虫为靶标,在弱毒株中过表达gabT基因,通过酶联免疫法(ELISA)和高效液相色谱法(HPLC)分别检测菌株中GABA和下游代谢产物琥珀酸的含量及杀线虫活性,同时检测在不同碳源培养条件下野生型菌株gabT基因表达水平、产物含量和杀线虫活性。【结果】过表达菌株R-p IB139的gabT基因上调表达,GABA含量降低,琥珀酸含量升高,杀线虫活性提高了39%;在8种不同碳源培养条件下,gabT基因在野生株中相对表达量较高的培养基碳源是可溶性淀粉和玉米淀粉,其发酵液中GABA含量较低,发酵液中下游代谢产物增多,杀线虫活性较高。【结论】通过改变gabT基因的表达,明确GABA支路在调控Snea253代谢以提高杀线虫的过程中发挥重要作用。     

γ-氨基丁酸茶对小鼠抗疲劳作用的研究

目的:研究γ-氨基丁酸茶对小鼠的抗疲劳作用.方法:采用昆明种小鼠游泳力竭实验,实验动物分为γ-氨基丁酸茶高、中和低实验组及空白对照组,分别检测游泳力竭时间,测定小鼠血糖、肝糖原、肌糖原,血清BUN、LDH、CK、SOD、MDA、GSH-PX,以及游泳前后的血乳酸.结果:γ-氨基丁酸茶对小鼠的实验期间的体重无明显影响.力...     

生菜硝酸还原酶基因的克隆及高氮水平下外源γ-氨基丁酸对其表达和叶片硝酸盐含量的影响

硝酸还原酶(NR)是硝酸盐代谢的关键酶。该研究在成功克隆生菜NR基因的同时,进行了高氮水平下外源γ-氨基丁酸(GABA)对生菜叶片NR基因表达和NO3--N含量的研究。结果表明:(1)生菜NR基因(GenBank登录号为KP122207)序列长1 791bp,编码585个氨基酸残基,蛋白保守结构域含钼辅蛋白超家族、细胞色素b5超家族和FNR超家族;生菜NR基因与菊苣NR基因亲缘关系最近,序列一致性为93%,与烟草、甜菜、黄瓜、大豆等NR序列的一致性均在80%以上。(2)高氮水平下外源2.5mmol/L GABA处理生菜可诱导NR基因上调表达,并显著提高了生菜叶片NR、亚硝酸还原酶(NiR)、谷氨酸脱羧酶(GAD)活性和NH4+-N含量,降低了NO3--N、NO2--N含量;虽然NO3--N含量与NR、GAD、NiR活性、NO2--N、NH4+-N含量均呈显著相关关系,但与NR活性的相关系数最高且达极显著水平。研究认为,高氮水平下外源GABA可通过诱导NR基因上调表达、增强相关酶活性来影响无机氮代谢,从而降低了生菜叶片硝酸盐含量,其中NR在该过程中发挥着至关重要的作用,为生产中GABA的施用及降低叶菜类蔬菜硝酸盐含量提供了理论依据。     

γ-氨基丁酸在植物抗逆生理及调控中的作用

γ-氨基丁酸(GABA)是一种非蛋白质氨基酸,广泛存在于生物体中.GABA已经在多种植物体中被发现,但是它在植物体中的生理作用还不十分清楚.对γ-氨基丁酸在高等植物体中的合成、代谢途径、逆境条件下GABA在植物体中起的作用以及对植物的生长发育、氮代谢以及信号调控作用等生理过程的影响进行了综合评述,为GABA在植物体中进一步研究提供理论依据.     

aFGF对大鼠卵巢颗粒细胞生长及分化的影响

卵巢颗粒细胞的生长及分化影响卵泡的发育,在卵巢生殖机能中占重要地位。除已知卵泡刺激素(FSH)可影响颗粒细胞的生长及分化外,近年发现,一些肽类物质特别是生长因子如表皮生长因子、成纤维细胞生长因子(FGFs)、胰岛素样生长因子等都可影响颗粒细胞的生长及分化,参与卵巢生殖机能的调控。FGFs是一类多功能因子,具有广泛的生     

高频电针刺激对帕金森病模型大鼠脑组织中γ-氨基丁酸含量的调节作用

本研究采用高效液相色谱-电化学法(high pressure/performance liquid chromatography-electrochemical detection,HPLC-ECD)观察电针刺激对帕金森病模型大鼠皮层、纹状体、腹侧中脑和小脑组织中神经递质含量的影响,以探讨电针减轻帕金森病行为症状的可能机制。在Sprague Dawley大鼠内侧前脑束(medial forebrain bundle,MFB)注射6-羟基多巴胺(6-hydroxydop-amine,6-OHDA),建立右侧损伤帕金森病大鼠模型,并将帕金森病大鼠随机分为模型组和100Hz电针治疗组(n=10),后者接受4个疗程(6天为一疗程)的头部百会穴(GV-20)及背部大椎穴(GV-14)电针刺激。另随机选取10只大鼠在MFB仅注射生理盐水(NS)作为假手术组。行为学测试观察电针治疗对阿扑吗啡诱导的大鼠异常旋转行为的影响,HPLC-ECD检测脑组织中γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)含量变化。结果显示,模型组大鼠出现了异常旋转行为,表明帕金森病造模成功。与假手术组相比,模型组大鼠皮层和纹状体损伤...     

血小板活化因子对大鼠卵巢颗粒细胞垂体腺苷酸环化酶激活肽mRNA表达的影响及调节机制

目的：探讨血小板活化因子（PAF）对大鼠卵巢颗粒细胞垂体腺苷酸环化酶激活肽（PACAP）mRNA表达的影响及其可能调节机制,旨在寻找PAF在卵巢中的作用靶点。方法：原代培养卵巢颗粒细胞,用放射免疫分析（RIA）及逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测颗粒细胞雌二醇分泌情况及其PACAP mRNA表达变化．结果：PAF对PACAP mRNA表达无明显影响,但与hCG共同作用可促进PACAP mRNA的表达：Forkolin可使PACAP mRNA表达升高。结论：PAF可通过对hCG的允许作用间接促进大鼠卵巢颗粒细胞PACAP mRNA表达,hCG的促进作用可能是通过cAMP—PKA途径介导的。     

雌二醇对大鼠颌下腺EGF、NGF生成的影响

为了研究雌二醇（estradiol-17β,E2）对颌下腺表皮生长因子（epidermal growth factor,EGF)和神经生长因子（nerve growth factor,NGF)生成的影响,研究采用免疫组织化学方法,对外源性投予雌二醇后的大鼠颌下腺进行了观察。结果证实E2明显促进颌下腺EGF和NGF的生成。提示雌二醇可能对EGF和NGF的合成起重要的调节作用。     

大鼠胰腺γ-氨基丁酸免疫组织化学定位

本文用ABC—GDN免疫组织化学方法,研究了γ-氨基丁酸(Gamma—Aminobutyric Acid,GABA)在大鼠胰腺的定位和分布,并用相邻切片法,观察它与胰岛素的共存关系。结果发现GABA免疫反应阳性细胞主要分布于胰腺内分泌部(胰岛)。在外分泌部亦有少许分布。大部分胰岛细胞呈GABA免疫反应阳性,集中位于胰岛的中央部。相邻连续切片免疫染色证实GABA与胰岛素共存于胰岛B细胞中。外分泌部胰腺GABA免疫反应阳性细胞,呈零散分布于腺泡和导管上皮间。本文为进一步探讨GABA在胰腺的生理作用提供了形态学依据。