耐亚胺培南铜绿假单胞菌的耐药性特征及oprD基因突变分析

为了分析亚胺培南耐药铜绿假单胞菌(IMPRPAE)临床分离株的耐药性及oprD基因变异情况,本研究收集了2014年1月至2017年12月临床标本中分离的35株IMPRPAE,采用VITEK2-compact系统分析IMPRPAE的耐药性;PCR法扩增基因oprD并测序分析其序列突变类型。IMPRPAE共15株,其中1株oprD基因PCR扩增阴性。余14株阳性菌株进行oprD基因测序发现其中1株无突变,11株有框码移位(其中有2株发现携带插入序列ISPpu21, IS1394),2株有终止密码子提前出现。本研究中铜绿假单胞菌oprD基因突变是亚胺培南耐药的主要原因。     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌的耐药性和金属酶研究

目的了解广州市某医院烧伤科病房亚胺培南耐药铜绿似单胞菌的耐药谱特点及产生金属酶情况。方法采用Kirby—Bauer法进行药物敏感性试验,采用2-巯基乙醇纸片协同试验筛选产金属酶菌株,对金属酶基因进行聚合酶链反应（PCR）和序列分析。结果48株亚胺培南耐药菌株均为多重耐药菌,对临床常用的多种抗菌药物耐药,敏感率由高到低依次为CIP、TOB、AMK、GEN和FEP。2-巯基乙醇纸片协同试验阳性6株,6株菌金属酶引物VIM-2扩增阳性,经测序证实为VIM-2型金属酶。结论该组亚胺培南耐药铜绿假单胞菌为多重耐药菌,产VIM-2型金属酶。     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌对左氧氟沙星的耐药性观察

目的对比研究左氧氟沙星和常用的12种抗生素对92株耐亚胺培南铜绿假单胞菌的耐药性.方法药敏试验采用K-B纸片扩散法.结果左氧氟沙星对耐亚胺培南菌株的耐药率为43.48%;显著低于头胞噻肟、头胞西丁、头胞他定、头胞哌酮、氧氟沙星和洛美沙星(P＜0.02或P＜0.001);和诺氟沙星、环丙沙星、阿米卡星、舒普深、妥布霉素的耐药率无差异([ WTBX P＞0.05).结论左氧氟沙星对耐亚胺培南铜绿假单胞菌有良好的抗菌活性.     

大连地区耐亚胺培南铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶检测及耐药性分析

目的了解大连地区分离的耐亚胺培南铜绿假单胞菌的耐药特征,金属β-内酰胺酶携带情况,提供大连地区院内控制铜绿假单胞菌感染的依据。方法选取2013年1月至2014年9月临床分离的400株铜绿假单胞菌,进行菌种鉴定和药物敏感试验;金属酶检测采用E-test试验;PCR法扩增产金属β-内酰胺酶的基因,并对扩增阳性产物进行测序确认。结果 400株铜绿假单胞菌的标本以呼吸道分泌物最多,占81.5%;分布以呼吸内科和ICU病房最高,占总数的19.8%和25.5%;药敏结果发现有89株铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药,且多数为多重耐药菌株;400株铜绿假单胞菌经E-test试验进行金属酶表型筛查,有17株金属酶阳性,检出率为19.1%;经PCR扩增金属酶基因阳性的有11株,其中8株为IMP-1,3株为VIM-2,其他几种基因均未检出。结论大连地区耐亚胺培南的89株铜绿假单胞菌多数是多重耐药菌株;产金属β-内酰胺酶在大连地区铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药中发挥重要作用,酶的基因型主要为IMP-1和VIM-2。     

ICU耐亚胺培南铜绿假单胞菌产金属酶检测及其耐药性分析

目的 了解重症监护病房(ICU)耐亚胺培南铜绿假单胞菌(IRPA)的金属β-内酰胺酶(MBLs)的产生情况及其耐药特性,为临床抗感染治疗提供依据.方法 对深圳市观澜人民医院2010年1月至2011年12月ICU分离的587株铜绿假单胞菌(PAE),用双纸片协同试验检测MBLs产生情况,用VITEK 2 compact全自动微生物分析系统检测其对17种抗生素的耐药性.结果 在587株PAE中,IRPA 127株,占21.6％;IRPA对其中7种抗生素为全耐药,对其余10种抗生素的耐药率也在40％以上;IRPA组及亚胺培南敏感铜绿假单胞菌(ISPA)组两组间对常用抗生素的耐药率比较,除AMP、CZO、FTN、SXT、SAM及CTT外,两组其余抗生素的耐药率差异均有统计学意义(P＜0.01);在127株IRPA中,产MBLs 45株,产酶率为35.4％.结论 IRPA的检出率较高,多药耐药现象较严重,产MBLs是PAE对IPM及头孢类抗菌药物耐药的主要原因之一,应参考实验室的药敏结果,合理选用抗菌药物.     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌金属酶的筛选及基因型研究

目的研究重庆医科大学附属第一医院分离的29株耐亚胺培南铜绿假单胞菌中金属酶（Metallo-β-Lactamase,MBL）的基因型分布情况。方法用亚胺培南-EDTA纸片法筛选29株铜绿假单胞菌中产MBL的铜绿假单胞菌,用PCR扩增法检测29株菌中金属酶VIM和IMP基因。结果29株耐亚胺培南的铜绿假单胞菌中,亚胺培南-EDTA纸片法筛选出MBL阳性菌株5株,阳性率为17％。PCR扩增出IMP基因型有4株,阳性率为14％,均为金属酶IMP-9型,未扩增出VIM基因。以PCR法结果为判定标准,亚胺培南-EDTA纸片法敏感性100％,特异性96％。结论IMP-9型为该院分离的这29株耐亚胺培南的铜绿假单胞菌中主要MBL基因型。本实验中所用的亚胺培南一EDTA纸片法能简单有效的筛选出产MBL的铜绿假单胞菌。     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌相关耐药基因的检测

目的对耐亚胺培南（IMP）的铜绿假单胞菌（IRPa）相关耐药基因进行检测。方法 2003年至2009年从临床标本中分离到（P.aeruginosa）共220株,采用三维试验筛选产β-内酰胺酶的铜绿假单胞菌,应用普通PCR和多重PCR分别检测碳青霉烯酶基因和质粒携带的C类头孢菌素酶（AmpC酶）耐药基因,应用荧光定量RT-PCR的方法检测oprD2基因的表达情况。结果共检出43株产β-内酰胺酶的菌株,其中产AmpC酶、超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）、金属β-内酰胺酶（MBLs）和未知酶菌株的构成比分别58.14%（25/43）、18.60%（8/43）、4.65%（2/43）和16.28%（7/43）。74株耐亚胺培南的铜绿假单胞菌中,有2株菌携带IMP-9基因,1株菌携带DHA质粒型AmpC酶基因,其他碳青霉烯酶基因检测为阴性。40株菌株oprD2基因表达蛋白量降低,34株oprD2基因表达蛋白量正常。结论 oprD2基因的突变或蛋白表达量降低是IRPa对亚胺培南耐药的主要原因,AmpC酶可水解亚胺培南可能与铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药有一定的关系,而KPC-1酶和MBLs在铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药机制中不是主要因素。     

肿瘤患者铜绿假单胞菌感染及耐药性分析

目的探讨近年来浙江省肿瘤医院肿瘤患者铜绿假单胞菌感染情况及耐药性,指导临床合理用药。方法采用法国生物梅里埃公司的全自动细菌鉴定系统VITEK-32及其配套的细菌鉴定卡和药敏卡。结果铜绿假单胞菌近年来分离率保持在2%~3%,居医院感染的第四位。铜绿假单胞菌对泰能、哌拉西林/他唑巴坦、头孢吡肟、头孢他啶、环丙沙星、左旋氧氟沙星等呈现出较高的敏感性,敏感率都在80%以上,而对头孢噻肟和头孢三嗪具有很高的耐药性。结论要严格控制和合理选择抗生素的使用,特别是头孢类抗生素。对喹诺酮类抗生素的耐药性要密切关注。     

亚胺培南耐药铜绿假单胞菌耐药机制的研究

目的探讨铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生紊的耐药机制。方法应用铜绿假单胞菌外膜蛋白SDS-PAGE图谱、凝胶分光光度扫描分析方法和三维试验分析亚胺培南耐药铜绿假单胞菌外膜蛋白和β-内酰胺酶类型。结果耐药组OprD2相对含量显著低于敏感组。耐药组产生了较高活性的AmpC酶。结论铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药机制可能是OprD2的缺失和AmpC酶共同作用的结果。     

ICU患者感染铜绿假单胞菌的耐药性分析

目的监测ICU铜绿假单胞菌的耐药性,更好地指导临床用药。方法收集本院2014年1月至2016年12月ICU送检的所有标本培养分离的铜绿假单胞菌并进行分析。结果共检出铜绿假单胞菌504株,占ICU检出所有病原菌第3位,约占14%。其中,2014年检出161株,2015年检出179株,2016年检出164株。耐药率由低到高前3位的抗生素分别是头孢哌酮/舒巴坦(13.9%)、头孢吡肟(29.4%)和哌拉西林/他唑巴坦(35.7%)。耐药率最高的抗生素为庆大霉素(57.7%)。耐药率大于50.0%的抗生素有头孢他啶、哌拉西林、美罗培南、庆大霉素和左氧氟沙星等。结论铜绿假单胞菌耐药率监测意义十分重要,可为临床合理使用抗生素提供依据和支持。     

铜绿假单胞菌医院感染分布及耐药性分析

目的探讨铜绿假单胞菌临床分离株的感染分布情况及其抗生素的耐药情况,指导临床合理用药。方法对我院2006年1月至2008年6月住院患者分离的铜绿假单胞菌进行抗生素敏感性测定,采用API系统及VITEK2系统进行细菌鉴定,用K-B法进行药敏试验及结果观察。结果216例院内感染铜绿假单胞菌病例中,从痰标本中分离的菌株最多,阳性率为45．4％;铜绿假单胞菌对头孢噻肟、复方新诺明、头孢哌酮的耐药率较高,分别为88％、86．1％和85．2％,对美洛培南的敏感性最高达到94％。结论铜绿假单胞菌是医院病原菌感染的主要致病菌之一,加强细菌和药敏监测,选择敏感性强的药物,避免广谱抗菌药物的长期应用,是延缓耐药菌株增加的有效办法。     

铜绿假单胞菌的临床感染及耐药性分析

目的了解铜绿假单胞菌（PAE）临床感染特点和耐药特性,为医院感染的监测与控制提供依据。方法采用法国生物梅里埃公司的API鉴定系统及VITEK2系统进行细菌鉴定,用K-B纸片扩散法进行药敏试验,用WHONET 5.4软件分析PAE的耐药性。结果10年来共分离出2479株PAE,主要来源于病房的呼吸道标本,其对23种抗菌药物的耐药率逐年上升,只有美罗培南、亚胺培南、头孢他啶和环丙沙星的耐药率〈30%,多重耐药PAE共有188株,主要分布在重症监护病房、呼吸内科。结论PAE的耐药性已十分严重,必须进行严密监控,以预防PAE导致的医院感染暴发流行。     

617株耐亚胺培南铜绿假单胞菌耐药性及其产超广谱β-内酰胺酶基因型研究

探讨耐亚胺培南铜绿假单胞菌的耐药性及其产超广谱β-内酰胺酶基因型。收集2011年7月至2013年12月上海市中医药大学附属曙光医院临床分离的铜绿假单胞菌共1 125株,筛选亚胺培南耐药株,常规纸片法检测其耐药性,并用E-test检测金属β-内酰胺酶（MBL）,采用PCR法检测耐药基因型。结果显示,1 125株铜绿假单胞菌中耐亚胺培南铜绿假单胞菌共计617株,占54.8%;亚胺培南敏感铜绿假单胞菌共计508株,占45.2%。617株亚胺培南耐药铜绿假单胞菌100%为多重耐药,而亚胺培南敏感铜绿假单胞菌的多重耐药率仅为13.78%,明显较前者低（χ²=871.15,P<0.05）;亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌中MBL表型阳性共126株,阳性率为15.4%,94株(74.60%)表现为VIM-2阳性,10株（7.94%）表现为IMP-1阳性,1株检出OXA-10,〖WTBZ〗且该例菌株同时表达VIM-2。临床分离的耐亚胺培南的铜绿假单胞菌多为多重耐药,其产MBL的主要基因型是VIM-2。     

肿瘤患者医院感染铜绿假单胞菌临床分布及耐药性分析

目的了解肿瘤患者医院感染铜绿假单胞菌的临床分布及对常用抗菌药物的耐药性,为临床合理使用抗生素提供参考依据。方法对我院2015年1月~2016年12月收治的恶性肿瘤患者临床标本中分离出的189株铜绿假单胞菌的分布及耐药性进行回顾性分析。结果 189株铜绿假单胞菌中,79.9%(151/189)来自呼吸道;其主要分布在综合内科、化疗科、放疗科及ICU等科室,分别占23.81%、17.46%、15.87%和12.17%。铜绿假单胞菌对氨曲南、头孢他啶和哌拉西林耐药率最高,分别为50.79%、32.28%和30.69%,对碳青霉烯类亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为23.81%和20.11%,对哌拉西林/他唑巴坦和头孢吡肟耐药率最低分别为15.34%和18.52%。结论肿瘤患者医院感染铜绿假单胞菌以综合内科、化疗科、放疗科及ICU为主,对氨曲南、头孢他啶和哌拉西林的耐药率均在30%以上。临床微生物实验室应加强对铜绿假单胞菌耐药性监测,同时根据药敏结果合理选用抗菌药物以减缓耐药菌株的产生。     

下呼吸道感染耐环丙沙星铜绿假单胞菌的分布与耐药性

目的了解耐环丙沙星铜绿假单胞菌的流行情况,分析耐环丙沙星铜绿假单胞菌的耐药性,比较耐环丙沙星铜绿假单胞菌与环丙沙星敏感铜绿假单胞菌的耐药性差异。方法选择贵阳医学院第三附属医院2011年6月至2014年11月下呼吸道感染标本中分离出的231株耐环丙沙星铜绿假单胞菌与环丙沙星敏感铜绿假单胞菌,按照《全国临床检验操作规程》进行微生物病原菌鉴定。采用Kirby-Bauer琼脂扩散法进行药敏试验,结果使用SPSS 17.0软件进行统计分析。结果下呼吸道感染标本中共分离出铜绿假单胞菌231株,其中耐环丙沙星铜绿假单胞菌检出率25.54%。从科室分布看,神经外科分离率最高,占47.46%,其次ICU、呼吸内科与消化内科分别占18.64%、13.56%、10.17%;下呼吸道感染耐环丙沙星铜绿假单胞菌菌株与环丙沙星敏感铜绿假单胞菌菌株对头孢曲松、阿米卡星、亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦等19种抗菌药物的耐药率分别为95.65%,71.83%;42.86%,7.69%;17.39%,2.70%;33.33%,11.02%;22.22%,8.00%。下呼吸道感染耐环丙沙星铜绿假单胞菌菌株耐药率明显高于环丙沙星敏感铜绿假单胞菌菌株,差异具有统计学意义(P0.05)。结论耐环丙沙星铜绿假单胞菌表现为多重耐药性,给临床治疗带来很大的困难。因此严格掌握抗菌药物的选用是延缓病原菌对抗菌药物耐药的有效方法。     

仙居县ICU病房铜绿假单胞菌感染调查及耐药性分析

目的了解铜绿假单胞菌在仙居县ICU病房内感染现状及其对临床常用抗菌药物的耐药情况,为铜绿假单胞菌感染的防治提供依据。方法对2011-2013年仙居县人民医院ICU患者下呼吸道感染铜绿假单胞菌药敏情况进行分析,对泛耐药菌株感染危险因素进行单因素分析。结果 622株铜绿假单胞菌对常用的抗生素有不同程度的耐药性,耐药率分别为:哌拉西林28.41%、哌拉西林/他唑巴坦24.84%、阿米卡星8.57%、环丙沙星17.32%、庆大霉素11.23%、左旋氧氟沙星22.36%、妥布霉素3.73%、头孢他啶36.75%、头孢吡肟32.00%、头孢哌酮/舒巴坦15.38%、亚胺培南39.83%、美洛培南37.36%。铜绿假单胞菌是ICU患者下呼吸道感染的主要致病菌,位居第二位,检出率为19.92%。广谱抗生素的应用、气管插管/气管切开、多器官功能障碍综合征是ICU泛耐药铜绿假单胞菌感染主要的危险因素,泛耐药比例为:广谱抗生素的应用78.57%、气管插管/气管切开76.19%、MODS 76.19%。结论铜绿假单胞菌易引发ICU病房下呼吸道感染,且耐药现象严重,易产生泛耐药,临床应根据药敏结果合理用药,控制耐药株的流行。     

耐喹诺酮类铜绿假单胞菌的耐药性分析及血清学分型

目的了解广州地区喹诺酮类耐药铜绿假单胞菌的耐药性及泵抑制剂对其耐药水平降低的作用,并调查血清型分布情况。方法用法国生物梅里埃公司的微生物鉴定和药敏分析系统VITEK-2对127株铜绿假单胞菌进行鉴定和药敏检测,并采用羰酰氰基-对-氯苯胺(CCCP)与环丙沙星共同作用,以琼脂稀释法测定耐药菌的最低抑菌浓度(M IC)的变化,同时用玻片凝集法对耐药株进行血清学分型。结果环丙沙星耐药菌对哌拉西林/他唑巴坦(65.5%)的敏感率最高,只有阿米卡星(64.4%)、哌拉西林(51.7%)和妥布霉素(50.6%)的敏感率大于50.0%,而敏感菌对美罗培南(97.5%)及左氧氟沙星(97.5%)的敏感率最高,妥布霉素(95.0%)次之,对临床常用的13种抗生素,耐药菌较敏感菌的敏感性明显降低(P值均<0.001);耐药菌受泵抑制CCCP作用,M IC降低1~4个稀释度;血清分型率为93.1%,耐药菌的血清型以B型(20.7%)和L型(19.5%)为主。结论耐喹诺酮类铜绿假单胞菌对临床常用抗生素的敏感性降低,并呈多重耐药,使用抗生素 泵抑制剂可提高药物对铜绿假单胞菌的敏感性;血清学分型可以快速简单地监测铜绿假单胞菌在医院内的流行情况。     

新生儿病房铜绿假单胞菌感染状况及耐药性的5年监测

目的监测2005年至2009年间铜绿假单胞菌在新生儿病房的分离情况及其耐药趋势,为临床感染的预防和治疗提供实验室依据。方法回顾分析2005年至2009年间新生儿病房所有标本中铜绿假单胞菌的分离率,菌株在标本中的分布以及对常见的13种抗菌药物的耐药性。结果铜绿假单胞菌的分离率有逐年升高的趋势,从2005年的1.19%增至2009年的5.16%;其在呼吸道标本中的分离率最高(86.3%),在其他标本中的检出率都相对较低。铜绿假单胞菌的耐药株也有逐年增多的趋势,特别是对复方新诺明的耐药性已发展成为全部耐药。结论铜绿假单胞菌在新生儿病房的分离率在不断地增加,其对多种抗菌药物有较高的耐药性,加之新生儿免疫系统发育不完善,应引起临床医师的高度重视。     

286株肿瘤患者下呼吸道感染铜绿假单胞菌耐药性分析

目的通过统计肿瘤患者合并下呼吸道感染铜绿假单胞菌的菌群分布以及对常用抗菌药物的耐药性分析,为肿瘤患者合并铜绿假单胞菌引起的下呼吸道感染提供治疗经验。方法对某肿瘤专科医院2016年1月～2018年6月住院患者痰标本分离出的286株铜绿假单胞菌以及13种常用抗菌药的药敏结果进行回顾性分析。结果铜绿假单胞菌对多粘菌素B耐药率最低(3.85%),其次是哌拉西林/他唑巴坦和头孢吡肟,分别为15.04%和17.13%;而对氨曲南、哌拉西林和头孢他啶的耐药率最高,分别为53.15%、43.36%和39.86%。结论肿瘤患者合并呼吸道感染的铜绿假单胞菌对多粘菌素B耐药性最低,临床可根据经验首选该药用于治疗肿瘤患者铜绿假单胞菌引起的合并下呼吸道感染。     

铜绿假单胞菌耐环丙沙星动态变化

目的观察铜绿假单胞菌耐环丙沙星情况的演变,并从分子水平揭示铜绿假单胞菌对环丙沙星产生耐药的原因。方法收集1995～2003年广州市第一人民医院患者,痰培养所得348株铜绿假单胞菌,做相关药敏试验,对耐药株gyrA基因突变作PCR-RFLP分析。结果环丙沙星耐药率1995年为13.8%,1997年为27.3%,1999年为38.9%,2003年为22.4%,以1995年为基准,各年份与之比较,经卡方检验χ21997=2.884,P>0.05,差异无显著性;χ21999=10.104,P<0.01,差异有非常显著性;χ22003=2.001,P>0.05,差异无显著性。在所分离的87株耐药菌中,发生gyrA变异的有77株。结论广谱抗生素的滥用,导致菌株接触抗生素的频度增加,基因发生突变,耐药性产生。