共查询到20条相似文献,搜索用时 0 毫秒
1.
2.
β—淀粉酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达王峥,周蓓芸,郑幼霞(中国科学院上海植物生理研究所,20003)关键词高温放线菌,β—淀粉酶,基因克隆β—淀粉酶是一种外切型淀粉水解酶,它从淀粉的非还原性末端依次水解α-1,4葡萄糖昔键,产生分构型的麦芽糖。内... 相似文献
3.
本工作采用新设计的营养缺陷型淘汰筛选法,从本实验室筛选的芽孢杆菌Bacillus R2中分离到能够水解生淀粉的β-淀粉酶基因。该基因所在的DNA片段为5.25kb,在大肠杆菌(E.coli)中的表达产物具有与供体菌相同的淀粉酶特性,实验室条件下酶产量为500IU/ml以上,RDA值为57%,并且可以全部分泌到培养基中。 相似文献
5.
6.
嗜热脂肪芽孢杆菌α-淀粉酶基因在大肠杆菌中的克隆和表达 总被引:1,自引:0,他引:1
以质粒pATl53为载体,应用鸟枪法在大肠杆菌中建立了嗜热脂肪芽孢杆菌α-淀粉酶基因无性繁殖系。两个含α一淀粉酶基因的克隆的Hind Ⅲ片段均为4.5kb,内切酶谱也相同。本文还比较了从HBl01,pa-1823和从基因供体菌中提取的α-淀粉酶的耐热性。 相似文献
7.
8.
一序言杆菌属是分泌型酶类的重要来源(Priest 1977)。新近有一些队芽孢杆菌属菌种中克隆几种分泌酶类的报道,包括从解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens),凝结芽孢杆菌(B.Coagulans)和枯草芽孢杆菌(B.Subtilis)中克隆淀粉酶基因,从地衣形芽孢杆菌 相似文献
9.
从土壤中筛选到产植酸酶活性较高的烟曲霉菌株WY-2,其植酸酶最适pH为5.5,最适温度为55℃。通过对烟曲霉WY-2植酸酶基因进行PCR扩增,获得了一个1.5kb大小的特异性产物,将其克隆到载体pMD18-T中。测序结果分析表明,该基因片段含有植酸酶基因完整的阅读框架(ORF),基因全长1459bp,其中包含一个61bp的内含子,编码465个氨基酸,有7个潜在的糖基化位点,5′端有一编码26个氨基酸的信号肽序列。该基因与已报道的烟曲霉ATCC34625植酸酶基因有91%同源性,编码的氨基酸序列同源性为91%。 相似文献
10.
11.
β干扰素基因在大肠杆菌中的表达 总被引:3,自引:1,他引:2
通过Bal 31酶酶切及筛选从β干扰素基因组克隆中分离到成熟β干扰素基因,并组建了一个在Tac启动子控制下表达β干扰索基因的质粒。研究了不同诱导条件对β干扰素表达的影响。Β干扰素在大肠杆菌中表达的产量为10μ/l。 相似文献
12.
从平菇(Pleurotus ostreatus)8个菌株中筛选出3株高产植酸酶菌株,并根据GenBank中植酸酶基因的保守区设计并合成一对特异性引物,以平菇菌丝的总DNA为模板,通过PCR扩增,获得了一条长约920 bp的片段.DNA序列测定结果表明,该片段长度为919 bp.采用blast进行序列比对,结果表明:该片段与曾报道的源于Trametes pubescens的植酸酶phyA(GenBank Accession:AJ310700)基因相比较,其DNA序列同源性为93%.该片段含有3个内含子,含有植酸酶基因的活性位点保守序列(Active-site sequence)RHGARYPT. 相似文献
13.
以鲑鱼基因组DNA为模板,采用PCR获得sCT基因,并为DNA序列分析所证实.以pGEX-3X为表达载体,利用体外定点突变技术成功地构建了融合蛋白GST-sCT的重组表达质粒pGEX-3X-sCT,在大肠杆菌中得到高效表达,其表达量约为菌体总蛋白的30%;利用亲合层析法对融合蛋白GST-sCT进行纯化,再经Fac-torΧa酶切后获得了重组sCT,并对其进行活性检测.初步实验证明,重组sCT具有较强的生物活性 相似文献
14.
15.
构建了带有Qβ噬菌体RNA复制酶cDNA基因的重组表达质粒pKK-Rep,采用电泳分析的方法考察了不同浓度的IPTG、不同的葡萄糖浓度对pKK-Rep在E.coli JM109中表达RNA复制酶蛋白的影响。结果表明,0.01mmol/L IPTG可以有效诱导pKK-Rep表达RNA复制酶蛋白,但表达的RNA复制酶蛋白大多数为不溶性蛋白。在培养基中添加0.02%的葡萄糖对该RNA复制酶蛋白的组成型表达无明显的影响,但当葡萄糖浓度增加至0.04%-1.0%时,这种组成型表达量显著降低。采用MDV-poly( )RNA作为模板来体外检测可溶性表达蛋白的活性,结果表明其具有体外特异扩增RNA模板的活性。 相似文献
16.
17.
鲑鱼降钙素基因在大肠杆菌中的克隆与表达 总被引:9,自引:0,他引:9
以鲑鱼基因组DNA为模板,采用PCR获得sCT基因,并为DNA序列分析所证实。以pGEX-3X为表达载体,利用体外定点突变技术成功地构建了融合蛋白GST-sCT的重组表达质粒pGEX-3X-sCT,在大肠杆菌中得到高效表达,其表达量约为菌体总蛋白的30%;利用亲合层析法对融合蛋白GST-sCT进行纯化,再经Factor Xa酶切后获得了重组sCT,并对其进行活性检测。初步实验证明,重组sCT具有较 相似文献
18.
19.