付里叶变换红外光谱法研究胰岛素的二级结构

付里叶变换红外光谱法测定了胰岛素的二级结构,讨论了信/噪比、谱解析、曲线拟合和吸收组分的指认对结构测定的影响。测定的胰岛素二级结构与X—光结构分析结果吻合。     

胰岛素作用原理的研究 Ⅶ.不同种属红细胞胰岛素受体与胰岛素的相互作用

参照Gambhir等人的报告建立了分离豚鼠、兔和鸡红细胞的方法。比较了豚鼠、兔和鸡红细胞胰岛素受体与猪胰岛素的相互作用,初步观察到不同种属动物的红细胞含胰岛素受体的数目似乎与其自身的胰岛素活力成反比。     

胰岛素作用原理的研究——Ⅶ.不同种属红细胞胰岛素受体与胰岛素的相互作用

参照Gambhir等人的报告建立了分离豚鼠、兔和鸡红细胞的方法。比较了豚鼠、兔和鸡红细胞胰岛素受体与猪胰岛素的相互作用,初步观察到不同种属动物的红细胞含胰岛素受体的数目似乎与其自身的胰岛素活力成反比。     

医用重组人胰岛素及类似物的生产和研究

医用重组人胰岛素及类似物的生产和研究寿思明（河南医科大学病理教研室,郑州４５００５２）王文霞（河南省中医院内一病区,郑州４５０００２很多年来,医用胰岛素都是从猪和牛的胰腺提取生产的。首先成功地生产人胰岛素的方法就是对猪胰岛素的改造。猪胰岛素与天然人胰...     

胰岛素蛋白质工程：高活性（B10Asp）人胰岛素

用基因定位突变方法将胰岛素Ｂ链第１０位的Ｈｉｓ变为Ａｓｐ,获得高活力胰岛素（Ｂ１０Ａｓｐ）人胰岛素,其受体结合能力和离体生物少分别为猪胰岛素的２６２％和２３５％体内生物活力也明显高于猪胰岛素,它的促细胞生长能力为猪胰岛素的１７４％。     

胰岛素蛋白质工程：高活性［B10Asp］人胰岛素

用基因定位突变方法将胰岛素Ｂ链第１０位的Ｈｉｓ变为Ａｓｐ,获得高活力胰岛素──［Ｂ１０Ａｓｐ］人胰岛素。其受体结合能力和离体生物活力分别为猪胰岛素的２６２％和２３５％;体内生物活力也明显高于猪胰岛素;它的促细胞生长能力为猪胰岛素的１７４％。     

猪胰岛素前体在酵母Kluyveromyces lactis中的分泌表达及其转化为人胰岛素

通过将包括猪胰岛素前体（ＰＩＰ）基因在内的表达框架克隆至质粒ｐＫＤ１衍生的两种载体上而在酵母Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｌａｃｔｉｓ中分泌表达猪胰岛素前体。根据放射免疫测定结果,猪胰岛素前体的表达水平为２０～３０ｍｇ／Ｌ。猪胰岛素前体经过转肽被转变为基因工程人胰岛素。分析结果表明,来自Ｋ．ｌａｃｔｉｓ的人胰岛素,其氨基酸组成、晶体形状和生物活力与天然胰岛素相同。     

人胰岛素与猪胰岛素在生物学特性上的比较

本文就近年来有关人和猪胰岛素在降血糖、动力学性质、对激素及中间代谢物的影响、受体亲和力以及免疫学特性等方面的研究进行了比较,由此可看出人胰岛素与猪胰岛素相比较在临床治疗上的优点,因而提出发展人胰岛素商品生产的重要性。     

胰岛素蛋白质工程;[B9Glu,B10Asp]人胰岛素

用缺口双链ＤＮＡ的定向突变方法分别将胰岛素Ｂ链第９和第１０位的Ｓｅｒ和Ｈｉｓ改变为Ｇｌｕ和Ａｓｐ,获得「Ｂ９Ｇｌｕ,Ｂ１０Ａｓｐ」人胰岛素。其受体结合能力为猪胰岛素的３４．４％,而体内活力与猪胰岛素基本相同     

胰岛素蛋白质工程：[B9Glu]人胰岛素

用基因定位突变方法将胰岛素Ｂ链第９位的Ｓｅｒ改为Ｇｌｕ。获得速效胰岛素─—［Ｂ９Ｇｌｕ］人胰岛素．它的受体结合能力和体内生物活力分别为猪胰岛素的２１％和４０％。     

猪胰岛素前体在酵母Kluyveromyces lactis中的分泌…

通过对包括猪胰岛素前体（ＰＩＰ）基因在内的表达框架克隆至质粒ｐＫＤ１衍生的两种载体上而在酵母Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ ｌａｃｔｉｓ中分泌表达猪胰岛素前体。根据放射免疫测定结果,猪胰岛素前体的表达水平为２０－３０ｍｇ／Ｌ,猪胰素胶体经过胰肽被转变基因工程人胰岛素,分析结果表明,来自Ｋ．ｌａｃｔｉｓ的人胰岛素,其氨基酸组成、晶体形状和生物活力天然胰岛素相同。     

羧肽酶Y催化猪胰岛素半合成为人胰岛素

人胰岛素是治疗糖尿病不可缺少的药品,如何制备较大量的人胰岛素提供临床应用,是一个重要问题。近几年来,Johanson等人从酒酵母(saccharomyces cerirlsiae)中提取羧肽酶Y,通过此酶的转肽作用,成功地合成了各种短肽和长肽。在此基础上,又用此酶将猪胰岛素B半合成为人胰岛素。     

用胰酶转肽的方法使人胰岛素原转成人胰岛素

猪胰岛素胰酶转肽成人胰岛素的相似条件下,基因工程生产的人胰岛素原可以50％的产率转成人胰岛素,所得人胰岛素的氨基酸组成与理论值相符,并具有天然活力。     

重组[B18Ile]人胰岛素的鉴定和特征

突变体「Ｂ１８Ｉｌｅ」猪胰岛素前体经分离纯化,转肽,得到重组「Ｂ１８Ｉｌｅ」人胰素「Ｂ１８Ｉｌｅ」人胰岛素能结晶,其与受体的结合能力为猪胰岛素的８２％,保留了与猪胰岛素基本相同的体内活力,从本文结果和分析表明Ｂ１８Ｖａｌ可能不是胰岛素表现生物功能所必需的。     

纪念“结晶胰岛素全合成”50周年——后继工作之一:单、双链胰岛素的体外折叠

<正>在胰岛素合成中,在A链内和A、B链间的3对二硫键正确配对是合成成功的关键。结晶牛胰岛素合成成功之后,张友尚先生、朱尚权先生等人长期进行胰岛素结构功能研究,邹承鲁先生团队进行了蛋白质折叠研究,我们在酵母中成功表达了猪胰岛素前体(porcine insulin precursor,PIP)的基因,并建立了胰岛素蛋白质工程技术。在这些研究基础上,我们于21世纪初,开展了单、双链胰岛素的体外     

一种筛选单体速效胰岛素的简便方法

通过基因突变方法制备的单体速效胰岛素Lispro Insulin已上市用于治疗糖尿病,如何利用简便快速的方法研究获得新的单体速效胰岛素成为研究的热点。以Lispro Insulin为模型,利用猪胰岛素的胰蛋白酶酶切大片段(DOI,去B链C端八肽胰岛素)和化学合成的八肽,通过胰蛋白酶的酶促合成方法为筛选新的单体速效胰岛素提供了新的途径。结果显示,酶促合成得到的95％纯度的Lispro Insulin具备了单体速效胰岛素的不自身聚合的特点。     

基因工程人胰岛素原和胰岛素的分离纯化及性质研究

携带pWR 590-BCA4质粒的大肠杆菌经发酵培养,提取出人胰岛素原融合蛋白。该融合蛋白经BrCN降解,氧化磺化及QAE-Sepha-dex A-25和Sephadex G-50分离所得到的磺化胰岛素原,经折叠和分离得到了人胰岛素原(HPI)。HPI 再经酶切转化为人胰岛索(HI)和C-肽,HI 的得率为5 m8/L,并获得了HI 的晶体。HPI 和HI 的氨基酸组成、N-端顺序和C-末端分析均与预期值相符。HI 的RIA 活性为猪胰岛素的99%,整体活性为26～27U/mg。     

胰岛素基因的转移

胰岛素是治疗糖尿病的药物之一,而糖尿病是一种严重危害人类健康和生命的常见病之一。据估计,仝世界糖尿病人约有几千万人,单在美国就有500～600万人,而且每年都在增长。这种病是与胰岛细胞功能衰竭有关。目前,医疗上使用的胰岛素大多数是从猪、牛和羊胰脏提取的。动物胰岛素的使用可产生过敏性反应(约有5%),而人胰岛素则没有这种不良反应。但人胰岛素来源更加奇缺。因此,胰岛素的供应甚感不足,像美国600万糖尿病人每天就有100万患者需用此药。所以,尽快地解决胰岛素工业生产问题,对治疗糖尿病具有极重大的实际意义和经济价值。当前遗     

胰岛素蛋白质工程: [B16Ala]胰岛素和[B26Ala]胰岛素——两个新型的速效人胰岛素

用大动物(猪)降血糖实验证明[B16Ala]胰岛素和[B26Ala]胰岛素是快速降血糖胰岛素. 它们的前体[B16Ala]PIP和[B26Ala]PIP, 在甲醇酵母体系中的分泌表达量分别为650和130 mg/L. 由于它们是新型的分别保留全部和几乎全部胰岛素体内生物活力的速效胰岛素, 且在甲醇酵母表达体系中得到比较高的表达量, 所以具有很好的临床应用前景.     

[B2-Lys]-胰岛素的制备与性质

本文报道了用化学半合成途径从天然猪胰岛素制备[B2-Lys]-胰岛素的过程。人胎盘细胞膜胰岛素受体结合试验表明:[B2-Lys]-胰岛素的受体结合能力只有天然胰岛素的80％,降兔血糖作用与时间关系的结果表明它没有长效作用。本文还对这些结果进行了讨论。