沙美特罗气雾剂平喘作用研究

目的:考察沙美特罗气雾剂的平喘作用。方法:本试验采用沙美特罗气雾剂吸入给药,测定豚鼠引喘潜伏期,考察沙美特罗气雾剂的平喘作用。结果:在剂量为125-500?g/kg时,可明显延长由2%氯化乙酰胆碱和0.1%组胺双盐酸盐引起的豚鼠引喘潜伏期(P0.05,P0.001),而且抽搐的豚鼠数目也明显减少。沙美特罗气雾剂的平喘作用可随剂量增加而加强,250?g/kg沙美特罗气雾剂对豚鼠的平喘作用强度与1000?g/kg的舒喘灵相当。结论:沙美特罗气雾剂具有较强的平喘作用。     

哮喘豚鼠肺内ADM表达变化及对离体气管条张力的作用

目的：通过观察肾上腺髓质素（ADM）mRNA在豚鼠哮喘模型肺内的表达及对哮喘豚鼠离体气管条张力的影响,研究ADM在支气管哮喘（简称哮喘）发病机制中的作用。方法：用原位杂交方法检测ADM mRNA在豚鼠哮喘模型肺内的表达,用组胺诱导豚鼠离体气管条收缩后,观察不同浓度的ADM对其收缩作用影响。结果：原位杂交结果显示正常及哮喘豚鼠肺内均有ADM mRNA的表达,但哮喘组较正常组明显增多（P＜0．05）,ADM可抑制组胺诱导的哮喘豚鼠离体气管条的收缩,并呈量效关系,当浓度达10^-8mol/L时抑经达到最大,而且即使加大ADM的浓度,抑制率未继续明显增加,并对致敏气管螺旋条的舒张作用明显大于正常气管螺旋条。结论：哮喘时,肺内ADM mRNA的表达明显增多,ADM可抑制组胺诱导的豚鼠离体气管条的收缩,浓度为10^-8mol/L时抑制率达到最大。提示ADM在哮喘发病过程中起重要作用。     

玉郎伞提取物对支气管平滑肌舒张作用的研究

研究玉郎伞水提物及从玉郎伞中提取纯化的三种活性成份—黄酮、皂苷、多糖对豚鼠离体气管条的舒张作用。实验制备新鲜豚鼠离体气管条,在克氏缓冲液中分别加入组胺或乙酰胆碱,使豚鼠气管螺旋条收缩达高峰后观察不同剂量的玉郎伞水提物及三种活性成份对乙酰胆碱或组胺致气管条收缩的影响。结果表明,玉郎伞水提物及皂苷、多糖能对抗乙酰胆碱或组胺对豚鼠离体气管条的收缩作用,使组胺及乙酰胆碱量效曲线右移。因此,玉郎伞水提物及皂苷、多糖有较强的支气管舒张作用。     

花椒挥发油对离体豚鼠气管平滑肌作用的实验研究

目的研究花椒挥发油对组胺(Histamine,His)、乙酰胆碱(Acetylcholine,Ach)诱发的豚鼠离体气管条收缩作用的影响,以及作用的量效关系,为研发平喘类中药奠定基础。方法采用Medlab生物信号采集处理系统利用定量药理分析方法分别测定:(1)His的量效曲线;(2)Ach的量效曲线;(3)不同浓度的花椒挥发油对His诱发的豚鼠离体气管条收缩的影响;(4)不同浓度花椒挥发油对Ach诱发的豚鼠离体气管条收缩的影响。结果His、Ach在体外引起了豚鼠离体气管条的浓度依赖性的收缩,其中His与Ach在10-2mol/L时均可以使气管条收缩达到最大值,花椒挥发油对His、Ach诱发的支气管收缩均有抑制作用,在花椒挥发油浓度达0.48 g/L时抑制率为49%;但对Ach诱发的支气管收缩在剂量为0.48 g/L时抑制率仅达到26%,抑制作用明显弱于His;结论花椒挥发油在体外浓度为0.08~0.48 g/L时均能有效地抑制His、Ach诱发的支气管收缩,对His诱导的豚鼠气管平滑肌收缩的抑制作用强于Ach,提示花椒挥发油对过敏性刺激诱发的哮喘有较好的抑制作用,将为开发抗过敏性哮喘疾病的中药研发奠定基础。     

沙美特罗气雾剂的急性毒性实验研究

目的:考察沙美特罗气雾剂对大白鼠的急性毒性。方法:本试验采用沙美特罗气雾剂喷雾吸入给药,观察10日,记录大白鼠中毒症状和死亡数。结果:沙美特罗气雾剂对大白鼠毒性很小,求不出LD50,最大耐受量为560.0?g/kg以上。结论:沙美特罗气雾剂对大白鼠毒性很小。     

肺泡巨噬细胞对豚鼠气道平滑肌张力的调控

经调理酵母多糖(OPZ)刺激的大鼠肺泡巨噬细胞培养上清液可松弛豚鼠离体气管肌条,上清液中PGE_1增加,表明PGE_1是肺泡巨噬细胞松弛气管肌条的介质之一。经OPZ激活的肺泡巨噬细胞培养上清液与豚鼠血小板作用后,其松弛效应被逆转为收缩效应,提示可能由于肺泡巨噬细胞分泌血小板活化因子激活血小板,使释放收缩介质所致。肺泡巨噬细胞借助所分泌的介质经常性地调节气道阻力,对肺通气具有保护意义。     

豚鼠气管平滑肌化学介质敏感性与体征表型的相关性

目的研究豚鼠体征表型与气管平滑肌化学介质敏感性的相关性。方法根据体征表型眼睛颜色、毛色、性别差异选取36只豚鼠,将动物按体征表型分为白色黑眼雌性组（WBEF）,白色黑眼雄性组（WBEM）,白色红眼雌性组（WREF）,白色红眼雄性组（WREM）,杂色黑眼雌性组（VBEF）,杂色黑眼雄性组（VBEM）,每组动物各6只。用旋割法制备离体豚鼠气管螺旋条,以组胺histamine（浴槽浓度2.0×10^-3g/L）和乙酰胆碱acetylcholine（浴槽浓度2.0×10^-4g/L）诱导气管螺旋条收缩,用BL420生物信号采集系统与张力传感器测定标本张力变化值,分析豚鼠眼睛颜色、毛色、性别与组胺、乙酰胆碱诱导的气管螺旋条收缩效应强弱的关系。数据采用SPSS 11.5软件在α=0.05的信度下进行单因素方差检验。结果豚鼠毛色与眼睛颜色表型其气管平滑肌化学介质敏感性差异有显著性（P〈0.05）,白色体征表型豚鼠的气管平滑肌化学介质敏感性较杂色表型高,红色眼睛表型较黑色眼睛表型高。性别表型对其介质敏感性差异不显著。结论毛色、眼睛颜色表型不同其豚鼠气管平滑肌化学介质敏感性差异显著,性别表型不同其介质敏感性差异不显著,平喘动物模型宜优先选择白色红眼表型豚鼠。     

旋割法制备气管螺旋条评价

目的通过改进螺旋剪法建立制备气管螺旋条的旋割法。方法 40只豚鼠,用旋割法和螺旋剪法制备离体豚鼠气管螺旋条,在Kreb＇s液中平衡孵育2 h后,以组胺histamine（浴槽浓度2.0×10-3g/L）和乙酰胆碱acetylcholine（浴槽浓度2.0×10-4g/L）引发气管螺旋条收缩,用BL420生物信号采集系统与张力传感器测定标本张力变化值。数据采用SPSS11.5软件在α=0.05的信度下进行t检验。结果 2 g负荷下,旋割法标本histamine引发收缩幅度是螺旋剪法制备标本的1.31倍,乙酰胆碱引发收缩幅度旋割法是螺旋剪法制备标本的1.208倍,经t检验,P〈0.05,差异均具有显著性;旋割法标本,histamine引发2 g负荷标本收缩幅度是1 g负荷的1.48倍,乙酰胆碱引发2 g负荷标本的收缩幅度是1 g负荷的1.38倍,经t检验,P〈0.05,差异均具有显著性;旋割法标本经hista-mine或acetylcholine激发收缩,洗净药物重复激发6次收缩幅度的RSD值分别为19.8%和19.1%,螺旋剪法标本经histamine或acetylcholine 6次重复引发诱发收缩幅度的RSD值分别35.3%和33.7%。结论与螺旋剪法制备气管螺旋条标本比较,旋割法制备螺旋条标本对收缩诱导剂histamine与acetylcholine的敏感性高,标本负荷以2 g较好,旋割法标本重复利用收缩幅度变化值较螺旋剪法标本小。     

Zmu-1：DHP和DHP两个品系豚鼠组胺激发试验气道反应性的比较

目的研究Zmu-1：DHP和DHP豚鼠组胺激发试验气道反应性的差异,为哮喘研究提供具有较好反应性的动物模型。方法通过活体气管插管及雾化组胺气体吸入,测定豚鼠气道阻力和肺动态顺应性;采用离体气管片组胺滴定法,通过气管片收缩测定气管平滑肌对组胺的敏感性;采用同位素标记药物配位法,测定豚鼠气道组织组胺H1受体的密度及平衡解离常数。结果当豚鼠吸人大于0．5mg／mL雾化组胺时,Zmu-1：DHP豚鼠气道阻力上升率和肺动态顺应性下降率与DHP豚鼠相比,其速度有增大趋势,但未达到显著水平（P〉0．05）;两个品系豚鼠雄性个体比雌性的敏感性显著增加（P〈0．01）。当组胺浓度为10-5mol／L和10μmol／L时,Zmu-1：DHP豚鼠气管片平滑肌的收缩率显著大于DHP豚鼠（P〈0．01～0．05）。两个品系豚鼠气道组胺Hl受体的密度及其平衡解离常数无显著差异（P〉0．05）。结论在一定的组胺浓度范围内,Zmu-1：DHP豚鼠气道平滑肌对组胺的敏感性大于DHP豚鼠,雄性豚鼠的敏感性大于雌性豚鼠。两个品系豚鼠气道组胺H1受体数量无差异,提示气道反应可能还受到平滑肌膜上其它受体和化学介质的作用。     

黄体酮对离体家兔气管平滑肌收缩活动的影响

目的：研究黄体酮对离体家兔气管平滑肌收缩活动的影响。方法：采用家兔离体气管平滑肌标本,观察黄体酮对ACh及Ca-Cl2量效曲线的影响,同时观察在无钙液中加入CaCl2时单剂量Ach诱发标本双时相收缩反应的影响。结果：黄体酮能使ACh及CaCl2量效曲线明显压低,最大反应降低,且能够抑制ACh引起的第1时相收缩,对第Ⅱ时相收缩作用无明显影响。且黄体酮对ACh量效曲线的影响是上皮依赖性的。结论：黄体酮对离体气管平滑肌的松弛作用与抑制电压依赖性钙通道(PDC)和ACh引起的细胞内Ca^2 释放及上皮细胞的作用有关。     

益母草注射液生物碱单体配伍对离体子宫收缩活动的影响

采用离体子宫模型,通过观察水苏碱、胆碱和葫芦巴碱单独应用以及两两配伍应用(2∶1、1∶1、1∶2)对大鼠及豚鼠正常离体子宫收缩活动的影响。结果表明,3×10-5mol/L水苏碱、胆碱和葫芦巴碱及其两两配伍(1∶1、2∶1、1∶2)对正常大鼠离体子宫收缩活动无明显影响;对豚鼠离体子宫收缩活动有兴奋作用,主要是通过增加其收缩幅度达到,同时减少收缩频率。水苏碱、胆碱和葫芦巴碱对子宫活动呈现兴奋作用,效应与动物种属有关,且对子宫的作用不存在协同或拮抗作用。     

山楂醇提取物对大鼠离体胃、肠平滑肌条收缩性的影响

目的:考察山楂醇提取液对大鼠离体胃、肠平滑肌的影响.方法:本研究以大鼠的离体胃、肠平滑肌条为模型,考察在正常克氏液条件下加入山楂提取液大鼠胃、肠平滑肌条收缩状况.同时观察乙酰胆碱、阿托品作用下加入山楂提取液大鼠肠平滑肌条收缩状况.结果:山楂醇提取液在5-20mg生药/ml浓度范围内可显著抑制大鼠胃、肠平滑肌条的运动,且具有明显剂量依赖性.山楂醇提取液(20mg生药/ml)可拮抗乙酰胆碱引起的胃肠平滑肌的强烈收缩,山楂醇提取液(20mg生药/ml)可对抗阿托品引起的肠平滑肌的舒张作用.结论:山楂醇提取液对大鼠胃、肠平滑肌条的收缩具有明显的抑制作用.     

沙美特罗的急性毒性实验研究

目的:考察沙美特罗的急性毒性。方法:本试验采用沙美特罗经腹腔注射后,观察10日,记录小白鼠中毒症状和死亡数。结果:用综合法计算出沙美特罗的LD50及其95%的可信限为:LD50=200.68mg/kg±22.8mg/kg。结论:沙美特罗具有较低的毒性。     

马尾松花粉多糖及其酯化物对离体蟾蜍心肌生理特性的影响

利用常规离体蟾蜍心脏灌流法,通过生理记录仪经张力换能器系统描记心脏活动,观察了60%马尾松花粉多糖及其硫酸酯化多糖对离体蟾蜍心肌收缩力及心率的影响,并用普萘洛尔、氯化镉、维拉帕米等药物对心肌上的特异受体进行阻断,初步探讨了酯化多糖对心肌的作用机制.结果表明:60%多糖有降低离体蟾蜍心肌收缩力的作用,酯化60%多糖则有增强心肌收缩力的作用,两者对心率都没有影响;酯化60%多糖可以逆转普萘洛尔、氯化镉对心肌的抑制作用,而在维拉帕米存在的情况下,其正性肌力作用受到抑制,说明酯化多糖的正性肌力作用可能是通过胞膜上的L-型钙通道介导完成,而与β1受体无关.因而,加深研究酯化多糖影响心脏生理活动的的分子机制,对治疗相关疾病和开发松花粉多糖具有双重意义.     

丁苯酞对豚鼠平喘作用的初步药效学观察

目的：初步探讨丁苯酞对豚鼠的平喘作用及机制。方法：本次研究分为离体气管平滑肌实验与动物整体实验两部分。在离体实验中制备豚鼠离体气管片,使用Ach、Hist使气管平滑肌收缩达到最大值后,按累积加药法加入丁苯酞,记录1、10、100 mg/L丁苯酞对痉挛气管平滑肌的解痉作用（n=10）。在整体实验中,取经筛选的豚鼠分为正常对照组、模型对照组、地塞米松组及丁苯酞高、低剂量组（n=8）,在吸入低浓度激发液（1% ACh：0.05% Hist=1：1）激发6次（每次10 s）的基础上,第7次吸入高浓度激发液（2% ACh：0.1% Hist=1：1）10 s,观测90 mg/kg、30mg/kg丁苯酞对哮喘豚鼠行为学以及血清NO、支气管肺泡灌洗液（BALF）中ET-1的影响。结果：1、10、100 mg/L的丁苯酞对ACh、Hist引起的离体痉挛状态的豚鼠气管平滑肌有显著的解痉作用（对Ach的解痉率为15.08 ±7.68、42.41 ±13.54、77.56 ±24.82;对Hist的解痉率为19.40 ±7.60、56.84 ±11.72、76.35 ±19.40）且呈一定的量效关系（P< 0.05,0.01）;在乙酰胆碱与组胺的引喘下,90 mg/kg、30 mg/kg丁苯酞能明显延长豚鼠的哮喘潜伏期（53.3 ±13.2、33.1 ±13.0）,改善哮喘行为学,降低血清NO（78.71 ±19.40、84.75 ±20.97）、支气管肺泡灌洗液（BALF）中ET-1（24.30 ±5.80、28.50 ±6.31）的含量（P < 0.05,0.01）。结论：丁苯酞具有一定的平喘作用,而缓解NO、ET-1异常升高是其作用机制之一。     

氢溴酸槟榔碱对豚鼠离体胃窦环行肌条收缩活动的影响

目的：观察氢溴酸槟榔碱对豚鼠离体胃窦环行肌条的收缩活动并探讨其作用机理。方法：将胃窦环行肌条置于灌流肌槽内,采用累积加氢溴酸槟榔碱和分别加阻断剂的方法,观察对肌条的收缩活动的影响。结果：10^-7mol/L、10^-6mol/L浓度的槟榔碱对胃窦环行肌条的收缩波平均振幅有增大作用;10^-6mol/L浓度槟榔碱增高环行肌条的张力,4-DAMP可阻断槟榔碱增加胃窦环行肌条的收缩活动的作用,加拉明未阻断槟榔碱兴奋胃窦环行肌条的作用。结论：氢溴酸槟榔碱可兴奋豚鼠胃窦环行肌条的收缩活动,该作用经由胆碱能M3受体,而不是胆碱能M2受体的途径。     

黄芩苷对家兔离体子宫平滑肌的作用

目的:观察黄芩苷对家兔离体子宫平滑肌收缩的作用及其与Ca2+的关系.方法:制作常规离体家兔子宫平滑肌肌条,考察黄芩苷对子宫肌条反应的影响.结果:(1)黄芩苷(5-10mmol-L-1)剂量依赖抑制子宫平滑肌收缩;(2)黄芩苷对催产素及高K去极化液中Ca2+所致的离体子宫平滑肌收缩均呈剂量依赖性抑制;使CaC12累积量-效曲线非平行性右移,最大效应下降,呈非竞争性抑制;(3)且对子宫平滑肌依细胞内、外Ca2+两种收缩成分均呈抑制作用.结论:黄芩苷对家兔离体子宫平滑肌条的抑制作用,可能与其拮抗Ca2+有关.     

侧脑室注射R-α-甲基组胺对哮喘豚鼠呼吸道P物质样免疫反应物的影响

目的:应用免疫组织化学方法观察侧脑室注射组胺Hs受体激动剂R-α-甲基组胺对哮喘豚鼠气道内P物质样免疫反应物的影响。方法：豚鼠首先腹腔注射卵蛋白致敏,给药组给予豚鼠股静脉注射卵蛋白激发哮喘发作后,再侧脑室注射组胺Hs受体激动剂R-α-甲基组胺(5μg)。哮喘组豚鼠在诱发哮喘发作后侧脑室注射等量生理盐水。对照组豚鼠腹腔注射等量生理盐水。经肺动脉灌注4％多聚甲醛,取气管、支气管和肺组织,冰冻切片,做P物质免疫组织化学染色。结果：气管、支气管和肺泡间隔内的P物质样免疫反应物在哮喘发作组明显多于对照组,在给药后10min组明显少于哮喘组,给药后20min组已接近正常组。结论：经侧脑室途径激动中枢组胺Hs受体后,哮喘豚鼠呼吸道内神经源性炎症介质P物质减少,提示中枢组胺Hs受体参与对哮喘气道神经源性炎症的调控。     

可能存在第三种亚型组织胺受体

加拿大Guelph大学生物医学系药理学实验室Eyre等长期以来一直从事呼吸道平滑肌上组织胺受体的研究。他们研究了人和其他种属动物的气管或支气管平滑肌,发现人、豚鼠、狗、牛和马的气道平滑肌对组织胺产生收缩反应,而绵羊、兔、猫、大鼠和雪貂的气道平滑肌的收缩反应很弱,有些甚至产生舒张反应。这一有趣现象促使Eyre和Chand用上述种属动物的气道平滑肌作进一步研究。他们先用H_1受体阻断剂mepyramine处理平滑肌标本,然后用各种激动剂如:氨甲酰胆碱、5-羟色胺、过敏的慢反应物质等使气管或支气管平滑肌的收缩达到最大收缩的50%,再加入组织胺、4-甲基组织胺或dimaprit(后二者均为选择性的组织胺H_2受体激动剂),可使受试的所有种属动物的气道平滑肌松弛。在豚鼠气管、马的支气管     

辣椒素对离体大鼠胃平滑肌收缩性的影响

目的:考察辣椒素对离体大鼠胃平滑肌收缩性的影响。方法:本研究以大鼠的离体胃平滑肌条为模型,首先考察在正常钙克氏液、高钙克氏液和低钙克氏液中辣椒素对胃平滑肌收缩作用的影响。然后正常克氏液中,分别观察辣椒素对乙酰胆碱、新斯的明、阿托品分别存在下的胃平滑肌收缩性的影响。结果:辣椒素在2.5μmol/L-40μmol/L浓度范围内可剂量依赖性显著抑制高钙溶液(Ca2 终浓度5μmol/L)引起的大鼠胃平滑肌强烈收缩,在5μmol/L-40μmol/L浓度范围内可显著抑制正常克氏液中大鼠胃平滑肌条的运动,且具有明显剂量依赖性,在10μmol/L-40μmol/L浓度范围内可显著抑制低钙克氏液中大鼠胃平滑肌条的运动,且具有剂量依赖性。辣椒素(10μmol/L)可拮抗乙酰胆碱和新斯的明引起的收缩作用(P<0.01)。辣椒素(10μmol/L)的作用与阿托品具有相加作用(P<0.01)。结论:辣椒素对胃平滑肌的收缩具有明显的抑制作用。