细胞凋亡原位检测的TUNEL法

细胞凋亡原位检测的ＴＵＮＥＬ法刘勇（江西省人民医院病理科，南昌３３０００６）细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ），又称程序性细胞死亡（ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｄｅａｔｈ，ＰＣＤ），是细胞的一种生理性死亡过程，有关细胞凋亡的研究近年来受到高度重视。末端转移...     

病毒基因与细胞凋亡

细胞凋亡（Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）是受遗传控制的细胞自灭过程,是机体维持稳态的主要机制之一。是一种典形的细胞程序化死亡（ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈ）,细胞程序化死亡的诱导与调控机制是当今生物学中非常活跃的研究领域,涉及到细胞生物学,病毒学、免疫学、发育生物学、致癌生物学等学科。具有重要的理论与实践意义。引起细胞凋亡的因素很多,本文仅就病毒基因与细胞凋亡的关系,主要以疤疹病毒科,腺病毒科,杆状病毒科和逆转录病毒中某些病毒与细胞凋亡相关的基因及其结构,作用方式和分子机理的研究结果进行综述并对以后研究方向作些展望。     

细胞凋亡与病毒性肝炎

细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）,是细胞在基因活动指导下的主动性死亡。细胞凋亡为普遍存在的一种生物现象,贯穿于机体整个生命活动过程的基本生理机制,调节着机体细胞增殖与更新间的平衡,维持组织器官正常生理功能及细胞数量的稳定。某些致病因子可以使细胞凋亡的基...     

细胞凋亡中的关键蛋白酶—Caspase—3

在哺乳动物细胞凋亡执行阶段起重作用的一系列半胱氨酸蛋白酶基因相继被克隆。Ｃａｓｐａｓｅ－３（又称ＣＰＰ３２,Ｙａｍａ,ａｐｏｐａｉｎ）被认为是各种凋亡刺激因子激活的ｃａｓｐａｓｅ家族中的关键蛋白酶,活性ｃａｓｐａｓｅ－３可作用于一些其他ｃａｓｐａｓｅ成员,并降解凋亡细胞中的某些蛋白质。Ｃａｓｅｐａｓｅ－３抑制物是细胞凋亡抑制剂,有希望成为治疗因细胞过度死亡所致相关疾病的重要分子。     

细胞程序性死亡与细胞凋亡可互换使用吗？

细胞程序性死亡与细胞凋亡可互换使用吗？张志文（北京医科大学生理学系北京１０００８３）从细胞生物学角度看,细胞程序性死亡（ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈ,ＰＣＤ）为功能性术语。３０年前Ｌｏｃｋｓｈｉｎ［１］首次用于说明多细胞组织中,细胞对特定生...     

Fas与FasL的分子及细胞生物学研究进展

Ｆａｓ是Ｉ型膜蛋白,属ＴＮＦ受体家庭成员,许多细胞表达Ｆａｓ。而Ｆａｓ配体（ＦａｓＬ）只在激活Ｔ淋巴细胞表达,是Ⅱ型膜蛋白,属ＴＮＦ家庭成员,当ＦａｓＬ与Ｆａｓ结合时,Ｆａｓ可向细胞传递“死亡信号”,细胞在数小时内凋亡,Ｆａｓ－ＦａｓＬ介导的细胞凋亡在免疫调失及免疫病理中,可能有重要作用。     

凋亡的分子机理

细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）是细胞接受某种信号后或受到某些因素刺激后一种主动的,由一些凋亡相关基因相互作用的细胞消亡过程,影响凋亡的基因可分为两类,即促进凋亡的基因和抗凋亡的基因。本文简述了这些基因与凋亡的关系,重点论述了ｂｃｌ－２家族与凋亡的研究进展。     

细胞凋亡过程中的信号转导

细胞凋亡过程中的信号转导李雨民陈洪（中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所,天津３００１９２）（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｌｅｍｉｓｔｒｙ,ＤｕｋｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ,ＵＳＡ）关键词细胞凋亡ＩＣＥＦａｓ／ＴＮＦＲ１信号转导细胞凋亡的发现虽已有...     

毛细血管扩张性共济失调突变蛋白在细胞凋亡过程中被Caspase┐3降解

新近的研究揭示：ｃａｓｐａｓｅ蛋白酶在细胞凋亡中起着死亡执行者的重要功能．一些蛋白相继被证明在细胞凋亡中可被ｃａｓｐａｓｅ特异切割,其中参与ＤＮＡ损伤修复过程的聚ＡＤＰ核糖聚合酶（ＰＡＲＰ）以及ＤＮＡ依赖的蛋白激酶（ＤＮＡ－ＰＫ）,在细胞凋亡过程中被ｃａｓｐａｓｅ选择性切割具有特殊的功能意义．为探索与ＤＮＡ－ＰＫ催化亚基有较高同源性,含有ｃａｓｐａｓｅ切割位点,且功能上目前也被认为是感受ＤＮＡ损伤和参与信号传导途径的ＡＴＭ（Ａｔａｘｉａｔｅｌａｎｇ－ｉｅｃｔａｓｉａｍｕｔａｔｅｄ）蛋白,是否在凋亡过程中也可被切割而降解？应用体外转录与翻译系统获得ＡＴＭ蛋白的ＰＩ３Ｋ结构域,同时通过建立无细胞反应体系获得含ｃａｓｐａｓｅ活性的细胞抽提液,将两者在体外共同保温．结果发现：ＡＴＭ蛋白与ｃａｓｐａｓｅ－３能免疫共沉淀,ＡＴＭ蛋白的ＰＩ３Ｋ结构域可被ｃａｓｐａｓｅ－３特异切割,并观察到辐射诱发细胞调亡中ＡＴＭ蛋白的降解．从而进一步证实了ＤＮＡ损伤修复的抑制,促进细胞凋亡的发生．     

调节细胞凋亡的新成员——ICE

调节细胞凋亡的新成员──ＩＣＥ阎水忠,吴旻（中国医学科学院,中国协和医科大学肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室,北京１０００２１）关键词细胞凋亡,ＩＬ－１β转换酶细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）的研究近年来成为包括发育学、细胞生物学以及肿瘤学等多种学科...     

p35/cdk5复合物的功能及在阿尔茨海默病病理中的作用

阿尔茨海默病（Alzheimer's disease,AD)是老年痴呆症中最常见的一种,以严重的记忆减退和认知障碍为主要临床表现,目前有关AD的发病机制尚不甚明了,神经原纤维缠结由高度磷酸化的tau蛋白聚集而成,是AD的特征性病变。细胞周期蛋白依赖的蛋白激酶5（cyclin-dependent ki-nase5,cdk5)与其调节蛋白p35,p25等参与了AD病人脑内tau蛋白的异常磷酸化,在AD的发病过程中可能发挥重要作用,本文简要介绍p35及cdk5的结构特征,在中枢神经系统内的分布,对p35/cdk5参与AD发病机制进行了初步的探讨,为临床防治AD提供一些新的思路。     

Cdk5/p35激酶与肌动蛋白细胞骨架结合关系的鉴定

Cdk5,一种多功能的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,其活性只有通过结合其神经特异性调节亚基才能被激活.p35是Cdk5的两个主要调节亚基之一.尽管Cdk5/p35激酶可以调控神经细胞中肌动蛋白细胞骨架的动态变化,但直到目前为止Cdk5/p35激酶与肌动蛋白细胞骨架的结合关系仍不是很清楚.现利用几种不同的方法对两者的结合关系进行了初步鉴定.目前的试验结果表明在鼠脑组织中肌动蛋白细胞骨架是Cdk5/p35超大蛋白复合体的一个组分,p35可以直接结合纤维状肌动蛋白,这说明在鼠脑组织或神经细胞中Cdk5很有可能是通过p35结合到肌动蛋白细胞骨架上并进一步调控肌动蛋白细胞骨架的动态活动的.     

昆虫杆状病毒细胞凋亡抑制基因

杆状病毒感染过程中,可能会诱导产生一条导致细胞凋亡的路径,细胞凋亡是一种程序性细胞死亡。宿主细胞的凋亡可以导致细胞的提前死亡或感染的终止,因此细胞凋亡可以限制病毒在被感染机体中的扩散或限制感染机体的发病。家蚕的杆状病毒拥有两种对抗细胞凋亡死亡的基因,p35和iap(inhibitorofapoptosis),它们可能通过阻止病毒感染引起的细胞凋亡或存在于大量生物体内的各种诱导信号引起的细胞凋亡。     

杆状病毒p35蛋白抗凋亡作用及机理

杆状病毒入侵可以诱导昆虫细胞凋亡,作为对抗宿主防御体系的一种策略,病毒自身编码具有抗细胞凋亡活性的蛋白,如p35蛋白和IAP。杆状病毒p35蛋白是一种广泛有效的凋亡抑制因子,能在哺乳纲、昆虫纲和线虫纲中抑制细胞凋亡作用,推测其与细胞凋亡途径上保守的成分Caspase起作用。研究表明,p35蛋白正是通过蛋白酶间的相互作用和p35蛋白的剪切而起作用的。就最近几年在p35蛋白抗凋亡作用机理方面的研究作一综述 。     

IFN-g促进LPS对小鼠抑制性巨噬细胞IL-12 p40/p35的表达

IL-12是由p35和p40两个亚基组成的可诱导细胞因子, 其重要的生物学功能是促进Th1细胞分化, 调节细胞免疫的抗病毒和抗肿瘤作用. 用半定量RT-PCR结合银染对LPS, LPS/IFN-γ作用下小鼠抑制性巨噬细胞IL-12 p40 和 p35两个基因mRNA的表达及NF-κB信号与表达的相互关系进行了研究, 发现IFN-γ不仅能显著促进LPS诱导的IL-12 p40 mRNA 的表达, 同样能明显上调IL-12 p35 mRNA水平, 两者表达水平大致相当, 而且IFN-γ 相应地促进了IL-12 p70的分泌. 蛋白酶小体抑制剂PSI显著抑制了LPS, IFN-γ , LPS/IFN-γ 诱导的IL-12 p40, p35mRNA的表达, 并对LPS, LPS/IFN-γ 诱导的Ik Ba 降解也有明显的抑制效应. LPS单独处理可增强NF-κB与小鼠p40基因启动子-146 ～-112区DNA特异序列的结合, 但IFN-gγ并不能加强LPS诱导的NF-k B与DNA的结合, 也不能促进LPS诱导的Ik Ba 降解. 以上结果提示: (ⅰ) IFN-/LPS共同作用, 可促使IL-12 p40和p35 两基因mRNA高水平表达并相互协调. 这种高表达和IL-12 p70的分泌增加相一致. (ⅱ) NF-B是LPS, IFN-g /LPS诱导的IL-12 mRNA表达的基本信号通路. (ⅲ) 蛋白酶小体抑制剂PSI通过抑制Ik Ba 降解, 进而抑制LPS和LPS/IFN-g 诱导的IL-12 p40与p35 mRNA的表达. (ⅳ) IFN-γ 通过非NF-κB信号途径增强LPS诱导的p35/p40 mRNA表达.     

The p35/CDK5 signaling is regulated by p75NTR in neuronal apoptosis after intracerebral hemorrhage

The p75 neurotrophin receptor (p75NTR), a member of tumor necrosis factor receptor superfamily, involves in neuronal apoptosis after intracerebral hemorrhage (ICH). It has been previously demonstrated that phosphorylation of p35 is a crucial factor for fighting against the proapoptotic p25/CDK5 signaling in neuronal apoptosis. Then, in ICH models of rats and primary cortical neurons, we found that the expressions of p75NTR, p-histone H1 (the kinase activity of CDK5), p25, Fas-associated phosphatase-1 (FAP-1), and phosphorylated myocyte enhancer factor 2D (p-MEF2D) were enhanced after ICH, whereas the expression of p35-Thr(138) was attenuated. Coimmunoprecipitation analysis indicated several interactions as follows: p35/p25 and CKD5, p75NTR and p35, as well as p75NTR and FAP-1. After p75NTR or FAP-1 depletion with double-stranded RNA interference in PC12 cells, the levels of p25 and p-histone H1 were attenuated, whereas p35-Thr(138) was elevated. Considering p75NTR has no effect of dephosphorylation, our results suggested that p75NTR might promote the dephosphorylation of p35-Thr(138) via interaction with FAP-1, and the p75NTR/p35 complex upregulated p25/CDK5 signaling to facilitate the neuronal apoptosis following ICH. So, in the study, we aimed to provide a theoretical and experimental basis that p75NTR could be regulated to reduce neuronal apoptosis following ICH for potential clinical treatment.     

Twice switched at birth: cell cycle-independent roles of the "neuron-specific" cyclin-dependent kinase 5 (Cdk5) in non-neuronal cells

Cdk5 (cyclin-dependent kinase 5 or initially NCLK for neuronal CDC2-like kinase) was switched twice at its birth nearly twenty years ago: first it was thought to be cyclin-dependent, second it was assumed to be primarily of importance in neuronal cells—both turned out not to be the case. In this review we want to discuss issues of pharmacological inhibition, to highlight the versatile roles, and to summarize the growing evidence for the functional importance of Cdk5 in non-neuronal tissues, such as blood cells, tumor cells, epithelial cells, the vascular endothelium, testis, adipose and endocrine tissues. The organizing principles we follow are apoptosis/cell death, migration/motility, aspects of inflammation, and, finally, secretion/metabolism.     

Baculovirus Host-Range

Baculoviruses are used as microbial insecticides, protein expression vectors, epitope display platforms, and most recently as vectors for gene therapy. Understanding the mechanisms that control baculovirus host-range and tissue tropisms are important for assessing their safety and for improving their properties for these biotechnology applications. In the past two decades some progress has been made and several baculovirus genes that influence host-range have been identified. Despite this progress, our understanding of the underlying mechanisms that restrict baculovirus host-range is still limited. Here we review what is currently known about baculovirus genes that influence virus host-range