甘蔗基因组DNA小量提取与大量提取方法研究

甘蔗的叶片中含有大量的多糖、多酚类和RNA等物质,对甘蔗分子生物学实验带来了极大的影响.本研究利用改良的CTAB对甘蔗基因组DNA进行小量提取法与大量提取方法的研究,本方法操作简单,DNA完整性好、产量高、纯度高可满足大部分分子实验的需要.     

3种小球藻DNA提取方法的比较

单细胞真核藻类小球藻已成为藻类分子生物学研究的热点,但其特殊的细胞壁组分给DNA的提取带来了一定的困难。文章比较了3种从小球藻中提取DNA的方法,即纤维素酶法、作者改进的CATB法和目前单细胞藻类常用的裂解法。通过所提取的DNA进行浓度、纯度分析,认为CTAB法是一种简单、快速和高效的适合于小球藻的DNA提取方法。     

花生DNA提取方法比较

目的:旨在筛选优化花生DNA提取方法。方法:采用SDS法、改进SDS法;CTAB法、改进CTAB法四种方法对花生叶DNA进行提取,并从电泳结果、纯度、得率、等方面对其进行比较研究,从而确定花生DNA提取适用流程;结果:CTAB法DNA平均得率为55.0μg/g.Fw,略小于SDS的60.3,但其A260/A280平均值为1.81,比SDS的1.55更接近标准要求。结论:综合考虑CTAB法是提取花生DNA的最佳方法,可提取到较高质量的DNA,符合分子检测要求;虽然改良CTAB法也相对好于SDS法,但由于步骤增加反而加剧DNA降解。     

苛求芽孢杆菌基因组DNA提取方法的比较

目的:比较不同方法提取苛求芽孢杆菌基因组DNA的差异。方法:用经典CTAB提取法、改进CTAB法(溶菌酶处理结合CTAB提取法)、UniQ柱吸附提取法制备苛求芽孢杆菌基因组DNA,比较产物完整性和用于PCR扩增的有效性。结果:三种方法制备基因组DNA纯度接近,但改进CTAB法产率最高,UniQ法产率最低。经典CTAB法和UniQ法提取基因组DNA易降解。三种方法所得基因组DNA用于PCR扩增效率接近。结论:溶菌酶裂解结合CTAB提取更适合制备苛求芽孢杆菌基因组DNA。     

火龙果茎基因组DNA提取方法改良

火龙果(Hylocereus undulatus)是近年发展起来的一种新兴热带水果, 其茎富含多糖、多酚及其它次生代谢物, 黏性极大, 很难从中提取高质量的DNA。特别是一年生以上的老茎, 目前尚未有较好的DNA提取方法。为了解决这一难题, 该研究对CTAB+Tris-HCl洗涤法进行了3种方式的改良。结果表明, “改进三”方法可不受取样时期和取样部位的限制, 从一年生以上火龙果茎中提取的DNA质量最好且不含黏性物质, 可用于酶切与分子标记等生化和分子生物学实验。该研究探索了一条较为理想的火龙果茎DNA提取方法, 值得推广应用。     

大青杨基因组DNA提取方法的比较

本研究采用改良SDS法、常规CTAB法和改良CTAB法(1.5×CTAB,2×CTAB,3×CTAB)提取大青杨基因组DNA,并用紫外光普分析、凝胶电泳、限制性内切酶消化和RAPD方法进行鉴定.结果表明:5种方法中,改良SDS法DNA提取率最高,但CTAB法比改良SDS法提取获得的DNA纯度高,OD260/OD280为1.73～1.81.与常规CTAB法比较,改良SDS法和改良CTAB法能有效去除蛋白、多糖、酚类及次生代谢物质.综合分析确定改良2×CTAB法为大青杨基因组DNA的最佳提取方法.     

火龙果茎基因组DNA提取方法改良

火龙果(Hylocereus undulatus)是近年发展起来的一种新兴热带水果, 其茎富含多糖、多酚及其它次生代谢物, 黏性极大, 很难从中提取高质量的DNA。特别是一年生以上的老茎, 目前尚未有较好的DNA提取方法。为了解决这一难题, 该研究对CTAB+Tris-HCl洗涤法进行了3种方式的改良。结果表明, “改进三”方法可不受取样时期和取样部位的限制, 从一年生以上火龙果茎中提取的DNA质量最好且不含黏性物质, 可用于酶切与分子标记等生化和分子生物学实验。该研究探索了一条较为理想的火龙果茎DNA提取方法, 值得推广应用。     

一种改良的植物DNA提取方法

植物组织中含有大量多糖、多酚、酯类等次生代谢产物, 要从中提取高质量的DNA比较困难。针对这一情况, 该文提出一种改良CTAB植物DNA提取方法(mCTAB), 并以10种常见植物为实验材料, 与4种常用的植物DNA提取试剂盒作对比。结果表明, mCTAB法提取的DNA产率高且质量好, PCR扩增成功率也较高, 而提取成本显著低于DNA提取试剂盒, 可有效用于植物DNA条形码等研究的植物DNA提取。     

一种提取银杏中DNA的方法

对改进的SDS和CrAB两种提取DNA的方法进行了比较试验,通过DNA浓度和纯度测定及琼脂糖凝胶电泳检测,结果显示,用改进的SDS法可从银杏幼叶和愈伤组织中获得DNA,其浓度分别为0.867μg·μ     

苎麻总DNA提取的CTAB法优化方案

根据苎麻组织自身含有较多的本分类,粘状物及黄酮类等次生代谢物质的特点,对CTAB法进行优化后用于提取苎麻组织总DNA。在研磨过程中加入抗氧化剂PVP,提取缓冲液加入终浓度6%的PVP和4%的β-巯基乙醇,可防止整个提取过程中溶液变褐;在第2次用氯仿/异戊醇抽提时,加入10%的CTAB和4%的NaCl高盐溶液,以除去多糖。经几种改良方案提取总DNA的ISSR-PCR扩增结果验证,以同时加入抗氧化剂和高盐溶液的CTAB-4法效果最好。     

华中五味子抗氧化和细胞毒活性研究

我们研究了华中五味子的根、茎、叶、果实乙醇提取物对脂性自由基DPPH及超氧阴离子的清除作用,同时观察了四种不同提取物在体外对肿瘤细胞株的细胞毒作用。我们发现,华中五味子根的乙醇提取物清除自由基活性和对肿瘤细胞杀伤作用比茎、叶和果实的提取物都强,研究结果提示华中五味子的根可以作为抗氧化剂的新来源。     

华中五味子染色体制片优化及核型分析

比较不同预处理和解离方法对华中五味子染色体制片的影响,采用华中五味子的萌发芽、新枝茎尖、幼叶等不同部位进行染色体制片,观察500个细胞,比较不同部位中期细胞和适宜核型分析的中期细胞所占比例,结果显示,0.1%秋水仙素预处理1 h、1 mol/L盐酸常温解离12 min制片所得染色体分散效果最佳。5~15 mm幼叶侧边组织制片最适宜华中五味子核型分析。核型公式为2n=2x=28=26 m 2sm,核型不对称系数(As.k)为56.30%,属于1B类型,核型对称性程度高,表明华中五味子在进化中处于比较原始类型。     

Chemical Constituents of Schisandra rubriflora Rehd.et Wils.

Schisandra rubriflora Rehd. et Wils. is a traditional Chinese medicine. To search for new and bioactive components from traditional Chinese medicines and provide scientific evidence for taxonomy, the chemical constituents ofthe plant were investigated by various column chromatography methods (silica gel,Sephadex LH-20, and RP-18). From the aerial parts ofS. rubriflora, three new megastigmane glycosides,namely (3S, 5R, 6S, 9R)-megastigmane-3, 9-diol 3-O-[α-L-arabionfuranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside](1), 7-megastigmene-3-ol-9-one 3-O-[o-L-arabionfuranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside] (2), and megastigmane-3α, 4β, 9ξ-triol 3-O-β-D-glucopyranoside (3), along with 14 known compounds, were isolated.The structures of the new compounds were elucidated by a combination of spectroscopic and chemical methods.     

Chemical Constituents of Schisandra rubriflora Rehd. et Wils.

Schisandra rubriflora Rehd. et Wils. is a traditional Chinese medicine. To search for new and bioactive components from traditional Chinese medicines and provide scientific evidence for taxonomy, the chemical constituents of the plant were investigated by various column chromatography methods (silica gel, Sephadex LH-20, and RP-18). From the aerial parts of S. rubriflora, three new megastigmane glycosides,namely (3S, 5R, 6S, 9R)-megastigmane-3, 9-diol 3-O-[α-L-arabionfuranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside](1), 7-megastigmene-3-ol-9-one 3-O-[α-L-arabionfuranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside] (2), and megastigmane-3α, 4β, 9ξ-tfiol 3-O-β-D-glucopyranoside (3), along with 14 known compounds, were isolated.The structures of the new compounds were elucidated by a combination of spectroscopic and chemical methods.     

华中五味子ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选

系统研究了华中五味子ISSR PCR反应体系中的主要影响因子,确立华中五味子ISSR-PCR最适反应体系,并筛选出12条有效引物。单因子实验结果显示,华中五味子ISSR-PCR反应体系中各主要成分的适宜浓度范围为,Mg²⁺ 1.50~3.50 mmol·L^-1,dNTPs 0.10~0.35 mmol·L^-1,引物0.25~0.60 μmol·L^-1,Taq酶0.50~1.50 U。4因子3水平正交实验确立了最适反应体系,即20 μL体系中包含2.50 mmol·L^-1 Mg²⁺、0.20 mmol·L^-1 dNTPs、0.25 μmol·L^-1引物、1.50 U Taq酶、60 ng DNA模板、2.50 μL 10×PCR Buffer。本研究为华中五味子种质资源的评估及遗传多样性分析奠定基础。     

厚朴与凹叶厚朴的抗逆性

本文根据西安夏季高温干旱、冬季严寒的气候特点,采用田间栽培、抗逆生理特性测定和抗旱形态特征比较等方法,对引种的国家三级保护植物厚朴(Magnolia officinalis Rehd.et Wils.)和凹叶厚朴(M.officinalis subsp.biloba(Rehd.et Wils.)Cheng et Law)的抗逆性进行了探讨,并用已适应西安气候多年的辛夷(M.liliflora Desr.)作对照。结果表明:两种植物均能在西安越冬,但只有在供水充足和适当遮荫条件下才能顺利越夏。凹叶厚朴的抗逆性强于厚朴,但它们的抗旱抗热性均较辛夷弱。     

尾叶远志抗氧化活性研究

采自贵州兴义的尾叶远志(Polygala caudata Rehd.et Wils.)根,经乙醇提取,再用不同溶剂萃取和柱层析分离,得到了12个不同的组分.用比色法研究了各组分还原三价铁离子及清除脂性自由基DPPH能力,采用化学发光法观察各组分清除羟自由基和超氧阴离子的活性.研究发现,尾叶远志各组分均有一定的清除自由基作用,并且其活性成分可能主要集中在PC-BuOH组分.     

大血藤化学成分及药学研究进展

目的:对传统中药大血藤的化学成分及药学研究概况进行综述.方法:查阅国内外发表的文献为依据.结果:传统中药大血藤中含有鞣质、糖苷、环多酚类、三萜皂甙类、木质素类、黄酮类、甙类及有机酸类等多种化学成分;药理研究证明,其具有抗辐射;抗菌、抗炎、抗急,陛过敏、抗癌及心血管系统活性等作用,结论:大血藤具有多种药理活性,有希望从中开发出治疗心血管疾病和抗炎的现代药物.对其进行进一步的研究和开发具有重要意义.     

华中五味子雌雄株花期叶片中内源激素的比较

对华中五味子雌雄株花期叶片中4种内源激素含量进行测定和比值的比较,结果表明,雌株叶片中的ABA含量显著高于雄株,IAA、GA3和ZR含量则显著低于雄株,ABA/IAA、ABA/GA3和ABA/ZR比值显著高于雄株,这可能与华中五味子性别分化有关。     

凹叶厚朴愈伤组织的超低温保存

采用单因子比较和均匀设计法。研究凹叶厚朴愈伤组织超低温的影响因素。结果表明：超低温保存的适宜材料是４周龄的愈伤组织。经４－６℃低温下预培养１２天的愈伤组织抗冻能力最强。