p16基因甲基化与表达在子宫内膜癌中的意义

肿瘤抑制基因p16定位于9号染色体短臂2区1带,编码细胞周期调节蛋白p16,p16基因失活将导致细胞增殖失控。研究证实肿瘤抑制基因启动子区域5CpG岛甲基化是导致转录水平上基因失活的重要机制。为了研究p16基因甲基化状态及其表达异常与子宫内膜癌发生的关系,采用甲基化特异性PCR(MSP)、免疫组化及PCR方法检测62例子宫内膜癌及相应癌旁组织、10例相应年龄正常子宫内膜中p16基因5′cpG岛甲基化状态、p16蛋白表达及p16基因外显子E,和E：表达缺失情况。结果表明癌旁及正常子宫内膜p16基因无甲基化,且无p16蛋白、外显子1和2的表达异常。62例子宫内膜癌中,15例甲基化,占24、2％;33例p16蛋白表达下降或无表达,占54．8％;p16基因外显子1缺失率16．1％(10／62),外显子2缺失率为30．6％(19／62),两者均缺失9．68％(6／62),至少其中1种缺失46、6％(29／62)。提示P16基因失活在子宫内膜癌中多见且与病理分级、临床分期密切相关。D16基因甲基化在子宫内膜癌的发生中起着重要作用。MSP法测定基因甲基化状态准确且简便可行。     

宫颈癌p16基因甲基化及表达的研究

为了探讨p16基因甲基化及异常表达在宫颈癌中的意义,分别采用甲基化特异性PCR（MSP）方法检测不同病理类型和临床分期的60例宫颈癌组织中p16基因启动子区域5´CpG岛甲基化状态;采用PCR方法检测p16基因外显子1（E1)和外显子2(E2)纯合缺失情况;采用免疫组化的方法分析p16蛋白的表达缺失和减弱情况。结果显示正常对照组织及癌旁p16基因无甲基化,且无E1和E2缺失和p16蛋白表达异常。60例宫颈癌标本的甲基化率为21.67%（13/60）;p16 基因缺失率为15.00%（9/60）;p16蛋白表达下降或无表达为51.67%（31/60）。可见p16基因蛋白的阳性表达率随着临床分期升高呈明显下降趋势。结果提示p16基因失活在宫颈癌中多见且与病理分级密切相关。p16 基因甲基化在宫颈癌发生中起着一定作用。Abstract： To detect hypermethylation and aberrant expression of the p16 gene in cervical carcinoma (CC), methylation-specific PCR (MSP) was used to determine the methylation status of 5´CpG islands of the p16 gene, loss or decrease of p16 expression was analyzed by immunohistochemistry (IHC), and homozygous deletion of exon 1 (E1) and/or exon 2 (E2) was determined by PCR. in 60 cases of CC at different pathological grades and clinical stages. The results showed absence of methylation and presence of normal expression of the p16 gene in the control and adjacent tissues of CC. Hypermethylation, loss or decrease of expression and deletion of the p16 gene were detected in 21.67%(13/60), 51.67%(31/60) and 15.00%(9/60) of the tumor tissues, respectively. The rate of p16 expression markedly reduced with the increase of clinical stages. Our data suggested that inactivation of the p16 gene was a frequent event and positively correlated with pathological grades in CC, and that methylation of the p16 gene was an important event in carcinogenesis of CC.     

鼻咽癌CT 表现与p53 、p16 蛋白异常表达关系的研究

目的：研究p53、p16蛋白表达与鼻咽癌Cr表现的关系。方法：经病理证实鼻咽癌50例,全部病例做鼻咽轴位平扫,部分病例同时做冠状扫描。应用免疫组化SABC法检测所有病例中的p53、p16蛋白的表达。结果：鼻咽癌及鼻咽粘膜慢性炎症中p53蛋白表达率分别为60％和10％,p16蛋白表达率分别为32％和85％,p53、p16表达在两者间的差异有极显著意义（P〈0．005）。p53蛋白表达与鼻咽癌分化程度及Cr表现为副鼻窦受累,颅底骨质破坏相关（P〈0．05）。p16蛋白表达与鼻咽癌预后及Cr表现为颈部淋巴结转移相关（P〈0．05）。p53与p16有相关性（P〈0．005）。结论：p53、p16在鼻咽发生、发展中起重要作用,p53蛋白表达与鼻咽癌分化程度、浸润深度、颅底侵犯有一定相关性,p16蛋白表达与鼻咽癌颈部淋巴结转移和预后有一定相关性,p53,p16可作为评价鼻咽癌CT表现恶性度及预后的指标。     

p53和VEGF蛋白表达与子宫内膜癌的关系

目的：检测子宫内膜癌组织中血管内皮生长因子与突变型抑癌基因p53的表达情况,以探讨其在子宫内膜癌发生转移中的作用。方法：应用免疫组化S．P法检测45例子宫内膜癌及10例正常子宫内膜组织中VEGF和突变型p53的表达及其相关性,分析其与各临床病理参数之间的关系。结果：子宫内膜癌组织中VEGF及突变型p53蛋白表达阳性率均高于正常子宫内膜,两者呈显著正相关（P〈0．01）。两者阳性表达率均与临床分期、组织分化程度、淋巴结转移（P〈0．05）有关,VEGF阳性表达率与肌层浸润深度无明显相关性（P〉0．05）,而突变型p53表达则与肌层浸润深度有关（P〈0.05）。结论：VEGF和突变型p53与子宫内膜癌的发生、侵袭、转移和预后相关。     

PTEN蛋白在子宫内膜癌中的表达及其临床意义

目的　探讨抑癌基因PTEN产物PTEN蛋白在由正常子宫内膜过渡至子宫内膜癌过程中的表达缺失情况及其临床意义。方法　用SP免疫组化法测定 73例子宫内膜癌、 2 5例子宫内膜非典型增生、 71例子宫内膜增殖症和 31例正常子宫内膜组织中PTEN蛋白的表达 ,并与组织学类型、组织学分级、肌层浸润深度和临床分期等生物学行为进行相关分析。结果　PTEN蛋白在子宫内膜腺癌和癌前病变中的表达缺失率分别为 6 6 6 7%和 76 0 0 % ,表达缺失率与组织学类型(P <0 0 0 5 )和组织学分级有关 (P <0 0 5 ) ,与子宫内膜癌肌层浸润深度和临床分期无关 (P >0 0 5 )。结论　PTEN表达缺失是子宫内膜癌发生的早期分子事件 ,PTEN蛋白表达缺失是早期诊断子宫内膜癌及癌前病变较好的生物标志。     

子宫内膜癌中血管内皮生长因子和微血管密度的表达

目的：探讨子宫内膜癌血管内皮生长因子(Vascular Endometrial Growth Factor,VEGF)的表达,及其与临床病理参数的关系。方法：采用S-P免疫组化法,应用VEGF多克隆抗体检测50例子宫内膜腺癌及20例正常子宫内膜中VEGF的表达,计数微血管密度(Microvessel Density,MVD)。结果：子宫内膜癌中VFGF表达阳性率明显高于正常子宫内膜,分别为92％和30％,P＜0．01。子宫内膜癌中的MVD明显高于正常子宫内膜,分别为：46．0±4．5和14．0±1．7,P＜0．05。MVD在深肌层浸润组中显著高于浅肌层浸润组,分别为：69．9±16．8和42．8±4．4,P＜0．05。结论：VEGF、MVD与子宫内膜癌的发生有关。子宫内膜癌发生发展依赖血管生成。MVD可作为子宫内膜癌的预后因素。     

子宫内膜癌患者P16基因甲基化和血清CA125检测的临床意义

目的：探讨子宫内膜癌患者P16基因甲基化和血清CA125检测的临床意义。方法：采用DNA甲基化特异性PCR分别对46例子宫内膜癌及12例正常内膜对照组织中抑癌基因p16甲基化进行检测;对所有病例术前均测定血清CA125水平。结果：子宫内膜癌组p16甲基化率45．6％,而12例对照组织均未检测到甲基化;子宫内膜癌组血清CA125水平明显升高。结论：子宫内膜癌患者p16基因甲基化和血清CA125水平与发病关系密切,两者结合对早期诊断及预后判断具有一定的临床指导意义。     

子宫内膜癌患者P16 基因甲基化和血清CA125 检测的临床意义

目的:探讨子宫内膜癌患者P16基因甲基化和血清CA125检测的临床意义。方法:采用DNA甲基化特异性PCR分别对46例子宫内膜癌及12例正常内膜对照组织中抑癌基因p16甲基化进行检测;对所有病例术前均测定血清CA125水平。结果:子宫内膜癌组p16甲基化率45.6%,而12例对照组织均未检测到甲基化;子宫内膜癌组血清CA125水平明显升高。结论:子宫内膜癌患者p16基因甲基化和血清CA125水平与发病关系密切,两者结合对早期诊断及预后判断具有一定的临床指导意义。     

ARHI和P130 在子宫内膜癌中的表达和意义

目的：探讨ARHI和P130 蛋白在子宫内膜癌中的表达状况,同时分析两因子在子宫内膜癌中的关联性。方法：收集80 例子 宫内膜癌,子宫内膜非典型增生型80 例及同时期因子宫肌瘤切除的40 例正常的子宫内膜的详细病例及高质量切片,设计分组 并使用免疫组化S-P法检测ARHI 蛋白和pRb2/P130的表达状况,并探究此两因子与子宫内膜癌的关联性。结果：ARHI蛋白阳 性表达率在正常子宫内膜组（97.50%）,子宫内膜非典型增生型组（53.75%）和子宫内膜癌组中（38.75%）三组中依次递减,组间差 异有统计学意义,P<0.05。ARHI蛋白阳性表达降低或缺失与子宫内膜癌的的恶性程度,手术病理分期有关(P<0.05),与子宫内膜 癌的类型无关（P>0.05）。Rb2/p130 蛋白的阳性表达率在三组中逐渐降低,在正常子宫内膜组（100%）,子宫内膜非典型增生型组 （56.25 %）及子宫内膜癌组（36.25 %）,组间差异有统计学意义,P<0.05。Rb2/P130 的阳性表达率降低或缺失与子宫内膜癌的组织 恶性程度,手术病理级别和组织学类型有关(P<0.05),同时Spearman 等级相关性分析表明：ARHI蛋白和Rb2/p130 蛋白表达在子 宫内膜癌中为正相关,r=0.435。结论：ARHI蛋白和Rb2/p130 的阳性表达率降低或缺失可能在某种程度上导致子宫内膜癌的产生 和恶化。     

野生型P53、P16基因协同对肺腺癌细胞系生长抑制作用的研究

为了探讨野生型P53基因及P16基因在恶性肿瘤基因治疗中的作用,用腺病毒为载体将野生型P53基因转入高、低转移的肺腺癌细胞系Anip973、AGZY83-a和经野生型P16基因质粒转染的高、低转移肺腺癌细胞系Anip973（Anip973P16）、AGZY83-a（AGZY83-aP16）。对各组转染细胞进行生长曲线、MTT生长抑制率、原位末端标记、Western-blotting等技术检测分析。结果发现（1）野生型P53蛋白的过表达对上述肺腺癌细胞系均呈现出较强的生长抑制作用。（2）野生型P53蛋白的过表达对高转移肺癌细胞系Anip973的抑制作用明显高于低转移细胞系AGZY83-a。（3）野生型p53蛋白的过表达对经野生型P16基因转染的高、低转移的肺癌细胞Anip973、AGZY83-a抑制作用明显高于未经P16基因转染的细胞。野生型P53基因可以作为肺腺癌基因治疗的候选基因。肿瘤抑制基因P53、P16的联合转染可能是对肺腺癌进行基因治疗的有效手段。 Abstract：To investigate the suppression effect of tumor suppressor genes in lung adenocarcinoma cell lines,we transferred a pair of lung adenocarcinoma cell lines with different metastasis potential,Anip973(High-metastasis potential cell line) and AGZY83-a (Low-metastasis potential cell line)and this pair of cell lines transfected with P16 gene:AGZY83-a P16 and Anip973 P16 with wild type P53 gene with adenovirus vector.The suppression effects of P53 gene were evaluated by cell growth curve,MTT,western-blotting analysis and TUNEL technique.Overexpression of wild-type P53 gene in AGZY83-a,Anip973,Anip973 P16 and AGZY83-a P16 inhibited the growth of these four kinds of lung cancer cells and induced apoptosis of the cells.The suppression effect of P53 gene in Anip973 and Anip973 P16 was higher than AGZY83-a and AGZY83-a P16 while co-expression of P53 and　P16 in this pair of cell lines inhibited the cells more efficiently comparing with the expression of P53 alone.Wild-type P53 gene might act as a candidate gene in lung adenocarcinoma gene therapy while co-transfection of P53 and P16 genes was a more effective method.     

人类癌组织中端粒酶活性与p16基因表达的相关性

端粒酶是一种由RNA和蛋白质组成的RNA酶,依其自身序列逆转录合成端粒序列并添加到染色体末端,以保证细胞分裂的稳定性。近年来的研究已证实端粒酶的激活是许多恶性肿瘤发生的先决条件。p16基因作为一种重要的抑癌基因,其编码产物P16蛋白可通过p16-cyclinD/CDK-pRB途径调控细胞周期。在多种肿瘤中均出现p16基因表达异常,其表达缺失与人类肿瘤的发生发展关系密切。就端粒酶活性与p16基因表达在人类癌组织中的相关性及其可能作用机制进行总结分析。     

PTEN基因和P53基因在子宫内膜癌中的表达及意义

目的：探讨PTEN基因和P53基因在子宫内膜癌中的表达及临床意义,为子宫内膜癌的治疗提供参考依据。方法：用免疫组化法检测50例子宫内膜癌患者PTEN基因缺失和P53基因突变情况,并分析两者与子宫内膜癌不同病理变化的相关性。结果：PTEN缺失24例,缺失率48.00%,进一步研究显示PTEN缺失与细胞分化程度和肌层浸润情况密切相关（P〈0.05）,P53突变32例,缺失率64.00%,并进一步研究显示P53突变与FIGO分期,细胞分化程度和肌层浸润情况密切相关（P〈0.05）。结论：PTEN基因缺失和P53基因突变与子宫内膜癌发生和发展密切相关,以PTEN基因和P53基因为靶点的生物治疗在进展期内膜癌中的治疗价值值得进一步深入研究。     

PTEN基因和P53基因在子宫内膜癌中的表达及意义

目的:探讨PTEN基因和P53基因在子宫内膜癌中的表达及临床意义,为子宫内膜癌的治疗提供参考依据。方法:用免疫组化法检测50例子宫内膜癌患者PTEN基因缺失和P53基因突变情况,并分析两者与子宫内膜癌不同病理变化的相关性。结果:PTEN缺失24例,缺失率48.00%,进一步研究显示PTEN缺失与细胞分化程度和肌层浸润情况密切相关(P0.05),P53突变32例,缺失率64.00%,并进一步研究显示P53突变与FIGO分期,细胞分化程度和肌层浸润情况密切相关(P0.05)。结论:PTEN基因缺失和P53基因突变与子宫内膜癌发生和发展密切相关,以PTEN基因和P53基因为靶点的生物治疗在进展期内膜癌中的治疗价值值得进一步深入研究。