植物冰冻切片条件的优化及其与石蜡切片在组织化学应用中的比较

冰冻切片是植物组织学研究中一项重要的实验技术,冷冻温度和冷冻时间是决定切片质量的关键因素。通过比较15种冰冻切片条件,得出植物组织直接冰冻切片较适宜的冷箱温度、冷台温度和冷冻时间。同时,通过对5种植物的不同组织进行组织化学染色,比较了新鲜材料直接冰冻切片与常规石蜡切片在不同化学成分鉴定上的异同及各自的适用范围。结果表明,对于多糖、蛋白质和角质,两种切片方法的鉴定结果比较一致,但对于脂肪只能采用冰冻切片技术。研究结果对植物组织学实验和研究方法的改进具有一定的参考价值。     

超声波在植物切片整体染色中的应用

一、引言动、植物切片整体染色法,是从事切片工作者长期待解决,并为许多从事切片的技术人员尝试的一个方法。但在植物切片两色整染中,效果往往不能令人满意。这个方法因为操作简单,时间经济,可节省人力、物力、     

冰冻切片法制作家兔眼球切片

用Ｓｚｅｎｔ－Ｇｙｏｒｇｙｒｉ液固定,明胶包埋,冰冻切片法制作 家兔眼球切片,获得了完整球壁的理想切片,其中睫状体,睫状突和睫状小带的形态结构更为理想。     

植物徒手切片

常听到中学教植物学的先生们谈,他们感到课好教,而能找到合适的实验材料满足同学们的学习要求却比较困难,特别是讲到植物的内部构造则更感到抽象。不是没有切片就是切片不合用,学生看了不容易懂,反而有时会减低了学生们的学习情绪。在当前条件下,好多中等学校设备还未达到完美的时候,这种情形可能是相当普遍的。切片的供应还不是那么十分充足,若自己制做,在设备方面多不够条件,即纵然有设备,而无论在时间、药品等方面多不太经济。所以愿介绍一个简单而有效的办法,供大家参考。     

植物切片两色一步整染法

动植物切片整体染色法,是从事切片工作者长期有待解决、并为许多从事这方面技术人员尝试的一个方法。在植物切片两色整染中,效果也往往不能令人满意。本方法因操作简单,时间经济、省人省力,尤其适用于切片的大批量生产,为教学科研提供大量切片。作者经多次反复试验,摸索出了用叔丁醇作溶剂配制番红、固绿混合液,应用于植物材料切片前整体染色,效果良好。     

用石蜡包埋制作全眼球切片的改进

制作全眼球切片标本的传统方法是用火棉胶包埋,虽能使眼球切片保持完整,而不易制作较薄的切片,整个制作过程需要的时间也比较长。用石蜡包埋制作全眼球切片的方法已有过报道。由于眼球的结构与致密度差异大,各部位软硬悬殊,要做出比较完美的切片标本是不大容易。为了进一步缩短制片时间,减少脱水程序,防止切片易碎,制作出好切易展的切片,对石蜡包埋制作全眼球切片作了一些改进,方法如下:     

数字切片在组织胚胎学实验教学中的应用

传统的组织胚胎学实验课以观察玻璃切片为主,玻璃切片在实验教学使用中存在易褪色、不易永久保存和使用时受时间和空间限制等缺陷,利用全自动显微镜扫描系统将玻璃切片制作为数字切片,结合显微数码互动系统和校园网络系统应用于组织胚胎学实验教学,不仅能有效解决优质典型玻璃切片片源不足带来的教学问题,也有利于教师的备课讲解、学生的复习与讨论以及师生间的互动,推动了组织胚胎学实验教学和考试模式的改革。该文主要介绍组织胚胎学数字切片的特点、应用及发展前景。     

火棉胶包埋组织切片及冰冻切片的连续切片与染色

近年来为了教学和研究所用之切片标本,曾广泛使用火棉胶包埋组织切片和冰冻切片法,这两种方法虽然它是有比石腊包埋组织切片稍厚一点,但它的优点是远超过了缺点。组织用石腊包埋,在组织经过不同浓度酒精脱水后,须用氯仿或二甲苯透明,再置于58℃温箱石腊中几个小时。以上透明剂具有使组织收缩变小,在经过这样高温之下,组织增加它由收缩而扭转和变形,纤维曲折,细胞及所含物质缩小,折光率增强,组织内所含之尖脂脂亦易于被以上透明剂所溶解,致染色不佳。作为观察和研究组织形态是不够美满的。因为石腊包埋组织制作切片有以上之缺点,     

石蜡切片法中染色技术的改良

石蜡切片是观察动植物组织最直接有效的方法之一。本实验对水稻品种9311的叶片进行切片并用1%的番红—乙醇染液和1%的苯胺蓝—乙醇染液进行染色,结果显示此改良方法得到的组织比传统石蜡切片更完整,染色的效果比传统石蜡切片更清晰,并且利用此方法对水稻叶片进行制片,可以大量缩短制片后期复水及脱水的时间,提高工作效率。     

FISH检测乳腺癌石蜡组织切片的酶消化时间的探究

目的:探讨在FISH实验中,乳腺癌石蜡组织切片的最适酶的消化时间.方法:收集42例手术切除的乳腺癌标本,经过固定、包埋和切片,其中12份标本的组织切片进行胃蛋白酶消化时间的优化实验,分别观察酶的消化时间为10分钟,15分钟,20分钟和25分钟对FISH结果的影响,随后在酶的优化条件对剩余30份组织切片继续杂交实验.结果:酶消化10min提示消化时间不足,酶消化15min提示消化时间适合,结果能很好地判读,而酶消化25min提示消化过度.对剩余的30份组织切片进行了18min的消化,杂交信号基本都能判读.结论:本实验条件下,石蜡包埋切片的最适消化时间在15-20min,不同实验室及不同的FISH处理过程会略有差异.所以建议FISH实验之前,应对酶的消化时间首先进行摸索.     

怎样制作好实验动物病理的石蜡切片

有关动物实验病理组织切片的制作文献报告甚少,本文小结了我们十多年来制作不同种类的实验动物病理组织切片的经验,对必须选用缓冲中性甲醛固定液和控制各类组织的脱水、透明浸蜡时间以及动物组织切片的过程特殊处理事宜作了说明。     

甲状腺组织冷冻切片的优化

目的优化冷冻切片的关键条件,以期提高甲状腺组织冷冻制片效率、切片质量与染色效果。方法收集术中新鲜送检的甲状腺标本,通过对比实验,比较冷冻切片制作环节中取材厚度、速冻方法与染色方法等因素对制片质量的影响。结果甲状腺组织冷冻切片取材厚度以0.2~0.3cm为佳;预先制作“冰垫”的托头并于上方加盖冷冻冰锤,有利于提高速冻效率、提高组织结构清晰度、减少组织块崩裂、减少冰晶、减少裂隙;机染有利于提高染色优良率并减少染色时间。结论选择适当的取材厚度、优化速冻方法、采用优质的染色方法,可显著提高甲状腺组织冷冻切片的制片质量,为精准的术中病理诊断奠定基础。     

脂肪组织石蜡切片制作方法探讨

目的探讨脂肪组织石蜡切片制作方法,改善和提高其切片质量。方法将送检的脂肪组织切开固定于中性甲醛液中;取材后将标本放入脱水机中,调整脱水机设置程序,在常规方法的基础上适当增加组织再固定及脱水、透明时间;包埋时采取挤压组织等改进方法。结果通过改进和调整后制作的脂肪组织蜡块平整无塌陷,石蜡切片优良,厚薄均匀,完整,无空洞、无挤压、镜下组织结构完整清晰,细胞无挤压、重叠等现象。细胞形态清晰,着色均匀艳丽。结论通过上述方法的改进,能尽可能多地减少脂肪组织的脂滴,增加脂肪组织的硬度,使组织和石蜡能很好的融合在一起,有利于切出完整的厚薄均匀的石蜡切片,提高制片质量。     

肾移植穿刺标本冰冻切片制作方法及体会

目的介绍一种肾移植穿刺标本冰冻切片的制作方法并分享制片过程中的体会。方法选取2017年武汉大学人民医院手术室提供的肾移植供体穿刺标本10例,分别记录每例冰冻切片的制作方法,切片质量,制片时间。收到标本后,首先在样本托上均匀涂抹一层普通胶水,于冷冻锤下压平成型30s,取出样本托,将标本铺展成一条直线于样品托上之后,在放置好的标本上均匀涂抹一层普通胶水覆盖标本,并用冷冻锤轻轻压平1min,取出进行切片。切片经改良AFA固定液固定,苏木素-伊红(hematoxylin-eosin staining,HE)染色制片后,显微镜下观察。结果切片完整平坦,无褶皱、卷缩、刀痕;染色核质分明,红蓝适度,对比度好;制片时间在13min左右。结论肾移植穿刺标本经两步法包埋再切片,联合改良AFA固定液固定及HE染色,大大缩短了制片时间,提高了制片质量,易于观察,且重复性好,可以推广。     

影响冷冻切片质量因素的分析

冷冻切片 (frozensection)是在低温恒冷条件下 ,使组织迅速冷冻达到一定硬度后制作成切片 ,冷冻切片的组织不需经过任何处理 ,组织中的糖、脂、蛋白质、酶、抗原、抗体等化学成分不受影响而得以保存。它除常用于手术中的快速病理诊断 ,还用于某些组织化学染色 ,酶的显示、抗原、抗体的检测 ,免疫荧光等方面。冷冻切片是一种组织切片快速制作方法 ,存在着多种干扰因素 ,影响冷冻切片质量主要有以下四个方面。1组织冷冻与冰晶形成冰晶的形成是组织在冷冻固化过程中 ,由于冷冻缓慢 ,时间过长 ,细胞胞浆和组织间隙内未结合水逐渐析出所形成 ,融…     

巧用水浴锅为石蜡切片伸展器

巧用水浴锅为石蜡切片伸展器以往制作石蜡切片的展片用具为：石蜡切片伸展器。虽然，市场上有现成的出售，但是价钱一般都在３００元左右。对于不经常使用者来说，无疑是一种额外开支。特别是对于师范院校、中专、中学等科研经费比较少的单位来讲，也确有其购买的难处。本...     

盐生肉质草本植物海马齿叶片石蜡切片简易方法

海马齿是海边盐生肉质草本植物,由于叶片的肉质化,传统石蜡切片制作路线不能制作出结构完整,效果较好的切片.本实验以传统的石蜡切片方法为基础,在固定方法选择,脱水时间控制,包埋温度,染色等方面做了适合海马齿叶片特点的改良,固定方法采用戊二醛固定液固定24 h,并洗脱;脱水每级梯度时间为1 h,包埋温度在100℃,染色方法采用固绿染色法.结果表明:采用这种改良的方法可以制作出染色清晰,组织结构完整的海马齿叶片切片.这对其它肉质化植物的石蜡切片制作有着借鉴作用.     

超薄切片套片法

超薄切片捞取方法很多,近年来,我们采用铂金丝环套片法,与目前采用的沾片法和水底捞片法相比,具有较多的优点。铂金丝环套片法操作简单,易于掌握,而且能使切片平整地铺在铜网中央。沾片法易将带状的连续切片打乱,切片也往往有皱折。水底捞片法,固然可以使切片保持平整,但操作不易掌握,对于缺乏经验的新手来说,很容易将切片捞偏,即使是熟练的操作者,     

环氧树脂厚切片的染色

供电子显微镜观察的超薄切片,一般用各种环氧树脂作包埋剂。用环氧树脂的包埋头也能切成厚1—2微米的切片,供光学显微镜观察。这种厚度的切片与几百埃计算的超薄切片相对而言,可称之厚切片或半薄切片。在超薄切片之前,用环氧树脂包埋头先切     

鱼卵切片技术

鱼类成熟的游离卵球,卵黄十分丰富,连续切片很不容易。若按过去的一般方法,切片易碎,显微照相亦欠佳,同时容易褪色,镜片标本不易长期保存。如果在固定、脱水、染色等方面加以改进,切片即不易脆碎,可得比较满意的结果,且处理过程也较简单。