家畜及实验动物高分辨染色体研究进展

高分辨染色体(High Resolution chromosome HRC)是指通过某种处理,获得有丝分裂早期染色体分裂相,早期染色体较中中期染色体长,显带后可以得到更多更细的带纹,从而提高人们对染色体的分辨力.Yuns, J. J(1976)首先以氨甲喋呤使细胞同步化法,建立了人类高分辨染色体技术.随之国内外许多学者对人类高分辨染色体进行了广泛而深入的研究.近几年,关于家畜和实验动物的高分辨染色体研究陆续亦有一些报道,但理论和应用方面的进展依然有限.本文试图就家畜和实验动物高分辨染色体研究的方法、进展以及意义进行阐述,同时提出值得探讨的几个问题.     

四种胡子鲇核型的比较研究

本文以鱼类肾细胞为材料,用空气干燥法制备染色体标本,对四种胡子鲇的核型进行了分析和比较。观察到这几种鱼的肾细胞中都存在不同程度的罗伯逊易位和其他染色体易位的现象。在蟾胡子鲇的核型中发现有粒状染色体的存在;在四种鱼中都发现可能是XY性染色体的异型染色体。结果还表明,斑点胡子鲇的核型可能由胡子鲇的核型通过染色体罗伯逊易位进化而来,而蟾胡子鲇的核型则是这四种鱼中最原始的一种。     

小鼠内细胞团标志蛋白的性质、分离和纯化

我们用二相电泳方法在小鼠畸胎瘤系统中发现小鼠胚胎内细胞团标志蛋白双联体(分子量39,000,p14.4—4.5)也存在于未分化的胚胎癌细胞株(PSAI-NG2、F9、PCC3)中,但在已分化细胞株滋养层母细胞癌TDM1中用二相电泳方法不能检查到这蛋白。把EC细胞分为细胞质、细胞核、染色体三部分再进行检查,可以清楚地看到这蛋白主要存在于染色体部分。把染色体再分成0.35M NaCl可溶性,2M NaCl可溶性及2M NaCl不溶性三个组份时,则这蛋白出现在0.35M NaCl可溶性组分中,表明它是与染色体疏松结合的非组蛋白染色体蛋白。这蛋白是一种耐热性蛋白,在80℃受热10分钟不能使它变性。用制备型SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳对经热处理的0.36M NaCl可溶性染色体蛋白进行分离,可得到电泳纯的小鼠内细胞团标志蛋白。由于这蛋白约占细胞总蛋白0.6%,与染色体疏松结合,又与早期胚胎细胞的多能性相关,提示它在维持多能细胞染色体构象方面有重要作用。     

通过测定DNA来确定啤酒酵母的染色体倍性

已经找到一种确定工业用酵母菌株的染色体倍性的方法。这种方法包括测定酵母单个细胞的 DNA 含量,可以通过血球记数器细心地记下细胞数目,然后通过比色法测定 DNA 的数量来实现。应用这一技术,有两株正在研究的陈贮啤酒酵母被确认为四倍体。     

染色体显带法及其临床应用

1970年瑞典Caspersson等结合细胞培养和荧光染料染色技术,发现人体细胞的染色体上面具有带状结构。1971年人类细胞遗传学标准化巴黎会议,审查了Caspersson氏的工作,拟订了染色体带型的命名法,并建议今后人类染色体的鉴别以报告中描述的荧光染色体带型为依据。几年来,各国陆续发表了不少报道,不仅充分证实人体染色体带纹结构的存在,而且在显带技术、显带机理和实际应用方面取得了较快的进展。 原来,在50年代末到60年代,只能根据染色体的相对长度、着丝点的位置、着丝点两侧的长臂和短臂的相对长度以及随体的有无来鉴别各条染色体。几个组的染色体,特别是C组各对染色体之间,上述四种特征很相近似,不易区分。染色体带型的发现,克服了这个缺点,使人体染色体结构和细胞遗传学研究从60年代的一般染色体组型分析进展到对染色体结构更精细的分析,在理论上和实践上都有重要的意义。 本文拟报道我们对于人体细胞染色体显带方法和其临床应用的初步结果。     

黑斑蛙骨髓细胞染色体标本制备的新方法

染色体标本制备是黑斑蛙分子细胞遗传学研究的基础。为了简化操作程序,缩短实验周期,建立了黑斑蛙染色体制备的一种新方法——骨髓细胞体外短时培养与秋水仙素同步处理法。该方法操作简便,重复性较好,可在较短时间里制备出分裂相较多且形态良好的蛙染色体标本,适用于核型分析、染色体荧光原位杂交、染色体显微分离和单染色体文库构建等多个方面的研究。     

哺乳动物染色体高分辨显带研究现状

高分辨染色体（High Resolution Chromosome, HRC）是指通过某种处理,获得有丝分裂早期染色休 （指晚前期、前中期、早中期染色体）分裂相,此时分裂 相的染色体较中中期染色体长,显带后可得到更多更 细的带纹,从而提高了人类对染色体的分辨力。Yunis (1976)134'首先以氨甲喋吟使细胞同步化,再使细胞 短时暴露于秋水酸胺中,从而提出了对400, 5-50,850 和1200条带时期的染色体进行研究的技术,高分辨染 色体应运而生。接着国内外许多学者对人类染色体进 行了高分辨分带研究『’一,,‘,一,‘’。人类细胞遗传学命名 常务委员会（1981)制定了人类高分辨染色体显带命名 的国际体制‘’‘’。这项工作大大促进了人类染色体高 分辨的研究,目前这项技术已经广泛应用于临床医 学‘4-1,t8,11,37 3。动物遗传学家借鉴人类高分辨染色 体技术对一些哺乳动物的染色体进行了高分辨研 究“,,,,之盆,川,但理沦和应用方面的研究均进展较'R o 本文对哺乳动物高分辨染色体研究的方法、进展以及 意义进行了阐述,同时提出了值得探讨的几个问题。     

藏猪种质资源细胞遗传学研究

藏猪是我国宝贵的地方品种资源,也是我国国家级重点保护品种中唯一的高原性猪种.通过细胞遗传学方法,对藏猪以及长白猪的普通核型、G-带染色体以及C-带染色体进行对比研究,发现藏猪特有的染色体带型.这为分析鉴别藏猪种质资源提供了细胞遗传学证据.     

应用引物原位标记技术检测21号染色体

应用原位引物标记技术（PRINS）检测了21号染色体着丝粒,在外周血和绒毛细胞的标记效率分别为91％和93％,实验过程可以在2h之内完成,证明这一检测方法是一种快速、灵敏、特异性良好的染色体数目检测方法,有可能用于21号染色体数目异常的快速诊断。     

一种野外制备染色体的新方法-骨髓整体低渗法

本文以整体低渗的方法进行哺乳与鸟类的染色体制备,以探讨一种在野外条件下,无法进行离心时,适合细胞遗传学研究的染色体制备新方法。应用该方法可在野外考察中,同时开展细胞遗传学方面的工作在某些特殊研究课题中,该方法有着广阔的应用前景。     

产生人抗体的转染色体动物研究进展

现已证明,应用抗体治疗疾病是一种非常成功的方法。单克隆抗体的生产使免疫治疗达到一个新水平,但鼠源单抗在治疗人体疾病方面有很多问题,而人源化抗体可以解决这些问题。目前抗体人源化已由鼠嵌合抗体发展到了转基因动物表达完全人抗体阶段,而人类人工染色体(HAC)载体的发展和微细胞介导的转染色体技术使得产生携带人类免疫球蛋白基因位点的转染色体动物成为可能。通过HAC将人的免疫球蛋白基因转入后,这类转染色体动物可以产生大量人源化多克隆抗体,这对预防及治疗疾病,甚至防御生物武器都有很重要的作用。转染色体技术可以使动物携带大而复杂的人类基因或基因簇,这些转基因动物有助于研究人类基因组在体内的功能作用,并用于各种疾病研究和生产药物蛋白。     

中国仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)中期染色体悬浮液的制备及其流式核型分析

流式核型分析是用流式细胞光度术(FCM)定量分析染色体的 DNA 分布,以便得到某种染色体在物种或细胞群体中的频数。其原理是把染色体分散于悬浮液中,用荧光染料对DNA 进行染色后,染色体以百万分之一秒的速度逐个通过激光束的焦点,产生的闪光被接收,并转换为电脉冲后,以频率分布图表示。流式分类是上述方法的延伸,使带有特殊 DNA     

染色体转位(Translocation)与癌症

许多种癌症是由染色体转位引起的。这是因为转位使原癌基因活化并过量表达,或是转位使基因融合。大部分已确认的转位都与免疫系统(免疫球蛋白和T细胞受体基因)本身固有的V(D)J重组有关。此外,外界因素,如电离辐射和某些化学药物等因素使DNA双链断裂,也可能导致染色体转位和癌变。了解染色体转位和癌变机制,对临床诊断和防治具有重要应用价值 。     

云南、贵州24种果蝇的核型研究

随着细胞遗传学的发展和染色体研究技术的改进,许多作者(Lin et al.,1974;Singh et al.,1979;Baimai,1980)应用染色体的显微照片对果蝇自然种组的有丝分裂中期染色体数目、形态等进行较细致的分析比较,使细胞遗传学分析对系统分类和物种形成赋予新的意义。     

中国地鼠减数分裂染色体的研究

减数分裂是发生在二倍体生殖细胞形成配子时的一种特殊的细胞分裂。在这一过程中,染色体经历着一系列的复杂变化,即配子的染色体数减半和同源染色体间的遗传物质交换等。因此这方面的研究,无论在细胞遗传的理论或应用上(评价各种诱变因子对性细胞的影响)都具有重要的意义。     

四细胞杂交克隆的NORs活性和均染区的巨染色体

通过聚乙二醇使3个小鼠细胞与1个中国仓鼠骨髓细胞融合,获得四细胞杂交克隆。在第6世代,该杂种细胞含有100条小鼠染色体和5条仓鼠染色体。本文报道在杂种细胞中双亲NORs活性均受抑制,不仅73.2％的仓鼠NORs活性被抑制,而且还有18.3％的小鼠NORs失去了活性。由于在杂种细胞中,仓鼠第3号染色体上的NORs活性仍保留它原来的91.2％,因此我们的结果表明:不同染色体上18s和28s rRNA基因的转录活性可有明显的差异,这可能与它们所在的染色体结构有关。我们首次报道了杂种细胞中所出现的均染色区巨染色体,并对这条巨染色体进行了G-带、C-带和Ag-NORs的分析。对这条巨染色体与18s和28srRNA基因扩增的关系进行了初步讨论。     

北京地区51种蚜虫的染色体组型

本文报道了通过改进蚜虫染色体制片方法,对北京地区51种常见蚜虫的染色体进行研究的结果。在这51种蚜虫中,染色体数目范围由2n=4至2n=18,出现频率最高的为2n=8、10、12。根据染色体的长度和形态,总结出8种蚜虫染色体组型,并将这几种组型与两种蚜虫分类系统进行对照,在较高级的分类水平上,讨论了这二种分类系统安排与细胞学证据的相符程度。     

禾谷镰孢菌Fusarium graminearum Schwabe分生孢子萌发过程中的核相变化及有丝分裂过程观察

通过Giemsa染色观察禾谷镰孢菌Fusarium graminearum分生孢子萌发过程中的核相变化及有丝分裂过程。观察表明,分生孢子细胞为单核,细胞核在分生孢子细胞内分裂后进入芽管,在芽管内进行多次分裂,使芽管内细胞核数目不断变化。禾谷镰孢菌有丝分裂过程可以分为4个时期,前期染色体逐渐浓缩变短,中期染色体清晰可见,后期染色单体发生分离并向相反的两极移动,末期形成新的子核。有丝分裂过程中染色体的分离同步或不同步,不同步分离中的滞后染色体形成后期桥的现象更为普遍。     

第一条人工染色体建成

哈佛医校的两位研究人员Andrew Murray和Jack Szostak建成了世界上第一条能正常工作的人工染色体。酵母细胞忠实地复制了染色体并在细胞分裂时传给他们的子细胞。仅管Szostak对《新科学家》杂志说要应用还有几年,但这一工作为更有效地治疗遗传疾病展现了新的希望。     

染色体转位（Translocation）与癌症

许多种癌症是由染色体转位引起的。这是因为转位使原癌基因少化并过量表达，或是转位使基因融合。大部分已确认的转位都与免疫系统（免疫球蛋白和Ｔ细胞受体基因）本身固有Ｖ（Ｄ）Ｊ重组有关。此外，外界因素，如电离辐射和某些化学药物等因素使ＤＮＡ双链断裂，也可能导致染色体转位和癌变。了解染色体转位和癌变机制对临床诊断和防治具有重要应用价值。