错配修复系统hMSH2基因IVS12(-6)T>C多态及饮食习惯 与结直肠癌的易感性

目的:研究江苏省结直肠癌发病与hMSH2基因IVS12(-6)T>C多态及饮食习惯的相关性。方法:对江苏省金坛、泰兴和淮安地区近2年来新发结直肠癌患者共计108例以及配对180例健康体检者的饮食等生活习惯因素进行调查,提取外周血DNA,应用PCR-DHPLC和DNA序列分析的方法,采用病例对照研究结合现场收集的流行病学资料统计分hMSH2基因IVS12(-6)T>C与结直肠癌发病的关系。结果:hMSH2基因IVS12(-6)T>C在家族性结直肠癌患者中检出率较高,且与散发性结直肠癌病例之间差异有统计学意义(P<0.05),在喜食油炸和腌渍食物组,hMSH2基因IVS12(-6)T>CC突变与正常人群之间也存在明显的统计学差异(P<0.05)。结论:hMSH2基因IVS12(-6)T>C突变,通过遗传性和后天获得性等多重因素影响,使得该突变的携带者有更高的结直肠癌发病风险。     

SARS冠状病毒S蛋白候选细胞受体氨基肽酶N的基因变异研究

氨基肽酶N是人类冠状病毒HCoV 2 2 9E的细胞受体 ,可能为SARS冠状病毒 (SARS CoV)S蛋白的受体。应用变性高效液相色谱 (DHPLC)技术筛查了正常无关个体中氨基肽酶N编码基因ANPEP的全部外显子及其两侧部分内含子序列。对筛查中DHPLC峰型提示有基因变异存在的DNA片段行PCR产物直接测序 ,共发现 9种单核苷酸多态 (SNP) ,其中 4种为非同义SNP ,分别为T32 1M(96 2C >T)、S6 5 1L(195 2C >T)、S75 2N(2 2 5 5G >A)和G76 4R(2 2 90G >A) ;其余 5种SNP为T795T(2 385C >T)、IVS7+17G >A、IVS14 16A >G、IVS17+12C >G和IVS17+44C >T。这些SNP的发现 ,为SARS CoV的宿主遗传因素研究 ,特别是发现SARS CoV感染和SARS发病的易感基因或抗病基因 ,提供了遗传标记。     

可动性I型内含子

真核生物绝大多数基因初始转录物的后加工过程涉及内含子(intron,亦称间插序列IVS)的切除和外显子(exon)的连接。自从Kruger和Cech等人首次发现嗜热四膜虫(Tetrahymena thermophila)大亚基rRNA的间插序列能够催化自身切除和外显子连接以来,自我剪接内含子(self splicing intron)及其他有催化功能的RNA的例子在不断增多.RNA催化功能的发现强     

中国西南阿昌族G6PD缺陷的特征及新单体型487G>A/IVS5-612(G>C)的鉴定

探讨中国西南部疟疾高发区云南省梁河县阿昌族人群的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺陷的发生率及其分子特征. 四氮唑蓝纸片法和G6PD/6PGD活性测定筛查490阿昌族个体 (男260人, 女230人), 发现男性G6PD缺陷的发生率为7.31% (19/260); 女性为4.35 (10/230). PCR-DHPLC-Sequencing 或PCR-Direct Sequencing分析19个阿昌族无关个体G6PD基因外显子2~13, G6PD Mahidol (487G>A)的突变率为84.2% (16/19); 所有G6PD Mahido均与新的多态性IVS5-612 (G>C)连锁. G6PD 487G>A/IVS5-612 (G>C) 构成新的单体型成为这一阿昌族群体G6PD缺陷的分子特征之一, 已提交GenBank (登录号: EF190463). 阿昌族G6PD Mahidol 的高发与缅甸人群G6PD Mahidol 突变率 (91.3%, 73/80) 极为相似, 这一结果提示阿昌族与缅甸人群之间有着广泛的基因交流 (gene flows). 而中国其他少数民族最常见的突变G6PD Canton (1376G>T) 和G6PD Kaiping (1388G>A) 在这一阿昌族人群中没有找到, 提示阿昌族与其他少数民族的G6PD基因突变热点不同. 本研究数据是有关阿昌族G6PD遗传学的首次报道, 将为研究阿昌族起源、迁移提供线索并有助于上述地区疟疾的防治.     

急性冠脉综合征患者PAPP-A基因IVS6+95(C/G)多态性与血浆PAPP-A水平及斑块性质的相关性

为研究湖北十堰地区急性冠脉综合征(ACS)患者PAPP-A基因IVS6 +95(C/G)多态性与血浆PAPP-A水平和斑块性质的相关性,随机选择215例ACS患者(包括58例急性心肌梗死(AMI)患者、73例不稳定型心绞痛(UAP)患者和84例稳定型心绞痛(SAP)患者)及142例健康对照者作为研究对象,检测PAPP-A基因IVS6+ 95 (C/G)多态性和血浆PAPP-A浓度,并进行统计学分析.结果显示,AMI组、UAP组和SAP组的PAPP-A浓度具有极显著差异(p＜0.01),在稳定性斑块和易损性斑块组间的PAPP-A浓度亦具有极显著差异(p＜0.01);AMI组、UAP组和SAP组与对照组间的基因型频率和等位基因频率具有显著差异(p＜0.05);在ACS组和对照组中,组内各类基因型人群的血浆PAPP-A浓度的差异不显著(p＞0.05).结果表明,PAPP-A基因IVS6+ 95多态性与急性冠脉综合征患者密切相关,血浆PAPP-A浓度与斑块性质相关,能够反映ACS患者斑块的易损性,是ACS患者危险分层的标志物.     

II类内含子的研究进展

自1977年以来,发现绝大多数真核生物的基因都是不连续的,即在编码序列中间有一个或数个间插序列(intervening sequence,IVS),前者被称为外显子(exon),后者被称为内含子(intron)。在DNA转录时,外显子和内含子的全部序列都被转录,形成前体mRNA。然后经过转录后加工,引入5′端帽子结构,3′端加上一段多聚腺苷酸。再经过剪接,去除不翻译的间插序列,把翻译部分连成一条链,形成成熟的mRNA。而原核生物的基因转录成mRNA,随即翻译成蛋白质,基因是连续的,在转录和翻译的过程中不需要剪接。     

长期服用复方丹参滴丸对老年急性心肌梗死患者PCI术后左室重构及炎症因子水平的影响

目的:探讨长期服用复方丹参滴丸对老年急性心肌梗死患者PCI术后左室重构及炎症因子水平的影响。方法:收集我院收治的的120例急性心肌梗死患者,随机分为实验组和对照组,每组60例。所有患者均行经皮冠状动脉介入术,术后对照组患者给予阿司匹林肠溶片和波立维治疗;实验组患者在对照组基础上给予复方丹参滴丸治疗。观察并比较两组患者治疗前后血清氨基末端脑钠肽(NT-pro BNP)、多普勒超声心动图[左舒张末期内径(LVEDD)、室间隔厚度(IVS)、左室舒张末期内径(LVD)水平]、血清白介素-6(IL-6)以及白介素-8(IL-8)水平。结果:与治疗前相比,两组患者治疗后的血清NT-pro BNP、IL-6、IL-8、LVEDD、IVS、LVD水平均下降,差异具有统计学意义(P0.05);与对照组相比,实验组患者的NT-pro BNP、IL-6、IL-8、LVEDD、IVS、LVD水平较低,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:长期服用复方丹参滴丸能够明显抑制老年急性心肌梗死患者PCI术后的左室重构,这可能与其降低血清IL-6、IL-8水平有关。     

免疫球蛋白重链可变段和T细胞受体可变段的分子进化研究

为阐明免疫球蛋白(Ig)和T细胞受体(TCR)在抗体多样性产生机理上的异同,作者比较了Ig重链可变段(Ig V_H)和TCR可变段(TCR V)的密码子替代率和协同进化,并分析异同的原因。共搜集8种鼠和3种人的TCR α链可变段(V_α),11种鼠和1种人的TCRβ链可变段(V_β),以及2种鼠和4种人的T细胞γ链可变段;同时搜集11种鼠、3种人、3种南美鳄鱼和1种鲨鱼的Ig V_(H_(o))研究结果揭示:(1)对编码蛋白质的密码子来说,TCR V(包括V_α和V_β)的核苷酸替代率为Ig V_H的2.4倍,说明前者有更高的替代率。(2)以协同进化而言,TCR V和Ig V_H的基因重复率分别为1.7×10~(-6)和1.6×10~(-6)/基因年。两者几乎相同,均系低速保持者。TCR V的数目(V_α为100,V_β为30)远少于Ig V_H(数目为300),原因是前者受到主要组织相容性复合体的制约,即受到负选择,这与中性学说观点相一致。文章还讨论了体细胞突变和DNA重排对两类抗体多样性产生上的作用,并探讨了IgV_H和TCR V的假基因问题。     

错配修复系统hMSH2基因IVS12（-6）T〉C多态及饮食习惯与结直肠癌的易感性

目的：研究江苏省结直肠癌发病与hMSH2基因IVS12（-6）T〉C多态及饮食习惯的相关性。方法：对江苏省金坛、泰兴和淮安地区近2年来新发结直肠癌患者共计108例以及配对180例健康体检者的饮食等生活习惯因素进行调查,提取外周血DNA,应用PCR-DHPLC和DNA序列分析的方法,采用病例对照研究结合现场收集的流行病学资料统计分hMSH2基因IVS12（-6）T〉C与结直肠癌发病的关系。结果：hMSH2基因IVS12（-6）T〉C在家族性结直肠癌患者中检出率较高,且与散发性结直肠癌病例之间差异有统计学意义（P〈0.05）,在喜食油炸和腌渍食物组,hMSH2基因IVS12（-6）T〉CC突变与正常人群之间也存在明显的统计学差异（P〈0.05）。结论：hMSH2基因IVS12（-6）T〉C突变,通过遗传性和后天获得性等多重因素影响,使得该突变的携带者有更高的结直肠癌发病风险。     

X-连锁迟发性脊椎骨骺发育不良基因剪接受体突变对mRNA加工的影响

X-连锁迟发性脊椎骨骺发育不良（spondyloepiphyseal dysplasia tarda, SEDL）是一种少见的由SEDL基因突变引起的骨软骨发育障碍性疾病,病变主要累及腰椎和近端承重大关节。为研究SEDL基因剪接受体突变(IVS2 -2A→C)对mRNA加工的影响,从该突变所致SEDL患者,以及健康对照者外周血中提取总RNA,逆转录合成cDNA, 以此为模板进行聚合酶链式反应（polymerase chain reaction, PCR）,对PCR扩增产物采用双向直接测序和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis, PAGE)方法进行分析。测序结果发现IVS2-2A→C突变患者的一种cDNA外显子2与外显子4直接拼接,显示外显子3全部丢失;另一种cDNA外显子1与外显子4拼接,显示外显子2和外显子3均缺失;在健康对照者也发现了外显子2缺失的cDNA。PAGE发现患者和对照者都存在两种RT-PCR产物,长度分别为567bp、425bp以及679bp、537bp,证实了测序结果。这说明SEDL基因第二内含子剪接受体突变（IVS2-2A→C）导致其外显子3在mRNA加工过程中全部丢失,由于SEDL基因的翻译起始位点位于外显子3,它的缺失可能使生成的mRNA不能被翻译,从而引起SEDL发生;外显子2位于5′ UTR,它的缺失提示SEDL基因存在选择性剪接,正常人也存在缺失外显子2的cDNA,说明这种选择性剪接对临床表型的影响似乎并不大,它对基因表达水平和表达调控是否有影响还需要进一步研究。     

人-鼠嵌合Fab片段的温度诱导表达

构建了具有λPRPL启动子高效表达人鼠嵌合Fab片段的温度诱导表达型载体pHZ01。并在大肠杆菌中表达了三种嵌合Fab片段：抗前列腺特异抗原(PSA)的嵌合Fab．抗溶菌酶(HEL)的嵌合Fab和抗破伤风类毒素(TT)的嵌合Fab．三种表达的可溶 性嵌合Fab都具有特异结合抗原的能力,嵌合Fab的CHI和CK区均为人源的。较之鼠源 Fab具有更好的应用前景。     

消息与动态

1986年夏,美国加利福尼亚伯克利人类起源研究所所长约翰逊(D.C.Johanson)率领的坦桑尼亚-美国联合发掘队在坦桑尼亚奥杜韦峡谷发现了一个“能人”(Homo habilis)的部分骨架,包括头骨碎片、上颌骨(腭骨)、牙齿、右臂的肱骨、桡骨和尺骨,左侧股骨的上段,右侧胫骨的一小段,编号为OH62(奥杜韦第62号人骨)。化石产自奥杜韦层位Ⅰ,与1959年玛丽·利基发现“东非人”头骨的地点距离不远。     

贵阳附近下二叠统双切尾虫亚科三叶虫的一新属

本文仅描述松辽盆地白垩纪与海侵有关的青山口组一段(赛诺曼期)和嫩江组一、二段(坎佩尼期)的沟鞭藻类1新属、11新种和1新联合种。     

一种双顺反子表达载体的构建及应用的研究

将表达载体pEC34中的一段寡核苷酸序列,其中包括翻译增强子序列、SD序列、终止码、起始码及两端的限制性内切酶位点,插入GST基因后,构建成双顺反子的表达载体．利用此载体表达了非融合的人骨形成蛋白2A(hBMP2A)和人骨形成蛋白3(hBMP3)C端肽段,将第一顺反子基因（GST基因）切小到原来的1／3时,则位于下游的第二顺反子基因编码的蛋白质在大肠杆菌中的表达量增加一倍。     

苦楝和臭椿微体快速繁殖

植物名称:苦楝(Melia azedarach)和臭椿(Ailanthus altissima)。材料类别:苦楝(8～10年生)和臭椿(10～15年生)一年生根蘖苗萌生的带芽茎段。培养条件:取温室生长的根蘖苗再生的嫩枝,去叶后剪成长1.0cm的带芽茎段,每茎段含1个腋     

广东南雄盆地浓山组上段孢粉组合

南雄盆地的古新统称为罗佛寨群。罗佛寨群划分为早—中古新世的上湖组和代表晚期的浓山组。浓山组分三段:下段(竹桂坑段)、中段(大塘圩段)、上段(中国科学院古脊椎动物与古人类研究所华南红层队,1977)。孢粉样品采集于大塘剖面,即古城—坪岭实测剖面。剖面的浓山组上段为一套紫红、灰绿色砂质泥岩互层,夹灰绿色粉砂岩和紫红色薄层砂岩,未见顶     

为开发肺气肿的治疗药用大肠杆菌生产人SLPI片段

日本帝人生物医学研究所药理研究部应用微生物小组的上村孝等,用大肠杆菌表达人分泌性白细胞蛋白酶抑制物质(Seeretoy Leukocyte Protease Inhibitor;SLPI)的C末端的一半已经成功。另外还确认了这个重组SLPI片段与天然型的SLPI一样,保持着人白细胞弹性蛋白酶抑制能力。该公司开发重组SLPI片段的目的是把它用作肺气肿的治疗药。肺气肿这病是由于呼吸细支气管发生慢性炎症,破坏了肺泡和肺组织,推测破坏的原     

ATP：RNA腺苷酰转移酶的纯化及其应用

绝大多数真核细胞mRNA的3＇-端带有一段多聚腺苷酸即poly(A)的结构,在基因工程的研究中经常以这样的mRNA作为模板,以寡聚(dT)12—18作为引物,通过反转录酶的作用得到互补于该mRNA的DNA(即cDNA),再经克隆增殖等技术可得到相当量的基因,从而能进一步进行各种研究。近年来这些技术也常用于病毒RNA基因组的研究。Devos等人利用ATP:RNA腺苷酰转移酶使3＇端无poly(A)的病毒RNA基因加上一段poly(A),     

人U_1和U_2snRNA基因定位缺失和取代突变

 用寡聚核苷酸诱导的定位突变法,将人U_1和U_2snRNA基因的5'-端调控区域的一段能与SV_(40)T抗原相结合的DNA删去,造成缺失突变,改变这段DNA核苷酸的排列顺序,造成取代突变。突变株用原位杂交法筛选,由限制性内切酶电泳图谱分析和DNA顺序测定得到证实。突变率约为5％。     

基因库构建

922110在噬菌体表面装配组合抗体库:genelll位点〔英〕/Barbaslll,C.F.…/Proe.Natl.Aead.Sei.U.S。A一1991,55(18)一7975~7982仁译自DBA,1991,10(23),13354〕 建成phagemid pCombs系统,以使线型噬菌体M13(克隆于大肠杆菌XLI一Blue)表面的组合抗体Fab库呈单价。Fab片段与gene一111蛋白C-末端区融合。表面带有人抗一破伤风类毒素克隆10C Fab片段的噬菌体与非特异性噬菌体相比抗原覆盖表面积增大1000~100000倍。用此系统分拣预先鉴定的人组合抗一破伤风类毒素Fab基因库,以验证其可用性。此基因库已重新构建于pComb3中,保留了原有的…