一种简便的薄层等电聚焦分析电泳装置

薄层等电聚焦分析电泳是近年来发展起来的一种高分辨率的蛋白质分析技术。等电聚焦是利用两性载体电解质,在外加电场的作用下,形成稳定的pH梯度,使得蛋白质、酶及多肽按其各自不同的等电点聚焦在相应的pH位置上,以便达到分离的目的。薄层等电聚焦分析电泳可以在一块薄层胶片上分析多个样品,操作方便、分辨率高,所以被人们广泛地采用。本文介绍一种简便的薄层等电聚焦分析电泳装置,它适用于我们现有的一般实验室条件,勿需进口成套贵重设备,同样能得到满意的分析结果。 1.电泳装置的配备我们自制了简易的电极架(图1)。上架用     

聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦

等电聚焦也曾称为等电点分离、等电点划分、等电点分析、聚焦电泳等。1966年瑞典学者Vesterberg和Svernsson首先合成了两性载体电解质,并成功地用于肌红蛋白分离,使这方法具有实用价值。等电聚焦的先决条件就是要求有稳定的pH梯度。按照支持pH梯度的介质不同,可     

超高分辨率毛细管等电聚焦—电喷雾质谱联用方法观察蛋白质亚型

在线的毛细管等电聚焦 电喷雾质谱联用 ,作为一种二维的分离系统 ,对毛细管等电聚焦过程中形成的蛋白质亚型进行了分析。这种分析系统通过使用中性的涂层毛细管 (80cm长 )、动态的毛细管位置调整方法和鞘流液接口得以建立。蛋白质首先在毛细管等电聚焦过程中根据它们等电点的差异得到分离 ,然后被电喷雾质谱鉴定。已聚焦好的蛋白质区带通过结合阴极移动和重力移动的方法从毛细管中流出而进入质谱仪。由于在此特定情况下这种方法具有极高的分辨率 ,有三种血红蛋白A和镰刀型血红蛋白的亚型 (具有几乎相同的电荷分布和分子质量 ,但它们的等电点差异在 0 .0 4到 0 .0 8之间 )和两种乳球蛋白A的亚型 (等电点差异为 0 .6 )被检测到。这些蛋白质亚型的等电点、相对含量和分子质量都通过毛细管等电聚焦 电喷雾质谱联用方法同时得到了确定。     

循环自由流等电聚焦方法的建立及应用研究

等电聚焦是利用蛋白质分子或其它两性电解质分子的等电点不同,在一个连续、稳定、线性的pH梯度中进行蛋白质分析分离的技术。薄层凝胶等电聚焦具有高分辨率,但上样量小,聚焦后样品分析处理不便,仅局限于分析。循环自由流液相等电聚焦以液体循环流动代替固相载体,上样量大,聚焦后样品分析处理方便,有较大的制造潜力。Bier等已开展这项技术的研究。该技术应用到遗传工程上可对干扰素等进行精制纯化^[3]。本实验应用循环自由流等电聚焦仪(Recycling free-flow isoelectric fo-cusing,RIEF)进行了pH梯度的建立、模型化合物的分离、相关参数的比较,并被步应用于生物活性蛋白的精制和活性回收,旨在为遗传工程产品下游工艺提供一种新型而行之有效的方法。     

单克隆抗体的等电聚焦

本文采用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦和Phast-system仪等电聚焦测定12份HBsAg McAb IgG的等电点,并对两种方法测定的误差和优缺点进行了讨论。     

野生纤毛虫同工酶微量等电聚焦分析探索

微量电泳是用来分离和表征提取于少量生物材料中的核酸和蛋白质的分析技术。作者以缘毛目螅状独缩虫(Carchesium polypinum Linne,1758)为材料,用微量等电聚焦(Microisoelectric focussing)探索了分析野生纤毛虫同工酶的可行性。实验结果表明:(1) 样品量小至两个群体螅状独缩虫(约200个个体)即可进行酯酶同工酶微量等电聚焦分析;(2) 自野外采集材料中立即分离制备的螅状独缩虫匀浆上清液的酯酶同工酶酶谱与实验室内放置10h后分离制备的酶谱几乎一致。因此,野生纤毛虫同工酶可用微量等电聚焦进行分析。     

牛乳碱性蛋白二维凝胶电泳条件的优化

为了在二维凝胶电泳(2-DE)中有效分离牛乳中的碱性蛋白,本试验在等电聚焦上样缓冲液中加入异丙醇和甘油,采用杯上样方式,比较了三丁基磷(TBP)和二硫苏糖醇(DTT)两种还原剂对碱性区域蛋白的分离效果。结果发现,等电聚焦上样缓冲液以TBP为还原剂的碱性蛋白分离图谱水平条纹少,优于以DTT为还原剂图谱。表明等电聚焦上样缓冲液以TBP为还原剂,采用杯上样的方法可以改善牛乳中碱性蛋白的分离效果。     

SDS-PAGE、同工酶等电聚焦和RAPD标记鉴定两系杂交水稻F1种子纯度对比研究

目的：探讨利用种子贮藏蛋白SDS—PAGE电泳、酯酶同工酶超薄等电聚焦电泳和RAPD分子标记鉴定五个两系杂交水稻组合F_1种子纯度的可行性。方法和结果：利用SDS—PAGE电泳技术未能找到所试五个组合各自的父本特征蛋白质带;利用酯酶同工酶超薄等电聚焦电泳技术和RAPD分子标记可找到所试五个组合的父母本特征酶带和RAPD标记,但酯酶同工酶的多态性同时也受种子萌发时间的影响。酯酶同工酶超薄等电聚焦电泳和RAPD分子标记可用于所试五个两系杂交水稻组合F_1种子纯度的鉴定。     

一种简单、快速、微量聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳方法

Bio-Rad公司的微量聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳(ModelⅢ Mini IEF Cell),不需要使用电极缓冲液,聚焦电泳时间仅用1.5小时,效果甚佳,但要使用该公司专有的凝胶支持薄膜,难于推广应用,我们经过试验,建立了一种简单、快速的微量凝胶等电聚焦电泳方法,40min完成等电聚焦过程,采用快速染色、脱色和干燥,将电泳图谱制成透明的薄膜,整个过程可以     

三种分析水稻F1代幼苗生长过程中酯酶同工酶变化的电泳方法比较

利用聚酯胶片作为凝胶支持物的超薄等电聚焦电泳(UTLIEF)研究水稻F1种子萌发过程中的酯酶同工酶多态性变化的结果表明,UTLIEF相比非变性不连续聚丙烯酰胺电泳(native-PAGE)和常规等电聚焦电泳(IEF)得到的酯酶同工酶图谱更清晰,酶带数目和强弱的多态性变化更高,用pH 2～9的两性电解质时等电聚焦的电泳效果较好.     

基于自动录音技术研究三种雉类鸣叫特征和节律

自动录音机是一种低成本、高效、可以在较长时间和较大空间范围内对物种的活动进行有效监测的设备。2019年4至6月,在北京小龙门地区(40°00′N,115°26′E)褐马鸡(Crossoptilon mantchuricum)、勺鸡(Pucrasia macrolopha)和环颈雉(Phasianus colchicus)的栖息地内布设了songmeter自动录音机,对三种雉类的鸣声进行为期2个月的连续收集。利用Kaleidoscope软件(Wildlife Acoustics公司,美国),对不同雉类鸣声进行了人工辅助的机器学习和自动识别,从录制的22 536 h录音数据中提取了褐马鸡、勺鸡和环颈雉的鸣声。优化鸣声提取的时频参数后,勺鸡鸣声提取的正确率为73.32%,探测率为52.91%;环颈雉鸣声提取的正确率为89.32%,探测率为67.36%;褐马鸡鸣声提取的正确率较低,仅为8.69%,探测率为58.54%。结合三种雉类的繁殖资料,揭示了三种雉类的鸣声节律:褐马鸡和环颈雉有早晚两个鸣叫高峰期,但高峰时段不尽相同,勺鸡只存在鸣叫早高峰;褐马鸡、勺鸡和环颈雉在交配期、孵卵前期具有一个鸣叫...     

百花山国家级自然保护区褐马鸡栖息地利用分析

栖息地破坏是生物多样性丧失的主要原因之一,对濒危物种的生存也构成严重威胁。褐马鸡(Crossoptilon mantchuricum)作为我国特有珍稀濒危物种,目前仅分布于山西、陕西、河北和北京地区。2013年10月至2014年6月,在北京百花山国家级自然保护区使用样线法进行野外调查,使用存在点与伪不存在点数据,结合海拔、坡度、坡向、距道路距离、距居民点距离和植被类型作为变量,运用CART、Random Forest、Tree Net三个机器学习模型对褐马鸡的上述6种栖息地因子重要性排序,结果显示,海拔是影响褐马鸡分布的最主要因子,其次是植被类型、距道路距离和距居民点距离。根据AUC值选择Tree Net模型为最适宜模型,划分褐马鸡的适宜栖息地类型,并计算适宜面积。本研究有助于了解重点栖息因子对北京地区褐马鸡的影响状况,利于褐马鸡保护管理对策的制定。     

山西庞泉沟自然保护区褐马鸡种群数量特征的研究

本文作者于1982—1988年在山西庞泉沟国家级自然保护区对褐马鸡(Crossoptilon mantchuri-cum)的种群数量进行了调查。结果种群密度为0.077(只/公顷),A、B、C垂直带间的数量分别为0.091、0.093、0.048,各占种群数量的39.22％、40.09％和20.69％,D带经调查,尚未见有分布。在繁殖前的5月为种群数量最低基数(0.030只);繁殖后的7月数量最高(0.099只)。     

笼养褐马鸡冬季的社群等级

本文用BBS方法（Batchelder-Bershad-Simpson Scaling Method)对笼养褐马鸡的社群等级进行了排序,发现其等级制度为近单线式。成鸟的等级明显高于亚成体,成年雄鸟的等级明显高于成年雌鸟,成年个体的等级与体重呈显著正相关,与面部红斑大小及耳簇羽长呈极显著正相关,全体14只鸟的体重与体长及耳簇羽长呈显著正相关,与面部红斑大小呈极显著正相关。体重可以认为是直接与个体的争斗实力相关的参数,而面部红斑大小,耳簇羽长则可能是个体争斗实力的外在信号,在体重相近的雌性个体中,面部红斑和耳簇羽对社群等级有很大的影响。褐马鸡的争斗炫耀可能是以面部为中心的。     

绿尾虹雉的冬季生态研究

绿尾虹雉（Lophophorus lhuysii）属雉科（Phasianidae）虹雉属（Lophophorus）,是我国特有珍稀雉类,列为国家一类保护动物。我们于1983年起对绿尾虹雉的生态进行专题研究,现根据对绿尾虹雉的野外考察所得,整理成本文。 野外考察的时间、地点、及路线 我们于1983年4月至1984年7月在四川省宝兴县跷碛公社对绿尾虹雉的生态做了四次考察,前后为期近十个月,其中冬季考察时间为1983年12月至1984年1月。     

Habitat use of Tibetan Eared Pheasant Crossoptilon harmani flocks in the non-breeding season

Habitat use by Tibetan Eared Pheasant Crossoptilon harmani flocks in shrub vegetation was investigated in the Lhasa area of Tibet during the non-breeding season of 19951996. Home range composition varied considerably among flocks, but stream belts were consistently used as foraging grounds. Slope direction, altitude and vegetation had little effect on habitat selection. In the absence of supplemental food, core range size was positively correlated with flock size, suggesting that food supplementation could support larger flocks. Flocks regularly roosted on the ground at midday at two or three relatively fixed sites within core ranges. At night they used patches of relatively tall, dense vegetation at the year-round sites in areas near cliffs or in hollows. The size of the night-roost site was related to flock size. Our results strongly suggested that both foraging and night-roosting habitats in the shrub environment are crucial to the birds.     

笼养褐马鸡繁殖行为的研究

1984年我们对褐马鸡(Crossoptilon mantchuricum)的繁殖行为作了观察。了解到它们的一些行为特征,通过这一工作希望有助于促进褐马鸡和其它珍禽的饲养管理和繁殖。 材料与方法 观察的三对褐马鸡,其中两对于1982年获自河北省西部的小五台山,都是当年的幼体;另一对于1983年初取自北京动物园,是1982年该园繁殖的后代。观察期间,褐马鸡圈养在笼舍内,舍内面积约3×2米,舍外架设网以防外逸并作为活动场所,面积约7×2.5米。观察是在距活动场10—15米的室内隐蔽处进行。录相是在活动场的护网外用     

Niche partitioning among three montane ground‐dwelling pheasant species along multiple ecological dimensions

Pheasants (order Galliformes) are typical ground‐dwelling birds, having a large body size and weak flight abilities. Sympatric pheasants are expected to share narrower niche space and face more extensive interspecific competition. However, little work has been undertaken simultaneously to investigate niche partitioning among sympatric pheasant species across multiple ecological dimensions. We compared microhabitat use, activity pattern and foraging strategy of sympatric Blood Pheasant Ithaginis cruentus, Buff‐throated Partridge Tetraophasis szechenyii and White Eared‐pheasant Crossoptilon crossoptilon on the Qinghai‐Tibet Plateau, China, to identify potential interspecific niche partitioning along different ecological dimensions in the breeding season. We found that the Buff‐throated Partridge differed significantly from the other two species in microhabitat use, and the three species showed different foraging strategies. It is likely that niche partitioning reduced potential interspecific competition, thus facilitating the species’ stable coexistence. Our study provides practical evidence of multidimensional niche theory within sympatric ground‐dwelling pheasant species, emphasizing that species interactions and coexistence within a guild are often not uni‐dimensional. Given global conservation concern for maintaining bird diversity, we recommend further restriction of yak grazing in these species’ habitat.     

Nest-site selection of the White Eared pheasant in southwestern Sichuan Province,China

From April to July 2003 and 2004,we surveyed the nest-site selection of the White Eared pheasant (Crossoptilon crossoptilon) in the Zhujie Monastery and in the mountain facing it in Sichuan Province,China.In this paper,we studied the nest characteristics and the clutch size of the pheasant.Habitat sampling method was used to determine the variables that might affect the nest-site selection of the White Eared pheasant.Chi-square test was used to identify which habitat type was likely to be preferred by the bird.Independent-samples t test and Mann-Whitney U test were used to find which variables were important for the birds'nest-site selection.A total of 13 nests were found.Oak shrub was greatly preferred as nest sites (84.62%).Nests under a rock wall (7.69%) and a fallen tree (7.69%) were also found.The average clutch size of a White Eared pheasant is 7.33±0.54 (range,5-11;n=12).Laying period was between April 27 and May 21.In the Zhujie area,1 nest was in the forest and 11 nests were in oak shrubs.The species preferred oak shrub as its nesting habitat (X2=8.333,dr=l,P＜0.05).The bird was more likely to place its nest in sites with a high coverage,I.e.0.5,1,and 2 m above the ground (independent-samples t test,P＜0.05),and with a large shrub diameter (Mann-Whitney U test,P＜0.05).The species are more likely to prefer sites with plant cover,shrub cover (independentsamples t test,P＜0.05),and shrub height (Mann-Whitney U test,P<0.05) in a relatively small range.     

山西芦芽山褐马鸡越冬栖息地选择的多尺度研究

1998～2000年在山西芦芽山自然保护区对褐马鸡的越冬栖息地选择进行了研究。采用4种空间尺度(10m、100m、300m和距离尺度),对影响褐马鸡越冬栖息地选择的主要因子进行了深入分析,并建立了褐马鸡越冬栖息地选择的逻辑斯谛回归模型。在300m尺度上．活动点和非活动点的生境类型有针叶林、针阔混交林、灌木林和草丛等。活动点周围针叶林面积显著高于非活动点(F=-3．116,P=0．002),虽然针阔混交林在两者中的面积比例都较小,但活动点周围针阔混交林的面积明显地低于非活动点(F=-2．255,P=0．024)．在灌木林和草丛的面积上两者无显著差异。这表明褐马鸡在300m尺度上喜欢活动于针叶林较多的地域,由于冬季针阔混交林不如针叶林能提供很好的隐蔽条件,褐马鸡避免选择针阔混交林;在100m尺度上,活动点和非活动点的生境类型有针叶林、针阔混交林和草丛,无灌木林生境,活动点的针叶林面积明显地高于非活动点(F=-2．931,P=0．003)。这表明褐马鸡在100m尺度上虽然倾向于选择针叶林,但对其它类型的生境如针阔混交林和草丛是可以利用的,这可能与其广泛取食活动有关。褐马鸡大尺度上的隐蔽条件满足以后,在小尺度上主要是为了获取更为丰富的食物。在距离尺度上活动点距居民点的距离、距道路的距离显著大于非活动点(F=15．621;6．048,P=0．000;0．018)。通过逐步逻辑斯谛回归分析,发现距灌草丛的距离、距居民点的距离、100m范围内针叶林的面积、树高以及食物的丰盛度是冬季褐马鸡栖息地选择的重要因子。以另外一个研究地收集的数据对所建立的栖息地选择模型的可靠程度进行了检验,结果表明该模型能有效地对褐马鸡的越冬栖息地进行预测。