向日葵未受精胚珠培养时胚状体发生的显微观察

由开花前1—4天的向日葵子房中取出胚珠,在液体培养基上进行漂浮培养,诱导了未受精的卵细胞发育为单倍体的胚状体.亦诱导了珠被绒毡层产生胚状体。对两种胚状体的发生和发育过程及其形态发生特点作了显微观察与描述。     

植物体细胞胚状体与器官发生的激素调节

研究了外源激素对胡萝卜、矮牵牛、石刁柏以及烟草、曼陀罗、芹菜等植物体细胞胚状体与器官(主要是不定芽)发生的调节作用。1.胚状体的诱导在基本培养基中所需生长素都比不定芽分化所需生长素浓度高,或再需补加少量细胞分裂素。不定芽的分化在基本培养基中所需细胞分裂素都比胚状体的诱导所需细胞分裂素浓度高,或再补加适量生长素。少量细胞分裂素对石刁柏E_3无性系胚状体发生有强烈的促进作用。2.在一定的激素条件下,石刁柏E_3、B_2茎尖无性系可以在同一块愈伤组织上发生胚状体、不定芽,有时还有根。改变培养基中激素的量,可使愈伤组织只发生胚状体或芽。3.IAA、NAA和KT、BA、Z(玉米素)对诱导石刁柏E_3系体细胞胚状体与不定芽都有效,2,4-D和KT对诱导石刁柏B_2系体细胞胚状体与不定芽都有效。4.石刁柏个体之间胚状体与不定芽发生能力差异很大,有三种以上不同的类型。胡萝卜下胚轴只能发生胚状体,球形胚发生的愈伤组织既能产生胚状体又能发生不定芽。     

茄子(Solanum melongena L.var.grossum)单倍体植株的诱导及对其后代的观察

成功地通过胚状体及愈伤组织诱导成花粉植株,经染色体加倍已获得较多的纯合二倍体株系;同时研究了激光处理花药对诱导胚状体的影响;初步摸索出通过胚状体成苗能减少混倍现象。经胚状体和愈伤组织诱导的花粉植株未见到发生衰退的现象。     

桉树胚状体再生与遗传转化的研究进展

文章综述了桉树胚状体发生过程中基因型、外植体材料、培养基、光照、植物生长调节剂种类与配比以及其他添加物对外植体胚性愈伤组织诱导以及胚状体发生的影响,探讨了影响桉树遗传转化体系建立的因素,并对近年来桉树胚状体再生和转基因研究进展进行了介绍。     

影响玉米胚状体建成关键因素研究进展

利用胚状体对玉米进行离体繁殖具有数量多、速度快、成苗率高、染色体稳定等优点。影响胚状体发生和分化频率的因素较多,主要集中在基因型、外植体、激素和培养基成份等几个方面。该文对胚状体诱导、分化的影响因素及其机理的最近研究进展进行综述。     

黑穗醋栗(Ribes nigrum L.)未受精胚珠培养诱导体细胞胚状体和植株再生的研究

本文报告了黑穗醋栗(Ribes nigrum L.)三个栽培品种中的薄皮黑豆未受精胚珠(花粉发育到单核晚期)在MS基本培养基附加植物激素BA,2.4-D和GA_3中形成了体细胞胚状体。长度约为0.5—1.0cm大小的胚状体在生根培养基中可以形成完整的再生植株。经过筛选得到了体细胞胚性愈伤组织无性系,继代培养二年多仍能保持胚状体形成能力。试验结果表明:诱导体细胞胚胎发生受品种和接种时期的影响,适宜的接种时期为花粉发育到单核晚期。培养基中的BA为诱导胚胎发生和保持胚性愈伤组织无性系所必需。     

玉米体细胞胚状体诱导及其植株再生的研究

用51个玉米自交系的幼嫩雄穗进行体细胞胚状体的诱导,44个系产生了胚状体,每个系产生胚状体的能力各有不同;观察了胚状体产生的方式和胚状体的形态等;从其中3个系的胚状体诱导出植株;对基因型的影响及植株再生等问题进行了讨论。     

离体培养下大豆体细胞胚胎发生的组织学研究

大豆胚状体可以直接从未成熟的子叶表皮及表皮下面1—3层细胞发生。这些细胞经过脱分化后,首先形成细胞质浓厚、核大的胚的发生细胞,胚发生细胞再分裂形成胚性细胞团,胚性细胞团再继续分裂形成胚状体。胚状体的发育过程和合子胚一样,经过球形、心形,鱼雷期和子叶期等诸阶段发育成小植株。此外,在诱导胚状体发生过程中,还观察到另一值得注意的现象:在未成熟胚的子叶表皮下面1至较深处的数层细胞,也转变成分生状细胞团,这些分生状细胞团呈不规则状,从其起源看,可称它们为内生“胚状体”,这些内生“胚状体”培养至20天,即停止生长发育。     

枸杞悬浮培养条件下的胚状体发生

在MS培养基上诱导宁夏枸杞下胚轴切段形成愈伤组织,并进行细胞悬浮培养。观察了悬浮培养条件下胚状体的发生过程。<1>观察发现,细胞经悬浮培养几天以后,先形成胚性细胞团,再有胚性细胞团块形成一个或几个胚状体。较大的胚状体也可以形成新的次生胚状体。<1>影响胚状体形成的关键因素是激素的种类及其含量。实验采用的基本培养基为MS,比较适宜胚状体发生的激素是0.2mg/L 2,4-D。同样浓度的2,4-D,会抑制胚状体的进一步发育,用0.2mg/L6-BA代替2,4-D, 则胚状体可以进一步发育并形成小植株。     

金花茶子叶在离体培养中胚状体的发生和小植株的形成

研究了金花茶(Camellia chrysantha(Hu)Tuyama)子叶在离体培养中体细胞胚状体发生的条件。在MS基本培养基中附加苄基嘌呤(BA)或苄基嘌呤与萘乙酸(NAA)组合,诱导了胚状体发生。组织学观察表明,胚状体起源于子叶的表皮细胞。在增添细胞分裂素和生长素的MS或改良B_5液体培养基里振荡培养,明显地促进了胚状体根的生长和茎的发育。胚状体在继代培养中能保持旺盛的再生能力。已得到两个繁殖率较高的胚状体无性系。在合适的条件下,胚状体能长成正常的小植株。     

甘蓝花药培养胚状体诱导形成影响因子研究

用甘蓝F1、F2和自交系S33个世代6种基因型材料进行甘蓝花药培养诱导胚状体形成影响因子研究。结果显示:(1)高浓度蔗糖对甘蓝胚状体形成具有显著的诱导作用,6%蔗糖浓度是甘蓝花药培养的最适浓度,其胚状体的诱导率最高达12.2%;(2)材料基因型是影响花药培养的主要因素,F2和F1代材料胚状体诱导效果好,且胚状体诱导率F2代(F2P192和F2P194)18.9%比F1代(F1S17和F1S13)17.1%较高,但差异不显著,自交系S3代材料很难诱导出胚状体;(3)B5培养基比MS培养基更适合甘蓝花药胚状体的诱导培养。结果表明,甘蓝F2代是其花药诱导培养胚状体的最佳基因型材料,B5 2.0 mg/L 2,4-D 2.0 mg/L KT 6%Suc是甘蓝花药诱导培养胚状体的最适培养基。     

玉米幼穗离体培养体细胞胚高频发生的研究

以玉米（Ｚｅａ ｍａｙｓ Ｌ．）幼穗为材料,ＭＳ主基本培养基,诱导体细胞且状体。筛选出了胚状体高频发生的品种;同时实验结果表明：玉米遗传型与胚状体形成有一定的相关性;诱导期２,４－Ｄ浓度对且状体产生十分重要,ＫＴ和６－ＢＡ影响且状体的发生。组织切片观察表明：多数胚状体起源于愈伤组织表层,少数产生于里层;愈伤组织产生且状体是不同步的。     

从未授粉烟草子房诱导单倍体植株的细胞学和胚胎学研究

由未授粉的子房培养出的单培体植株来自两条途径:1.来自大孢子,直接进行多次分裂,经胚状体各阶段,发育形成;2.来自成熟卵细胞,经胚状体各阶段发育而成。此外,从上述途径产生的芽的基部和顶端形成愈伤组织,在同样培养基上分化形成胚状体,最后发育成植株。外源激素对未授粉子房高频率地诱导形成胚状体足必需的,而对诱导胚性愈伤组织形成胚状体以及进一步分化成植株并非必需。培养基中增加维生素 B_1,B_6,烟酸,叶酸和肌醇等的使用量时,未授粉离体子房和胚性愈伤组织诱导胚状体的频率显著提高。     

桉树愈伤组织胚状体的发生(简报)

植物组织培养已成为一种非常有用的研究手段,据1978年资料统计,在组织培养中具有胚状体分化能力的种子植物已达34科,75属,117种(朱澂 1978)。这说明胚状体发生的普遍性。在多年生的木本植物中,诱导出胚状体的材料也已不少。由于胚状体的结构完整,分化频率高,繁殖系数大,成苗速度快,有利于胚状体发生和发育规律的研究。桉树为世界木材产量最多的三个树种之一。为使桉苗快速繁育,国内外正开展桉树组培的研究工作,但现尚未见出现胚状体的报导。早在1965年,Sussex由赤桉实生苗外植体获得了愈伤组织。Aneja等(1969)由柠檬桉木质块茎的愈伤组织诱导出小植株。Kitahara     

烟草未授粉子房胚状体诱导的研究

对烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ Ｌ．）未授粉子房胚状体的诱导进行了研究,结果发现,胚状体是单细胞起源,起源于大孢子或卵细胞,接种发育早期的子房,胚状体起源于大孢子;接种发育晚期的子房,胚状体起源于卵细胞;接种发育中期的子种,胚状多起源于大孢子,少数起源于卵细胞,不同的基因型,蔗糖浓度及光照强度等对胚状体诱导率的影响亦有不同。     

荷兰芹胚性愈伤组织诱导及胚状体发生与内源IAA和ABA关系的初步研究

分析了荷兰芹胚性愈伤组织发生的条件, 对Co²⁺作用下胚状体形成与培养物内源IAA和ABA 的关系做了研究。结果表明, 荷兰芹下胚轴胚性发生能力随其相对位置而异, 自下而上逐渐提高。提高2, 4-D 浓度有利于胚性愈伤组织的诱导, 水解酪蛋白对胚性能力的表达没有显著影响。在胚状体发生过程中, 添加Co²⁺显著降低培养物内源IAA 和ABA 水平, 并提高胚状体诱导率。其中对照组IAA 有一个峰值, ABA 有两个峰值;实验组ABA 变化趋势与对照组相似, 而IAA 则始终没有峰值出现。Co²⁺对IAA 和ABA 的抑制机制可能有所不同。     

荷兰芹胚性愈伤组织诱导及胚状体发生与内源ＩＡＡ和ＡＢＡ关系的初步研究

分析了荷兰芹胚性愈伤组织发生的条件,对Ｃo^2 作用下胚状体形成与培养物内源ＩＡＡ和ＡＢＡ的关系做了研究,结果表明,荷兰芹下胚轴胚性发生能力随其相对位置而异,自下而上逐渐提高,提高２,４－Ｄ浓度有利于胚性愈伤组织的诱导,水解酪蛋白对胚性能力的表达没有显影响。在胚状体发生过程中,添加Ｃo^2 显降低培养物内源ＩＡＡ和ＡＢＡ水平,并提高胚状体诱导率。其中对照组ＩＡＡ有一个峰值,ＡＢＡ有两个峰值;实验组ＡＢＡ水平,并提高胚状体诱导率。其中对照组ＩＡＡ有一个峰值,ＡＢＡ有两个峰值;实验组ＡＢＡ变化趋势与对照组相似,而ＩＡＡ始终凤有峰值出现,Ｃo^2 对ＩＡＡ和ＡＢＡ的抑制机制可能有所不同。     

胚状体发生的细胞学和生理生化研究

植物组织培养中胚状体的发生是较普遍的现象。由于通过胚状体途径繁殖植物和进行突变体筛选的优越性,使胚状体的实际应用受到极大重视。但是,胚状体发生的一些理论问题还远未解决。本文仅就胚状体发生的细胞学及生理生化研究的新进展,作一简要综述。     

猕猴桃胚乳培养中的胚胎发生

中华猕猴桃及硬毛猕猴桃的胚乳培养在MS+Zeatin 3 ppm+2,4-D0.5ppm+CH 400ppm的培养基上诱导产生愈伤组织,在MS+Zeatin 1 ppm+CH 400ppm的分化培养基上产生胚状体和长成完整小植株。细胞组织学观察表明,胚状体起源于愈伤组织内单个细胞,经原胚、球形胚、心形胚等阶段发育成苗。猕猴桃胚乳属于细胞型胚乳,它的这种胚状体起源于愈伤组织内单个细胞的发生方式,也不同于常见的胚状体发生于愈伤组织表面的方式。     

2.4-D、6-BA对人参体细胞胚胎发生过程的影响研究

本实验以人参芽胞、二年生人参根、实生苗的茎、叶为外植体研究了体细胞胚的发生条件,并对其发生过程中可溶性蛋白、相关酶活性及内源激素的变化等进行了研究。结果表明,诱导愈伤组织的培养基为MS+2,4-D 4.0mg/L + BA 0.2mg/L;在MS+2,4-D 1.0mg/L + KT 0.2 mg/L培养基上继代培养,可获得胚性愈伤组织;在无2,4-D的培养基上可诱导出胚状体。将胚状体转入无任何激素的MS培养基上继续培养,之后转入1/2MS培养基上获得再生植株。组织细胞学观察表明人参胚状体的起源方式为单细胞起源。在体细胞胚胎发生过程中,多糖和淀粉含量在早期胚时较低,可溶性蛋白含量、POD及PPO活性在早期胚时最高;IAA在早期胚时期含量最高,在成熟胚时期ABA含量最高,而ABA/IAA比值在成熟胚时较高,利于体细胞胚的发育成熟。cDNA-AFLP 分析表明胚状体发育不同时期的人参培养物基因表达不同,从而导致了分化和发育。培养物HPLC分析表明胚胎发生试管苗总皂苷含量比子叶胚时期高4倍多。单体皂苷差异较大。